第十六章转基因技术与作物育种.docx

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第十六章转基因技术与作物育种

一、选择题

1、人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工合成。

通过转基因技术可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是（）

A.大肠杆菌B.酵母菌

C.肺炎双球菌D.乳酸菌

2、下列有关基因工程的叙述，正确的是（）

A．DNA连接酶将碱基对之间的氢键连接起来

B．目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因突变

C．限制性核酸内切酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率就越大

D．常用的载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等

3、我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。

下列叙述不正确的是（）

A.抗虫基因的提取和运输需要专用的工具酶和载体

B.重组DNA分子中替换一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失

C.抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递到近缘作物，从而造成基因污染

D.转基因抗虫棉是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的

4、如图是获得抗虫棉的技术流程示意图。

卡那霉素抗性基因（kanr）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。

下列叙述正确的是（）

A.构建重组质粒过程中需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶

B.愈伤组织的分化产生了不同基因型的植株

C.卡那霉素抗性基因（kanr）中有该过程所利用的限制性核酸内切酶的识别位点

D.抗虫棉有性生殖后代能保持抗虫性状的稳定遗传

5、上海医学研究所成功培育出第一头携带人白蛋白基因的转基因牛。

他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高30多倍，以下与此有关的叙述中正确的是（）

A.“转基因动物”是指体细胞中出现了新基因的动物

B.“提高基因表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞中含有更多的人白蛋白基因

C.只有从转基因牛乳汁中才能获取人白蛋白，是因为人白蛋白基因只在牛乳腺细胞中含有

D.转基因牛的肌肉细胞中也有人白蛋白基因，但不发生转录、翻译，不能合成人白蛋白

6、下列关于蛋白质工程和基因工程的比较，不合理的是（）

A.基因工程原则上只能生产自然界已存在的蛋白质，而蛋白质工程可以对现有蛋白质进行改造，从而制造一种新的蛋白质

B.蛋白质工程是在基因工程的基础上发展起来的，蛋白质工程最终还是要通过基因修饰或基因合成来完成

C.当得到可以在-70℃条件下保存半年的干扰素后，在相关酶、氨基酸和适宜的温度、pH条件下，干扰素可以大量自我合成

D.基因工程和蛋白质工程产生的变异都是可遗传的

7、基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的，在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是（）

A．人工合成基因　　　　　

B．制备重组DNA分子

C．把目的基因导入受体细胞

D．目的基因的检测和表达

8、已知一双链DNA分子，用限制酶Ⅰ切割得到长度为120kb（kb：

千碱基对）片段；用限制酶Ⅱ切割得到40kb和80kb两个片段；同时用限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ切割时，得到10kb、80kb和30kb3个片段，据此分析该双链DNA分子结构及酶切位点情况为（）

9．据图所示，有关工具酶功能的叙述不正确的是（）

A．限制性核酸内切酶可以切断a处，DNA连接酶可以连接a处

B．DNA聚合酶可以连接a处

C．解旋酶可以使b处解开

D．连接c处的酶可以为DNA连接酶

10、采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出了转基因羊。

但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。

以下有关叙述，正确的是（）

A．如果人凝血因子基因的核苷酸序列已知，可用人工合成的方法获得该目的基因

B．人体细胞中凝血因子基因进入羊受精卵细胞后，其传递和表达不再遵循中心法则

C．在该转基因羊体内，人凝血因子基因存在于乳腺细胞中，而不存在于其他体细胞中

D．人凝血因子基因开始转录后，DNA聚合酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA

11、科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中，在医学研究及相关疾病治疗方面都具有重要意义。

下列有关叙述错误的是（）

A．选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞具有全能性

B．采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达

C．人的生长激素基因能在小鼠细胞内表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用

D．转基因小鼠的肝细胞含有人的生长激素基因

12、某研究所的研究人员将生长激素基因通过质粒介导进入大肠杆菌细胞内，来表达产生生长激素。

已知质粒中存在两个抗性基因：

A是抗链霉素基因，B是抗氨苄青霉素基因，且目的基因要插入到基因B中，而大肠杆菌不带有任何抗性基因。

下列叙述正确的是（）

A．导入大肠杆菌的质粒一定为重组质粒

B．RNA聚合酶是构建该重组质粒必需的工具酶

C．可用含氨苄青霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒

D．在含氨苄青霉素培养基中不能生长，但在含链霉素培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌

二、填空题

1、如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。

图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。

据图回答：

（1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。

筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含________的培养基上进行。

（2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是________（填字母代号）。

A.启动子B.tetRC.复制原点D.ampR

（3）过程①可采用的操作方法是________（填字母代号）。

A.农杆菌转化B.大肠杆菌转化

C.显微注射D.细胞融合

（4）过程②可采用的生物技术是________________。

（5）对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。

这利用了细胞的________性。

（6）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用________（填字母代号）技术。

A.核酸分子杂交B.基因序列分析

C.抗原—抗体杂交D.PCR

2、科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。

但在进行基因工程的操作过程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。

已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—，据图回答：

（1）过程①表示的是采取___________的方法来获取目的基因。

（2）根据图示分析，在构建基因表达载体过程中，应用限制酶___________切割质粒，用限制酶___________切割目的基因。

用限制酶切割目的基因和运载体后形成的粘性末端通过___________原则进行连接。

（3）人体的生长激素基因能在细菌体内成功表达是因为__________。

写出目的基因导入细菌中表达的过程________________。

（4）将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长，说明大肠杆菌B已导入了______________________，反之则没有导入。

三、简答题

1、基因工程的定义与特征？

2、试述基因工程的主要研究内容？

3、基因工程在食品工业上有何应用发展？

4、转基因是一把双刃剑，请客观谈谈对转基因及转基因食品安全性的认识？

5、原核生物和真核生物的基因表达调控有何差别？

6、什么是基因？

根据基因的产物，基因可分为哪三类？

7、引起核酸变性的因素主要有哪些？

核酸变性后性质有何变化？

8、DNA复性及其影响因素？

9、DNA凝胶电泳中核酸分子分离的机理？

10、DNA凝胶电泳中影响电泳迁移率的因素主要有哪些？

11、PCR的原理和主要反应过程，并分析影响PCR扩增的影响因素？

12、PCR引物设计的原则，若给一指定DNA序列并需要通过PCR扩增此序列，如何设计扩增引物？

13、定量PCR的原理？

Ct值的含义？

14、分子杂交的类型主要有哪些？

探针的标记方法与标记类型？

常用的双链DNA的标记方法是哪两种？

15、Southern杂交一般过程及影响杂交因素？

16、基因组文库的构建过程？

如何确定文库的大小？

17、基因文库的类型包括哪两种？

各有什么特点？

18、一般质粒DNA的构型有哪几种？

在琼脂糖凝胶电泳中有何特点？

19、碱裂解法提取质粒DNA的原理，分析影响试验结果的各种可能因素？

20、电泳缓冲液使用一定时间后出现DNA在凝胶中跑不动现象的原因，有何解决办法？

21、电泳的指示剂和染色剂有何区别，各自的作用是什么？

22、限制性核酸内切酶的类型，基因工程常用的是哪种限制性核酸内切酶？

23、什么是星活性，产生星活性的因素可能有哪些？

24、结合已做的实验，分析影响酶切的因素。

25、限制性核酸内切酶命名规则及各字母代表的含义？

26、简单叙述同尾酶和同裂酶的差别？

27、连接酶主要有哪些类型？

有何异同点？

影响连接酶连接效果的因素主要有哪些？

28、试分析提高平端DNA连接效率的可能方法？

29、基因工程中常用的DNA聚合酶主要有哪些？

30、作为基因工程载体，其应具备哪些条件？

31、质粒的不相容性及其分子机理？

32、载体的类型主要有哪些？

在基因工程操作中如何选择载体？

33、质粒转化原理，影响转化率的因素有哪些？

34、重组体分子的选择方法主要有哪些？

并简单阐述其原理？

35、基因的克隆方法主要有哪些？

并阐述其克隆原理？

36、简单阐述差异显示PCR克隆基因的原理及其优缺点，有何应用？

37、抑制性差减杂交的原理与应用？

38、酵母双杂交技术、噬菌体表面展示技术的原理？

39、T-DNA标签法克隆基因的一般技术路线？

40、通过比较，分析大肠杆菌表达系统和酵母表达系统各有何优缺点？

41、如何提高克隆基因的表达水平？

42、克隆目的基因蛋白的表达形式主要有哪些类型？

43、启动子从转录模式上可分为哪两种？

表达系统常选用哪一种？

其机理是什么？

44、表达载体和基因工程一般克隆载体在元件构成上有何差别？

45、根据表达蛋白用途的不同，设计选择基因的表达策略？

46、什么叫转基因植物？

植物转基因技术的基本路线主要包括哪些？

47、外源基因导入植物的方法主要有哪些？

48、运用已学的知识，如何全面分析获得的转基因个体（提示：

包括外源基因是否整合，被插入位点分析，外源基因是否表达，表达量如何？

）

49、出现转基因沉默现象的可能原因分析？

50、转基因食品的危害有哪些？

51、如果知道某一基因的功能及其相应的蛋白质的氨基酸序列组成，可以通过何种方法克隆该基因?

52、列举质粒载体必须具备的4个基本特性？

53、PCR的基本原理是什么？

用PCR扩增某一基因，必须预先得到什么样的信息？

54、什么是基因组文库（genomiclibrary）?

构建基因组文库，涉及哪些基本过程?

它同遗传学上的基因库有什么不同?

55、常用的工具酶有哪些？

其主要用途是什么？

56、常用的目的基因与载体的连接方法有哪些？

一、选择题

1.B2.C3.D4.A5.D6.C7.C8.D9．D10.A11.B12.D

二、填空题

1、

（1）HindⅢ和BamHⅠ氨苄青霉素

（2）A（3）C（4）胚胎移植技术（5）全能（6）C

2、答案：

（1）反转录（人工合成）

（2）ⅠⅡ碱基互补配对（3）共用一套密码子转录-翻译（4）普通质粒或重组质粒

三、简答题

1、基因工程的定义与特征。

定义：

在体外把核酸分子（DNA的分离、合成）插入载体分子，构成遗传物质的新组合（重组DNA），引入原先没有这类分子的受体细胞内，稳定地复制表达繁殖，培育符合人们需要的新品种（品系），生产人类急需的药品、食品、工业品等。

特征：

具跨越天然物种屏障的能力。

强调了确定的DNA片段在新寄主细胞中的扩增。

2、试述基因工程的主要研究内容。

1）、目的基因的分离

2）、DNA的体外重组（载体、受体系统等）

3）、重组DNA分子转移到受体细胞及其筛选

4）、基因在受体细胞内的扩增、表达、检测及其分析。

3、基因工程在食品工业上有何应用发展？

主要是通过基因重组，使各种转基因生物提高生产谷氨酸、调味剂、酒类和油类等有机物的产率；或者改良这些有机物组成成分，提高利用价值。

4、转基因是一把双刃剑，请客观谈谈对转基因及转基因食品安全性的认识。

转基因技术所带来的好处是显而易见的，在人类历史进步和发展中起到了积极作用。

首先，通过该项技术可以提供人们所需要的特性，改良培育新品种；

第二，延长食品保存时间或增加营养成分；

第三，将抗虫防菌基因转入到作物中，使作物本身产生抵抗病虫害侵袭的能力，减少了农药的使用量，有利于环境保护；

第四，转基因技术及食物在医学方面得到广泛研究和应用。

人们对转基因技术的主要担忧在于环境方面。

外源基因的导入可能会造就某种强势生物，产生新物种或超级杂草、损害非目标生物、破坏原有生物种群的动态平衡和生物多样性，也即转基因生物存在潜在的环境安全问题。

转基因作物的大面积种植已有数年，食用转基因食品的人群至少有10亿之多，但至今仍未有转基因食品对生命造成危害的实例；更何况目前每一种基因工程食品在上市前，都要经过国家法律认可，食品卫生部门和环境部门的严格检测。

只有测试合格了，才能投放市场。

因此公众完全可以安全地消费、大胆地食用转基因食品。

5、原核生物和真核生物的基因表达调控有何差别？

1）基因表达调控的三个水平：

转录水平调控、翻译水平调控、蛋白质加工水平的调控

原核基因表达调控主要是在转录水平上的调控。

2）真核生物基因表达的特点：

1．基因组DNA存在的形式与原核生物不同；

2．真核生物中转录和翻译分开进行；

3．基因表达具有细胞特异性或组织特异性；

4．真核基因表达的调控在多个水平上进行：

DNA水平的调控、转录水平调控、转录后水平调控、翻译水平调控、蛋白质加工水平的调控；

6、什么是基因？

根据基因的产物，基因可分为哪三类？

基因是具有生物学功能的、在染色体上占据一定位置一段核苷酸序列，是分子遗传的功能单位。

根据基因的产物，基因可分为三类：

转录并翻译编码蛋白质的基因:

包括结构蛋白基因、编码酶的基因、调节基因

转录但不翻译产物的基因:

包括tRNA、rRNA，

不转录但有功能的DNA区段:

如启动子、操纵基因

7、引起核酸变性的因素主要有哪些？

核酸变性后性质有何变化？

引起核酸变性的因素：

温度、酸、碱、甲醛和尿素等。

DNA变性后，它的一系列性质发生变化，如紫外吸收（260nm）值升高（增色效应）,粘度降低等，如DNA增加25－40%.RNA约增加1.1%。

8、DNA复性及其影响因素。

变性DNA在适当的条件下，两条彼此分开的单链可以重新缔合成为双螺旋结构，这一过程称为复性。

DNA复性的程度、速率与复性过程的条件有关，也与它本身的组成和结构有关：

分子量越大复性越难。

浓度越大，复性越容易。

将热变性的DNA骤然冷却至低温时，DNA不可能复性。

但是将变性的DNA缓慢冷却时，可以复性。

复性的应用：

核酸的杂交，分子扩增

9、DNA凝胶电泳中核酸分子分离的机理。

在碱性环境下，核酸分子带负电荷，在外加电场的作用下，分子在凝胶多孔性刚性滤孔中从负极向正极泳动，其中主要由于分子筛效应和电荷效应达到分离不同大小核酸分子的目的。

10、DNA凝胶电泳中影响电泳迁移率的因素主要有哪些？

1）分子本身的影响

分子的大小：

小则快

带电荷数：

多则快

分子构型：

超螺旋>解螺旋

2）电场：

直流电场

电压高则快

电压太高则结果不准确

常用3~5V/CM

3）支持物介质

种类：

琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶

凝胶浓度:

浓度大，筛孔小，适合小分子电泳；浓度小，筛孔大，适合大分子电泳

4）电泳缓冲液

pH值：

偏碱性，带负电荷

离子浓度：

离子浓度高，电流大，发热快，胶溶解

种类：

TAE、TBE、TPE、TNE

11、PCR的原理和主要反应过程，并分析影响PCR扩增的影响因素。

PCR原理：

变性温度下，DNA双链变性双螺旋解开成单链DNA，在退火温度中人工合成的特异引物根据碱基互补配对原则与单链DNA特异结合，然后在DNA聚合酶的作用下，在延伸温度下不同的脱氧核苷酸按照碱基互补配对原则在引物的引导下合成与模板DNA互补的新链，实现DNA的扩增。

影响PCR扩增的影响因素：

（1）Taq酶：

常用1U/25µL

浓度低，扩增产物不够；

浓度高，非特异性扩增增加；

酶的活性；

（2）dNTP的浓度：

常用100-200µmol/L，不能低于20µmol/L，特异性、保真性；

（3）模板：

主要考虑纯度及使用量，对纯度要求不高，但含有酚、氯仿等杂质则难以成功。

使用量从几个ng到100ng.

（4）引物浓度：

0.1-0.5µmol/L之间，过多则非特异扩增增加，形成引物二聚体；

（5）Mg2+浓度：

常用0.5-2.5mmol/L；

影响：

酶的活性、引物-模板退火、特异性

（6）PCR反应程序设定：

变性温度和时间、引物退火温度Tm与时间、引物延伸温度与时间和循环数

12、PCR引物设计的原则，若给一指定DNA序列并需要通过PCR扩增此序列，如何设计扩增引物？

引物设计原则：

1、G+C含量45-55%；

2、Tm值高于55；

3、引物特异性；

4、引物扩增跨度；

5、是否形成引物二聚体

13、定量PCR的原理？

Ct值的含义。

原理：

通过实时检测PCR每一个循环扩增产物相对应的荧光信号，来实现对起始模板进行定量及定性的分析。

初始模板量X0的对数值与C（T）值之间呈线性关系：

logX0=-log（1+Ex）*Ct+logN

Ct值的含义是：

每个反应管内的荧光信号开始由本底进入指数增长阶段时到达设定的域值时所经历的循环数（如后图所示，图仅供参考）

14、分子杂交的类型主要有哪些？

探针的标记方法与标记类型？

常用的双链DNA的标记方法是哪两种？

探针的标记方法：

切口平移法、随机引物合成法，末端标记法，PCR标记法，体外转录标记法。

探针按核酸分子分：

DNA探针和RNA探针；

按标记物的不同：

放射性标记探针和非放射性标记探针。

标记类型：

按核酸分子的不同：

可分为DNA探针和RNA探针

根据标记物的不同：

可分放射性标记探针和非放射性标记探针；

双链DNA探针标记主要方法：

切口平移法、随机引物合成法；

15、Southern杂交一般过程及影响杂交因素。

Southern杂交操作步骤:

（1）用限制性内切酶酶切DNA,经凝胶电泳分离各酶切片段；

（2）转膜：

将DNA片段转移到硝酸纤维素滤膜或尼龙膜上；

（3）预杂交：

封阻滤膜上非特异性位点；

（4）杂交：

让探针与同源DNA片段特异性结合；

（5）洗脱：

去除非特异性结合的探针；

（6）自显影检查目的DNA所在的位置。

Southern杂交影响因子

1）、目的DNA在总DNA中所占的比例

2）、探针的大小和标记效率

3）、转移到滤膜上的DNA量

4）、探针与靶DNA的同源性

16、基因组文库的构建过程？

如何确定文库的大小？

基因组文库的构建过程：

1）从生物体提取大片断的基因组DNA；

2）用适当的限制性内切酶（常为4碱基识别位点）进行部分酶切或超声波打断基因组DNA；

3）在琼脂凝胶电泳上或蔗糖梯度离心筛选适当长度的DNA片断（根据载体的要求）；

4）载体的酶切、回收；

5）将处理好的基因组DNA片断与载体连接；

6）将重组子导入宿主细胞

7）文库的鉴定、收集、保存；

确定文库大小的方法：

以在构建的基因组文库中任一基因存在的概率来衡量文库的质量或完备性，它与基因文库最低所含克隆数N（即文库大小）之间的关系可用下式表示：

N=ln（1–P）/ln（1–f）

其中：

N：

文库所需的总克隆数；

P：

任一基因被克隆（或存在于基因文库中）的概率；

f：

克隆片段的平均大小/生物基因组的大小。

17、基因文库的类型包括哪两种？

各有什么特点？

18、一般质粒DNA的构型有哪几种？

在琼脂糖凝胶电泳中的有何特点？

超螺旋质粒DNA、开环质粒DNA、线状质粒DNA

在琼脂糖凝胶电泳的特点是：

电泳的泳动速度由大到小分别是：

超螺旋质粒DNA>线状质粒DNA>开环质粒DNA

19、碱裂解法提取质粒DNA的原理，分析影响试验结果的各种可能因素。

碱裂解法原理：

在碱性条件下，双连DNA氢键断裂，结构破坏变性，环状超螺旋质粒不充分变性。

在中性条件下变性质粒恢复原来构型，而线性大分子细菌DNA不能复性呈不溶物而经离心除去。

提取失败：

1）洗去双链时，将质粒DNA洗去；

2）破壁失败，质粒没析出；

3）加剂问题

电泳失败：

1）电压太高2）没加染色剂

3）胶穿孔4）电泳时间过长

20、电泳缓冲液使用一定时间后出现DNA在凝胶中跑不动现象的原因，有何解决办法？

原因：

电泳缓冲液的离子富集作用；

解决方法：

1.更换成新配置的电泳缓冲液；

2.把电泳槽中的缓冲液倒出混匀后再重新使用

21、电泳的指示剂和染色剂有何区别，各自的作用是什么？

指示剂一定要在电泳前加入，指示剂一般与蔗糖、甘油或聚蔗糖400组成载样缓冲液；（一般为：

溴酚兰，二甲苯青）

作用：

①预知电泳的速率及方向；②使样品呈现颜色，便于加样；

③一些高浓度蔗糖或其它物质增加DNA的密度，可以防止DNA的扩散

染色剂既可以在电泳前加入样液，又可以电泳后再对凝胶染色；（溴化已锭EB、硝酸银、Goldview染料）

作用：

呈现出核酸电泳后的带型。

22、限制性核酸内切酶的类型，基因工程常用的是哪种限制性核酸内切酶？

23、什么是星活性，产生星活性的因素可能有哪些？

在非最适合的条件下酶的识别特异性降低，产生非特异性带，这种活性称星活性。

产生Star活性的因素：

高浓度甘油，碱性pH，存在Mn2+，低离子强度，低盐浓度，低pH

24、结合已做的实验，分析影响酶切的因素。

1）DNA的纯度：

DNA中的杂质如蛋白质、酚、氯仿、乙醇、SDS、EDTA等都会影响酶的活性。

2）DNA的甲基化程度：

dam甲基化酶（修饰GATC中的A）；dcm甲基化酶（修饰CCA/TGG的C）。

3）温度：

不同的限制性内切酶的最适反应温度不同。

大多数是37oC，少数要求40-65oC。

4）缓冲液（Buffer）：

是影响限制酶活性的重要因素。

MgCl2、NaCl/KCl：

提供Mg2+和离子强度；

Tris-HCl：

维持pH；

二硫苏糖醇（DTT）：

保持酶稳定性；

牛血清白蛋白BSA等：

有助于酶的稳定；

β－巯基乙醇：

保持酶的稳定性，防止酶失活

25、限制性核酸内切酶命名规则及各字母代表的含义。

命名规则：

寄主菌属名的第1个字母＋种名的前两个字母＋菌株或菌型代号（大写）＋空白＋发现序列（罗马数字）

例子：

EcoRⅠ（E：

属名；co：

种名；R：

株；Ⅰ：

发现次序）

26、简单叙述同尾酶和同裂酶的差别。

同尾酶：

来源不同，识别的序列不同，但能切出相同的粘性末端，连接后不能被相关的酶同时切割。

同裂酶：

识别序列相同，切割位点有些相同，有些不同。

分完全同裂酶和不完全同裂酶