专题45 基因工程与蛋白质工程一高考生物高频考Word文档下载推荐.docx

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【答案】C

【题型】选择题

【难度】较难

2.(2012四川高考2)将大肠杆菌的质粒连接上人生长激素的基因后,重新置入大肠杆菌的细胞内,通过发酵就能大量生产人生长激素。

下列叙述正确的是()zzstep

A.发酵产生的生长激素属于大肠杆菌的初级代谢产物

B.大肠杆菌获得的能产生人生长激素的变异可以遗传

C.大肠杆菌质粒标记基因中腺嘌呤与尿嘧啶含量相等

D.生长激素基因在转录时需要解旋酶和DNA连接酶

【答案】B

【解析】初级代谢产物是微生物生长必需的,而人的生长激素不是大肠杆菌必需的,A项错误;

可遗传的变异有基因突变、基因重组和染色体变异,大肠杆菌获得的能产生人生长激素的变异属于基因重组,B正确;

基因为有遗传效应的DNA片段,不含有U,C错误;

转录时合成mRNA不需要DNA连接酶,D错误。

【难度】一般

二、综合题

1.(2016·

全国课标卷Ⅲ,40)图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三种限制性内切酶的识别序列与切割位点,图(b)为某种表达载体的示意图(载体上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切点是唯一的)。

根据基因工程的有关知识,回答下列问题:

(1)经BamHⅠ酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被________酶切后的产物连接,理由是________。

(2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子,如图(c)所示,这三种重组子中,不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有________,不能表达的原因是________。

图(c)

(3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有________和_______,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是___________________。

【答案】 

(1)Sau3AⅠ 两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端

(2)甲、丙 甲中目的基因插入在启动子的上游,丙中目的基因插入在终止子的下游,二者的目的基因均不能被转录

(3)E·

coliDNA连接酶 T4DNA连接酶 T4DNA连接酶

【解析】 

【题型】综合题

2.(2015·

课标卷Ⅰ,40)HIV属于逆转录病毒,是艾滋病的病原体。

回答下列问题:

(1)用基因工程方法制备HIV的某蛋白(目的蛋白)时,可先提取HIV中的________,以其作为模板,在________的作用下合成________,获取该目的蛋白的基因,构建重组表达载体,随后导入受体细胞。

(2)从受体细胞中分离纯化出目的蛋白,该蛋白作为抗原注入机体后,刺激机体产生的可与此蛋白结合的相应分泌蛋白是________,该分泌蛋白可用于检测受试者血清中的HIV,检测的原理是____________________________________。

(3)已知某种菌导致的肺炎在健康人群中罕见,但是在艾滋病患者中却多发。

引起这种现象的根本原因是HIV主要感染和破坏了患者的部分________细胞,降低了患者免疫系统的防卫功能。

(4)人的免疫系统有________癌细胞的功能。

艾滋病患者由于免疫功能缺陷,易发生恶性肿瘤。

(1)RNA 逆转录酶 cDNA(或DNA) 

(2)抗体

抗原抗体特异性结合 

(3)T(或T淋巴) 

(4)监控和清除

(1)HIV是RNA病毒,其核酸是单链RNA,而在基因工程中构建目的基因表达载体时,载体一般用的是质粒,为双链DNA,故先用逆转录酶催化HIV的RNA逆转录为DNA分子再进行基因工程操作。

3.(2014·

课标Ⅱ,40)植物甲具有极强的耐旱性,其耐旱性与某个基因有关。

若从该植物中获得该耐旱基因,并将其转移到耐旱性低的植物乙中,有可能提高后者的耐旱性。

(1)理论上,基因组文库含有生物的________基因;

而cDNA文库中含有生物的________基因。

(2)若要从植物甲中获得耐旱基因,可首先建立该植物的基因组文库,再从中________出所需的耐旱基因。

(3)将耐旱基因导入农杆菌,并通过农杆菌转化法将其导入植物________的体细胞中,经过一系列的过程得到再生植株。

要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达,应检测此再生植株中该基因的________,如果检测结果呈阳性,再在田间试验中检测植株的__________是否得到提高。

(4)假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交,子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为3∶1时,则可推测该耐旱基因整合到了__________________(填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”)。

(1)全部 部分(其他合理答案也可) 

(2)筛选(其他合理答案也可) 

(3)乙 表达产物(其他合理答案也可) 耐旱性 

(4)同源染色体的一条上

(1)基因文库有两种:

基因组文库和部分基因文库,基因组文库含有生物的全部基因;

cDNA是以mRNA为模板逆转录得到的,而细胞中只有部分基因表达,所以cDNA文库含有生物的部分基因。

(2)建立基因文库后要根据目的基因的特性从中筛选出目的基因。

(3)目的基因与载体构建基因表达载体后,导入乙植物细胞(受体细胞),需要进行表达产物(蛋白质)和生物个体水平(耐旱性)等的检测。

4.(2016·

江苏卷,33)下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注。

请回答下列问题:

(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用________两种限制酶切割,酶切后的载体和目的基因片段,通过________酶作用后获得重组质粒。

为了扩增重组质粒,需将其转入处于________态的大肠杆菌。

(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加________,平板上长出的菌落,常用PCR鉴定,所用的引物组成为图2中________。

(3)若BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端连接,连接部位的6个碱基对序列为________,对于该部位,这两种酶________(填“都能”、“都不能”或“只有一种能”)切开。

(4)若用Sau3AⅠ切图1质粒最多可能获得________种大小不同的DNA片段。

(1)BclⅠ和HindⅢ 连接 感受 

(2)四环素 引物甲和引物丙 

(3) 都不能 

(4)7

(1)选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点,但BamHⅠ可能使质粒中启动子丢失,因此只能选BclⅠ和HindⅢ。

酶切后的载体和目的基因片段,通过DNA连接酶作用后获得重组质粒。

为了扩增重组质粒,需将其转入处于感受态的大肠杆菌。

5.(2014·

天津卷,8)嗜热土壤芽孢杆菌产生的β-葡萄糖苷酶(BglB)是一种耐热纤维素酶,为使其在工业生产中更好地应用,开展了以下试验:

利用大肠杆菌表达BglB酶

(1)PCR扩增bglB基因时,选用________基因组DNA作模板。

(2)下图为质粒限制酶酶切图谱。

bglB基因不含图中限制酶识别序列。

为使PCR扩增的bglB基因重组进入该质粒,扩增的bglB基因两端需分别引入________和________不同限制酶的识别序列。

注:

图中限制酶的识别序列及切割形成的黏性末端均不相同。

(3)大肠杆菌不能降解纤维素,但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力,这是因为_______________________________________。

(1)嗜热土壤芽孢杆菌

(2)NdeⅠ BamHⅠ

(3)转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶

【锁定考点】

一、选择题

1.下图表示培育转基因抗植物病毒番茄的过程示意图。

下列叙述正确的是(  )

A.过程A需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶的参与

B.过程B通常需要用CaCl2处理,以提高番茄细胞壁的通透性

C.过程C需要采用植物组织培养技术

D.抗植物病毒基因一旦整合到番茄细胞的染色体上,就能正常表达

【解析】图中过程A为构建基因表达载体,需要用到限制酶和DNA连接酶,而不需要DNA聚合酶,A错误;

CaCl2处理只能提高农杆菌细胞的细胞壁的通透性,B错误;

过程C为由一个植物细胞得到一个完整植株的过程,一般要采用植物组织培养技术,C正确;

抗植物病毒基因整合到番茄细胞的染色体上,不一定能表达,D错误。

2.下列关于蛋白质工程的说法错误的是(  )

A.蛋白质工程能定向改造蛋白质的结构,使之更加符合人类的需要

B.蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作,定向改变其结构

C.蛋白质工程能产生自然界中不存在的新型蛋白质分子

D.蛋白质工程与基因工程密不可分,又称为第二代基因工程

【答案】B 

【解析】由于基因决定蛋白质,因此,要对蛋白质的结构进行设计改造,最终还必须通过改造基因来完成,而不是直接对蛋白质分子进行操作。

【难度】较易

3.抗菌肽对治疗癌症有一定作用,下图表示抗菌肽合成过程。

相关说法正确的是(  )

   

A.用PCR克隆目的基因不需要DNA解旋酶

B.基因表达载体包含起始密码和终止密码

C.用显微注射法导入基因表达载体

D.筛选菌种时用基因探针检测相关蛋白质

【答案】A

1.下图是利用基因工程方法生产重组人生长激素的有关资料。

图中质粒表示基因工程中经常用的载体—pBR322质粒,Ampr表示青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因。

根据下图回答下列问题(限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ切割形成的末端均不相同):

(1)过程②得到的cDNA一般比从基因组文库中获得的目的基因要小的多,原因是______________________,过程③需要在目的基因两侧位置上连接PstⅠ和EcoRⅠ限制酶识别序列,这样做的目的是_____________________。

(2)如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ对质粒pBR322进行切割,用一种酶、两种酶和三种酶分别切割时,其中含有完整青霉素抗性基因的DNA片段的比例是________。

(3)基因表达载体除了含有目的基因和抗性基因,至少还有_____________等(至少答两个)。

(4)如果只用限制酶PstⅠ切割目的基因和质粒pBR322,完成过程④、⑤后,将三角瓶内的大肠杆菌(不含Ampr、Tetr抗性质粒)先接种到甲培养基上,形成菌落后用无菌牙签挑取甲上的单个菌落,分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置上,一段时间后,菌落的生长状况如图所示。

接种到甲培养基上的目的是筛选________的大肠杆菌,含有目的基因的大肠杆菌在乙、丙培养基上的存活状态分别是________、_____

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