作业指导书合本1.docx

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作业指导书合本1

作业指导书

文件编号：

JSFY-JYK-ZY-001

发布日期

2011年11月30日

B版

修订号O

批准日期

2011年11月30日

标题：

丙氨酸氨基转移酶测定操作规程

第1页

共2页

编写人：

崔福强

审核人：

鲍红梅

批准人：

崔福强

丙氨酸氨基转移酶测定操作规程

[临床意义]

ALT是氨基酸代谢中所涉及的一个酶，分布于很多组织。

在肝脏组织与肾脏组织中含量最高。

组织破坏会使细胞内的酶进入血液循环。

很多种疾病，比如肝炎、单核细胞增多症和肝硬化，都会发现血清ALT升高。

但有些疾病例如心肌梗死，ALT不会特别高。

因此ALT被认为是肝脏物异性酶。

[实验原理]

本法为IFCC推荐的动力学测定方法，反应式如下：

L－丙氨酸＋ａ－酮戊二酸ALT丙酮酸＋L-谷氨酸

丙酮酸＋NADH＋H+LDHL-乳酸＋NAD+

[标本的收集与处理]

患者准备：

无特殊要求。

类型：

无溶血的血清或肝素化的血浆。

轻微的溶血不会明显的影响结果，可是，红细胞内的ALT是血清中的3～5倍。

收取标本后尽快分离血清。

EDTA血清也可以用。

应用EDTA血浆为标本结果乘以1.02将与血清标本的结果一致。

标本的稳定性：

血清中的ALT在0～4°C稳定3天。

当存放于－20°C稳定期长于3天。

EDTA血浆中的ALT放在室温（15～30°C）或冰箱（2～8°C）可以稳定7天。

[仪器与材料]

北京松上A6半自动生化分析仪

山东潍坊三维丙氨酸氨基转移酶（ALT）

参与反应成分的最终浓度：

1.试剂R1

TRIS缓冲液（PH7.5）100mmol/L

L-丙氨酸500mmol/L

乳酸脱氢酶（LDH）>1200U/L

2.试剂R2

ａ－酮戊二酸15mmol/L

NADH0.18mmol/L

作业指导书

文件编号：

JXFY-JYK-ZY-001

发布日期

2011年11月30日

A版

修订号0

批准日期

2011年11月30日

标题：

丙氨酸氨基转移酶测定

第2页

共2页

编写人：

崔福强

审核人：

鲍红梅

批准人：

崔福强

[注意]

1.可根据仪器要求按比例改变标本、试剂用量。

2.标本中ALT的吸光度变化值△A/分>0.30时，将标本用生理盐水1：

9稀释后再测定，结果乘以10。

3.若试剂空白吸光度小于0.800说明试剂失效，请勿使用。

4.生化仪光径不为1cm时，F＝4180/光径cm.

5.本试剂中含有叠氮钠，请勿吸入并避免与皮肤、粘膜接触。

6.实验废液因含有血清，须先进行消毒处理，再用大量水冲洗排放。

[试剂准备]

将4份R1与1份R2混合，2－8°C密封避光保存可稳定4周。

工作液预先保温至37°C

[操作程序]

1.打开仪器的电源开关（仪器的背面）

2.面板上的屏幕上面板上的屏幕上出现选择测试项目类别，选肝功类进入。

3.进入选择菜单，选ALT项目，然后屏显试验所有参数。

4.等温度达到37°C时，进入，然后吸入空白，然后样本测定。

[计算]

无需计算，结果自动以U/L显示。

[报告结果]

参考正常值男性：

≤42U/L女性≤32U/L

[注意事项]

操作过程的限制性：

ALT的线性范围是0－1200U/L。

样品浓度超过线性范围应稀释重做。

可以手工加一份血清4份生理盐水，轻轻地混匀，当常规标本，结果乘以5。

作业指导书

文件编号：

JSFY-JYK-ZY-002

发布日期

2011年11月30日

B版

修订号0

批准日期

2011年11月30日

标题：

总胆红素测定操作规程

第1页

共2页

编写人：

崔福强

审核人：

鲍红梅

批准人：

崔福强

总胆红素测定操作规程

[临床意义]

总胆红素增高临床上表现有黄疸，超过20.1umol/L时有临床意义，增高到34.2umol/L表现出黄疸体征。

红细胞大量破坏、胆道阻塞、肝脏疾病，均可导致血中胆红素增高而引起黄疸。

[实验原理]

对氨基苯磺酸＋HCL+NaNO2氯化重氮苯横酸＋NaCL

总胆红素＋氯化重氮苯横酸O偶氮胆红素

[标本的收集与处理]

患者准备：

空腹

类型：

新鲜不溶血血清或血浆均可，样本收集后应尽快测定，注意避光。

[仪器与材料]

北京松上A6半自动生化分析仪

潍坊三维总胆红素定量检测试剂

试剂盒的组成：

1.试剂R

盐酸0.7mol/L对氨基苯磺酸20umol/L

柠檬酸0.7mol/L咖啡因0.18mol/L

2.NaNO2溶液20mmol/L

[试剂准备]

根据用量将试剂R与NaNO2溶液按50：

1的比例混合均匀，即为工作液，置2～8°C避光存放，可稳定1个月。

[基本参数]

温度37°C方式终点法波长570nm

光径1cm试剂量600UL标本量40UL

反应时间5分钟系数208

[操作程序]

1.打开仪器的电源开关（仪器的背面）

2.面板上的屏幕上面板上的屏幕上出现选择测试项目类别，选肝功类进入。

。

3.　进入选择菜单，选DBIL项目，然后屏显试验所有参数。

作业指导书

文件编号文件编号：

JXFY-JYK-ZY-002

发布日期

2011年11月30日

B版

修订号0

批准日期

2011年11月30日

标题：

总胆红素检测标准操作规程

第2页

共2页

编写人：

崔福强

审核人：

鲍红梅

批准人：

崔福强

4.等温度达到37°C时，进入，然后吸入空白，然后样本测定。

[计算]

　无需计算，结果自动以umol/L显示。

[报告结果]

参考正常值5.0－20.1umol/L

[注意事项]

1.试剂量和标本量可因仪器要求按比例增减。

2.本法线性范围可达513.0umol/L超过该范围的标本用生理盐水稀释1倍再测，结果乘以2。

3.血中胆红素对光敏感，保存及实验过程中尽量避光。

4.实验室废液因有血清，须先进行消毒处理，再用大量水冲洗排放。

作业指导书

文件编号：

JSFY-JYK-ZY-003

发布日期

2011年11月30日

B版

修订号0

批准日期

2011年11月30日

标题：

直接胆红素测定标准操作规程

第1页

共2页

编写人：

崔福强

审核人：

鲍红梅

批准人：

崔福强

直接胆红素测定标准操作规程

[临床意义]

直接胆红素经过肝细胞加工后，其实质是由胆红素n分子与1到2个葡萄醛酸分子单独酯化的结构，能易溶于水，可通过肾脏排泄，能直接与重氮试剂反应。

在没有加速剂存在时，血清与重氮试剂反应所生成的红色偶氮胆红素为直接胆红素。

直接胆红素增高临床上多见于肝细胞受损，对肝内外胆道阻塞、肝炎、急性黄疸、肝萎缩等有重要的临床意义。

[实验原理]

对氨基苯磺酸＋HCL+NaNO2氯化重氮苯磺酸＋NaCL

直接胆红素＋氯化重氮苯磺酸偶氮胆红素

[标本收集与处理]

患者准备：

空腹

类型：

新鲜不溶血清或血浆均可。

标本的稳定性：

胆红素对光的敏感度与温度有关，血标本应避光置冰箱保存，标本保存冰箱可稳定3天，－70°C暗处保存，稳定3个月。

[仪器与材料]

北京松上A6半自动生化分析仪

潍坊三维直接胆红素测定试剂

1.试剂R

盐酸0.3mol/L对氨基苯磺酸30umol/L

2.NaNO2溶液10mmol/L

[试剂准备]

根据用量将试剂R与NaNO2溶液按50：

1的比例混合均匀，即为工作液，置2～8°C避光存放，可稳定1个月。

[基本参数]

温度37°C方式终点法波长570nm

光径1cm试剂量600UL标本量40UL

反应时间5分钟系数170

[操作程序]

1.打开仪器的电源开关（仪器的背面）

2.面板上的屏幕上面板上的屏幕上出现选择测试项目类别，选肝功类进入。

3.进入选择菜单，选TBIL项目，然后屏显试验所有参数。

4.等温度达到37°C时，进入，然后吸入空白，然后样本测定。

作业指导书

文件编号：

JXFY-JYK-ZY-003

发布日期

2011年11月30日

B版

修订号0

批准日期

2011年11月30日

标题：

直接胆红素测定标准操作规程

第1页

共2页

编写人：

崔福强

审核人：

鲍红梅

批准人：

崔福强

[计算]

　无需计算，结果自动以umol/L显示。

[报告结果]

参考正常值0.3－6.8umol/L

[注意事项]

5.试剂量和标本量可因仪器要求按比例增减。

6.本法线性范围可达256.5umol/L超过该范围的标本用生理盐水稀释1倍再测，结果乘以2。

7.血中胆红素对光敏感，保存及实验过程中尽量避光。

8.实验室废液因有血清，须先进行消毒处理，再用大量水冲洗排放。

作业指导书

文件编号：

JSFY-JYK-ZY-004

发布日期

2011年11月30日

B版

修订号0

批准日期

2011年11月30日

标题：

总蛋白测定操作规程

第1页

共2页

编写人：

崔福强

审核人：

鲍红梅

批准人：

崔福强

总蛋白测定操作规程

[临床意义]

蛋白质为不可渗透的大胶质分子，并带有许多电荷，分为清蛋白和球蛋白二类，对于维持渗透压入保持水份平衡极为重要，并可维持血液的酸碱度。

血清总蛋白增加常见于严重腹泻、呕吐、肾上腺皮质功能减退等，血液中水份增加、营养不良、肝脏疾病及肾病综合症可导致总蛋白水平降低。

[实验原理]

在碱性溶液中，血清蛋白与二价铜离子反应生成有色复合物（双缩脲反应），颜色深浅与总蛋白的浓度成比例关系。

[标本收集与处理]

应为血清，2－8°C保存可稳定1周。

[仪器与材料]

北京松上A6半自动生化分析仪

潍坊三维总蛋白测定试剂

试剂盒组成

碘化钾30mmol/L酒石酸钾钠100mmol/L

硫酸铜30mmol/L氢氧化钠0.6mol/L

[试剂准备]

无需配制，开瓶即用。

[基本参数]

方式终点法标本量10ul温度37°C

试剂量1.0ml波长546nm反应时间5分钟

[操作程序]

1.打开仪器的电源开关（仪器的背面）

2.面板上的屏幕上出现选择测试项目类别，选肝功类进入。

3.选择总蛋白，进入测试。

等温度达到37°C时，然后吸入空白，然后样本测定。

[计算]

无需计算，结果自动以umol/L显示。

[报告结果]

参考正常值60.0-83.0g/L

[注意事项]

1.标本中总蛋白浓度大于100g/L应将标本用生理盐水稀释再测，结果乘以稀释倍数。

2.实验室废液因有血清，须先进行消毒处理，再用大量水冲洗排放。

作业指导书

文件编号：

JSFY-JYK-ZY-005

发布日期

2011年11月30日

B版

修订号0

批准日期

2011年11月30日

标题：

白蛋白测定操作规程

第1页

共2页

编写人：

崔福强

审核人：

鲍红梅

批准人：

崔福强

白蛋白测定操作规程

（溴甲酚绿法）

[临床意义]

白蛋白是血清中清蛋白，是主要的蛋白质成份，是一个通用的蛋白营养指标，白蛋白降低，常伴随着总蛋白降低，常见于营养不良，慢性胃肠道疾病等，糖尿病、甲状腺功能亢进、高烧、外伤等可造成蛋白消耗过多，高白蛋白血症常见于脱水或血液浓缩。

[测定原理]

在PH4.2酸性条件下，白蛋白和溴甲酚绿结合，生成绿色复合物，可用比色法测定白蛋白的含量。

[标本收集与处理]

血清，血清中白蛋白在2－8°C保存可稳定1周。

[仪器与材料]

北京松上A6半自动生化分析仪

潍坊三维白蛋白测定试剂

[试剂准备]

液体单一试剂，无需配制，开瓶即用。

[基本参数]

温度37°C方式终点法波长570nm

试剂量1500UL标本量10UL反应时间3分钟

[操作程序]

[操作程序]

1.打开仪器的电源开关（仪器的背面）

2.面板上的屏幕上面板上的屏幕上出现选择测试项目类别，选肝功类进入。

3.进入选择菜单，选ALT项目，然后屏显试验所有参数。

4.等温度达到37°C时，进入，然后吸入空白，然后样本测定。

作业指导书

文件编号：

JXFY-JYK-ZY-005

发布日期

2011年11月30日

B版

修订号0

批准日期

2011年11月30日

标题：

白蛋白测定操作规

第2页

共2页

编写人：

崔福强

审核人：

鲍红梅

批准人：

崔福强

[计算]

无需计算，结果自动以umol/L显示。

[报告结果]

参考正常值0.3－6.8umol/L

[注意事项]

9.试剂量和标本量可因仪器要求按比例增减。

10.本法线性范围可达256.5umol/L超过该范围的标本用生理盐水稀释1倍再测，结果乘以2。

11.血中胆红素对光敏感，保存及实验过程中尽量避光。

12.实验室废液因有血清，须先进行消毒处理，再用大量水冲洗排放。

作业指导书

文件编号：

JSFY-JYK-ZY-006

发布日期

2011年11月30日

B版

修订号0

批准日期

2011年11月30日

标题：

HBsAg测定操作规程

第1页

共1页

编写人：

崔福强

审核人：

鲍红梅

批准人：

崔福强

HBsAg测定操作规程

（酶联免疫夹心法）

[原理]

在微孔板条上预包被纯化乙肝表面抗体（抗－HBs），配以酶标记抗体（抗－HBs－HRP）及TMB等其它试剂，采用夹心法原理检测人血或血浆中的乙型肝炎病毒表面抗原HRP为辣根过氧化物酶TMB为四甲基联苯胺

[标本收集与处理]

血清或血浆

[试剂]

潍坊三维乙肝病毒表面抗原诊断试剂盒

[操作步骤]

1.配制洗涤液：

用蒸馏水或去离子水将浓缩洗涤液1：

25稀释至500ml备用。

2.加样：

设空白对照1孔，阴、阳对照各2孔。

分别加阴、阳性对照各50ul（1滴）和50ul待测样本于相应孔内。

3.加酶：

除空白对照孔外，每孔加50ul（1滴）酶标记物，轻轻振荡混匀，用封板膜将板孔封好。

4.温育：

置37℃水浴30分钟。

5.洗涤：

手工：

扣去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置20秒，甩干，重复4次后拍干。

洗板机：

选择4次洗涤程序，洗板后拍干。

6.显色：

每孔加底物液A、B各50ul（1滴），轻轻振荡混匀后，置37℃避光显色15分钟。

7.测定：

每孔加终止液50ul（1滴），轻拍混匀，用酶标仪单仪波长450nm或双波长450nm/630nm测定各孔OD值（在30分钟内完成测定）；用单波长测定时需空白对照孔凋零。

[结果判定]

1.临界值（C.O.）=2.1×阴性对照OD均值（阴性对照OD值小于0.05时，以0.05计算）

2.结果判定：

样本OD值S/C.O.≧1者判为HBsAg阳性；反之判为HBsAg阴性。

[注意事项]

1.试剂及待测样本用前先放室温平衡30分钟左右；未用完的板条应及时封存于加有干燥剂的自封袋中。

2.含血球的标本易出现假阳性，应尽量避免使用。

3.滴加试剂前，应将滴瓶翻转数次混匀，滴加时瓶身应保持垂直并匀速加样。

4.洗涤要充分，各孔均须加满，防止孔口内游离酶不能洗净。

若浓缩洗涤液出现结晶，可于37℃放至溶解。

5.所有样本和废弃物都应按传染源处理。

6.不同批号的试剂不可混用。

[贮存条件和有效期]

1.贮存条件：

2－8℃2.有效期：

12个月

作业指导书

文件编号：

JSFY-JYK-ZY-007

发布日期

2011年11月30日

B版

修订号0

批准日期

2011年11月30日

标题：

抗－HBs测定操作规程

第1页

共2页

编写人：

崔福强

审核人：

鲍红梅

批准人：

崔福强

抗－HBs测定操作规程

（酶联免疫夹心法）

[原理]

在微孔板条上预包被纯化乙肝表面抗原（HBsAg），配以酶标记抗体（HBsAg－HRP）及TMB

等其它试剂，采用夹心法原理检测人血清或血浆中的乙型肝炎病毒表面抗体（抗－HBs）。

HRP为辣根过氧化物酶TMB为四甲基联苯胺

[标本收集与处理]

血清或血浆

[试剂]

潍坊三维乙肝病毒表面抗体诊断试剂盒

[操作步骤]

8.配制洗涤液：

用蒸馏水或去离子水将浓缩洗涤液1：

25稀释至500ml备用。

9.加样：

设空白对照1孔，阴、阳对照各2孔。

分别加阴、阳性对照各50ul（1滴）和50ul待测样本于相应孔内。

10.加酶：

除空白对照孔外，每孔加50ul（1滴）酶标记物，轻轻振荡混匀，用封板膜将板孔封好。

11.温育：

置37℃水浴30分钟。

12.洗涤：

手工：

扣去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置20秒，甩干，重复4次后拍干。

洗板机：

选择4次洗涤程序，洗板后拍干。

13.显色：

每孔加底物液A、B各50ul（1滴），轻轻振荡混匀后，置37℃避光显色15分钟。

14.测定：

每孔加终止液50ul（1滴），轻拍混匀，用酶标仪单仪波长450nm或双波长450nm/630nm测定各孔OD值（在30分钟内完成测定）；用单波长测定时需空白对照孔凋零。

[结果判定]

3.临界值（C.O.）=2.1×阴性对照OD均值（阴性对照OD值小于0.05时，以0.05计算）

4.结果判定：

样本OD值S/C.O.≧1者判为抗－HBs阳性；反之判为抗－HBs阴性。

[注意事项]

7.试剂及待测样本用前先放室温平衡30分钟左右；未用完的板条应及时封存于加有干燥剂的自封袋中。

8.含血球的标本易出现假阳性，应尽量避免使用。

9.滴加试剂前，应将滴瓶翻转数次混匀，滴加时瓶身应保持垂直并匀速加样。

10.洗涤要充分，各孔均须加满，防止孔口内游离酶不能洗净。

若浓缩洗涤液出现结晶，可于37℃放至溶解。

11.所有样本和废弃物都应按传染源处理。

12.不同批号的试剂不可混用。

[贮存条件和有效期]

1.贮存条件：

2－8℃2.有效期：

12个月

作业指导书

文件编号：

JSFY-JYK-ZY-008

发布日期

2011年11月30日

B版

修订号0

批准日期

2011年11月30日

标题：

HBeAg测定操作规程

第1页

第1页

编写人：

崔福强

审核人：

鲍红梅

批准人：

崔福强

HBeAg测定操作规程

（酶联免疫夹心法）

[原理]

在微孔板条上预包被纯化乙肝e抗体（抗－HBe），配以酶标记抗体（抗－HBe－HRP）及TMB等其它试剂，采用夹心法原理检测人血清或血浆中的乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）

HRP为辣根过氧化物酶TMB为四甲基联苯胺

[标本收集与处理]

血清或血浆

[试剂]

潍坊三维乙肝病毒e抗原诊断试剂盒

[操作步骤]

15.配制洗涤液：

用蒸馏水或去离子水将浓缩洗涤液1：

25稀释至500ml备用。

16.加样：

设空白对照1孔，阴、阳对照各2孔。

分别加阴、阳性对照各50ul（1滴）和50ul待测样本于相应孔内。

17.加酶：

除空白对照孔外，每孔加50ul（1滴）酶标记物，轻轻振荡混匀，用封板膜将板孔封好。

18.温育：

置37℃水浴30分钟。

19.洗涤：

手工：

扣去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置20秒，甩干，重复4次后拍干。

洗板机：

选择4次洗涤程序，洗板后拍干。

20.显色：

每孔加底物液A、B各50ul（1滴），轻轻振荡混匀后，置37℃避光显色15分钟。

21.测定：

每孔加终止液50ul（1滴），轻拍混匀，用酶标仪单仪波长450nm或双波长450nm/630nm测定各孔OD值（在30分钟内完成测定）；用单波长测定时需空白对照孔凋零。

[结果判定]

5.临界值（C.O.）=2.1×阴性对照OD均值（阴性对照OD值小于0.05时，以0.05计算）

6.结果判定：

样本OD值S/C.O.≧1者判为HBeAg阳性；反之判为HBeAg阴性。

[注意事项]

13.试剂及待测样本用前先放室温平衡30分钟左右；未用完的板条应及时封存于加有干燥剂的自封袋中。

14.含血球的标本易出现假阳性，应尽量避免使用。

15.滴加试剂前，应将滴瓶翻转数次混匀，滴加时瓶身应保持垂直并匀速加样。

16.洗涤要充分，各孔均须加满，防止孔口内游离酶不能洗净。

若浓缩洗涤液出现结晶，可于37℃放至溶解。

17.所有样本和废弃物都应按传染源处理。

18.不同批号的试剂不可混用。

[贮存条件和有效期]

1.贮存条件：

2－8℃2.有效期：

12个月

作业指导书

文件编号：

JSFY-JYK-ZY-009

发布日期

2011年11月30日

B版

修订号0

批准日期

2011年11月30日

标题：

抗－HBe测定操作规程

第1页

第1页

编写人：

崔福强

审核人：

鲍红梅

批准人：

崔福强

抗－HBe测定操作规程

（酶联免疫中和抑制法）

[原理]

在微孔板条上预包被纯化乙肝e抗体，配以中和抗原和酶标记抗体及TMB等其它试剂，采用中和抑制法原理检测人血清或血浆中的乙型肝炎病毒e抗体（抗－HBe）。

HRP为辣根过氧化物酶TMB为四甲基联苯胺

[标本收集与处理]

血清或血浆

[试剂]

潍坊三维乙肝病毒e抗本诊断试剂盒

[操作步骤]

22.配制洗涤液：

用蒸馏水或去离子水将浓缩洗涤液1：

25稀释至500ml备用。

23.加样：

设空白对照1孔，阴、阳对照各2孔。

分别加阴、阳性对照各50ul（1滴）和50ul待测样本于相应孔内。

24.加酶标记物及中和：

除空白对照孔外，每孔加50ul（1滴）酶标记物和50ul（1滴）中和抗原，轻轻振荡混匀，用封板膜将板孔封好。

25.温育：

置37℃水浴30分钟。

26.洗涤：

手工：

扣去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置20秒，甩干，重复4次后拍干。

洗板机：

选择4次洗涤程序，洗板后拍干。

27.显色：

每孔加底物液A、B各50ul（1滴），轻轻振荡混匀后，置37℃避光显色15分钟。

28.测定：

每孔加终止液50ul（1滴），轻拍混匀，用酶标仪单仪波长450nm或双波长450nm/630nm测定各孔OD值（在30分钟内完成测定）；用单波长测定时需空白对照孔凋零。

[结果判定]

7.临界值（C.O.）=0.3×阴性对照OD均值。

对非血清标本：

临界值（C.O.）=0.5×阴性对照OD均值（阴性对照OD值大于1.5时，以1.5计算）

8.结果判定：

样本OD值S/C.O.≧1者判为抗－Hbe阴性；反之判为抗－HBe阳性。

[注意事项]

19.试剂及待测样本用前先放室温平衡30分钟左右；未用完的板条应及时封存于加有干燥剂的自封袋中。

20.含血球的标本易出现假阳性，应尽量避免使用。

21.滴加试剂前，应将滴瓶翻转数次混匀，滴加时瓶身应保持垂直并匀速加样。

22.洗涤要充分，各孔均须加满，防止孔口内游离酶不能洗净。

23.所有样本和废弃物都应按传染源处理。

24.不同批号的试剂不可混用。

[贮存条件和有效期]

1.贮存条件：

2－8℃2.有效期：

12个月

作业指