pETDuet-1大肠杆菌表达载体说明_精品文档资料下载.pdf

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大肠杆菌蛋白双表达载体，有两个多克隆位点表达水平:

高克隆方法:

多克隆位点，限制性内切酶载体大小:

5420bpMCS15测序引物及序列:

pETUpstreamPrimer:

5-ATGCGTCCGGCGTAGA-3MCS13测序引物及序列:

DuetDOWN1Primer:

5-GATTATGCGGCCGTGTACAA-3MCS25测序引物及序列:

DuetUP2Primer:

5-TTGTACACGGCCGCATAATC-3MCS23测序引物及序列:

T7t:

5GCTAGTTATTGCTCAGCGG3载体标签:

N-His,C-S载体抗性:

氨苄备注:

pETDuet-1是设计用来同时表达两个目的基因。

pETDuet-1携带有pBR322质粒来源的ColE1复制子,lacI基因和氨苄抗性基因。

稳定性:

瞬时表达组成型:

组成型病毒/非病毒:

非病毒pETDuet1载体质粒图谱和多克隆位点信息载体质粒图谱和多克隆位点信息pETDuet1载体简介载体简介pETDuet-1载体被设计用来在大肠杆菌中同时表达两个外源基因.载体含有两个多克隆位点，每一个多克隆位点是通过T7启动子/Lac操纵子和一个核糖体结合位点组成。

本载体可以与pACYCDuet-1载体联合使用，在合适的宿主菌中，可以一起共表达至多4个目的基因。

插入在pETDuet-1载体多克隆位点1的目的基因可以使用pETUpstreamPrimer（Cat.No.69214-3）和DuetDOWN1Primer（Cat.No.71179-3）进行测序，插入在多克隆位点2的目的基因可以通过DuetUP2Primer（Cat.No.71180-3）和T7TerminatorPrimer（Cat.No.69337-3）进行目的基因测序。

pETDuet1载体序列载体序列ORIGIN1GGGGAATTGTGAGCGGATAACAATTCCCCTCTAGAAATAATTTTGTTTAACTTTAAGAAG61GAGATATACCATGGGCAGCAGCCATCACCATCATCACCACAGCCAGGATCCGAATTCGAG121CTCGGCGCGCCTGCAGGTCGACAAGCTTGCGGCCGCATAATGCTTAAGTCGAACAGAAAG181TAATCGTATTGTACACGGCCGCATAATCGAAATTAATACGACTCACTATAGGGGAATTGT241GAGCGGATAACAATTCCCCATCTTAGTATATTAGTTAAGTATAAGAAGGAGATATACATA301TGGCAGATCTCAATTGGATATCGGCCGGCCACGCGATCGCTGACGTCGGTACCCTCGAGT361CTGGTAAAGAAACCGCTGCTGCGAAATTTGAACGCCAGCACATGGACTCGTCTACTAGCG421CAGCTTAATTAACCTAGGCTGCTGCCACCGCTGAGCAATAACTAGCATAACCCCTTGGGG481CCTCTAAACGGGTCTTGAGGGGTTTTTTGCTGAAAGGAGGAACTATATCCGGATTGGCGA541ATGGGACGCGCCCTGTAGCGGCGCATTAAGCGCGGCGGGTGTGGTGGTTACGCGCAGCGT601GACCGCTACACTTGCCAGCGCCCTAGCGCCCGCTCCTTTCGCTTTCTTCCCTTCCTTTCT661CGCCACGTTCGCCGGCTTTCCCCGTCAAGCTCTAAATCGGGGGCTCCCTTTAGGGTTCCG721ATTTAGTGCTTTACGGCACCTCGACCCCAAAAAACTTGATTAGGGTGATGGTTCACGTAG781TGGGCCATCGCCCTGATAGACGGTTTTTCGCCCTTTGACGTTGGAGTCCACGTTCTTTAA841TAGTGGACTCTTGTTCCAAACTGGAACAACACTCAACCCTATCTCGGTCTATTCTTTTGA901TTTATAAGGGATTTTGCCGATTTCGGCCTATTGGTTAAAAAATGAGCTGATTTAACAAAA961ATTTAACGCGAATTTTAACAAAATATTAACGTTTACAATTTCTGGCGGCACGATGGCATG1021AGATTATCAAAAAGGATCTTCACCTAGATCCTTTTAAATTAAAAATGAAGTTTTAAATCA1081ATCTAAAGTATATATGAGTAAACTTGGTCTGACAGTTACCAATGCTTAATCAGTGAGGCA1141CCTATCTCAGCGATCTGTCTATTTCGTTCATCCATAGTTGCCTGACTCCCCGTCGTGTAG1201ATAACTACGATACGGGAGGGCTTACCATCTGGCCCCAGTGCTGCAATGATACCGCGAGAC1261CCACGCTCACCGGCTCCAGATTTATCAGCAATAAACCAGCCAGCCGGAAGGGCCGAGCGC1321AGAAGTGGTCCTGCAACTTTATCCGCCTCCATCCAGTCTATTAATTGTTGCCGGGAAGCT1381AGAGTAAGTAGTTCGCCAGTTAATAGTTTGCGCAACGTTGTTGCCATTGCTACAGGCATC1441GTGGTGTCACGCTCGTCGTTTGGTATGGCTTCATTCAGCTCCGGTTCCCAACGATCAAGG1501CGAGTTACATGATCCCCCATGTTGTGCAAAAAAGCGGTTAGCTCCTTCGGTCCTCCGATC1561GTTGTCAGAAGTAAGTTGGCCGCAGTGTTATCACTCATGGTTATGGCAGCACTGCATAAT1621TCTCTTACTGTCATGCCATCCGTAAGATGCTTTTCTGTGACTGGTGAGTACTCAACCAAG1681TCATTCTGAGAATAGTGTATGCGGCGACCGAGTTGCTCTTGCCCGGCGTCAATACGGGAT1741AATACCGCGCCACATAGCAGAACTTTAAAAGTGCTCATCATTGGAAAACGTTCTTCGGGG1801CGAAAACTCTCAAGGATCTTACCGCTGTTGAGATCCAGTTCGATGTAACCCACTCGTGCA1861CCCAACTGATCTTCAGCATCTTTTACTTTCACCAGCGTTTCTGGGTGAGCAAAAACAGGA1921AGGCAAAATGCCGCAAAAAAGGGAATAAGGGCGACACGGAAATGTTGAATACTCATACTC1981TTCCTTTTTCAATCATGATTGAAGCATTTATCAGGGTTATTGTCTCATGAGCGGATACAT2041ATTTGAATGTATTTAGAAAAATAAACAAATAGGTCATGACCAAAATCCCTTAACGTGAGT2101TTTCGTTCCACTGAGCGTCAGACCCCGTAGAAAAGATCAAAGGATCTTCTTGAGATCCTT2161TTTTTCTGCGCGTAATCTGCTGCTTGCAAACAAAAAAACCACCGCTACCAGCGGTGGTTT2221GTTTGCCGGATCAAGAGCTACCAACTCTTTTTCCGAAGGTAACTGGCTTCAGCAGAGCGC2281AGATACCAAATACTGTCCTTCTAGTGTAGCCGTAGTTAGGCCACCACTTCAAGAACTCTG2341TAGCACCGCCTACATACCTCGCTCTGCTAATCCTGTTACCAGTGGCTGCTGCCAGTGGCG2401ATAAGTCGTGTCTTACCGGGTTGGACTCAAGACGATAGTTACCGGATAAGGCGCAGCGGT2461CGGGCTGAACGGGGGGTTCGTGCACACAGCCCAGCTTGGAGCGAACGACCTACACCGAAC2521TGAGATACCTACAGCGTGAGCTATGAGAAAGCGCCACGCTTCCCGAAGGGAGAAAGGCGG2581ACAGGTATCCGGTAAGCGGCAGGGTCGGAACAGGAGAGCGCACGAGGGAGCTTCCAGGGG2641GAAACGCCTGGTATCTTTATAGTCCTGTCGGGTTTCGCCACCTCTGACTTGAGCGTCGAT2701TTTTGTGATGCTCGTCAGGGGGGCGGAGCCTATGGAAAAACGCCAGCAACGCGGCCTTTT2761TACGGTTCCTGGCCTTTTGCTGGCCTTTTGCTCACATGTTCTTTCCTGCGTTATCCCCTG2821ATTCTGTGGATAACCGTATTACCGCCTTTGAGTGAGCTGATACCGCTCGCCGCAGCCGAA2881CGACCGAGCGCAGCGAGTCAGTGAGCGAGGAAGCGGAAGAGCGCCTGATGCGGTATTTTC2941TCCTTACGCATCTGTGCGGTATTTCACACCGCATATATGGTGCACTCTCAGTACAATCTG3001CTCTGATGCCGCATAGTTAAGCCAGTATACACTCCGCTATCGCTACGTGACTGGGTCATG3061GCTGCGCCCCGACACCCGCCAACACCCGCTGACGCGCCCTGACGGGCTTGTCTGCTCCCG3121GCATCCGCTTACAGACAAGCTGTGACCGTCTCCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGGTTTTCA3181CCGTCATCACCGAAACGCGCGAGGCAGCTGCGGTAAAGCTCATCAGCGTGGTCGTGAAGC3241GATTCACAGATGTCTGCCTGTTCATCCGCGTCCAGCTCGTTGAGTTTCTCCAGAAGCGTT3301AATGTCTGGCTTCTGATAAAGCGGGCCATGTTAAGGGCGGTTTTTTCCTGTTTGGTCACT3361GATGCCTCCGTGTAAGGGGGATTTCTGTTCATGGGGGTAATGATACCGATGAA