伤寒Microsoft Word 文档 3解析.docx
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伤寒MicrosoftWord文档3解析
四、伤寒病理模型的建立方法
(一)吴茱萸汤对肝寒犯胃家鸽呕吐模型的防治作用的实验观察
1.名称:
吴茱萸汤对肝寒犯胃家鸽呕吐模型的防治作用
2.目的:
研究吴茱萸汤对肝寒犯胃家鸽呕吐模型的防治作用
3.实验材料:
5ml注射器,8号导尿管,手表,压舌板;吴茱萸汤水煎液1g/ml(吴茱萸汤组成:
吴茱萸10g,党参10g,生姜20g,大枣15g。
取吴茱萸汤全方加水500ml浓煎取汁55ml。
)吴茱萸水煎液0.6g/ml(吴茱萸10g加水250ml,浓煎取汁16.7ml);胆矾水溶液20mg/ml(胆矾由广州市药材公司提供)。
4.实验对象:
体重300至400克健康家鸽(雌雄不限)。
5.实验环境:
温度20~25℃,湿度60~80%。
6.操作步骤
①取健康家鸽30只,随机分为甲乙丙三组:
吴茱萸汤全方组(甲组)、吴茱萸单味组(乙组)、冷开水对照组(丙组),每组各10只,均贴好标签,禁食12小时。
以胆矾水溶液给家鸽灌胃,因为胆矾的主要成分为硫酸铜,其味酸辛性寒,易于寒伤脾胃,故可造成肝寒犯胃之呕吐模型。
而吴茱萸汤温中散寒降逆止呕,故可以本实验观察其温胃止呕作用。
②两人合作,一人取做位,左手握住家鸽,右手食指与大拇指环绕其后颈,固定头部,另一人将压舌板横放于鸽口中,以8号导尿管由舌上插入食道约15cm。
然后以注射器注入药液(甲组注入吴茱萸汤水煎液,乙组注入吴茱萸水煎液,丙组注入冷开水。
)一次,体积均按10ml/kg。
③给药后一小时,每鸽灌服胆矾200mg/kg,完毕立即计下时间,记录各鸽出现第一次呕吐的时间(呕吐潜伏期)和给胆矾水溶液后1小时内呕吐的次数(呕吐频率)。
观察吴茱萸汤和吴茱萸对家鸽灌服胆矾水溶液所致呕吐的影响,所得资料进行统计学检验。
7.实验结果
吴茱萸汤对肝寒犯胃家鸽呕吐模型的影响(±s)
药物 例数 呕吐潜伏期 干呕总次数 呕吐次数 呕吐量 呕吐物性状 其它
(分) (mL)
甲组
乙组
丙组
注:
乙、甲比较,p ;丙、乙比较,p 。
8、模型评价
出现呕吐物或干呕>5次/分钟即为模型成功。
9、注意事项:
为避免误入气管,可将导尿管外口浸入水中,不见气泡表示插入胃中。
(二)少阴病阳虚水停证家兔模型的建立
1、名称:
少阴病阳虚水停证家兔模型
2、目的:
建立类似于伤寒论少阴病阳虚水停证的动物模型。
3、实验材料:
①寒凉药灌胃液的制备:
石膏和知母按2:
1.5比例配伍,常规水煎两次,浓缩成100%水煎液,于4℃保存。
②升主动脉缩窄环:
环由两层组成,外层用硬质铝片,宽约3mm,厚约1.2mm,长度1.8-2.4cm,以0.1cm递增预备各种长度不等的铝片备用。
操作时长度以每个动物升主动脉周径的2/3为宜。
内层为能吸水膨胀的两片干海带。
两层周围包绕一层塑料膜密封。
用之前,在塑料膜上用针头刺多个针眼以便环内层材料逐渐吸水膨胀,而达到升主动脉逐渐缩窄与压迫的目的。
③手术器械。
④RM-6000四道生理记录仪(日本产)。
⑤7071型半导体点温度计(上海产)。
⑥动物人工呼吸机(江西)。
4、实验对象:
体重2.0-3.0kg新西兰家兔,雌雄兼用,
5、实验环境:
温度20~25℃,湿度60~80%。
6、操作步骤
①在实验时每天灌服寒凉药1次,剂量为7ml/kg(7g/kg),相当于按人体表面积计算后剂量的7倍左右,连续7天。
②于第8天将兔固定于手术台上,用脱毛剂脱去胸部毛发,酒精、碘酒常规消毒3次,2%普鲁卡因局部麻醉,在无菌条件下,沿胸骨左缘切开皮肤、肌肉,剪断第2、3肋骨,用开胸器撑开暴露心脏,注意避免损伤胸膜及剪破心脏。
再夹住心耳部,稍提起,暴露冠状动脉,在冠状动脉起始部下0.5cm处,用丝线结扎左冠状动脉前降支,为防侧枝循环,再在结扎处的下方约1cm处再行结扎。
然后用血管分离钳分离主动脉,用自制缩窄环套住升主动脉,使两端相接,环的长度较升主动脉周径的2/3长1-2mm(从而缩窄升主动脉1/3,几天后,因海带吸水发泡可使升主动脉口径缩小至原来的1/3左右)。
关闭心包膜和胸腔,缝合切口。
整个手术期间均维持兔的自主呼吸。
③以青霉素40万单位肌注,每天2次,连续3天。
如兔不进食,则以5%葡萄糖5-10ml静脉注射,每天2-3次。
7-10天后观察。
④在造模后不同时间以半导体温度计测定腹部及肢体(左后足、右前足)温度。
可见在手术后第七天肢体温度降低。
动物出现倦卧、活动减少、毛发枯燥、口及耳部发绀、足部水肿。
⑤手术后第七天,再以3%戊巴比妥钠麻醉,按心电图测定法测动物肢体导联心电图。
切开颈部皮肤,分离颈总动脉,从左颈总动脉插入充满肝素的导管至左心室,导管的另一端与压力传感器相连,固定导管。
待动物稳定后测定左室内压(LVP)、左室内压最大上升速率(LVdp/dtmax)及心率(HR)。
结果发现LVP升高,dp/dtmax升高,而心率无明显变化。
7、模型评价
本模型采用先灌服寒凉药制造阳虚模型,在此基础上采用缩窄升主动脉和模拟心肌缺血的方法,引起动物充血性心力衰竭,动物在症状体征、体温及血流动力学检查均与阳虚合并心衰改变相似。
且以真武汤进行反证性治疗,表明真武汤对该模型有效。
可见,该模型类似于伤寒论少阴病阳虚水停证。
8、注意事项:
手术时细心操作,避免损伤胸膜、大血管、心肌。
严格按无菌要求操作。
术后注意加强抗菌治疗。
(三)少阴寒化证大鼠模型的建立
1、名称:
少阴寒化证大鼠模型
2、目的:
建立少阴寒化证大鼠模型,为六经病的现代化研究提供载体。
3、实验材料:
①β-溶血性链球菌(北京中国药品生物制品检定所提供)。
②寒凉中药复方煎剂:
知母、石膏、黄柏、龙胆草(比例为1.5:
2:
1:
1),常规水煎两次,浓缩成200%(生药含量为2g/ml)药液备用。
③代谢笼。
④LX-5动物脉搏换能器(湖南医大生理研究室产),LMS-2B型二道生理记录仪(成都科学仪器厂产)。
⑤手术器械,大鼠实验台。
4、实验对象:
处于生长期的wistar大鼠,雌雄各半,体重180~230克。
5、实验环境:
温度20~25℃,湿度60~80%。
6、操作步骤
所有大鼠均单个饲养在代谢笼中,自由摄食和摄水,实验室环境温度为10±2℃;先以200%的寒凉中药复方煎剂灌胃,剂量为6g/只,每天一次,连续14天。
第15天由尾静脉注射β-溶血性链球菌,每次1ml(0.1×1010/ml),每七天注射1次,共2~4次。
造模后进行以下观察:
①主要症状:
造模后大鼠毛发蓬松,毛色枯燥无光泽,易脱落,匍匐行走,懒动,嗜睡,大便溏不成颗粒状,舌质色暗。
②扭体次数减少。
③尿量增加。
④饮水量减少。
⑤以动物脉搏换能器测定大鼠尾动脉振动幅度,可见其搏动幅度减弱。
⑥体表温度下降,体表温度与舌下温度的温差增大。
⑦舌体微循环障碍。
⑧血浆皮质醇浓度降低。
⑨体重增长减慢。
7、模型评价
本模型以寒凉中药造成阳虚,在此基础上以β-溶血性链球菌造成心、肾损伤,造模后动物表现阳虚症状、体征,组织学观察可见到心肾损害,以四逆汤反证对该模型有明显的改善作用,表明该模型制作成功,类似于人类少阴病寒化证的变化。
8、注意事项:
①实验环境温度要控制严格;②动物应单个饲养,以便于观察和测定。
(四)少阴病心肾阳虚证家兔模型的建立
1、名称:
家兔少阴病心肾阳虚证模型
2、目的:
建立家兔少阴病心肾阳虚证模型。
3、实验材料:
①寒凉药液:
知母石膏按1.5:
2比例配伍,常规水煎,浓缩成100%(1g生药/ml)药液。
②麻黄汤药液:
麻黄、桂枝、炙甘草、杏仁按3:
2:
1:
3的比例配伍,常规水煎,浓缩成100%水煎液。
③2,4-二硝基苯酚。
④胆固醇。
⑤蛋黄粉。
⑥猪油。
⑦皮质醇、6-酮-前列腺素F!
a、内皮素(ET)、肿瘤坏死因子(TNF)、血脂(TC、HDL、TG)等测定试剂。
4、实验对象:
2.5kg左右的新西兰雄性家兔(雌雄不限)。
5、实验环境:
温度20~25℃,湿度60~80%。
6、操作步骤
家兔在80%基础饲料中加入15%蛋黄粉,0.5%胆固醇、5%猪油,以此饲料连续喂养3周。
3周后饲料中不加胆固醇,只喂含蛋黄粉和猪油的饲料,继续喂养3周。
喂养期间自由摄食和饮水。
在饲喂同时,于第5周起灌胃寒凉药液7ml/kg(相当于人等效剂量的7倍左右),连续1周。
第7周起,实验兔皮下注射2,4-二硝基苯酚30mg/kg。
1.5小时后灌服麻黄汤以发汗,每天一次,连续一周,于实验第7周后检测。
造模后检测:
①血浆皮质醇含量降低;②血浆6-keto-PGF!
a含量降低;③血浆ET浓度升高;④血浆TNF含量升高;⑤血脂(TC、LDL)升高,HDL含量降低;⑥主动脉形态结构观察,见内皮细胞受损,内膜增厚,有大量平滑肌源性和单核细胞源性泡沫细胞,平滑肌细胞示合成型,中膜平滑肌细胞排列紊乱,含大量脂质空泡。
7、模型评价
该模型先饲以高脂饲料造成动脉粥样硬化,继而根据中医大汗亡阳、阴损及阳的原理,以寒凉药和麻黄汤发汗损伤人体阳气,导致动脉粥样硬化合并阳虚证,并且以具有温阳活血作用的药物(四逆汤合抵当汤)反证治疗,对上述病理变化均有改善作用,提示该模型类似人类少阴病心肾阳虚证。
8、注意事项:
①严格按配方比例配制高脂饲料,注意饲料保洁;②动物应单个饲养,以便于观察和测定。
(五)少阴病热化证大鼠模型的建立
1、名称:
少阴病热化证大鼠模型
2、目的:
建立类似少阴病热化证的内毒素所致弥散性血管内凝血(DIC)动物模型。
3、实验材料:
①大肠杆菌脂多糖(Lps,Sigma公司产,fromEColi055,B5),用时以生理盐水在无菌条件下配制成0.1mg/ml溶液。
②半导体体温计。
③DIC检测相关试剂。
4、实验对象:
SD大鼠体重180~220g,雌雄均用。
5、实验环境:
温度20~25℃,湿度60~80%。
6、操作步骤
大鼠按0.1mg/kg(1ml/kg)剂量腹腔注射LPS,24小时同前法腹腔注射LPS。
根据1994年全国第五届血栓与止血会议制订的DIC诊断标准对实验动物进行观察:
①一般表现:
动物表现出烦燥、精神差,进食减少,大便干燥,小便短赤等症状。
②体温(肛温):
第1次注射LPS后3小时体温开始上升,至第7小时升至最高,其后缓慢下降,但至第二次注射LPS后体温仍升高。
③出凝血试验:
造模后血小板数降低,凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间(aPTT)延长,纤维蛋白原含量升高,3P试验阳性,符合DIC的表现。
④血液学检查:
血中RBC、WBC数均下降,红细胞平均体积减小。
⑤病理学检查可见肺灶性出血、水肿,肝瘀血,肺泡壁毛细血管及肾小球毛细血管内可见血栓,肾近曲小管上皮细胞坏死。
7、模型评价
本模型以中医理论为依据,以内毒素腹腔注射造成大鼠DIC模型。
内毒素通过Shwartzman反应,引起微血管内血栓形成,导致继发性出血,这与中医血热出血证相似,又实验室检查及病理观察均表明,该模型兼阴虚血瘀之证,故本模型类似于阴虚热盛兼血瘀之出血证,相当于少阴病热化证。
8、注意事项
①注射LPS的量不可过大,否则常导致动物死亡;②在测定血液学指标时,最好用塑料器皿,如用玻璃器皿则应硅化。
③血液学检测应在4小时内完成。
取血后如暂时不测定,则应加盖后置4℃冰箱中保存。
(六)大承气汤对大鼠大肠运动的影响
1、目的:
大承气汤为阳明腑实证之主方,具有泻热荡实之功;通过观察大承气汤对大鼠大肠运动的促进,增强对大承气汤泻下功能的理解。
2、原理:
大承气汤有行气活血功效,可增强肠蠕动,促进排粪。
以墨汁作指示剂。
以大肠内混有墨汁粪便的推进距离为指标,可反应大承气汤对大肠运动的影响。
3、材料:
动物:
体重为200~250g的健康大鼠,器材:
2ml注射器,手术器械1套。
大鼠手术台,药品及试剂;含墨汁的大承气汤水煎剂1g/m1(大黄酒洗12g、厚朴去皮炙15g、枳实12g、芒硝9g),乌拉坦0.2g/m1,生理盐水。
4、方法:
①大承气汤水煎剂对大肠运动的直接影响:
实验前一天给大鼠腹腔注射乌拉坦(1g/kg),剪去腹中部的毛,在腹中部沿腹中线做5~6cm长的切口,打开腹腔。
把内径为1mm的塑料管由回盲部插入结肠1cm,结扎固定,塑料导管通过肌肉皮肤从背部引出,以备给药。
腹部切口缝合后将大鼠放回笼内,术后大鼠禁食不禁水。
次日取12只手术过的大鼠,按体重随机均匀分为2组。
给药组大鼠由塑料导管向结肠内灌注含墨汁的大承气汤水煎液4g/k8,立即计时:
对照组大鼠按同法向结肠内灌注等容量生理盐水。
给药后10分钟将大鼠猛击头部处死。
立即打开腹腔,用眼科剪将结肠由肛门到盲肠端剪下,放在用水湿润的小木板上(或玻腐板上),仔细分离肠系膜,并将结肠摆直,用米尺测量结肠总长度和墨汁推进距离,按下式计算墨汁推进百分率。
给药组与对照组比较,进行统计学处理。
②大承气汤对大肠运动的间接影响:
为研究大承气汤通过胃和小肠吸收后对大肠运动的间接影响,可按下述方法进行:
取禁食12小时的大鼠12只,随机均匀分为2组。
给药组和对照组大鼠每只分别灌胃等容量的大承气汤水煎液(4g/kg)和生理盐水(均不含色素指示剂)。
每只大鼠灌胃后立即放人钟罩内浅麻醉,背位固定在手术台上,剪去腹部的毛,沿腹中线做5~6cm长切口。
找到回盲部,给药组和对照组大鼠均由回盲部用注射器灌注含墨汁的生理盐水2ml/kg。
在靠近回盲邵的回肠段用双线做双结扎,在两线之间剪断回肠,立即计时。
将肠放回腹腔、缝合切口。
2小时后处死大鼠,按上法剪下结肠、测量结肠总长度和墨汁推进距离。
计算推进百分率和统计学处理测给药组和对照组大鼠差异的显著性。
5、结果:
①大承气汤能直接作用于大肠非常显著地增强大鼠大肠的推进作用(见下表)。
大承气汤对大鼠大肠推进作用的直接影响(+SD)
组别 动物数(只) 剂量(g/kg) 结肠总长度(cm) 墨汁推进距离(cm) 推进百分率(%)
生理盐水
大承气汤
②大承气汤小肠吸收后作用于大肠显著地增强大鼠大肠的推进作用(见下表)。
大承气汤对大鼠大肠推进作用的间接影响(+SD)
组别 动物数(只) 剂量(g/kg) 结肠总长度(cm) 墨汁推进距离(cm) 推进百分率(%)
生理盐水
大承气汤
6、注意事项
①大鼠手术时麻醉不宜过深,以防麻醉剂抑制胃肠蠕动,如麻醉过深大鼠也不易苏醒。
②在导管插管时应尽量少翻动肠管。
③处死大鼠后剪下结肠时,应从肛门开始剪,以免影响墨汁推进距离,影响实验结果。
7、评价:
本实验不需特殊仪器,操作方便也较简单易行。
实验肠段在体内,其温度、湿度由机体自然维持,只要手术认真细致,实验结果稳定可靠。
(七)桃核承气汤、抵当汤对局部血液循环障碍的改善作用
1、目的:
观察桃核承气汤、抵当汤对局部血液循环障碍的改善作用,以加深对此二方活血化瘀作用的理解。
2、原理:
抵当汤、桃核承气汤为《伤寒论》中攻逐下焦蓄血之主方,具有破瘀血、泻实热的作用。
本实验运用肾上腺素造成蟾蜍或青蛙肠系膜微血管血液循环障碍,活体观察二方对肾上腺素引起的局部血液循环障碍的改善作用。
3、材料:
尖头针1把,眼科剪2把,显微镜1台,蛙板1块,大头针4枚,图钉4个,棉球若干,探针1根;蟾蜍(或青蛙)4只;200%桃核承气汤水煎液、200%抵当汤水煎液适量,5mg/100ml肾上腺素1只,生理盐水适量。
4、方法:
取蟾蜍2只,分别用探针由枕骨大孔插入,破坏其大脑和脊髓。
用图钉将蟾蜍固定在蛙板圆孔附近处;在蟾蜍侧腹部剪开一个1.5-2cm切口,轻巧取出肠系膜,用大头针固定于蛙板圆孔上,置于显微镜下,观察肠系膜微循环状况。
将5mg/100ml肾上腺素各滴一滴于蟾蜍肠系膜上,观察血流状况:
再将其中一只滴生理盐水一滴于蟾蜍肠系膜上,将另外一只滴抵当汤水煎液一滴于肠系膜上,观察血流状况的变化,然后与滴入生理盐水的一只交换用药。
观察抵当汤水煎液对微循环障碍的改善作用后,再将另外2只用来观察桃核承气汤对微循环障碍的改善作用,方法同上。
5、结果:
观察用药前后毛细血管开放的数量、口径,流速以及血流形态
(A、B分别表示其中一只蟾蜍或青蛙)
开放数量 口 径 流 速 形 态
A B A B A B A B
用 药 前
滴入肾上腺素后
滴入生理盐水后
滴入抵当汤后
开放数量 口 径 流 速 形 态
A B A B A B A B
用 药 前
滴入肾上腺素后
滴入生理盐水后
滴入桃核承气汤后
6、注意事项:
每次滴入液体不易太多;滴完对照或观察药物后,交换前应间隔10-15分钟。
7、评价:
此方法简单易行,可以大概反映桃核承气汤、抵当汤对局部血液循环障碍的改善作用,加深对二方活血化瘀作用的理解,缺点是不够精确。
另外,该实验采用了组间和自身前后二种对照,增加了实验结果的可信度。
(八)大陷胸汤对大鼠利尿作用(代谢笼法)
1、目的:
通过观察大陷胸汤对正常大鼠,单位时间内尿量的影响,加深对大陷胸汤峻下逐水作用的理解,掌握本实验所运用的研究方法。
2、原理:
利用粪尿分离装置直接收集尿量的方法称为代谢笼法。
大陷胸汤具有峻下逐水、泻热破结作用,为热实结胸之主方,利用此法可观察其对尿量的影响,并可测定尿中钾、钠离子浓度,探讨利尿原理。
3、材料:
动物:
雄性大鼠,150~250g。
器材:
粪尿分离代谢笼,动物天平,大鼠灌针头,量筒。
药品及试剂:
大陷胸汤(大黄50g、芒硝15g、甘遂末5g)水煎液250mg/m1、速尿溶液lOmg/ml、生理盐水。
4、方法:
取10±20g雄性大鼠,生理盐水灌胃(2.5ml/lOOg),两小时内收集的尿量达到灌胃量40%以上的大鼠18只,分生理盐水、速尿,大陷胸汤三组。
每笼二只,体重相近。
试验前禁食18小时以上。
灌胃水荷量为2.5ml/lOOg。
各组灌胃药量也为2.5ml/lOOg。
给药后连续收集6小时尿量。
每36小时作组间动物互换,即每组大鼠均先后应用上述三种药物进行测试。
5、结果:
大陷胸汤和速尿均有明显的利尿作用。
大陷胸汤水煎液对大鼠尿量的影响(X+SD)
组 别 动物数(n) 尿量(给药后6小时内)
生理盐水
速 尿
大陷胸汤
6、注意事项:
①选用雄性大鼠,各大鼠体重相近,组间差重不超过5g;②禁食18小时,不禁水,以排除粪便干扰;③室温不宜差异过大。
7、评价:
本法测定尿量较为准确。
除可进行组间比较外,还可进行自身前、后比较。
如实验中,在第一次观察后的36小时,原生理盐水组大鼠改服速尿,作第二次观察;于第二次观察后36小时,又改服大陷胸汤。
这样的实验结果既有组间对照,又有动物的自身对照,从而提高了结果的可靠性。
(九)桂枝汤的加减药味量效关系的拆方研究
1、目的:
桂枝汤为《伤寒论》中经典名方,在此基础上对其加减,其功效又迥然不同:
本实验通过对其药味加减,观察量效关系变化,既对桂枝汤类方的不同功效有了进一步理解,又增加了对《伤寒论》组方配伍规律研究的了解。
2、原理:
桂枝汤组方严谨,然病有兼证,法有兼治,方有加减,为了探讨桂枝汤加减后的药效变化,设计了以下几组用药方案:
①桂枝汤17.5g/kg;②桂枝去芍汤13.6g/kg
③桂枝加桂汤20.0g/kg;④桂枝加芍汤21.0g/kg。
上述剂量相当于临床中效剂量,减半为小剂量,加倍为大剂量,进行加减药味量效关系的拆方研究。
3、材料:
封闭群瑞士种小鼠,戊巴比妥钠(亚催眠剂量),醋酸(致扭体量)。
4、方法:
小鼠灌胃给药后一小时,腹腔注射戊巴比妥钠(亚催眠剂量),观察动物入眠率;或腹腔注射醋酸(致扭体量),5分钟后,计算15分钟内的扭体次数,用直线回归法计算回归方程式,并进行等效量的对比(本文仅引用其中两项实验)。
5、结果:
见下表:
桂枝汤Y’=41.92+4.37X,r=0.99,桂枝汤Y’=24.17-11.67X,r=-0.99
桂枝加桂汤Y’=43.38+12.5X,r=0.87,桂枝加芍汤Y’=14.56-5.33X,r=-0.99
从量效回归方程求得的桂枝汤等四方临床中效剂量的药理作用比较
药理作用指标 对 照 桂枝汤 桂枝去芍汤 桂枝加桂汤 桂枝加芍汤
镇静作用(入眠率%)
镇痛作用(扭体率)
6、说明:
桂枝汤等四个方剂在疗效上有一定共同性,随着药味加减,各药在效能上也有其相异性,如:
桂枝加桂汤呈现明显的镇静作用,而桂枝加芍汤则呈现明显的镇痛作用。
7、注意事项:
①方剂加减的药效作用比较不宜以单一剂量的药效强度作比较,应以多剂量求量效回归方程,从量效方程看彼此的差异,本实验是按动物和人的公斤体重比例换算出的相当于人的临床等效剂量,通过量效方程的计算,来比较药量加减的药效变化,可以较好地反映方剂配伍的作用。
②为了求得量效回归方程,剂量点不宜少于3点,进行回归计算时,应检查相关系数(r)及其显著性,有显著相关的回归线可用实线或粗实线表示,无显著相关者,虽然也能得到回归方程及回归线,应改用虚线表示。
③当每组有多只动物时,计算相关系数(r),可用均数点,也可用各实际测量值(散点),前者所得相关系数的绝对值较大,但因均数点少,往往达不到显著水平,而同一实验数据散点所得相关系数的绝对值虽然较小,却因点数多,较易达到显著水平。
8、评价:
应用量效关系及量效回归曲线进行中药方剂的拆方分析,可以得到一般拆方研究所得不到的大量信息:
①临床中效剂量下各组药效的比较。
即比较在某一剂量纵线上各组药物效应的大小,各组间可用t检验进行统计分析。
②药效相等情况下各组等效量的比较。
应注意不同药效强度的横线上,各组等效量之比可能有差别,所以最好做两种药效强度(高效,中效)的等效量之比。
③最大药效之比。
有协同作用的组方往往可产生更强的药效,是单味药或小组方即使为多大剂量也无法达到的,在临床上有重要意义,应加以注意。
④两组回归线的斜率之比。
两组斜率无显著差异时,两线基本平行,说明药效是单纯的增强或减弱,两组斜率有显著差异时,两线不平行,说明药效的变化与剂量有关,例如桂枝汤及加芍药桂枝汤在大剂量与小剂量下镇痛药效之比是不相同的。
(十)四逆汤及附子、干姜、甘草对大鼠心肌收缩力及心率的影响
1、目的:
加深对四逆汤功效的理解,掌握四逆汤的组方依据,熟悉经方配伍规律研究方法,增强实验技能。
2、原理:
四逆汤是《伤寒论》中名方,由附子(9g)、干姜(6g)、甘草(6g)组成。
有回阳救逆功效,主治阳气衰微,阴寒内盛,亡阳等证。
本方为治疗少阴病阴盛阳衰的代表方剂。
四逆汤对大鼠心肌收缩力增强作用及心率影响,均优于各单味药物组(干姜、甘草、附子),且毒性大为降低,单味附子与复方二者口服的半数致死量相差4.1倍,从而说明了四逆汤组方的合理性及配伍的必要性。
3、材料:
动物:
大鼠;器材:
超级恒温器,95%O2+5%CO2储气瓶,灌流瓶,离体心脏灌流器,主动脉插管,蛙心夹,恒温玻璃罩,全能滑轮,恒压瓶,二导生理记录仪,位移换能器,培养皿;药品及试剂:
四逆汤水煎醇沉液(由制附子9g、干姜6g、炙甘草6g组成)1.0g/m1,制附子、干姜、炙甘草各单味药水煎醇沉液1.0g/m1,洛氏液。
4、方法