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分子生物学11229
第七篇分子生物学检验技术
第一章绪论
记忆要点：
1.基因与疾病的关系：
病毒感染，单基因病，多基因病，肿瘤
2.分子生物学检验技术主要研究病原微生物基因，基因变异及基因多态性
模拟题
1.下列哪项属于单基因遗传病（）
A.冠心病B.糖尿病C.精神于神经疾病
D.原发性高血压E.α-地中海贫血
2.下列哪项属于多基因遗传病（）
A.糖尿病B.血友病C.Duchenne肌营养不良
D.脆性X综合征E.血红蛋白病
3．癌基因激活机制包括（）
A.点突变B.甲基化程度降低C.反转录酶活性增高
D.基因扩增E.DNA连接酶活性降低
4．病毒容易发生变异是由于下列哪些酶缺乏校正功能（）
A.DNA聚合酶B.DNA连接酶C.RNA聚合酶
D.蛋白酶E.反转录酶
5.病毒感染宿主的方式主要表现为（）
A.病毒感染宿主细胞后，病毒DNA直接在细胞内复制
B.病毒基因与宿主细胞染色体发生整合而使宿主染色体基因结构发生改变
C.病毒基因与宿主细胞染色体结合，形成复合物
D.病毒感染宿主细胞后，病毒吞噬细胞核
E.病毒感染宿主细胞后，病毒颗粒被宿主细胞吞噬
6．分子生物学检验技术在临床上的应用有（）
A.检测病原微生物基因B.检测基因变异C.器官移植配型
D.亲自鉴定E.遗传性疾病的诊断
第二章基因组与基因组学
记忆要点：
1.原核生物基因组中基因数目少，并且只有一个复制起始位点，是一条环状双链DNA，形成类核，没有核膜。
结构基因（无内含子）连同上游的调控区以及下游的转录中止信号共同组成操纵子。
其mRNA为多顺反子mRNA，5’端无帽子结构，3’端无多聚A尾。
质粒：
共价闭合环状DNA分子（酵母杀伤质粒为RNA）
2．病毒：
基因重叠，基因组为单倍体。
HBV、HCV、HIV基因组的特点
3．真核生物基因组；二倍体，单顺反子，重复序列多，非编码序列多，基因不连续（有内含子），基本上没有操纵子结构。
模拟题
7.下列叙述哪项是错误的（）
A.原核生物基因组具有操纵子结构B.原核生物结构基因是断裂基因
C.原核生物基因组中含有插入序列D.原核生物基因组中含有重复顺序E.原核生物结构基因的转录产物为多顺反子
8.质粒的主要成分是（）
A.多糖B.蛋白质C.氨基酸衍生物D.DNA分子E.脂类
9.原核生物类核结构的组成是（）
A.双链DNAB.RNAC.蛋白质+DNAD.支架蛋白
E.RNA+支架蛋白+双链DNA
10.操纵子不存在于（）
A.细菌基因组B.病毒基因组C.真核生物基因组D.大肠杆菌基因组
E.原核生物基因组
11.病毒生物学性状及感染的致病性主要取决于（）
A.病毒早期蛋白B.病毒表面糖蛋白C.病毒核酸
D.病毒晚期蛋白E.病毒衣壳蛋白
12.有关于微卫星重复序列的描述正确的是（）
A.在群体的个体间重复簇的大小不发生变化
B.每一簇含的重复序列的数目比小卫星重复序列多
C.有一个10~15个核苷酸的核心重复序列
D.在DNA重组时不具有活性E.以上都不对
13.细胞器基因组是（）
A.环状的B.不编码蛋白质产物C.分为多个染色体
D.线状的E.含有大量的短重复DNA序列
14.真核生物重指导蛋白质合成的结构基因大多数为（）
A.单拷贝序列B.中度重复序列C.高度重复序列
D.回文序列E.其它
15.有关人类基因组的特点描述不正确的是（）
A.功能相关的基因常散在分布于不同的染色体上
B.含有大量的重复序列
C.基因组中各个基因的大小和内部组织差异不大
D.含有大量的非编码序列
E.每个结构基因都有单独的调控序列
16.有关于多基因家族的描述，错误的是（）
A.由某一祖先基因经过重复合变异所产生的一组基因
B.通常由于突变而失活
C.假基因和有功能的基因是同源的
D.所有成员均产生有功能的基因产物
E.以上都正确
17.临床上用PCR方法检测HCV，常用的扩增靶序列为（）
A.5’端非编码区B.3’端非编码区C.结构蛋白区
D.非结构蛋白区E.以上都不是
18.原核生物基因组的特征包括（）
A.具有类核结构B.具有多个DNA复制起始位点
C.有大量的基因重叠现象D.存在可移动基因成分
E.有大量重复序列存在
19.质粒的结构特点有（）
A.所有质粒都是超螺旋结构的DNA
B.大多数质粒为环状双链DNA
C.以环状单链DNA分子存在
D.质粒DNA有半开环结构
E.以环状双链RNA分子存在
20.有关R质粒叙述正确的是（）
A.R质粒带有抗性转移因子B.R质粒又称耐药性质粒
C.R质粒带有抗性决定因子D.R质粒能决定细菌的性别
E.R质粒能决定细菌的大小
21.有关病毒基因组的结构特点正确的是（）
A.多数为多倍体B.编码区在基因组中的比例很少
C.含有大量的基因重叠现象D.含有一种核酸
E.有操纵子结构
22-24题共用下列选项
A.F质粒B.R质粒C.Col质粒D.严密型质粒E.松弛型质粒
22.带有耐药性基因的质粒是（）
23.可以产生大肠杆菌素的质粒是（）
24.在细胞中含量较多，且复制不受宿主严格控制的质粒是（）
第三章蛋白质组与蛋白质组学
记忆要点：
蛋白质组：
一种基因组所表达的全套蛋白质。
蛋白分离纯化，进行分析鉴定。
蛋白质相互作用
模拟题
25.最能直接反映生命现象的是（）
A.蛋白质组B.基因组C.mRNA水平
D.糖类E.脂类
26.两种等电点相近，分子量相差较大的蛋白质首选的分离方法是（）
A.电泳B.离子交换层析C.凝胶过滤层析
D.亲和层析E.分配层析
27.甲、乙、丙三种蛋白质，等电点分别为6.1，4.3和5.7。
在负极点样后电泳30分钟，哪种蛋白泳东的距离最远（）
A.甲蛋白B.乙蛋白C.丙蛋白
D.距离无差别E.不一定
28.下列哪种方法是蛋白质组研究中最有效的分析鉴定技术（）
A.二维凝胶电泳B.Westenr印迹C.Edman降解法
D.酶解分析法E.核酸表达法
29.SDS-聚丙酰胺凝胶电泳的原理不正确的是（）
A.SDS是一种阴离子去污剂
B.SDS可以与蛋白质的疏水部分结合，从而使蛋白质获得负电荷
C.蛋白质的迁移率与分子大小相关
D.SDS使具有不同等电点的蛋白质得以分离
E.SDS与蛋白质结合后可以屏蔽没有SDS时的任何一种电荷
30.关于滤膜结合法以下说法正确的是（）
A.硝酸纤维素法不能结合蛋白质，但可以结合双链DNA
B.硝酸纤维素法不能结合双链DNA，但可以结合单链DNA
C.硝酸纤维素法可以结合游离DNA片断
D.与蛋白质结合得DNA片断可以结合在硝酸纤维素膜上
E.可以将双链DNA和单链DNA分离开来
31.关于DNaseI足纹分析法，下列说法正确的是（）
A.DNaseI可以随机水解核苷酸中的磷酸二酯键
B.DNaseI可以水解与蛋白质结合的核苷酸
C.DNaseI水解核苷酸有碱基特异性
D.末端标记的DNA经DNaseI作用经放射自显影后形成以相差一个核苷酸为梯度的DNA探针
E.当结合有蛋白质的DNA片断经DNaseI作用后，在放射自显影图谱上出现一段空白区域，称之为足纹
32.对核酸-蛋白质杂交实验的描述，正确的是（）
A.又称Southwestern杂交B.可以确定结合蛋白质的分子量
C.又称Southeastern杂交D.可鉴定蛋白质与DNA的特异性杂交
E.蛋白质-DNA复合物经紫外线照射后导致其交联
33-35题共用下列选项
A.凝胶过滤层析B.离子交换层析C.亲和层析
D.SDS-PAGEE.琼脂糖凝胶电泳
33.根据分子大小分离蛋白质的是（）
34.利用大分子物质与其结构相对应的专一分子发生可逆性结合来分离物质的方法是（）
35.二维凝胶电泳中，第一向是等电聚焦凝胶电泳，第二向是（）
第四章肿瘤相关基因
记忆要点：
1.癌基因包括病毒癌基因和细胞癌基因。
细胞癌基因是正常细胞中一类编码关键性调控蛋白的基因，又称原癌基因，在进化上高度保守。
一般认为病毒癌基因来源于细胞癌基因。
一个等位癌基因的突变就可以激活细胞。
2.抑癌基因：
一类可抑制细胞过度生长和增生的基因。
两个等位基因都发生突变才能引起抑癌基因的失活，故抑癌基因又称隐性癌基因。
模拟题
36-38题共用下列选项
A.src家族B.ras家族C.myc家族D.sis家族E.erb家族
36.其产物具有酪氨酸磷酸化的蛋白激酶活性（）
37.产物具有GTP酶活性（）
38.产物结构与PDGF相似（）
39.关于p53基因的叙述，正确的是（）
A.是癌基因B.是肿瘤转移基因
C.野生型p53是抑癌基因D.是肿瘤转移抑制基因
E.突变型p53是抑癌基因
40.某患者检查时见脾脏增大，白细胞增多且存在bcr-abl融合基因，提示可能与下列哪种疾病有关？
（）
A.急性T细胞白血病B.急性粒细胞白血病
C.多发性骨髓瘤D.慢性粒细胞白血病
E.脾功能亢进
41.患儿，男，4岁，数月来视力明显下降，瞳孔区呈白色反光，检查可见视网膜上有近圆形且边界不清的黄白色隆起肿块，初步诊断为视网膜母细胞瘤。
表达产物异常可引起该疾病的抑癌基因是（）
A.RbB.p53C.BRCA1D.DCCE.WT1
42.下列关于恶性肿瘤发生发展的叙述哪项是错误的（）
A.多种因素协同作用B.单个基因变化即可引起细胞恶性转化
C.某些肿瘤是基因病D.是多因素多阶段变化的结果
E.既有癌基因改变，也包括抑癌基因变化
43.以下不属于细胞癌基因激活机制的是（）
A.点突变B.基因重排C.基因扩增
D.染色体易位E.原癌基因甲基化程度增高
44.细胞癌基因又称原癌基因，其含义是（）
A.正常情况下细胞癌基因并不致瘤B.细胞癌基因来源于病毒癌基因
C.病毒癌基因来源于细胞癌基因D.细胞癌基因是癌基因的前体
E.细胞癌基因来源于癌基因
45.癌基因家族有（）
A.src家族B.ras家族C.myc家族D.sis家族E.erb家族
第五章核酸的分离与纯化
记忆要点：
核酸分离、纯化的原则：
保证核酸一级结构的完整性；避免污染。
基因组DNA分离方法：
酚抽提法
3.质粒DNA的提取：
碱裂解法
模拟题
46.以下哪种方法不能抑制或灭活RNase活性（）
A.实验玻璃器皿及溶液用DEPC处理B.加入强烈的胍类变性剂
C.加入β-巯基乙醇D.加入EDTA金属离子鳌合剂
E.加入DTT
47.以下属于DNA的保存方法的是（）
A.溶于TE缓冲液中在-70℃储存
B.溶于0.3mol/L的醋酸纳溶液或双蒸水中，在-70℃至-80℃保存
C.沉淀溶于70%乙醇溶液或去离子的甲酰胺溶液zhogn，可在-20℃中长期保存
D.以DEPC水溶解保存E.异丙醇沉淀保存
48.下列关于紫外分光光度法用于核酸的纯度鉴定的说法正确的是（）
A.TE缓冲液中，纯RNA的A260/A280值为1.8，纯DNA的A260/A280值为2.0
B.TE缓冲液中，纯DNA的A260/A280值为1.8，纯RNA的A260/A280值为2.0
C.蛋白质及酚均使A260/A280上升
D.比值为1.8的DNA溶液一定为纯的DNA溶液
E.比值为2.0的RNA溶液一定为纯的RNA溶液
49.下列哪项不是保证RNA制备成功的条件（）
A.在RNA的制备过程中，排除RNase的污染及强有力地抑制其活性
B.选择性地使用针对RNase的蛋白质变性剂并联合使用RNase的特异性抑制剂，极大地防止内源性RNase对RNA的水解
C.应使用Ph4.5~5.5的水饱和酸性酚，既有利于DNA变性又有利于RNA的分离
D.在抽提过程中加入少量氯仿，目的在于消除抽提过程中因蛋白质变性而产生的泡沫
E.低温操作
50.纯DNA的A260/A280比值为1.8，可使比值升高的是（）
A.蛋白质B.酚C.RNA
D.氯仿E.Mg2+
51.完整的无降解的或降解很少的总RNA电泳图中，3个条带的荧光强度积分应呈特定的比值，下列表述错误的是（）
A.沉降系数大的核算条带分子量大，电泳迁移率低
B.分子量小，电泳迁移率高，荧光强度积分低
C.原核生物总RNA电泳结果，荧光强度由高到低为23SRNA，16SRNA，5SRNA
D.28SRNA的荧光强度比18SRNA的荧光强度高
E.RNA中以mRNA最多
52.SDS的作用是（）
A.鳌合剂，可以抑制DNA酶的活性，同时降低细胞膜的稳定性
B.高效水解RNA
C.引起细胞膜的讲解并能乳化脂质和蛋白质，并使它们沉淀
D.增加溶液粘度，维持渗透压，防止受机械力作用而降解
E.沉淀DNA
53.RNA中数量最多的是（）
A.mRNAB.rRNAC.tRNA
D.hnRNAE.snRNA
54.核酸沉淀常用的有机溶剂有（）
A.酚B.甲酰胺C.氯仿
D.异丙醇E.乙醇
55.下列哪些可通过抑制RNA酶对RNA的水解而延长RNA的保存时间（）
A.NaOHB.DEPCC.RNasin
D.NaAcE.VRC
56.质粒DNA提取纯化方法的3个主要步骤（）
A.质粒DNA的扩增B.质粒DNA的释放C.质粒DNA的鉴定
D.质粒DNA的回收E.质粒DNA的分离纯化
第六章DNA重组技术
记忆要点：
1.DNA重组技术常用的工具酶
2.限制性内切酶的分类、作用特点及甲基化酶的概念
3.常用载体的构建
4.DNA重组的过程及重组子的筛选和鉴定
5.DNA测序的方法
模拟题
57.限制性内切酶切割后产生的DNA双链末端带有（）
A.5’磷酸基和3’羟基B.5’羟基和3’磷酸基
C.5’磷酸基和3’磷酸基D.5’羟基和3’羟基
E.以上都不是
58.与限制性内切酶一起组成II类限制-修饰系统的是（）
A.同裂酶B.同工异源酶C.同尾酶
D.同工异构酶E.甲基化酶
59.在DNA重组技术中，哪种酶催化重组DNA分子的形成（）
A.DNA聚合酶B.Klenow片断C.连接酶
D.末端转移酶E.限制性内切酶
60.在DNA重组技术中，能给DNA片断3’端加上同聚物尾的酶是（）②
A.反转录酶B.Klenow片断C.TaqDNA聚合酶
D.末端转移酶E.碱性磷酸酶
61.装载容量最大的载体是（）
A.质粒载体B.噬菌体载体C.粘粒载体
D.腺病毒DNAE.酵母人工染色体
62.克隆质粒载体不应具备的特性有（）
A.复制子B.筛选标记C.多克隆位点
D.较高的拷贝数E.分子量相对较大
63.应用α-互不作用筛选时，阳性重组子克隆菌落为（）
A.白色B.蓝色C.蓝白相嵌
D.无色E.溶菌斑
64.质粒扩增时加入氯霉素的目的是（）
A.利用抗药性标记进行筛选
B.抑制大肠杆菌蛋白质合成，提高质粒拷贝数
C.抑制杂菌污染
D.抑制阴性克隆
E.以上都不是
65.用下列方法进行重组体的筛选，哪一项能说明外源基因进行了表达（）
A.Southern印迹杂交B.Northern印迹杂交
C.Western印迹杂交D.原位菌落杂交
E.斑点杂交
66.关于感受态细胞性质的描述，下列说法错误的是（）
A.具有可诱导性B.具有可转移性
C.细菌生长的任何时期都可以出现D.不同细菌出现感受态的比例不同
E.细菌处于对数生长期
67.关于质粒载体的叙述正确的是（）
A.由紧密型质粒经人工改造拼接而成
B.由松弛质粒经人工改造拼接而成
C.具有自主复制能力
D.装载容量大
E.具有筛选标记
68.下面关于多克隆位点的描述正确的是（）
A.仅位于质粒载体中B.仅位于病毒载体中
C.不同酶的识别序列可以有重叠D.一般是人工合成添加到载体中
E.具有多种酶的识别位点
69.质粒载体必须具备的基本特征有（）
A.独立复制B.有选择性标记C.有独特的酶切位点
D.有端粒E.具有较大的分子量
70.同聚物加尾法是一种人工粘性末端连接法，下列说法正确的是（）
A.易自身环化B.连接效率较低
C.用任何一种方法制备的DNA都可以用该方法进行连接
D.利用末端转移酶的功能，将载体和外源性DNA的3’端加上一段寡合苷酸
E.可能会产生某种限制性酶切位点
第七章克隆基因表达及基因干扰
记忆要点：
1.真核生物基因在原核细胞中的表达方式有非融合型表达、融合型表达以及分泌型表达。
2.反义寡核苷酸、反义RNA、RNAi及miRNA抑制基因表达的机制
模拟题
71.下列哪个不是目前融合型表达系统（）
A.His系统B.GST系统C.金黄色葡萄球菌蛋白A系统
D.半乳糖苷酶系统E.GCT系统
72.在His系统中主要利用His与下列哪个金属离子螯合（）
A.铝离子B.镉离子C.镍离子
D.铜离子E.铁离子
73.在Western印迹电转移时，负极到正极依次放置的顺序是（）
A.NC膜、凝胶、滤纸B.滤纸、NC膜、凝胶、滤纸
C.滤纸、凝胶、NC膜、滤纸D.凝胶、NC膜、滤纸
E.滤纸、NC膜、凝胶
74.下列哪个是大分子核酶（）
A.锤头状RNAB.第I类内含子C.发夹形RNA
D.肝炎D病毒RNAE.nuerosporaVarkudsatellite核酶
75.siRNA中G+C含量一般为多少时产生的沉默效应较高（）
A.5%B.15%C.25%
D.50%E.75%
76.利用大肠杆菌表达蛋白质所使用的表达载体应具有（）
A.含大肠杆菌适宜的选择标志
B.具有能调控转录、产生大量mRNA启动子
C.无翻译起始点
D.无翻译终止序列
E.多克隆位点
77.下列哪些材料可作为Westernblot的固相膜（）
A.硝酸纤维素膜B.尼龙膜C.醋酸纤维素膜
D.PVDF膜E.新华滤纸
78.siRNA的制备方法目前主要有（）
A.化学合成法B.体外转录法C.RNaseIII消化法
D.siRNA表达载体法E.siRNA表达框架法
79.SDS-PAGE电泳中，下列哪些试剂是需要的（）
A.亚甲双丙烯酰胺B.氧气C.丙烯酰胺
D.过硫酸胺E硝酸铵.
80.聚丙烯酰胺凝胶电泳具有哪些效应（）
A.电荷效应B.浓缩效应C.离子交换效应
D.分子筛效应E.分子螯合效应
81.反义RNA的作用机制主要是（）
A.抑制DNA复
B.阻止目的mRNA的成熟及向细胞内转运
C.阻止mRNA在多聚核糖体上翻译
D.抑制RNA复制
E.促进DNA复制
第八章核酸分子杂交技术
记忆要点：
1.核酸分子杂交的原理：
DNA变性后，只要消除变性条件，单链核酸分子可以与碱基互补的异源性单链形成双链杂交体。
2.Southern杂交、Northern杂交及荧光原位杂交的原理
3.核酸分子探针的分类及标记方法
4.核酸分子杂交的过程、杂交后信号检测方法及杂交技术的临床应用
模拟题
82.DNA链的Tm值主要取决于核酸分子的（）
A.G-C含量B.A-T含量C.A-G含量
D.A-C含量E.T-G含量
83.基因芯片技术的本质就是（）
A.核酸分子杂交技术B.蛋白质分子杂交技术
C.聚合酶链反应技术D.基因重组技术
E.酶切技术
84.寡核苷酸探针的最大优势是（）
A.杂化分子稳定B.可以区分仅仅一个碱基差别的靶序列
C.易标记D.易合成
E.易分解
85.检测的靶序列是RNA的技术是（）
A.Southern杂交B.Western杂交
C.Northern杂交D.Eastern杂交
E.杂交淋巴瘤
86.菌落杂交可以用于（）
A.快速确定是否存在目的基因
B.不仅可以检测DNA样品中是否存在某一特定的基因，还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息
C.检测目标是RNAD.用于基因定位分析
E.阳性菌落的筛选
87.以等位基因特异的寡核苷酸探针杂交法诊断某常染色体隐性遗传病时，若能与突变探针及正常探针结合，则该样本为（）
A.正常人B.杂合体患者C.纯合体患者
D.携带者E.不能确定
88.DNA探针的优点有（）
A.制备方法简单B.DNA探针易降解
C.DNA探针的标记方法成熟，有多种方法可以选择
D.克隆在质粒载体中，可以无限繁殖，取之不尽
E.单链，不存在竞争性的自身复制
89.变形的DNA会发生哪些理化性质的变化（）
A.粘度下降B.沉降速度增加
C.浮力下降D.紫外线吸收增加
E.紫外线吸收减少
90.杂交技术中，预杂交的主要目的是（）
A.平衡滤膜B.封闭非特异性杂交的位置
C.提高杂交信号的检测效率D.便于从滤膜上除去探针
E.清除用于杂交反应检测的显色物质
91.重组DNA的筛选可用核酸分子杂交的方法，常用于检测DNA的杂交方法有（）
A.菌落印迹杂交B.Northern印迹杂交
C.Western杂交D.原位杂交
E.斑点杂交
92.下列哪些可以作为核酸探针使用（）
A.microRNAB.单链DNA
C.寡核苷酸D.Mrna
E.双链RNA
第九章聚合酶链反应及相关技术
记忆要点：
1.PCR反应体系和反应条件
2.荧光定量PCR的原理
3.在PCR产物中引入突变序列的常用方法及检测PCR产物突变序列的方法
模拟题
93.下列因子不影响聚合酶链反应忠实性的是（）
A.退火温度B.反应pH值C.牛血清白蛋白
D.MgCl2E.TaqDNA聚合酶
94.双脱氧终止法测定核酸序列时，使用ddNTP的作用时（）
A.作为DNA合成的正常底物B.形成特异性终止链
C.标记合成的DNA链D.使电泳时DNA易于检测
E.使新合成的DNA链不易形成二级结构
95.有关于PCR的描述下列哪项不正确（）
A.是一种酶促反应
B.引物决定了扩增的特异性
C.扩增的产量按Y=A（1+X）n，A是模板量，X是扩增效率，n是循环次数
D.循环次数月多产物量越大，增加循环次数可提高产物量
E.扩增的对象是DNA序列
96.决定PCR反应特异性和PCR产物长度的是（）
A.模板B.dNTPC.引物
D.缓冲液E.TaqDNA聚合酶
97.下列关于PCR反应引物的描述，不正确的是（）
A.引
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