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电子显微镜的放大倍数极限为100万倍;

而AFM的放大倍数能高达10亿倍,观察活的生命样品,电子显微镜的样品必须进行固定、脱水、包埋、切片、染色等一系列处理,因此电子显微镜只能观察死的细胞或组织的微观结构;

原子力显微镜的样本可以是生理状态的各种物质,在大气条件或溶液中都能进行,因而只需很少或不需对样品作前期处理,这样,就使AFM能观察任何活的生命样品及动态过程。

加工样品的力行为,测试样品的硬度和弹性等;

AFM还能产生和测量电化学反应。

AFM还具有对标本的分子或原子进行加工的力行为,例如:

可搬移原子,切割染色体,在细胞膜上打孔等等。

3.1原子力显微镜简介,2.原子力显微镜的基本工作原理,立式AFM(Hansma等,1988),原子力显微镜后来又经过多次改进,现代的AFM不仅有原子级的分辨率(纵向0.01nm,横向0.1nm),针尖对试件的作用力极小,基本不划伤试件,能测量软质试件,而且具有多项新的测量功能,3.原子力显微镜的总体结构组成,3.2原子力显微镜的测量和扫描模式,1.AFM检测的要求,探针尖和试件表面非常接近时,二者间的作用力极为复杂,有原子(分子、离子)间的排斥力(库仑力)、吸引力(范德华力)、磁力、静电力、摩擦力(接触时)、粘附力、毛细力等。

AFM的检测成像用的是原子(分子、离子)间的排斥力(接触测量)或吸引力(非接触测量),而其他各种作用力对AFM的检测成像并无帮助,而只是起干扰影响作用。

2.作用力的检测模式,1)恒力测量模式;

2)测量微悬臂形变量的测量模式;

3)恒力梯度测量模式;

4)力梯度测量模式。

AFM的三种扫描成像模式,3.AFM检测时的扫描成像模式,AFM检测试件表面微观形貌时,现在采用三种不同的扫描成像模式:

1)接触扫描成像模式(contactmode),2)非接触扫描成像模式或抬高扫描成像模式(non-contactmode或liftmode),3)轻敲扫描成像模式(tappingmode),1)接触扫描成像模式,该方式所感知的力是接触原子的外层电子相互排斥的库仑力,这相互排斥的库仑力大小在1081011N。

该方式可以稳定地获得高分辨率试件表面微观形貌图像,有可能达到原子级的测量分辨率。

其缺点如下:

(1)检测弹性模量低的软质试件时,试件表层在针尖力的作用下会产生变形,甚至划伤,这将使测出的表面形貌图像出现假象。

(2)在大气条件下,多数试件表面都吸附着覆盖层(凝集水蒸气,有机污染物,氧化层等),厚度一般为几nm。

当探针尖接触这吸附层时,毛细现象会使吸附层下凹,或粘附到针尖上,引起额外的粘附力,增加了总的作用力,造成了检测成像的畸变。

(3)针尖和试件接触并滑行,容易使探针尖磨损甚至损坏。

2)非接触扫描成像模式,非接触扫描模式测量时,测量的作用力是以范德华力为主的吸引力,针尖试件间距离大致在520nm。

非接触扫描测量模式的主要优点,是探针和试件不接触,针尖测量时不会使试件表面变形,适用于弹性模量低的试件,此外因针尖和试件不接触,测量不受毛细力的影响,同时针尖也不易磨损。

但非接触扫描测量模式测量灵敏度要低些。

AFM轻敲扫描针尖振荡示意图,3)轻敲扫描成像模式,3.3探针与试件间的作用力,1.探针与试件间的各种作用力,1)各种长程力和短程力,探针试件间距离在10m左右时,空气阻尼力探针试件间距离在1001000nm时,主要静电力和磁力相互作用探针试件间距离在10100nm处,吸附水膜产生几百nN吸引力的毛细力针尖试件距离到达10nm左右时,原子(分子、离子)间吸引的范德华力针尖试件间距离小到1nm以内时,原子间相互排斥的厍仑力开始起作用,2)探针尖接近试件过程中发生作用的各种力,3)AFM测量时利用的相互作用力,在接触测量时,检测的是它们间的相互排斥力;

在非接触测量时,检测的是它们间的相互吸引力,4)针尖试件间其他作用力及其应用于各种扫描力显微镜,针尖试件间相互作用的磁力,可制成检测材料磁性能的磁力显微镜(MFM);

针尖试件间相互作用的静电力,可制成检测材料表面电场电势的静电力显微镜(EFM);

探针试件接触滑行时的摩擦力,可制成研究材料摩擦磨损行为的摩擦力显微镜(FFM);

2.AFM工作时针尖试件间的相互作用力,石墨H位上的两种电荷密度分布,1)相互排斥的库仑力和相互吸引的范德华力

(1)原子间的排斥力原子(分子)间的排斥力是由于原子外面的电子云相互排斥而产生的,原子间的排斥力是很强的,在AFM测量时排斥力在1081011N数量级,是短程的相互作用力,作用距离在1010m,随距离增加排斥力迅速衰减。

(2)原子间的相互吸引力原子(分子)间相互吸引的范德华力,是原子或分子靠近时产生相互极化而产生的微弱引力。

属长程力,作用距离可达108m以上。

范德华力,由三部分组成:

(1)偶极偶极相互作用力,即两个偶极子之间的作用力;

(2)偶极感应偶极间的相互作用力,同被它感应的偶极子间的相互作用力;

(3)色散力,它存于中性的原子或分子间。

这些中性的原子或分子的时间平均偶极矩为零,但是由于电子不断围绕原子核运动,在某一瞬间可能产生一定的偶极矩,使得中性原子或分子之间产生瞬时间偶极矩作用,从而产生了色散力。

Fv=,Hamaker常数A是决定范德华作用能大小的关键性参数,2)针尖试件原子间作用力和距离的关系,3)针尖和试件“接触”的概念,当两物体逐渐接近到二者之间的相互作用合力为“零”的临界点时,这两物体被认为开始接触。

即两物体之间相互作用的合力是排斥力时,这两物体是被认为相互接触的;

两物体之间相互作用的合力是吸引力时,这两物体是被认为相互不接触的。

4)AFM的接触测量和不接触测量,不易用于测量,3.悬臂针尖试件相互作用的动力学分析,1)针尖试件相互作用的势能,r两原子间距离两原子间作用能的系数在u(r)=0时的两原子间距离,针尖试件间距离为z的总势能,3.4毛细力和AFM在液体中测量,1.试件表面的吸附层,2.毛细力及其对AFM测量的影响,在R=50100nm,相对湿度在4080时,毛细力大约在几十nN数量级。

3.液体中针尖试件间的相互作用力,探针和试件都浸入液体内进行测量时,可以完全消除毛细现象,因此可不受毛细力的干扰,使测量时的作用力大大减小,而且可以:

1)检测软质试件;

2)可以观察检测活的生物细胞;

3)可以观察研究“固液界面”。

现在还不能完全控制AFM在液体中不同条件时的针尖试件间的相互作用力,作用机理也不完全清楚。

但AFM在液体中测量时,因消除了毛细力,可以使针尖试件间的作用力,比在真空中测量降低两个数量级。

这对检测柔软生物细胞,低弹性模量的软质材料极为重要。

4.在液体中AFM的检测,水下Au(111)的AFM图像(Manne,1990)原子分辨率的起伏幅度约1。

DNA的AFM图像(DigitalInstruments),3.5影响AFM测量精度的若干问题分析,1.探针作用力引起的试件表面变形,2.微悬臂对测量结果的影响,1)在AFM采用接触测量时,ki0,实测高度z将小于试件表面真实的起伏。

2)在AFM采用恒力测量模式时,针尖一试件间的相互作用力需保持不变。

当检测中作用力发生变化kih时,反馈系统通过改变z,使悬臂的变形力产生变化,而达到平衡:

kc(zh)=kih,3)在AFM测量时,针尖的预置力越大,纵向测量结果的放大作用也越大,即纵向畸变也增大。

为减小测量误差,应尽量采用小的针尖预置力。

4)AFM测量结果的纵向放大量(畸变)和微悬臂的刚度有关。

在采用等间隙测量模式时,从式中可看,采用刚度kc较低的微悬臂较为有利,可以减小纵向测量误差。

但如采用恒力测量模式时,为减小纵向测量误差,应采用刚度较高的微悬臂,这和采用等间隙测量模式时正好相矛盾。

因此可知,微悬臂刚度的选择和AFM的测量模式有关。

故在恒力测量模式时,测出的试件廓形高低,大于真实的高低,即测量结果在垂直方向有放大作用,造成测量廓形的误差,3.探针尖曲率半径对测量结果的影响,4.试件表面廓形高低起伏不平对测量结果的影响,1)纯几何的测量误差,即针尖和试件表面接触点改变,造成的测量误差。

2)针尖试件间的横向作用力,使探针弯曲,造成测量误差。

3)针尖试件间作用力和距离变化的非线性,造成测量误差。

纯几何的测量误差,3.6AFM的微悬臂和针尖,1.对微悬臂和针尖性能的要求,针尖尖锐程度,直接决定AFM测量的横向分辨率。

理想针尖的尖端是单原子,现在的商品针尖端曲率半径在10050nm,正努力希望能达到曲率半径R=10nm或更小。

微悬臂应该对垂直于试件表面,作用于针尖的Z向微弱力极为敏感,应该可以检测到几nN力的变化,因此微悬臂在Z向的弹性系数k必须很小。

在扫描过程中,针尖受摩擦力和横向力作用,因此要求悬臂有很高的横向刚度以减少测量误差。

微悬臂的自振频率须足够高,以便在扫描检测时,针尖能跟踪试件表面的起伏。

在典型测量中,扫描时轮廓起伏信号的频率可以达到几kH,因此微悬臂的固有频率必须高于10kHz,这样才能测出正确的试件表面微观形貌。

由于微悬臂Z向弹簧常数k很小,要求的自振频率又较高,这决定了微悬臂的尺寸(长度),必须很小,常用100m量级,质量也必须很小,应小于1mg。

2.微悬臂和针尖的结构形式,粘结针尖的矩形薄片微悬臂用金属丝制成的微悬臂和针尖V形薄片微悬臂带金字塔形针尖的一体化的V形薄片微悬臂,V形薄片微悬臂(C.Quate)(137m100m),a)玻璃基板带4个微悬臂b)单个带针尖的V形微悬臂c)金字塔形针尖(1.75mm1.30mm)(142m105m)(4.2m3.2m)带金字塔形针尖的Si3N4一体化V形薄片微悬臂(C.Quate),5)带圆锥形针尖的一体化的V形薄片微悬臂,带圆锥针尖V形SiO2微悬臂制造过程,带针尖的微悬臂(50m36m)圆锥形针尖(6.25m4.5m)带圆锥形针尖的SiO2一体化V形薄片微悬臂(C.Quate),6)粘晶须针尖的微悬臂,7)碳纳米管针尖的微悬臂,a)硅针尖加碳纳米管b)局部放大c)尖端放大AFM的碳纳米管探针尖(H.Dai),3.微悬臂的力学性能分析,1)对微悬臂的力学性能要求,要求它能高灵敏度地检测出在针尖上的作用力,并将此作用力转化成能测量的微悬臂形变或位置偏移。

为使针尖扫描时能随迅速变化起伏的试件表面廓形上下,微悬臂必须有足够高的自振频率。

2)矩形薄片微悬臂的力学计算,悬臂梁自由端最大挠度z1,悬臂梁的弹性系数,4)若干AFM的微悬臂的物理力学性能,3.7AFM针尖

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