细胞生物学简答论述题Word文件下载.docx

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③具有渗透调节作用的细胞器，在维持细胞内环境的相对稳定中发挥了巨大作用。

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3.简述动物细胞与植物细胞之间的主要区别。

植物细胞所特有的结构：

液泡、叶绿体、细胞壁。

动物细胞所特有的结构：

中心体。

植物细胞有细胞壁、叶绿体，有些还有成熟的大液泡，而且在分裂的时候有细胞板；

动物细胞却没有。

动物细胞有中心体，低等动物细胞和植物细胞没有。

4.简述单克隆抗体的主要技术路线。

单克隆抗体的制备

①动物免疫与亲本细胞的选择；

②细胞融合：

淋巴细胞杂交瘤的制备；

③杂交瘤细胞的筛选：

有限稀释法等

④单克隆抗体的制备和冻存；

⑤单克隆抗体的纯化

亲本细胞的选择

①骨髓瘤细胞：

一般不分泌抗体，能在体外无限繁殖和连续继代培养，且为HGPRT－（次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶）或TK－（胸腺嘧啶核苷激酶）缺陷。

多用BALB/C小鼠的骨髓瘤细胞。

②淋巴细胞：

经过免疫处理的淋巴细胞，多用大鼠或小鼠。

③免疫方法：

对细胞或微生物抗原可直接注射如小鼠体内，可溶性蛋白抗原可与等量的福氏完全佐剂混合乳化后，注入到动物体内。

细胞融合：

将免疫脾细胞和小鼠骨髓细胞以2：

1或10：

1的比例混匀于50ml锥形离心管内，1200rpm离心;

10分钟，尽量吸净上清液，用手指轻击管壁，使管底沉淀的细胞铺展成薄层，在室温条件下边轻轻振摇离心管边在60秒钟内逐滴加入50%的PEG0.5ml，随后静置90秒，再于5分钟内边振摇边逐滴加入5－10ml不含血清的培液或盐水缓冲液，以终止PEG的作用，再静置10分钟。

HAT培养基筛选杂交瘤细胞

细胞团块分散后，加HAT溶液，即可加入有饲养细胞的96孔塑料培养板内每孔0.1ml，用HAT选择性培养时隔4－5天换液，8-10天后可以选择检测。

HAT选择系统：

HAT是含一定浓度次黄嘌呤（H）、氨基喋呤（A）及胸腺嘧啶核苷（T）的一种选择性培养基，其中三种成分与细胞DNA合成有关。

5.受体的主要类型。

根据受体蛋白结构、信息转导过程、效应性质、受体位置等特点，对目前已确定的受体可分为四类：

（1）离子通道受体

　　这一家族是直接连接有离子通道的膜受体，存在快反应细胞膜上，均由数个亚基组成，每个亚基的一部分共同组成离子通道，起着快速的神经传导作用。

当受体激活后，离子通道开放，促进细胞内、外离子跨膜流动，引起细胞膜去极化或超极化，产生兴奋或抑制效应。

N胆碱受体、兴奋性氨基酸受体、γ-氨基丁酸受体等属于这类受体。

（2）G蛋白偶联受体

　　这一家族的受体是通过G蛋白连接细胞内效应系统的膜受体。

肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺、M胆碱、前列腺素及一些多肽类等的受体都属于这类受体。

它们通过与不同膜上G蛋白偶联，使配体的信号通过第二信使cAMP、磷酸肌醇、二酰基甘油及Ca2+传至效应器，从而产生效应。

这类G蛋白偶联受体的结构具有共同的跨膜结构，在受体与激动剂结合后，只有经过G蛋白的转导，才能将信号传递至效应器。

（3）具有酪氨酸激酶活性的受体

　　这一家族是结合细胞内蛋白激酶，一般为酪氨酸激酶的膜受体。

当激动剂与细胞膜外的识别部位结合后；

细胞内的激酶被激活，在特定部位发生自身磷酸化，再将磷酸根转移到其效应器上，使效应器蛋白的酪氨酸残基磷酸化，激活胞内蛋白激酶，引起胞内信息传递。

属于具有酪氨酸激酶活性的受体有胰岛素、胰岛素样生长因子、表皮生长因子、成纤维生长因子、血小板源性生长因子及某些淋巴因子的受体。

（4）调节基因表达的受体

　　肾上腺皮质激素、雌激素、孕激素、甲状腺素都是非极性分子，可以自由透过细胞膜的脂质双分子层，与胞内的受体发生结合，传递信息。

所有甾体激素受体都属于一个有共同结构和功能特点的大家族。

它们都有一个约70个氨基酸残基组成的DNA结合部位。

甾体激素受体触发的细胞效应很慢，需若干小时。

各种受体都有特定的分布部位和特殊功能，有些受体具有亚型。

6.简述胞饮作用和吞噬作用的主要区别。

①细胞类型不同：

胞饮作用见于几乎所用真核细胞；

吞噬作用对于原生动物是一种获取营养的方式，对于多细胞动物这种方式仅见于特殊的细胞（如巨噬细胞、嗜中性和树突细胞）。

②摄入物：

胞饮作用摄入溶液，吞噬作用摄入大的颗粒性物质。

③胞吞泡的大小不同，胞饮泡直径一般小于150nm，而吞噬泡直径往往大于250nm。

④摄入的过程：

胞饮作用是一个连续发生的组成型过程,无需信号刺激；

吞噬作用是一个信号触发过程。

⑤胞吞泡形成机制：

胞饮作用需要网格蛋白形成包被、接合素蛋白连接；

吞噬作用需要微丝及其结合蛋白的参与,如果用降解微丝的药物（细胞松弛素B）处理细胞，则可阻断吞噬泡的形成，但胞饮作用仍继续进行。

7.细胞通过分泌化学信号进行通讯主要有哪几种方式？

①内分泌，由内分泌细胞分泌的信号分子（激素），通过血液循环运送到体内各个部位，作用于靶细胞。

②旁分泌。

局部信号分子通过扩散，作用于邻近靶细胞。

③自分泌。

信号发放细胞和靶细胞为同类或同一细胞。

自分泌信号常见于病理条件下，如肿瘤细胞合成和释放生长因子刺激自身，导致肿瘤细胞的增殖失控。

④通过化学突触传递神经信号：

神经递质经突触作用于特定的靶细胞。

8.简要说明G蛋白偶联受体介导的信号通路的主要特点。

G蛋白偶联的受体是细胞质膜上最多，也是最重要的倍转导系统，具有两个重要特点：

⑴信号转导系统由三部分构成：

①G蛋白偶联的受体，是细胞表面由单条多肽链经7次跨膜形成的受体；

②G蛋白能与GTP结合被活化，可进一步激活其效应底物；

③效应物：

通常是腺苷酸环化酶，被激活后可提高细胞内环腺苷酸（cAMP）的浓度，可激活cAMP依赖的蛋白激酶，引发一系列生物学效应。

⑵产生第二信使。

配体—受体复合物结合后，通过与G蛋白的偶联，在细胞内产生第二信使，从而将胞外信号跨膜传递到胞内，影响细胞的行为。

根据产生的第二信使的不同，又可分为cAMP信号通路和磷酯酰肌醇信号通路。

cAMP信号通路的主要效应是激活靶酶和开启基因表达，这是通过蛋白激酶完成的。

该信号途径涉及的反应链可表示为：

激素→G蛋白偶联受体→G蛋白→腺苷酸环化化酶→cAMP→cAMP依赖的蛋白激酶A→基因调控蛋白→基因转录。

磷酯酰肌醇信号通路的最大特点是胞外信号被膜受体接受后，同时产生两个胞内信使，分别启动两个信号传递途径即IP3—Ca2+和DG—PKC途径，实现细胞对外界信号的应答，因此，把这一信号系统又称为“双信使系统”。

9.信号肽假说的主要内容。

分泌蛋白在N端含有一信号序列，称信号肽，由它指导在细胞质基质开始合成的多肽和核糖体转移到ER膜；

多肽边合成边通过ER膜上的水通道进入ER腔，在蛋白合成结束前信号肽被切除。

指导分泌性蛋白到糙面内质网上合成的决定因素是N端的信号肽，信号识别颗粒（SRP）和内质网膜上的信号识别颗粒受体（又称停泊蛋白DP）等因子协助完成这一过程。

10.简述蛋白质糖基化修饰中N－连接与O－连接之间的主要区别。

P188

N-连接与O-连接的寡糖比较

特征

N-连接

O-连接

合成部位

合成方式

与之结合的氨基酸残基

最终长度

第一个糖残基

糙面内质网

来自同一个寡糖前体

天冬酰胺

至少5个糖残基

N-乙酰葡萄糖胺

糙面内质网或高尔基体

一个个单糖加上去

丝氨酸、苏氨酸、羟赖氨酸、羟脯氨酸

一般1-4个糖残基，但ABO血型抗原较长

N-乙酰半乳糖胺等

11.溶酶体膜有何特点与其自身相适应？

1）嵌有质子泵，形成和维持溶酶体中酸性的内环境；

2）具有多种载体蛋白用于水解的产物向外转运；

3）膜蛋白高度糖基化，可能有利于防止自身膜蛋白的降解。

12.简述ATP合成酶的作用机制。

ATP合酶包含两部分：

F1头部和F0基部。

F1头部含有催化位点，F0基部形成一个通道，质子由此通道从膜间隙转运到基质中。

ATP酶利用质子动力势，产生构象的改变，改变与底物的亲和力，催化ADP与Pi形成。

F1具有三个催化位点，但在特定的时间，三个催化位点的构象不同、因而与核苷酸的亲和力不同。

在L构象，ADP、Pi与酶疏松结合在一起；

在T构象底物（ADP、Pi）与酶紧密结合在一起，在这种情况下可将两者加合在一起；

在O构象ATP与酶的亲和力很低，被释放出去。

质子通过F0时，引起c亚基构成的环旋转，从而带动γ亚基旋转，由于γ亚基的端部是高度不对称的，它的旋转引起β亚基3个催化位点构象的周期性变化（L、T、O），不断将ADP和Pi加合在一起，形成ATP。

13.线粒体与叶绿体基本结构上的异同点。

相同点：

都含有遗传物质DNA和RNA，都能产生ATP，都具有封闭的两层单位膜，外膜含有孔蛋白，通透性高；

内膜通透性低通常向内折叠——形成线粒体的嵴和叶绿体的类囊体，构成多酶系统行使功能的结构框架。

不同点：

（1）线粒体是由外膜、内膜、外室、内室构成的。

叶绿体由叶绿体膜，类囊体和基质构成。

（2）线粒体内膜向内室褶叠形成嵴，内膜和嵴的基质面上有许多带柄的球状小体，即基粒。

叶绿体内膜并不向内折叠成嵴，不含电子传递链，内外膜之间形成膜间隙。

（3）线粒体内膜以内的空隙为基质腔，充满着基质。

叶绿体内膜与类囊体之间是流动性的基质，其中悬浮着片层系统。

（4）叶绿体内膜中除基质外，还有由单位膜封闭形成的扁平类囊体，类囊体膜中镶嵌有大小、数量不同的颗粒，捕光系统、电子传递链和ATP合成酶都位于类囊体膜上，集中了光合作用能量转换功能的全部组分。

14.细胞周期中核被膜的崩解和装配过程。

在分裂前期末,核纤层蛋白被磷酸化，核纤层解体，核被膜解体；

在分裂末期，核纤层蛋白去磷酸化，重新组装成核纤层，核被膜重建。

15.细胞内以多聚核糖体的形式合成蛋白质，其生物学意义是什么？

细胞内各种多肽的合成，不论其分子量的大小或是mRNA的长短如何，单位时间内所合成的多肽分子数目都大体相等。

以多聚核糖体的形式进行多肽合成，对mRNA的利用及对其浓度的调控更为经济和有效。

16.简述CDK1（MPF）激酶的活化过程。

CDK1激酶的激活首先是CDK要和周期蛋白结合形成复合体，wee1、mik1激酶和CDK激酶催化CDK的第14位的苏氨酸（Thr14）、第十五位的酪氨酸（Tyr15）和第161位的苏氨酸（Thr161）磷酸化。

但此时的CDK仍不表现激酶活性（成为前体MPF）。

然后，CDK在磷酸酶Cdc25c的催化下，其Thr14和Tyr15去磷酸化，才能表现出激酶活性。

17.简述核被膜的主要功能

一方面，核被膜构成了核质天然屏障，它将细胞的核和质两大结构和功能区域：

DNA复制RNA转录与加工在核内进行，蛋白质翻译则在局限在细胞质中。

这就避免了相互干扰，使生命活动更加秩序井然，同时核被膜还能保护核内DNA避免受到损伤破