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1、分子生物学11229第七篇 分子生物学检验技术第一章 绪论记忆要点：1. 基因与疾病的关系：病毒感染，单基因病，多基因病，肿瘤2. 分子生物学检验技术主要研究病原微生物基因，基因变异及基因多态性模拟题1.下列哪项属于单基因遗传病（ ）A.冠心病 B.糖尿病 C.精神于神经疾病D.原发性高血压 E.-地中海贫血2. 下列哪项属于多基因遗传病（ ）A.糖尿病 B.血友病 C.Duchenne肌营养不良D.脆性X综合征 E.血红蛋白病3癌基因激活机制包括（ ）A. 点突变 B.甲基化程度降低 C.反转录酶活性增高D.基因扩增 E.DNA连接酶活性降低4病毒容易发生变异是由于下列哪些酶缺乏校正功能（

2、）A.DNA聚合酶 B. DNA连接酶 C. RNA聚合酶D.蛋白酶 E.反转录酶5. 病毒感染宿主的方式主要表现为（ ）A. 病毒感染宿主细胞后，病毒DNA直接在细胞内复制B.病毒基因与宿主细胞染色体发生整合而使宿主染色体基因结构发生改变C. 病毒基因与宿主细胞染色体结合，形成复合物D.病毒感染宿主细胞后，病毒吞噬细胞核E. 病毒感染宿主细胞后，病毒颗粒被宿主细胞吞噬6分子生物学检验技术在临床上的应用有（ ）A.检测病原微生物基因 B.检测基因变异 C.器官移植配型D.亲自鉴定 E.遗传性疾病的诊断第二章 基因组与基因组学记忆要点：1. 原核生物基因组中基因数目少，并且只有一个复制起始位点，

3、是一条环状双链DNA，形成类核，没有核膜。结构基因（无内含子）连同上游的调控区以及下游的转录中止信号共同组成操纵子。其mRNA为多顺反子mRNA，5端无帽子结构，3端无多聚A尾。质粒：共价闭合环状DNA分子(酵母杀伤质粒为RNA)2病毒：基因重叠，基因组为单倍体。HBV、HCV、HIV基因组的特点3真核生物基因组；二倍体，单顺反子，重复序列多，非编码序列多，基因不连续（有内含子），基本上没有操纵子结构。模拟题7. 下列叙述哪项是错误的（ ） A.原核生物基因组具有操纵子结构 B. 原核生物结构基因是断裂基因C. 原核生物基因组中含有插入序列D. 原核生物基因组中含有重复顺序E. 原核生物结构基

4、因的转录产物为多顺反子8. 质粒的主要成分是（ ）A.多糖 B.蛋白质 C.氨基酸衍生物 D.DNA分子 E.脂类9. 原核生物类核结构的组成是（ ）A.双链DNA B. RNA C.蛋白质+DNA D.支架蛋白E. RNA+支架蛋白+双链DNA10. 操纵子不存在于（ ）A.细菌基因组 B.病毒基因组C. 真核生物基因组 D.大肠杆菌基因组E.原核生物基因组11. 病毒生物学性状及感染的致病性主要取决于（ ）A.病毒早期蛋白 B.病毒表面糖蛋白 C.病毒核酸D.病毒晚期蛋白 E.病毒衣壳蛋白12. 有关于微卫星重复序列的描述正确的是（ ）A.在群体的个体间重复簇的大小不发生变化B.每一簇含的

5、重复序列的数目比小卫星重复序列多C.有一个1015个核苷酸的核心重复序列D.在DNA重组时不具有活性 E.以上都不对13. 细胞器基因组是（ ）A.环状的 B.不编码蛋白质产物 C.分为多个染色体D.线状的 E.含有大量的短重复DNA序列 14. 真核生物重指导蛋白质合成的结构基因大多数为（ ）A.单拷贝序列 B.中度重复序列C.高度重复序列D.回文序列 E.其它15. 有关人类基因组的特点描述不正确的是（ ）A.功能相关的基因常散在分布于不同的染色体上B.含有大量的重复序列C.基因组中各个基因的大小和内部组织差异不大D.含有大量的非编码序列E.每个结构基因都有单独的调控序列16. 有关于多基

6、因家族的描述，错误的是（ ）A.由某一祖先基因经过重复合变异所产生的一组基因B.通常由于突变而失活C.假基因和有功能的基因是同源的D.所有成员均产生有功能的基因产物E.以上都正确17. 临床上用PCR方法检测HCV，常用的扩增靶序列为（ ）A.5端非编码区 B. 3端非编码区 C.结构蛋白区D. 非结构蛋白区 E. 以上都不是18. 原核生物基因组的特征包括（ ）A.具有类核结构 B.具有多个DNA复制起始位点C.有大量的基因重叠现象 D.存在可移动基因成分E.有大量重复序列存在19. 质粒的结构特点有（ ）A.所有质粒都是超螺旋结构的DNAB.大多数质粒为环状双链DNAC.以环状单链DNA分

7、子存在D.质粒DNA有半开环结构E. 以环状双链RNA分子存在20 . 有关R质粒叙述正确的是（ ）A. R质粒带有抗性转移因子 B. R质粒又称耐药性质粒C. R质粒带有抗性决定因子 D. R质粒能决定细菌的性别E. R质粒能决定细菌的大小21. 有关病毒基因组的结构特点正确的是（ ）A.多数为多倍体 B.编码区在基因组中的比例很少C.含有大量的基因重叠现象 D.含有一种核酸E.有操纵子结构22-24 题共用下列选项A. F质粒 B. R质粒C. Col质粒 D.严密型质粒E.松弛型质粒22.带有耐药性基因的质粒是（ ）23.可以产生大肠杆菌素的质粒是（ ）24.在细胞中含量较多，且复制不受

8、宿主严格控制的质粒是（ ）第三章 蛋白质组与蛋白质组学记忆要点：蛋白质组：一种基因组所表达的全套蛋白质。蛋白分离纯化，进行分析鉴定。蛋白质相互作用模拟题25. 最能直接反映生命现象的是（ ）A.蛋白质组 B.基因组 C. mRNA水平 D.糖类 E.脂类26 . 两种等电点相近，分子量相差较大的蛋白质首选的分离方法是（ ）A.电泳 B.离子交换层析 C.凝胶过滤层析D.亲和层析 E.分配层析27 .甲、乙、丙三种蛋白质，等电点分别为6.1，4.3和5.7。在负极点样后电泳30分钟，哪种蛋白泳东的距离最远（ ）A.甲蛋白 B. 乙蛋白 C.丙蛋白D.距离无差别 E.不一定28. 下列哪种方法是蛋

9、白质组研究中最有效的分析鉴定技术（ ）A. 二维凝胶电泳 B. Westenr印迹 C. Edman降解法D. 酶解分析法 E.核酸表达法29. SDS-聚丙酰胺凝胶电泳的原理不正确的是（ ）A. SDS是一种阴离子去污剂B. SDS可以与蛋白质的疏水部分结合，从而使蛋白质获得负电荷C.蛋白质的迁移率与分子大小相关D. SDS使具有不同等电点的蛋白质得以分离E. SDS与蛋白质结合后可以屏蔽没有SDS时的任何一种电荷30. 关于滤膜结合法以下说法正确的是（ ）A.硝酸纤维素法不能结合蛋白质，但可以结合双链DNAB. 硝酸纤维素法不能结合双链DNA，但可以结合单链DNA C. 硝酸纤维素法可以结

10、合游离DNA片断D.与蛋白质结合得DNA片断可以结合在硝酸纤维素膜上E.可以将双链DNA和单链DNA分离开来 31. 关于DNase I足纹分析法，下列说法正确的是（ ）A. DNase I可以随机水解核苷酸中的磷酸二酯键B. DNase I可以水解与蛋白质结合的核苷酸C. DNase I水解核苷酸有碱基特异性D.末端标记的DNA经DNase I作用经放射自显影后形成以相差一个核苷酸为梯度的DNA探针E.当结合有蛋白质的DNA片断经DNase I作用后，在放射自显影图谱上出现一段空白区域，称之为足纹32. 对核酸-蛋白质杂交实验的描述，正确的是（ ）A.又称Southwestern杂交 B.

11、可以确定结合蛋白质的分子量C.又称Southeastern杂交 D. 可鉴定蛋白质与DNA的特异性杂交E. 蛋白质-DNA复合物经紫外线照射后导致其交联33-35题共用下列选项A.凝胶过滤层析 B.离子交换层析 C.亲和层析 D.SDS-PAGE E.琼脂糖凝胶电泳33. 根据分子大小分离蛋白质的是（ ） 34. 利用大分子物质与其结构相对应的专一分子发生可逆性结合来分离物质的方法是（ ）35. 二维凝胶电泳中，第一向是等电聚焦凝胶电泳，第二向是（ ）第四章 肿瘤相关基因记忆要点：1. 癌基因包括病毒癌基因和细胞癌基因。细胞癌基因是正常细胞中一类编码关键性调控蛋白的基因，又称原癌基因，在进化上

12、高度保守。一般认为病毒癌基因来源于细胞癌基因。一个等位癌基因的突变就可以激活细胞。2. 抑癌基因：一类可抑制细胞过度生长和增生的基因。两个等位基因都发生突变才能引起抑癌基因的失活，故抑癌基因又称隐性癌基因。模拟题36-38题共用下列选项A. src家族 B. ras家族 C. myc家族 D. sis家族 E. erb家族36. 其产物具有酪氨酸磷酸化的蛋白激酶活性（） 37. 产物具有GTP酶活性（ ） 38. 产物结构与PDGF相似（ ） 39. 关于p53基因的叙述，正确的是（ ） A.是癌基因 B.是肿瘤转移基因C.野生型p53是抑癌基因 D.是肿瘤转移抑制基因 E.突变型p53是抑癌

13、基因40. 某患者检查时见脾脏增大，白细胞增多且存在bcr-abl融合基因，提示可能与下列哪种疾病有关？（ ） A.急性T细胞白血病 B.急性粒细胞白血病C.多发性骨髓瘤 D.慢性粒细胞白血病E.脾功能亢进41. 患儿，男，4岁，数月来视力明显下降，瞳孔区呈白色反光，检查可见视网膜上有近圆形且边界不清的黄白色隆起肿块，初步诊断为视网膜母细胞瘤。表达产物异常可引起该疾病的抑癌基因是（ ） A. Rb B. p53 C. BRCA1 D. DCC E. WT142. 下列关于恶性肿瘤发生发展的叙述哪项是错误的（ ） A.多种因素协同作用 B. 单个基因变化即可引起细胞恶性转化C. 某些肿瘤是基因病

14、 D. 是多因素多阶段变化的结果E.既有癌基因改变，也包括抑癌基因变化43. 以下不属于细胞癌基因激活机制的是（ ） A.点突变 B. 基因重排 C.基因扩增 D.染色体易位 E. 原癌基因甲基化程度增高44. 细胞癌基因又称原癌基因，其含义是（ ） A.正常情况下细胞癌基因并不致瘤 B. 细胞癌基因来源于病毒癌基因C.病毒癌基因来源于细胞癌基因 D. 细胞癌基因是癌基因的前体E. 细胞癌基因来源于癌基因45. 癌基因家族有（ ） A. src家族 B. ras家族 C. myc家族 D. sis家族 E. erb家族第五章 核酸的分离与纯化记忆要点：核酸分离、纯化的原则：保证核酸一级结构的完

15、整性；避免污染。基因组DNA分离方法：酚抽提法3. 质粒DNA的提取：碱裂解法模拟题46. 以下哪种方法不能抑制或灭活RNase活性（ ） A.实验玻璃器皿及溶液用DEPC处理 B.加入强烈的胍类变性剂C.加入-巯基乙醇 D.加入EDTA金属离子鳌合剂E. 加入DTT47. 以下属于DNA的保存方法的是（ ） A.溶于TE缓冲液中在-70储存 B.溶于0.3mol/L的醋酸纳溶液或双蒸水中，在-70至-80保存C.沉淀溶于70%乙醇溶液或去离子的甲酰胺溶液zhogn ，可在-20中长期保存D.以DEPC水溶解保存 E.异丙醇沉淀保存48. 下列关于紫外分光光度法用于核酸的纯度鉴定的说法正确的是

16、（ ） A.TE缓冲液中，纯RNA的A260/A280值为1.8，纯DNA的A260/A280值为2.0B.TE缓冲液中，纯DNA的A260/A280值为1.8，纯RNA的A260/A280值为2.0C.蛋白质及酚均使A260/A280上升D.比值为1.8的DNA溶液一定为纯的DNA溶液E.比值为2.0的RNA溶液一定为纯的RNA溶液49. 下列哪项不是保证RNA制备成功的条件（ ） A.在RNA的制备过程中，排除RNase的污染及强有力地抑制其活性B.选择性地使用针对RNase的蛋白质变性剂并联合使用RNase的特异性抑制剂，极大地防止内源性RNase对RNA的水解C.应使用Ph4.55.5

17、的水饱和酸性酚，既有利于DNA变性又有利于RNA的分离D.在抽提过程中加入少量氯仿，目的在于消除抽提过程中因蛋白质变性而产生的泡沫E.低温操作50. 纯DNA的A260/A280比值为1.8，可使比值升高的是（ ） A.蛋白质 B.酚 C.RNAD.氯仿 E. Mg2+51.完整的无降解的或降解很少的总RNA电泳图中，3个条带的荧光强度积分应呈特定的比值，下列表述错误的是（ ） A.沉降系数大的核算条带分子量大，电泳迁移率低B.分子量小，电泳迁移率高，荧光强度积分低C.原核生物总RNA电泳结果，荧光强度由高到低为23SRNA，16SRNA ，5SRNA D.28SRNA的荧光强度比18SRNA

18、的荧光强度高E. RNA中以mRNA最多52. SDS的作用是（ ） A.鳌合剂，可以抑制DNA酶的活性，同时降低细胞膜的稳定性B.高效水解RNAC.引起细胞膜的讲解并能乳化脂质和蛋白质，并使它们沉淀D.增加溶液粘度，维持渗透压，防止受机械力作用而降解E.沉淀DNA53. RNA中数量最多的是（ ） A. mRNA B. rRNA C. tRNA D. hnRNA E. snRNA54. 核酸沉淀常用的有机溶剂有（ ） A.酚 B.甲酰胺 C.氯仿D.异丙醇 E.乙醇55. 下列哪些可通过抑制RNA酶对RNA的水解而延长RNA的保存时间（ ） A .NaOH B. DEPC C. RNasin

19、 D. NaAc E.VRC56. 质粒DNA提取纯化方法的3个主要步骤（ ） A.质粒DNA的扩增 B. 质粒DNA的释放 C.质粒DNA的鉴定D. 质粒DNA的回收 E. 质粒DNA的分离纯化第六章 DNA重组技术记忆要点： 1. DNA重组技术常用的工具酶2. 限制性内切酶的分类、作用特点及甲基化酶的概念3. 常用载体的构建4. DNA重组的过程及重组子的筛选和鉴定5. DNA测序的方法模拟题57.限制性内切酶切割后产生的DNA双链末端带有（ ）A. 5磷酸基和3羟基 B. 5 羟基和3磷酸基C. 5磷酸基和3磷酸基 D. 5 羟基和3羟基E. 以上都不是58. 与限制性内切酶一起组成I

20、I类限制-修饰系统的是（ ） A.同裂酶 B.同工异源酶 C.同尾酶D.同工异构酶 E.甲基化酶59. 在DNA重组技术中，哪种酶催化重组DNA分子的形成（ ） A.DNA聚合酶 B.Klenow片断 C.连接酶 D.末端转移酶 E.限制性内切酶60. 在DNA重组技术中，能给DNA片断3端加上同聚物尾的酶是（ ）A.反转录酶 B. Klenow片断 C.TaqDNA聚合酶D. 末端转移酶 E.碱性磷酸酶61. 装载容量最大的载体是（ ） A.质粒载体 B.噬菌体载体 C.粘粒载体D.腺病毒DNA E.酵母人工染色体62. 克隆质粒载体不应具备的特性有（ ） A.复制子 B.筛选标记 C.多克

21、隆位点D.较高的拷贝数 E.分子量相对较大63. 应用-互不作用筛选时，阳性重组子克隆菌落为（ ） A.白色 B.蓝色 C.蓝白相嵌 D.无色 E.溶菌斑64. 质粒扩增时加入氯霉素的目的是（ ） A.利用抗药性标记进行筛选 B.抑制大肠杆菌蛋白质合成，提高质粒拷贝数C.抑制杂菌污染 D.抑制阴性克隆E.以上都不是65. 用下列方法进行重组体的筛选，哪一项能说明外源基因进行了表达（ ） A. Southern印迹杂交 B. Northern印迹杂交C. Western印迹杂交 D. 原位菌落杂交E. 斑点杂交66. 关于感受态细胞性质的描述，下列说法错误的是（ ） A.具有可诱导性 B.具有可

22、转移性C.细菌生长的任何时期都可以出现 D.不同细菌出现感受态的比例不同E.细菌处于对数生长期67. 关于质粒载体的叙述正确的是（ ） A.由紧密型质粒经人工改造拼接而成 B.由松弛质粒经人工改造拼接而成C.具有自主复制能力 D.装载容量大E.具有筛选标记68. 下面关于多克隆位点的描述正确的是（ ） A.仅位于质粒载体中 B.仅位于病毒载体中C.不同酶的识别序列可以有重叠 D.一般是人工合成添加到载体中E.具有多种酶的识别位点69.质粒载体必须具备的基本特征有（ ） A.独立复制 B.有选择性标记 C.有独特的酶切位点D.有端粒 E.具有较大的分子量70. 同聚物加尾法是一种人工粘性末端连接

23、法，下列说法正确的是（ ） A.易自身环化 B.连接效率较低C.用任何一种方法制备的DNA都可以用该方法进行连接D.利用末端转移酶的功能，将载体和外源性DNA的3端加上一段寡合苷酸E.可能会产生某种限制性酶切位点第七章 克隆基因表达及基因干扰记忆要点：1. 真核生物基因在原核细胞中的表达方式有非融合型表达、融合型表达以及分泌型表达。2. 反义寡核苷酸、反义RNA、RNAi及miRNA抑制基因表达的机制 模拟题71. 下列哪个不是目前融合型表达系统（ ） A. His系统 B.GST系统 C.金黄色葡萄球菌蛋白A系统D.半乳糖苷酶系统 E.GCT系统72. 在His系统中主要利用His与下列哪个

24、金属离子螯合（ ） A.铝离子 B.镉离子 C.镍离子 D.铜离子 E.铁离子73. 在Western印迹电转移时，负极到正极依次放置的顺序是（ ） A.NC膜、凝胶、滤纸 B. 滤纸、NC膜、凝胶、滤纸C.滤纸、凝胶、NC膜、滤纸 D. 凝胶、NC膜、滤纸E.滤纸、NC膜、凝胶74. 下列哪个是大分子核酶（ ） A.锤头状RNA B.第I类内含子 C.发夹形RNAD.肝炎D病毒RNA E. nuerospora Varkud satellite 核酶75. siRNA中G+C含量一般为多少时产生的沉默效应较高（ ） A.5% B. 15% C. 25%D. 50% E. 75%76. 利用大

25、肠杆菌表达蛋白质所使用的表达载体应具有（ ） A.含大肠杆菌适宜的选择标志 B.具有能调控转录、产生大量mRNA启动子C.无翻译起始点 D.无翻译终止序列E.多克隆位点77. 下列哪些材料可作为Western blot的固相膜（ ） A.硝酸纤维素膜 B.尼龙膜 C.醋酸纤维素膜D.PVDF膜 E.新华滤纸78. siRNA的制备方法目前主要有（ ） A.化学合成法 B.体外转录法 C.RNase III消化法D. siRNA表达载体法 E.siRNA表达框架法79. SDS-PAGE电泳中，下列哪些试剂是需要的（ ） A.亚甲双丙烯酰胺 B.氧气 C.丙烯酰胺D.过硫酸胺 E硝酸铵.80.聚

26、丙烯酰胺凝胶电泳具有哪些效应（ ） A.电荷效应 B.浓缩效应 C.离子交换效应D.分子筛效应 E.分子螯合效应81. 反义RNA的作用机制主要是（ ） A.抑制DNA复B.阻止目的mRNA的成熟及向细胞内转运C.阻止mRNA在多聚核糖体上翻译D.抑制RNA复制 E.促进DNA复制第八章 核酸分子杂交技术记忆要点：1. 核酸分子杂交的原理：DNA变性后，只要消除变性条件，单链核酸分子可以与碱基互补的异源性单链形成双链杂交体。2. Southern杂交、Northern杂交及荧光原位杂交的原理3. 核酸分子探针的分类及标记方法4. 核酸分子杂交的过程、杂交后信号检测方法及杂交技术的临床应用模拟题

27、82. DNA链的Tm值主要取决于核酸分子的（ ） A.G-C含量 B.A-T含量 C.A-G含量 D.A-C含量 E.T-G含量83. 基因芯片技术的本质就是（ ） A.核酸分子杂交技术 B.蛋白质分子杂交技术C.聚合酶链反应技术 D.基因重组技术E.酶切技术84. 寡核苷酸探针的最大优势是（ ） A.杂化分子稳定 B.可以区分仅仅一个碱基差别的靶序列C.易标记 D.易合成E.易分解85. 检测的靶序列是RNA的技术是（ ） A.Southern杂交 B. Western杂交C.Northern杂交 D. Eastern杂交E.杂交淋巴瘤86. 菌落杂交可以用于（ ） A.快速确定是否存在目

28、的基因B.不仅可以检测DNA样品中是否存在某一特定的基因，还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息C.检测目标是RNA D.用于基因定位分析E.阳性菌落的筛选87. 以等位基因特异的寡核苷酸探针杂交法诊断某常染色体隐性遗传病时，若能与突变探针及正常探针结合，则该样本为（ ） A.正常人 B.杂合体患者 C.纯合体患者D.携带者 E.不能确定88. DNA探针的优点有（ ） A.制备方法简单 B.DNA探针易降解C. DNA探针的标记方法成熟，有多种方法可以选择D. 克隆在质粒载体中，可以无限繁殖，取之不尽E.单链，不存在竞争性的自身复制89. 变形的DNA会发生哪些理化性质的变化（ ） A

29、.粘度下降 B.沉降速度增加C.浮力下降 D.紫外线吸收增加E.紫外线吸收减少90. 杂交技术中，预杂交的主要目的是（ ） A.平衡滤膜 B.封闭非特异性杂交的位置C.提高杂交信号的检测效率 D.便于从滤膜上除去探针E.清除用于杂交反应检测的显色物质91.重组DNA的筛选可用核酸分子杂交的方法，常用于检测DNA的杂交方法有（ ） A.菌落印迹杂交 B. Northern印迹杂交C.Western杂交 D.原位杂交E.斑点杂交92. 下列哪些可以作为核酸探针使用（ ） A.microRNA B.单链DNAC.寡核苷酸 D.MrnaE.双链RNA第九章 聚合酶链反应及相关技术记忆要点：1. PCR

30、反应体系和反应条件2. 荧光定量PCR的原理3. 在PCR产物中引入突变序列的常用方法及检测PCR产物突变序列的方法模拟题93.下列因子不影响聚合酶链反应忠实性的是（ ） A. 退火温度 B.反应pH值 C.牛血清白蛋白D. MgCl2 E.TaqDNA聚合酶94. 双脱氧终止法测定核酸序列时，使用ddNTP的作用时（ ） A.作为DNA合成的正常底物 B.形成特异性终止链C.标记合成的DNA链 D.使电泳时DNA易于检测E.使新合成的DNA链不易形成二级结构95. 有关于PCR的描述下列哪项不正确（ ） A.是一种酶促反应 B.引物决定了扩增的特异性C.扩增的产量按Y=A(1+X)n ，A是模板量，X是扩增效率，n是循环次数D.循环次数月多产物量越大，增加循环次数可提高产物量E.扩增的对象是DNA序列96. 决定PCR反应特异性和PCR产物长度的是（ ） A.模板 B.dNTP C.引物D.缓冲液 E. Taq DNA聚合酶97. 下列关于PCR反应引物的描述，不正确的是（ ） A.引