PBS缓冲液配制方法Word格式.docx
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一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4?
12H2O（磷酸氢二钠）
NaH2PO4?
2H2O（磷酸二氢钠）Nacl
用于细胞培养的PBS需含有氯化钾
称取8gNaCI、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可0.01M
PBS缓冲液
称取NaCI8g，KCl0.2g，Na2HPO4?
12H2O3.63g,KH2PO40.24g,溶
于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
PBS是最普遍不过的实验室缓冲液，但其配方各异。
以下是我的总结：
母液的配制：
0.2MNa2HPO4:
称取71.6gNa2HPO4-12H2O，溶于1000ml水
0.2MNaH2PO4:
称取31.2gNaH2PO4-2H2O，溶于1000ml水
各种浓度PB（pH=7.4）的配制：
先配0.2MPB（pH=7.4，100ml）：
取19ml0.2mol/L
的NaH2PO4，81ml0.2mol/L的Na2HPO4,即可。
然后只需将0.2MPB（pH=7.4）按相应比例适当稀释即可，如：
0.1MPB（PH=7.4）:
取500ml0.2MPB,加水稀释至1000ml即可
0.01MPB（PH=7.4）:
取50ml0.2MPB，加水稀释至1000ml即可
0.02MPB（PH=7.4）:
取100ml0.2MPB,加水稀释至1000ml即可若需要NaCL的话，加入NaCL至0.9%（g/100ml）即可。
另：
其它各种另PH值的0.2MPB（100ml）配方：
pH0.2MNaH2PO4（ml）0.2MNa2HPO4（ml）
5.7
93.5
6.5
5.8
92
8
5.9
90
10
6.0
87.7
12.3
6.1
85
15
6.2
81.5
18.5
6.3
77.5
22.5
6.4
73.5
26.5
68.5
31.5
6.6
62.5
37.5
6.7
56.5
43.5
6.8
51
49
6.9
45
55
7.0
38
62
7.1
33
67
7.2
28
72
7.3
23
77
7.4
19ml
81ml
7.5
16
84
7.6
13
87
7.7
10.5
0.5
7.8
8.5
91.5
7.9
7
93
8.0
5.3
94.7
磷酸盐缓冲液（PhosphateBuffer,PB,磷酸氢二钠和磷酸二氢钠缓冲
液配方
磷酸盐缓冲液（PhosphateBuffer,PB）
试剂：
NaH2PO42H2ONa2HPO412H2O
配制方法：
配制时，常先配制0.2mol/L的NaH2PO4和0.2mol/L的
Na2HPO4,两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液（PB）,根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。
（1）0.2mol/L的Na2HPO4；
称取Na2HPO4.12H2O31.2g（或NaH2PO4H2O27.6g）加重蒸水至1000ml溶解。
（2）0.2mol/L的Na2HPO4:
称取NaHPO4.12H2O71.632g（或
Na2HPO47H2O53.6g或Na2HPO42H2O35.6g）加重蒸水至1000ml溶解（3）0.2mol/LpH7.4的PB的配制：
取19ml0.2mol/L的NaH2PO4
和81ml0.2mol/L的Na2HPO412H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB
（pH约为7.4〜7.5）o若pH偏高或偏低，可通过改变二者的比例来加以调整，室温保存即可。
0.2mol/L磷酸盐缓冲液（pH5.7〜8.0）
pH0.2mol/LNaH2PO4（ml）0.2mol/LNa2HPO4（ml）
92.0
90.0
10.0
85.0
15.0
51.0
49.0
45.0
55.0
39.0
61.0
33.0
67.0
28.0
72.0
23.0
19.0
81.0
16.0
84.0
13.0
87.0
89.5
93.0
关于磷酸缓冲溶液的知识，我在网上搜索了好多帖子，但是还是不能
确定正确的答案。
现在把他们链接过来，希望有高手们参与讨论，我会把最终的正确解答整理出来，提供给大家。
PBS可以为三种溶液的英文缩写，分别是
1.磷酸盐缓冲溶液（phosphatebufferedsolution）、
2.磷酸盐缓冲盐水（phosphatebufferedsaline）及
3.磷酸盐缓冲钠（phosphatebufferedsodium），
其配制方法不同，pH值不同，发挥的生物学作用亦不完全相同。
如无特殊说明，生物学上常用的PBS是中性磷酸盐缓冲溶液（phosphatebufferedsolution）
无钙镁离子磷酸缓冲盐水（PBS）
（0.15Mol/LPH7.2）
NaCI8.0g
KCI0.2g
Na2HPO41.15g
（如为Na2HPO412H2O，则为2.89g）
KH2PO40.2g
将上述试剂依次溶于1000ml去离子水中，完全溶解后，115C高压灭菌10min~15min,存在4C冰箱中备用。
此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。
我们用的都是第二种
问题1:
磷酸盐缓冲盐水（phosphatebufferedsodium）,为什么用第
三种或第一种呢：
这么多年以来我都以为PBS就是磷酸盐缓冲溶液，其他两种说
法的英语名称常见到，不过我一直都以为他们是差不多的东西。
不同的汉语翻译倒是第一次听说。
我们公司用的PBS有很多种，抗体组用的中和PBS配方就比较
简单，没有K+离子，只起到缓冲PH的作用；
Na2HPO4+KH2PO4
按照不同比例混匀，可以得到不同PH的缓冲液，用于不同目的，
这个在分子生物学中用得很多；
用于活细胞或者细菌处理的，为了
保持渗透压，会加入其他的溶液，最常见的就是NaCI和KCl调节
离子浓度。
以上是个人的理解，欢迎批评。
：
问题2:
既然抗体组的PBS是起到缓冲PH的作用，那加入80G的NACL作用是什么？
需要平衡渗透压吗？
还有加入K离子的是不是因为细胞上NA-K泵的原因啊，血清里面又没有细胞，何来NA-K泵一说啊？
我觉得之所以这么配，其实就是对血清中缓冲环境的一种模拟罢了，血清里面又没有细胞，何来NA-K泵一说啊？
我没说血清撒。
。
我们用的又没加K，我是说加了K的的
问题3:
不加NACL会怎么样啊？
多省钱啊
在中和磷酸盐缓冲液中，NaCI的主要作用应当是保持一定的离子浓度，以维持抗体的活性。
在离子浓度过高或过低的情况下，蛋白质都会变性，抗体当然不例外。
ps:
哺乳类需用生理盐水浓度是0.9%。
称取0.9克氯化钠，溶解在少量蒸馏水中，稀释到100毫升。
鸟类需用的生理盐水浓度是0.75%。
称取0.75克氯化钠，溶解后用蒸馏水稀释到100毫升。
两栖类需用的生理盐水浓度是0.65%。
称取0.65克氯化钠，溶解后用蒸馏水稀释到100毫升。
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