整理PBS缓冲液的配制方法.docx

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整理PBS缓冲液的配制方法

【2017年整理】PBS缓冲液的配制方法

PBS缓冲液配方

不管是免疫组化，还是细胞培养中，常用到PBS缓冲液，下面是我们实验室的配方，供大家参考。

我们实验室的配方:

A液:

0.1mol/L磷酸二氢钾:

磷酸二氢钾（KH2PO4，MW136.09）1.361g，加双蒸水至100ml。

B液:

0.1mol/L磷酸氢二钠:

酸酸氢二钠（Na2HPO4.2H2O，MW177.99）1.78g，加双蒸水至100ml。

或者酸酸氢二钠（Na2HPO4.12H2O，MW358.14）3.58g，加双蒸水至100ml。

pH,,A液（ml）,,B液（ml）

5.60,,9.50,,0.25

5.91,,9.00,,1.00

6.24,,8.00,,2.00

6.47,,7.00,,3.00

6.64,,6.00,,4.00

6.81,,5.00,,5.00

6.98,,4.00,,6.00

7.17,,3.00,,7.00

7.38,,2.00,,8.00

7.73,,1.00,,9.00

8.04,,0.50,,9.50

一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O（磷酸氢二钠）NaH2PO4•2H2O（磷酸二氢钠）Nacl

用于细胞培养的PBS需含有氯化钾

称取8gNaCl、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可0.01M

PBS缓冲液

称取NaCl8g，KCl0.2g，Na2HPO4•12H2O3.63g,KH2PO40.24g，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L，常温保存备用。

PBS是最普遍不过的实验室缓冲液，但其配方各异。

以下是我的总结:

母液的配制:

0.2MNa2HPO4:

称取71.6gNa2HPO4-12H2O，溶于1000ml水0.2MNaH2PO4:

称取31.2gNaH2PO4-2H2O，溶于1000ml水各种浓度PB（pH=7.4）的配制:

先配0.2MPB（pH=7.4，100ml）:

取19ml0.2mol/L的NaH2PO4，81ml0.2mol/L的Na2HPO4,即可。

然后只需将0.2MPB（pH=7.4）按相应比例适当稀释即可，如:

0.1MPB（PH=7.4）:

取500ml0.2MPB，加水稀释至1000ml即可。

0.01MPB（PH=7.4）:

取50ml0.2MPB，加水稀释至1000ml即可。

0.02MPB（PH=7.4）:

取100ml0.2MPB，加水稀释至1000ml即可。

若需要NaCL的话，加入NaCL至0.9%（g/100ml）即可。

另:

其它各种另PH值的0.2MPB（100ml）配方:

pH0.2MNaH2PO4（ml）0.2MNa2HPO4（ml）

5.793.56.5

5.89285.990106.087.712.36.185156.281.518.56.377.522.56.473.526.56.568.531.56.662.537.56.756.543.56.851496.945557.03862

7.133677.228727.323777.419ml81ml7.516847.613877.710.50.57.88.591.57.97938.05.394.7

磷酸盐缓冲液（PhosphateBuffer,PB），磷酸氢二钠和磷酸二氢钠缓冲

液配方

磷酸盐缓冲液（PhosphateBuffer,PB）

试剂:

NaH2PO4?

2H2ONa2HPO4?

12H2O

配制方法:

配制时，常先配制0.2mol/L的NaH2PO4和0.2mol/L的

Na2HPO4，两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液（PB），

根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。

（1）0.2mol/L的Na2HPO4;称取Na2HPO4.12H2O31.2g（或

NaH2PO4?

H2O27.6g）加重蒸水至1000ml溶解。

（2）0.2mol/L的Na2HPO4:

称取NaHPO4.?

12H2O71.632g（或

Na2HPO4?

7H2O53.6g或Na2HPO4?

2H2O35.6g）加重蒸水至1000ml

溶解。

（3）0.2mol/LpH7.4的PB的配制:

取19ml0.2mol/L的NaH2PO4

和81ml0.2mol/L的Na2HPO4?

12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB

（pH约为7.4,7.5）。

若pH偏高或偏低，可通过改变二者的比例来

加以调整，室温保存即可。

0.2mol/L磷酸盐缓冲液（pH5.7,8.0）

pH0.2mol/LNaH2PO4（ml）0.2mol/LNa2HPO4（ml）5.793.56.55.892.08.05.990.010.06.087.712.36.185.015.06.281.518.56.377.522.56.473.526.56.568.531.56.662.537.56.756.543.56.851.049.06.945.055.07.039.061.07.133.067.0

7.228.072.07.323.067.07.419.081.07.516.084.07.613.087.07.710.589.57.88.591.57.97.093.08.05.394.7关于磷酸缓冲溶液的知识，我在网上搜索了好多帖子，但是还是不能

确定正确的答案。

现在把他们链接过来，希望有高手们参与讨论，我

会把最终的正确解答整理出来，提供给大家。

PBS可以为三种溶液的英文缩写，分别是

1.磷酸盐缓冲溶液（phosphatebufferedsolution）、

2.磷酸盐缓冲盐水（phosphatebufferedsaline）及

3.磷酸盐缓冲钠（phosphatebufferedsodium），

其配制方法不同，pH值不同，发挥的生物学作用亦不完全相同。

如无特殊说明，生物学上常用的PBS是中性磷酸盐缓冲溶液（phosp

hatebufferedsolution）。

无钙镁离子磷酸缓冲盐水（PBS）

（0.15Mol/LPH7.2）

NaCl8.0g

KCl0.2g

Na2HPO41.15g

（如为Na2HPO4?

12H2O，则为2.89g）

KH2PO40.2g

将上述试剂依次溶于1000ml去离子水中，完全溶解后，115?

高压灭菌10min~15min，存在4?

冰箱中备用。

此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。

我们用的都是第二种

问题1:

磷酸盐缓冲盐水（phosphatebufferedsodium），为什么用第三种或第一种呢:

这么多年以来我都以为PBS就是磷酸盐缓冲溶液，其他两种说法的英语名称常见到，不过我一直都以为他们是差不多的东西。

不同的汉语翻译倒是第一次听说。

我们公司用的PBS有很多种，抗体组用的中和PBS配方就比较简单，没有K+离子，只起到缓冲PH的作用;Na2HPO4+KH2PO4

按照不同比例混匀，可以得到不同PH的缓冲液，用于不同目的，这个在分子生物学中用得很多;用于活细胞或者细菌处理的，为了保持渗透压，会加入其他的溶液，最常见的就是NaCl和KCl调节

离子浓度。

以上是个人的理解，欢迎批评。

:

问题2:

既然抗体组的PBS是起到缓冲PH的作用，那加入80G的NACL作用是什么,需要平衡渗透压吗,还有加入K离子的是不是因为细胞上NA-K泵的原因啊，血清里面又没有细胞，何来NA-K泵一说啊,

我觉得之所以这么配，其实就是对血清中缓冲环境的一种模拟罢了，血清里面又没有细胞，何来NA-K泵一说啊,我没说血清撒。

。

。

。

。

。

我们用的又没加K，我是说加了K的的问题3:

不加NACL会怎么样啊,多省钱啊

在中和磷酸盐缓冲液中，NaCl的主要作用应当是保持一定的离子浓度，以维持抗体的活性。

在离子浓度过高或过低的情况下，蛋白质都会变性，抗体当然不例外。

ps:

哺乳类需用生理盐水浓度是0.9%。

称取0.9克氯化钠，溶解在少量蒸馏水中，稀释到100毫升。

鸟类需用的生理盐水浓度是0.75%。

称取0.75克氯化钠，溶解后用蒸馏水稀释到100毫升。

两栖类需用的生理盐水浓度是0.65%。

称取0.65克氯化钠，溶解后用蒸馏水稀释到100毫升。

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1999年CT诊断医师上岗证书考试试题1、下列哪一项是脂肪组织的CT值:

A（60~1001HU

B（20~60HU

C（0~20HU

D（-20~-120HU

E（<-200HU

2（由于血脑屏障破坏所致的肿瘤增强是:

A（脑膜瘤

B（垂体瘤

C、听神经瘤

D（胶质瘤

E（三叉神经瘤

3（脑池是:

A（蛛网膜与硬脑膜之间的间隙

B（蛛网膜与软脑膜之间的间隙

C、软脑膜与脑皮层之间的间隙

D（软脑膜与骨膜之间的间隙

E（软脑膜与硬脑膜之间的间隙4（不必进行增强扫描的是:

A（鉴别纵隔内结构

B（鉴别血管、肿块、淋巴结

C、大血管畸形

D.肺肿块合并肺不张

E（畸胎瘤

5（临床疑支气管扩张症，胸部x线片未见病变，怎样选择CT检查方法:

A（增强CT扫描

B（层厚10mm层距10nra平扫

C、层厚10mm层距20mm平扫;

D（层厚5mm层距20mm平扫

E（层厚1-1（5mm，高分辨率CT扫描6;前臂静脉团注增强扫描，肺动脉的循环时大约为:

A（10?

秒

B，20?

秒

C（30?

秒

D（40?

秒

E（50?

秒

7、下列哪一项对鉴别非感染性高密度肾囊肿是最重要的:

A（囊肿壁薄

B（囊肿外缘光滑

C（囊内密度均匀

D（增强前后密度无变化（

E（和肾实质分界清

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8（90,腰椎间盘疝发生在哪些部位:

（

A（腰1,腰2

B（腰2,腰3

c、腰3-腰4

D（腰4,腰5

E（腰4-5和腰5,骶l

9.在日常工作中，通过调节窗宽窗位来观察图像，要提高观察范围内组织的对比分辨率首

先应采取:

A（适当减小窗宽

B（适当增大窗宽

c（适当提高窗位

D（适当降低窗位

E（以上都不是

10（CT值是指:

A（物质密度的绝Z寸值

B（物质厚度的绝对值

c、物质衰减系数的绝对值

D（物质衰减系数与水相比的相对值

E、物质厚度的相对值

11（当层厚选用10mm，螺距等于1（0时，表明球管每旋转360，检查床前进:

A（0mm（床不动）

B（1.0mm

C.10mm

D（20mm

E（以上都不对

12（螺旋CT扫描与传统cT扫描相比最重要的优势是:

A（扫描速度快

B（取样速度快

C、重建速度快

D（体积扫描

E、单层连续扫描

13（CT图像出现带征提示:

A（脑炎

B、脑囊虫----,,,

C、脑出血

D（脑血管病变（

E（脑梗塞

14（下列哪一项是脑膜瘤典型CT表现:

A（钙化、囊变坏死

B（骨质破坏

C（明显瘤周水肿

D.等密度，明显均匀增强

E（占位效应明显

15.头颅动态CT扫描（床不移动）主要目的是:

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A.定位诊断

B（区别良、恶性

C（区别肿瘤与瘤周水肿

D.观察病变动态循环

E（区别脓肿与肿瘤

16（下面关于脑室系统的正确描述是:

A（包括左、右侧脑室、三脑室、导水管和四脑室

B（包括左、右侧脑室，三、四、五、六脑室

c（包括侧脑室;三脑室、导水管和四、五脑室

D（与蛛网膜下腔不相通

E（位于脑实质内

17（下列关于颅咽管瘤病理的描述，不正确的是:

A（80,为囊性

B（20,为实性

C（85,有钙化

D（囊内含胆固醇结晶液体或浓稠脱屑物

E（肿瘤边界模糊不清（

18（下面有关鞍上池毗邻关系的正确描述是:

A（前为直回，侧为海马，后为中脑

B（前为眶回，侧为颓叶，后为桥脑

C、前为额叶，侧为颓叶，后为中脑

D（前为额下回，侧为海马，后为桥脑

E（前为额叶，侧为颓叶，后为桥脑19（星形细胞瘤的CT表现为:

A（不规则低密度，

B（囊样低密度

C、可强化

D，可不强化

E、以上都是

20（下面哪一种是急性硬膜下血肿的不典型表现:

A（梭形

B（均匀高密度

C、广泛

D（可跨越颅缝

E（中线结构移位

21（患儿男，12岁，头痛5天。

CT平扫示右侧裂池和鞍上池密度高，增强扫描呈铸形强化（诊

断:

A（脑胶质瘤

B（先天发育异常

C、脑膜瘤

D（脑结核

E.结核性脑膜炎

22（大脑半球分界不清的部位是

A（额颓顶交界区

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B.中央区

C、基底节区，

D、颞顶枕交界区

E、颞岛交界区

23（患儿男，2岁，头痛。

cT轴位子扫示双侧额顶部半月形脑脊液密度，脑实质受压中线结

构居中，诊断为:

A（急性硬膜下血肿

B:

双侧硬膜下血肿

C、双额顶慢性硬膜下血肿

D、双额顶硬膜下水瘤

E（双额顶蛛网膜囊肿

24（双侧大脑半球最大的连接结构是:

A（大脑镰

B.透明隔

C（脑干

D（胼胝体

E（内囊

25（尾状核头部占位病变引起侧脑室:

A.后角变形、受压、移位

B（体部受压、变形、移位

C（下角受压、变形、移位

D.三角区受压、变形、移位

E..前角受压、变形、移位

26（听神经瘤<1mm时，CT平扫示:

A（可无阳性发现

B.内听道扩大

C.内听道截断

D（内听道骨壁破环

E（内听道骨壁增生

27（眶裂通过的结构有:

A（第三、第四、第六颅神经，眼上静脉三叉神经第一支

B（第三、第四、第五、第六颅神经，眼上动脉

C（第二、第三、第五、第一颅神经;眼上静脉

D（第二、第三、第五、第-颅神经，眼上静脉

E（第一、第二、第三、第四颅神经，眼动脉28（松果体瘤与生殖细胞瘤鉴别，以下哪一项cT表现有利于松果体瘤的诊断:

A（脑积水

B（三脑室后部受压

C（肿瘤内有钙化

D（松果体钙化移位

E（肿瘤增强

29（脑白质剪切伤的典型部位在:

P45

A（中央灰白质交界区

B.周边灰白质交界区------?

?

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C、胼胝体

D（大脑脚

E（以上都是

30（下面哪一种CT表现有利于脑内占位病变诊断:

A（边界清楚

B（与骨板交界呈钝角

C（骨板增生

D（脑室受压移位

E（脑皮层位置正常

31（麦氏（Magenide）孔梗阻引起的脑室扩张是:

A（侧脑室、三脑室、四脑室、五脑室

B（侧脑室、三脑室、四脑室、六脑室

C（侧脑室、三脑室、四脑室、导水管

D（侧脑室、三脑室、四脑室、五脑室、六脑室

E（侧脑室、三脑室、五脑室、六脑室32（星形细胞瘤与脑梗塞的鉴别最有意义的是:

A（低密度

B（不增强

C（单脑叶分布

D（多脑叶分布

E、不按血管支配区分布

33（患者男，60岁，突然剧烈头痛，CT示在侧裂池，颞角高密度，可能性大的是:

A（前交通动脉瘤破裂出血

B，大脑中动脉瘤破裂出血

C、大脑前动脉瘤破裂出血-

D（大脑后动脉动瘤破裂出血

E（后交通动脉瘤破裂出血

34（基底节包括:

A（尾状核、豆状核、屏状核、杏仁核

B（尾状核、壳核、苍白球、内囊

C、尾状核、丘脑;内囊、豆状核

D（尾状核、豆状核、内囊、丘脑

E、尾状核、屏状核、丘脑

35（患者男，60岁，右肢体功能障碍2小时，CT平扫正常。

24小时后复查，左颈叶大片模糊

低密度，诊断为:

A（左颈内动脉支配区急性脑梗塞

B（前交通动脉支配区急性脑梗塞

C.左大脑中动脉支配区急性颞叶脑梗塞

D（左大脑前动脉支配区急性颞叶脑梗塞

E.左大脑后动脉支配区急性颞叶脑梗塞36（颅底骨折的间接征象是:

A（硬膜外血肿

B（硬膜内血肿

c（头皮血肿

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D（副鼻窦和乳突气房出现气--液面

E.脑血肿

37（侧脑室三角区对应的脑叶是:

A（额颞顶叶交界区

B（额颞枕叶交界区

C（颞顶枕叶交界区

D（颞枕叶和小脑半球交界区

E.颞枕岛叶交界区

38（Meckel腔与颞下窝相连接经:

A。

眶上裂

B（棘孔

C.眶下裂

D（圆孔

E（卵圆孔

39（声带癌侵犯声门下的标准是肿瘤向下超过声带突:

A（2mm

B（3mm

C（4mm

D（5mm

E（6mm

40（下列哪一项CT征象对诊断视网膜母细胞瘤最有价值:

A（眼球内肿块

B（眼球内肿块伴出血

c（眼球内肿块伴坏死

D（眼球内肿块伴钙化

E（眼球内肿块向颅内扩展41（眼外肌从眶尖的腱环向前行附于:

A（角膜

B（虹膜

C.巩膜

D（视网膜

E（脉络膜

42（颈内静脉淋巴结分:

A（2组

B（3组

C（4组

D（5组

E（6组

43（患者男，40岁（右眼突，CT示眼球后肿块，内有静脉石样钙化，增强明显（诊断为:

A（炎性假瘤

B.良性肿瘤

C.海绵状血管瘤

D（恶性肿瘤

E（甲状腺性突眼

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44（在cT图象上腮腺深浅部的分界为:

E

A（颈内动脉

B（颈外动脉

c（颈内静脉

D（颈外静脉

E（颌后静脉

对甲状腺癌的诊断作用主要是:

45（CT

A（确诊

B（鉴别良恶性

C.鉴别非肿瘤性病变

D（确定肿瘤范围和淋巴结转移

E（确定周围组织结构受累46（面神经管分:

A（2段

B（3段

C.4段

D（5段

E（6段

47（横轴位鼻咽腔的CT图象形态为:

A（硬腭水平呈长方形

B（软腭之上水平呈方形

C.咽隐窝水平呈梯形

D（咽鼓管隆突水平呈梯形

E（咽隐窝水平呈双梯形48（下面哪一种CT征象最有利于中耳胆脂瘤诊断:

A（鼓膜增厚内陷

B（中耳腔扩大

C.外耳道棘破坏

D（中耳内软组织影

E（听骨链移位

49（早期鼻咽癌CT表现为:

A（无特征性

B（咽隐窝变浅，消失

C.咽隐窝加深，扩大

D（腭帆删巴大

E（咽旁间隙内移

50（对上颌窦癌诊断最有价值的CT征象为:

A（窦腔密度高伴骨质破坏

B.窦腔密度高伴骨质增生

C.窦腔密度高伴骨壁膨胀

D（窦腔密度高伴气液面

E（窦腔密度高伴同侧鼻腔高密度51（患儿男，15岁，反复鼻衄1年，CT示翼腭窝软组织肿块，压迫上颌窦后壁弯曲前移，明

显强化，诊断为:

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A（淋巴瘤

B（肉瘤

C（恶性肿瘤

D（癌

E（血管纤维瘤

52.患者女，25岁（双侧突眼6个月。

CT示双侧下直肌和内直肌呈梭形增大，增强扫描明显

增强，眼环正常，眼球突出1cm，诊断:

A（炎性假瘤

B（甲状腺性突眼（格雷夫斯病）

C（细菌性肌炎

D（血管性病变

E（横纹肌瘤

53.右上叶后段薄壁空洞，直径4cm，内有较小的液面，空洞周围肺内有渗出病变，右下叶

及左肺中下野有多发斑片状渗出，选择可能性较大的诊断:

A（肺结核病（干酷性肺炎）

B（肺脓肿

C.血源性肺脓肿

D（空洞型肺癌

E（肺霉菌病

54（能够确定胸部淋巴结肿大病理性质的检查方法是:

A（CT

B（MRI

C.胸部平片

D（同位素

E（以上均不是

55（肺癌可以经过气管转移扩散，最突出的例子是:

A（鳞癌

B（小细胞癌

C.大细胞癌

D（类癌

E（细支气管肺泡癌

56（指出最具有特征意义的肺动脉栓塞的表现:

A（-侧肺透过度增高

B（肺的外围以胸膜为基底的楔状致密影

C.实变区内小透亮区

D（增强扫描肺动脉主干内充盈缺损

E（局限性肺血管稀少

57.女性55岁，CT示胆总管重度扩张，在胰头上缘中断消失，形态不规则，最可能的诊断是:

A（胆总管癌

B（胰头癌

C.胆囊癌

D（胆总管结石

E（急性胆管炎

58.下列哪一项不是肾上腺腺瘤的CT表现

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A（密度均匀的类圆形实性肿块

B（病变边缘光滑清晰与肾上腺相连

C.常可见条或觅片状钙化，

D（常因含有脂类而呈低密度

E（增强扫描呈轻度强化

59.下列关于腹膜壁层肿瘤的描述，哪一项是错误的:

A（肿瘤沿腹膜面生长

B（一般不形成腹腔积液

C.呈板块状增厚

D（瘤结节向腹腔内突起

E（病变弥漫，常合并腹腔积液

60男性，44岁，有10年饮酒史，8年前曾患肝炎，cT示肝脏左叶和尾叶增大，方叶小，肝

，呈小灶性略低密度区，增强后早期五明显强化，裂宽，肝表面不光整，肝内密度不均

但延迟8分钟扫描，肝内密度基本均匀，同时脾门及贲门周围见团状软组织影，脾门及

贲门周围团状软组织影应考虑:

A（副脾

B（增大的淋巴结

C.曲张的侧支循环血管

D（肿瘤组织蔓延

E.增大的胰尾

61（下列哪一项不是CT对胃癌检查的主要作用:

A（用于早期诊断

B（显示胃壁增厚及范围

c（确定癌肿是否长出胃壁

D（显示周围淋巴结肿大

E（发现肝或其它脏器转移

62.下面哪一项不是典型肝脓肿在CT图象上的表现:

A（平扫示低密度占位，中心区CT值略高于水

B.多为圆或椭圆形，部分腔内有分隔

C（多数病灶边缘不清楚

D（脓肿周围出现不同密度环征

E（增强扫描脓肿壁无强化

63.下面哪一项不是细菌性肝脓肿的主要感染途径:

A.胆道

B.门静脉

c.下腔静脉

D.肝动脉

E.直接蔓延

64.肝癌在增强扫描的时间密度曲线上特征性表现为:

A（速