课程名称《微生物学》实验.docx

课程名称《微生物学》实验.docx

《课程名称《微生物学》实验.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《课程名称《微生物学》实验.docx（13页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。

课程名称《微生物学》实验

课程名称《微生物学》实验

任课教师

白凤翎

专业

食品科学与工程

食品质量与安全

2005～2006学年

课程类型

学位课

班级

2004级1、2班

第二学期

第4～6周

教学课题

实验一微生物形态学实验

教学目的：

1、证明微生物是无所不在的，体会无菌操作的重要性；

2、学习并掌握油镜的原理和使用方法；

3、学习微生物制片和染色技术，掌握单染色和革兰氏染色方法；

4、了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性。

教学重点、难点：

1、油镜的原理及使用

2、细菌的制片技术

3、革兰氏染色技术

4、环境、体表微生物的分离

教学方法：

实验教学

考核知识与技能观测点：

1、微生物常规器皿和普通光学显微镜简介

2、食品、环境、体表微生物的分离

3、微生物（细菌）的单染色法

4、细菌的复合染色：

革兰氏染色法

5、混合菌涂片染色

6、微生物与动植物细胞的显微比较

时间：

2006年3月13日至2006年3月27日

实验一微生物形态学实验

一、微生物常规器皿和普通光学显微镜简介（2学时）

1、知识点

①各类微生物学实用器皿的规格要求及应用

②微生物学器皿的特点（封闭、灭菌）

③普通光学显微镜的原理：

A结构与组成、B显微镜的原理

2、技能要点

①试管、吸管、平皿的洗涤包扎

②棉塞的制作

③接种工具的制作与使用

④普通光学显微镜的使用：

A、光源调节：

通光路、提聚光器、光圈调节

B、焦距调节C、视野调节

二、食品、环境、体表微生物的分离（2学时）

1、知识点

①从周围环境、人体体表、口腔、食品等中分离各种微生物，证明微生物是无处不在的；

②体会无菌操作的重点性

③微生物不同其菌落特征不同

2、技能要点

①沉降法：

空气中微生物的分离

②涂布法：

表面微生物分离

③划线法：

食品中微生物的分离

④菌落特征描述

三、微生物（细菌）的单染色法（2学时）

1、知识点

①细菌染色原理

②染料的化学组成

③细菌细胞的结构与组成

④油镜的原理、分辨率

2、技能要点

①涂片技术关键点：

A涂片B固定

②低倍镜观察关键点：

调聚光器、调焦距

③油镜观察关键点：

A调焦B结束擦洗镜头

④细菌形态描述绘图

四、细菌的复合染色：

革兰氏染色法（2学时）

1、知识点

①革兰氏染色的操作步骤

②革兰氏染色的原理

③革兰氏阳性细菌与阴性细菌细胞结构比较

2、技能要点

①细菌制作

②革兰氏染色操作关键点：

A时间B脱色C水洗

③讨论菌种与革兰氏染色的关系

④绘制图线（四张）

五、混合菌涂片染色（2学时）

1、知识点

①革兰氏染色关键点分析：

脱色不足→G-→G+

脱色过渡→G+→G-

②通过G+和G-菌混合涂片证明染色操作的正确性

③未知细菌革兰氏染色判别

2、技能要点

①混合菌挑取制作涂片

②染色

③绘图及比较分析

六、微生物与动植物细胞的显微比较（2学时）

1、知识点

①细胞大小

②细胞形态与结构

③细胞染色

2、技能要点

①普通光学显微镜使用低倍镜观察动植物组织构造切片

高倍镜观察动植物细胞构造

油镜观察微生物细胞形态

②绘图比较分析

思考题：

1．用油镜观察时应注意哪些问题？

在载玻片和镜头之间加滴什么油？

起什么作用？

2．影响显微镜分别率的因素有哪些？

3．你认为制备细菌染色标本时，尤其要注意哪些环节？

4．你认为哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确性？

其中最关键的环节是什么？

5．你的染色结果是否正确？

如果不正确，请说明原因。

6.混合菌涂片染色有什么实际意义？

在进行混合菌涂片时应注意哪些问题？

7.试比较分析微生物和动植物在细胞形态结构的区别和联系。

课程名称《微生物学》实验

任课教师

白凤翎

专业

食品科学与工程

食品质量与安全

2005～2006学年

课程类型

学位课

班级

2004级1、2班

第二学期

第9～10周

教学课题

实验二微生物营养学实验

教学目的：

1、明确培养基的配制原理，掌握配制培养基的一般方法和步骤；

2、了解高压蒸汽灭菌的基本原理和应用范围；

3、学习与掌握高压蒸汽灭菌的操作方法和注意事项；

4、掌握平板划线法、倾注法、涂布法分离微生物的基本操作技术；

5、掌握微生物纯化技术；

6、了解不同微生物在各种培养基上（中）的培养特征；

7、进一步熟练和掌握微生物无菌操作技术。

教学重点、难点：

1、培养基的制造方法与步骤

2、高压蒸汽灭菌器的使用及注意事项

3、微生物的接种培养技术

4、微生物的分离纯化方法与原理

教学方法：

实验教学

考核知识点：

1、培养基的制造

2、培养基的高压灭菌

3、食品中微生物的分离与培养

4、微生物的纯化

5、微生物菌落特征描述

时间：

2006年4月17日至2006年4月28日

实验二微生物营养学实验

一、培养基的制造（2学时）

1、知识点

①微生物生长的六大营养要素的功能

②各个营养要素之间的配比

③培养基的pH值对微生物生长的影响

2、技能要点

①营养物的称量与溶化

②培养基pH值的调节

③培养基的过滤与分装

④培养基的加塞与包扎

二、培养基的高压灭菌（2学时）

1、知识点

①高压灭菌的原理

②高压灭菌器的结构和组成

③高压灭菌的操作程序

2、技能要点

①观察水位和加水

②装入被灭菌物与加盖

③加热与加压

④放气

⑤在规定灭菌时间内维持压力、温度

⑥减压与开盖

三、食品、土壤等微生物的分离与培养（2学时）

1、知识点

①纯培养的分离原理

②纯培养分离方法的选择（涂布分离法、倾注平板法）

③纯培养的纯化

④各类微生物的群落形态特征

2、技能要点

①食品检样的前处理A、固体样品B、液体样品

②样品的稀释A、10倍系列稀释B、

③样品的接种与培养A、涂布法B、倾注法

④菌落的形态学观察和描述A、平板B、斜面C、高层

四、微生物的纯化（2学时）

1、知识点

①纯培养的概念

②分离纯培养的目的和意义

③平板划线分离的原理的操作方法

2、技能要点

①单个菌落的确定

②平板划线：

A、连续划线B、垂直划线

③无菌操作

五、菌落特征描述（2学时）

1、知识点

①细菌的群体特征

②细菌的繁殖方式

③细菌在不同培养基上的表现：

A固体培养基、B、液体培养基C、半固体培养基

2、技能要点

①比较各类微生物的形态特征

②描述形态特征

③绘图及比较分析

思考题：

1．培养基配好后，为什么必修立即灭菌？

如何检查灭菌后的培养基是无菌的？

2．在配制培养基的操作过程中应注意什么问题？

为什么？

3．高压灭菌开始之前，为什么要将锅内的冷空气排尽？

灭菌完毕后，为什么待压力降到“0”时才能打开排气阀，开盖取物？

4．在使用高压蒸汽灭菌时，怎样杜绝一切不安全因素？

5．如何确定平板上某个单个菌落是否为纯培养？

请写出实验的主要步骤。

6．你所做的涂布平板法和划线法是否较好地得到了单个菌落？

如果不是，请分析原因。

7．接种环接种前后灼烧的目的是什么？

为什么在接种前一定要将其冷却？

如何判断灼烧过的接种环已冷却？

8．如何描述各种微生物在斜面上、半固体和液体培养基中的培养特征？

课程名称《微生物学》实验

任课教师

白凤翎

专业

食品科学与工程

食品质量与安全

2005～2006学年

课程类型

学位课

班级

2004级1、2班

第二学期

第15～16周

教学课题

实验三微生物生理学实验

教学目的：

1、了解糖发酵的试验原理和在肠道细菌鉴定中的重要作用；

2、掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法；

3、掌握IMViC试验的原理和操作要点；

4、掌握过氧化氢酶及脲酶试验的原理和方法；

5、了解IMViC试验在肠道菌鉴定中的意义和方法。

教学重点、难点：

1、糖发酵试验的原理、结果判定标准

2、吲哚试验的原理及操作方法

3、V-P试验的结果判定

4、脲酶试验的原理和结果判定

教学方法：

实验教学

考核知识点：

1、糖发酵试验

2、IMVIC试验

3、过氧化氢酶及脲酶试验

时间：

2006年5月29日至2006年6月14日

实验三微生物生理学实验

一、糖发酵试验（3学时）

1、知识点

①微生物学发酵糖类的原理

②糖发酵试验在细菌鉴定中的作用和意义

③区分氧化产酸和发酵产酸的作用

2、技能要点

①接种

②无菌操作技术

③发酵结果判断

二、IMVIC试验（5学时）

1、吲哚试验知识点

①吲哚试验的原理

②吲哚试验培养基构成和试剂组成

③乙醚或二甲苯的萃取作用

2、吲哚试验技能要点

①接种与培养（培养基—蛋白胨水）

②乙醚或二甲苯萃取

③吲哚试剂（构成及显色原理）

④结果判断（阳性与阴性的判断）

2、甲基红试验知识点

①甲基红试验原理

②甲基红指示剂的变色范围

③培养基组成

④发酵产酸

2、甲基红试验技能要点

①接种与培养（培养基—葡萄糖蛋白胨水）

②甲基红指示剂

③试验结果判定

3、V-P试验知识点

①V-P试验原理

②V-P试验与甲基红试验的关系

③α－萘酚的作用

2、V-P试验技能要点

①接种与培养（培养基—葡萄糖蛋白胨水）

②滴加40%KOH和α－萘酚

③反应结果的判断及注意事项

4、柠檬酸盐试验知识点

①柠檬酸盐试验原理（西蒙氏柠檬酸盐培养基配方）

②不同微生物碳源谱

③所用指示剂的变色范围

2、柠檬酸盐试验技能要点

①接种与培养（西蒙氏柠檬酸盐斜面）

②观察测试细菌的生长状况

③观察培养基的颜色变化

④结果判断

思考题：

1．假如某种微生物可以有氧代谢葡萄糖，发酵试验应该出现什么结果？

2．讨论IMVIC试验在食品检验中的意义？

3．为什么大肠杆菌是甲基红反应阳性，而产气杆菌为阴性？

这个试验与V—P试验最初底物和最终产物有何异同处？

为什么会出现不同？

4．糖发酵试验中所选用的批示剂有哪几种？

其变色范围和颜色如何？

5．在同一种发酵管中同时加葡萄糖和乳糖，采取什么方法判断其发酵结果？

6．微生物的生化反应的意义有哪些？

7．为什么在含糖培养基消毒灭菌时较低压力及较长时间呢？

8．在进行V－P试验时，为什么阳性试验结果容易判断？

阴性试验结果不容易下结论？