HPLC法测定盐酸美克洛嗪原料及片剂的含量和有关物质图文精文档格式.docx

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结果：

线性浓度范围０．６一１．４

ｇ・Ｌ－１（ｒ＝ｏ．９９９７），ＲＳＤ％为ｏ．１５％。

结论：

用同一高效液相色谱法来测定盐酸荚克洛嗪原料及片刺的含量争有关物质，经方法学验证，此方法简便、灵敏、准确。

关键词：

高效液相色谱法；

盐酸美克洛嗪；

含量；

有关物质中图分类号：

９２１．２

文献标识码：

Ａ

文章编号：

１００９—３６５６（２００８）一ｌ一６５—３

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１仪器与试药

盐酸美克洛嗪为抗组胺药，收载于《中国药典》

２００５年版二部。

本文采用了同一种ＨＰＬＣ法对盐酸美克洛嗪原料及片剂的含量和有关物质进行了测定，此色谱法不同于ｕｓＰ２７版盐酸美克洛嗪原料及片剂的含量和有关物质的测定方法。

本文所选ＨＰＬＣ法检测成本低，对色谱柱无特殊要求，经方法学验证，此方法简便、专属性强、灵敏度高、结果准确。

Ａｇｄｅｍｌｌｏｏ型高效液相色谱仪，包括Ｇ１３１４Ａ

型紫外检测器，Ｇ１３１１Ａ型四元梯度泵，Ｇ１３１３Ａ型自动进样器，Ｇ１３１６Ａ型柱温箱。

盐酸美克洛嗪原

料（本单位自制，批号：

０４１００１、０４１００２、０４１００３），盐

酸美克洛嗪片（本单位自行研制，批号：

０５０４０ｌ、０５０４０２、０５０４０３），盐酸美克洛嗪对照品（ＵｓＰ标准品），甲醇为色谱纯，磷酸氢二铵为分析纯，磷酸为

作者简介：

隆艳，女，制药工程硕士研究生。

学科及研究方向：

药剂学。

联系电话：

０２ｌ一６２９３“１０。

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分析纯，水为超纯水。

２含量测定方法与结果

２．１

按处方比例配置的辅料中（为标示量的８０％一１２０％）制成高、中、低３种质量浓度，混合均匀，分别取不同浓度的样品３份，按样品含量测定方法操作，

色谱条件

色谱柱为Ｃ１８柱ＧｅｍｉＩｌｉ

Ｃ１８（４．６咖×

２５０

测得回收率分别为９９．３％，９８．９％，９９．４％，平均回

ｍｍ，５斗ｍ），流动相为甲醇．磷酸盐缓冲溶液（ｏ．０ｌ

ｍｏｌ・Ｌ。

１的磷酸氢二铵用磷酸调节ｐＨ至７．Ｏ＝８８：

１２，检测波长２３０２．２专属性试验

精密称取对氯苯酚适量及盐酸美克洛嗪对照品

收率为９９．２％，ＲＳＤ值为０．７８％。

２．８溶液稳定性试验

ｎｍ，柱温为３０℃，进样量２０灿。

分别在０，２，４，８，１６，２４ｈ精密量取供试品溶液２０斗Ｌ注入液相色谱仪，结果样品峰的ＲＳＤ为

０。

４％。

适量，用流动相溶解，并配置成适宜浓度的样品溶２．９样品含量测定

取盐酸美克洛嗪对照品（ＵＳＰ标准品）适量，精密称定，用流动相溶解并稀释制成每ｍＬ中约含ｌⅡｌｇ的溶液，作为对照品溶液；

取盐酸美克洛嗪样品适量，精密称定，用流动相溶解并稀释制成每ｍＬ中约含１ＩＩｌｇ的溶液，滤过，取续滤液，作为供试品溶液（１）。

另取盐酸美克洛嗪片约２０片，研细，取粉末适量，精密称定，置量瓶中，加流动相溶解并稀释制成每

液。

精密量取此溶液２０止，注入液相色谱仪，在上

述色谱条件下并以盐酸美克洛嗪峰计算理论塔板数为ｌｌ４２９，分离度大于１．５，符合要求，图谱见色谱

图ｌ。

ｍＬ中约含１鹕的溶液，滤过，取续滤液，作为供试品

溶液（２）。

精密量取对照品溶液与供试品溶液（１）、

（２），各２０止，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按

外标法以峰面积计算含量，结果见表ｌ及表２。

０

２，，

，

７．，

ｌＵ

１２．’

ｌ，

ｌ，．）

川ＺＺ．，

，，ｍｍ

表１３批样品（盐酸芙克洛嗪原料）含量测定结果

批号

ｃＰ２０００版电位滴定法／％高效液相色谱法／％

图ｌ色谱图ｌ

Ｉ一对氯苯酚；

２一盐酸美克洛嗪

２．３空白辅料干扰试验

按盐酸美克洛嗪片剂处方称取空白辅料并按上

述方法配置测定供试品溶液，结果证明在上述色谱

条件下，空白辅料在主成分保留时间处无吸收峰。

２．４线性关系试验

精密称取盐酸美克洛嗪适量，用流动相溶解并稀释制成每ｍＬ中约含５ｍｇ的样品溶液，精密量取

表２

３批样品（盐酸美克洛嗪片剂）含量测定结果

ｃＰ２０００版容量滴定法／％高效液相色谱法／％

此溶液１．２，ｌ，６，２．Ｏ，２．４，２．８ｍＬ，分别置于１０

ｍＬ

３有关物质测定方法与结果３．１最低检测限试验

精密称取盐酸美克洛嗪适量，用流动相溶解并稀释制成每ｍＬ中约含１ＩＩｌｇ盐酸美克洛嗪溶液，分别吸取此溶液１ｍＬ。

用流动相稀释成不同浓度的溶液，精

量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，按上述色谱条

件，各精密量取２０灿，分别注入液相色谱仪，记录

色谱图，根据峰面积计算，测得数据经线性回归得回

归方程：

ｙ＝７

８７３．６ｘ－１０３．０４，ｒ＝０．９９９７。

２．５精密度试验

密量取不同浓度的稀释溶液２０止，分别注人液相色

谱仪，记录色谱图，由此得知最低检出量为ｌＯ

３．２精密度试验

ｎｇ。

取供试品溶液，按上述色谱条件，重复进样６

次，ＲＳＤ为０．１５％。

２．６重复性试验

次，ＲＳＤ为０．６０％。

３．３溶液稳定性试验

分别在０，２，４，８，１６，２４ｈ精密量取供试品溶液

取供试品溶液各５份，按样品含量测定法测定，

平均含量为９８．１％，ＲｓＤ＝０．１３％２．７回收率试验

按盐酸美克洛嗪片剂处方，将一定量药物加到２０灿注入液相色谱仪，结果样品峰的ＲｓＤ为

她婪苎型竺堂垡坚堕些幽ｚ巫２型垒１

０．４３％。

２．５—３倍。

供试品溶液色谱图中如有杂质峰，单一

３．４线性关系试验

杂质峰面积不得大于对照溶液主峰峰面积精密称取盐酸美克洛嗪适量，用流动相溶解并（０．２５％），各杂质峰峰面积总和不得大于对照溶液稀释制成每ｍＬ中约含０．１ｔｌｌｇ的样品溶液，精密量主峰峰面积的２倍（０．５％）。

取此溶液ｌ，１．５，２，２．５，３ｍＬ，分别置于５０ｍＬ量瓶表３

３批样品（盐酸美克洛嗪原料）有关物质测定结果

中，用流动相稀释至刻度，摇匀，按上述色谱条件，各

¨

．．

有关物质总含量／％

精密量取２０灿，分别注入液相色谱仪，记录色谱

一。

（依照ｕｓＰ２７版测定法测定Ｘ依照本文有关物质测定法）

图，根据峰面积计算，测得数据经线性回归得回归方程：

，，＝３０．５５戈一Ｏ．１１６５，ｒ＝０．９９９９。

３．５破坏试验

表４３批样品（盐酸美克洛嗪片剂）有关物质测定结果

取样品适量，分别置于３个研钵中，分别加入适量的ｌｍｏｌ・Ｌ－１盐酸、ｌ

ｍ０１・ＬｑＮＡＯＨ、ｌＯ％Ｈ２０２，卅县

（依照ＵＳＰ２７版测定法测定Ｘ依照本文有关物质测定法）

使样品完全溶解，再将样品干燥，再取干燥的样品适量，置量瓶中，用流动相溶解并配制成每１ｍＬ含ｌ

ＩＩｌｇ

的溶液，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液；

另取样品置强光下照射３ｄ，然后取照射条件下破坏的样品４讨论

适量，置量瓶中，加流动相溶解并稀释配制成每ｍＬ结合中国药典２００５年版二部、欧洲要药典ＥＰ中含ｌｎｌｇ的样品溶液，摇匀，滤过，按上述色谱条件４．０版、美国药典ｕＳＰ２７版中盐酸美克洛嗪片的含

测定，各杂质峰分离度较好，证明此法可行。

量及有关物质的测定方法，为了避免容量滴定法测

３．６样品有关物质测定

定对盐酸美克洛嗪片的滴定终点颜色的判定的干取盐酸美克洛嗪原料约１０ｍｇ，置１０ｍＬ量瓶扰，以及为了避免检测方法多项操作，经试验，比较中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品了多种流动相系统（甲醇一磷酸盐缓冲液，甲醇一水，溶液（１）；

精密量取０．２５ＩＩｌＬ，置１００ｍＬ量瓶中，加甲醇一乙腈－水，甲醇一乙腈一磷酸盐缓冲液等），其中以流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液（１）。

另取甲醇ｍ．０１ｍ０１・Ｌ。

１磷酸氢二铵缓冲溶液ｐＨ

７．Ｏ

盐酸美克洛嗪片剂２０片，精密称定，研细，精密称取（８８：

１２）最好，在上述色谱条件下，盐酸美克洛嗪峰

适量（约相当于盐酸美克洛嗪１０ｍｇ），置１０ｍＬ量形好，不拖尾，符合要求，经方法学验证，此方法简

瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，作为便、灵敏度高、专属性强、结果准确。

供试品溶液（２）；

精密量取续滤液０．２５ｍＬ，置１００参考文献

ｍＬ量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶［１］

中华人民共和国药典二部，２００５：

５５２．

液（２）。

照含量测定项下色谱条件，取对照溶液２０［２】盐酸美克洛嗪和盐酸美克洛嗪片（ｕｓＰ２７版），１１４６．

Ｌ注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使盐酸美克［３］盐酸美克洛嗪和盐酸美克洛嚷片（ＥＰ４．Ｏ版），１５３２．［４］

ｗ蚰盯Ａｃｈｎ蛐ａｔｃ伊ａｐｈｉａ，１９９１．３１（７／８）：

４０１．

洛嗪色谱峰的峰高约为满量程的４０％。

再精密量・［５】于世林．高效液相色谱方法及应用，２０００年版．

取供试品溶液与对照品溶液各２０斗Ｌ，分别注入液［６］唐易全．色谱。

１９９０．８（６）：

３６８．

相色谱仪，记录色谱图