新城疫油苗和冻干苗疫苗的生产工艺流程.docx

新城疫油苗和冻干苗疫苗的生产工艺流程.docx

《新城疫油苗和冻干苗疫苗的生产工艺流程.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《新城疫油苗和冻干苗疫苗的生产工艺流程.docx（27页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。

新城疫油苗和冻干苗疫苗的生产工艺流程

新城疫冻干疫苗生产工艺流程

1生产用毒种制备

-4-5）,尿囊腔内接种或（如10101.1毒种繁殖将毒种用灭菌生理盐水作适当稀释10日龄SPF鸡胚,每胚0.1ml。

选接种后72~120小时死亡、且病痕明显的鸡胚,分别收获鸡胚液（尿囊液及羊水）,装于灭菌容器内。

将检验无菌、且对1%鸡红细胞凝集价≥1:

640（微量法1:

512）的鸡胚液混合,定量分装于安瓿中,冷冻保存。

注明收获日期,毒种代数等。

1.2毒种鉴定

-7、10按含毒鸡胚液量用灭菌生理盐水作为10倍系列稀释，取1.2.1病毒含量

-8-93个稀释度各尿囊腔内接种10日SPF鸡胚5个，每胚100.1ml、10，置36~37℃继续孵育，48小时以前死亡的鸡胚弃去不计，在48~120小时死亡的鸡胚随时取出，收获鸡胚液，同一稀释度

的胚液等量混合，按稀释度分别测定红细胞凝集价，至120小时，取出所有活胚,逐个收获

鸡胚液，分别测定红细胞凝集价，凝集价≥1:

160（微量法1:

128）者判为感染，计8EID。

0.1ml病毒含量应≥10EID算，每50501.2.2纯净应无细菌、霉菌、支原体和外源病毒污染，分别按《无菌检验或纯粹检验标准操作规程》、《支原体检验标准操作规程》、《外源病毒检验标准操作规程》进行。

1.3毒种保存在-15℃以下保存,应不超过1年。

1.4毒种继代应不超过3代。

鸡胚作为制苗材料。

SPF日龄9~11选择发育良好的制苗材料选择2

3制苗用毒液的制备

-5-4每胚尿囊腔10）,（如10或3.1接种取生产用毒种用灭菌生理盐水作适当稀释，接种后密封针孔，置36~37℃继续孵育，不必翻蛋。

内接种0.1ml小时前死亡的鸡胚弃去。

60鸡胚接种后,每日照蛋一次，将在3.2孵育和观察不论死,或120小时,每4~8小时照蛋一次死亡的鸡胚随时取出,直至9660小时后,置于气室向上直立,2~8℃冷却。

亡与否,全部取出,然后以无菌手术,用碘酊消毒气室部位,3.3收获将冷却4~24小时的鸡胚取出每若干个鸡胚的胚液混合为一组。

收获剥除气室部卵壳，剪开尿囊膜，吸鸡胚液,后的胚液置于灭菌瓶中，作好标识，留样后，结冻保存。

如胎儿腐败、胚液混浊及有任何污染应逐个检查鸡胚,在收获胚液的同时,

可疑者弃去不用。

4半成品检验《无菌检验或纯粹检验标准操按,经处理过的胚液每组分别取样,4.1无菌检验应无细菌生长。

作规程》进行无菌检验,病毒含量测定4.2

-9-7-8个稀释10倍系列稀释，取10、103、按含毒鸡胚液量用灭菌生理盐水作为10小48个，每胚50.1ml，置36~37℃继续孵育，日度各尿囊腔内接种10SPF鸡胚小时死亡的鸡胚随时取出，收获鸡胚液，48~120时以前死亡的鸡胚弃去不计，在小时，取同一稀释度的胚液等量混合，按稀释度分别测定红细胞凝集价，至120逐个收获鸡胚液，分别测定红细胞凝集价，凝集价≥1:

160（微量法出所有活胚,7者可用于配制疫苗。

>100.1ml，每者判为感染，计算1:

128）EID病毒含量EID5050配苗及分装5

将检验合格的若干组鸡胚液滤过,混合于同一容器内,按规定羽份,加一定比例的蔗糖脱脂奶粉作稳定剂,使其最终蔗糖含量为2.5%，脱脂奶粉含量为5%，同时6EID。

每羽份病毒含量应≥10分装后迅速,加入适宜的抗生素充分摇匀,定量分装50进行冷冻真空干燥。

6成品检验

6.1物理性状

6.1.1外观检查疫苗瓶上的标签，打印出的羽份或头份、生产批号、有效日期清晰可见、位置适当。

瓶上的铝盖稳固不松动。

6.1.2眼观检查将疫苗拿到与眼平行位置观察呈微黄色，海绵状疏松团块，然后再轻微振动，疫苗松动并与瓶壁分离，判为合格。

6.1.3溶解性检查用稀释液注射到疫苗瓶内，经轻微振动，疫苗应迅速完全溶解，无粘块或粘团出现，判为溶解性良好。

6.2无菌检验按《无菌检验或纯粹检验标准操作规程》进行，如有菌生长，应进行杂菌计数，并作病原性鉴定（按《杂菌计数和病原性鉴定操作细则》进行）和禽沙门氏菌检验每羽份非病原菌数应不超过1个（按《禽沙门氏菌检验法》进行）。

6.3支原体检验按《支原体检验法》进行，应无支原体生长。

6.4鉴别检验

6.4.1选择发育良好的10日龄SPF鸡胚10只，划出尿囊腔接种部位。

5.0EID/0.1mL10，与等量抗鸡新城疫病毒特6.4.2将疫苗用无菌生理盐水稀释至50异性血清混合，室温中和1小时后，尿囊腔接种，每胚0.1mL。

24~120在小时，120观察37℃继续孵育，置将接种后鸡胚用石蜡封孔后，6.4.3

小时内应不引起特异死亡，且至少存活8只，鸡胚液作红细胞凝集试验，应为阴性。

6.5外源病毒检验按《外源病毒检验法》进行。

6.6安全检验下列方法任择其一。

6.6.1用鸡胚检验将疫苗用无菌生理盐水稀释，尿囊腔内接种10日龄鸡胚10只，每胚0.1ml（含10个使用剂量），接种后24~72小时，鸡胚死亡率应不超过20%为合格。

如死亡率超过20%，可用20个鸡胚重检1次，重检结果死亡率仍超过20%，该批疫苗判为不合格。

6.6.2用鸡检验用2~7日龄SPF雏鸡20只，合成两组，第1组10只，每只滴鼻接种0.05mL（10个使用剂量）；第2组10只，不接种作为对照，两组在相同条件下分别饲养管理，观察10日，应无不良反应。

如有非特异性死亡，免疫组与对照组均不超过1只。

6.7效力检验下列方法任择其一。

6.7.1用鸡胚检验

6.7.1.1鸡胚选择选择发育良好的10日龄SPF鸡胚15个，划出尿囊腔接种部位，作出批组及滴度标记，每一滴度接种5个。

6.7.1.2疫苗稀释将疫苗按瓶签注明羽份，用灭菌生理盐水稀释至1羽份-7。

10倍系列稀释至10/0.1mL，再作-7-6-5三个稀释度尿囊腔内接种鸡胚各510、10个，每、6.7.1.3接种分别取10胚0.1mL，用石蜡封孔。

6.7.1.4孵育置37℃继续孵育至120小时，每天上、下午各照检1次，48小时以前死亡的鸡胚弃去不计，在48~120小时死亡的鸡胚，随时取出放在2~8℃冰箱中，至120小时取出全部活胚放在2~8℃℃冰箱中24小时。

6.7.1.5凝集价（HA）测定与计算鸡胚半数感染量（EID）将冷却鸡胚取出，50将同一稀释度的死亡鸡胚液等量混合，分别测定红细胞凝集价；将活胚逐个收获鸡胚液，分别测定红

细胞凝集价，HA≥160（微量法128）者判为感染，计算半数感染量，每羽份6.56.0EID），判为合格。

≥10EID（国家标准每羽份≥1050506.7.2用鸡检验

只。

10日龄健康易感鸡（血凝集抑制价应≤4）30-60选取鸡的选择6.7.2.1

6.7.2.2疫苗稀释将疫苗按瓶签注明羽份，用灭菌生理盐水稀释成每0.05mL含1/100使用剂量。

6.7.2.3免疫及攻毒每只鸡滴鼻接种0.05mL，10~14日后，连同条件相同的对4.0ELD，观察10-143只，各肌肉注射鸡新城疫北京株强毒10日，对照鸡全照鸡50部发病死亡，免疫鸡至少保护9只为合格。

6.8剩余水分测定按《剩余水分测定方法》进行，应符合规定。

6.9真空度测定按《真空度测定方法》进行，应符合规定。

鸡新城疫低毒力活疫苗生产工艺流程图、主要过程控制点和控制项目

种蛋消种*SP前孵种蛋选新城疫灭活疫苗生产工艺流生产用毒种制1接种途--1.1毒种繁将毒种用灭活生理盐水作适当稀释（11，尿囊腔接种剂无菌检照蛋时后孵化及照接1日SP鸡胚，每0.1m。

选接种712小时之间死亡且病痕明培养温湿病毒含的鸡胚，分别收获鸡胚液（尿囊液及羊水，装于灭菌容器内。

将检验无菌，且冷蛋时-1℃冷冻保

冷蛋温1鸡红细胞凝集价64（微量51）以上的鸡胚液混合，定量分装于分装铝瓿瓶中，冷冻保存。

注明收获日期、毒种代次等保护1.2毒种鉴

无菌检纯化水粗清洗-711按含毒鸡胚液量用灭菌生理盐水作倍系列稀释，1.2.1病毒含注射水分装前、中、后无纯化水灭-9

-36~370.1m每1SP鸡个11个稀释度各尿囊腔内接小时死亡的鸡胚随时取出48~12继续孵育4小时以前死亡的鸡胚弃去不计脉动蒸汽灭隧道烘箱收获鸡胚液，同一稀释度塞加燥干的胚液等量混合，按稀释度分别测定红细胞凝集价，至120小时，取出所有活胚,冻干逐个收获物理性状鸡胚液，分别测定红细胞凝集价，凝集价≥1:

160（微量法1:

128）者判为感染，计出箱

安全检验

盖压无菌检验外源病毒检验装箱入库样抽签贴．

8EID。

，每算EID0.1ml病毒含量应≥1050501.3毒种保存在-15℃以下保存，应不超过6个月。

1.4毒种继代应不超过3代。

2制苗材料选择选择发育良好9～10日龄的易感鸡胚作为制苗材料。

3制苗用毒液的制备

-4-5），每胚尿或103.1接种取生产用毒种，用灭菌生理盐水作适当稀释（如10囊内接种0.1ml，接种后密封针孔，置36～37℃继续孵育，不必翻蛋。

3.2孵育和观察鸡胚接种后，每日照蛋1次，将60小时前死亡的鸡胚弃去。

此后，每4～6小时照蛋1次，死亡的鸡胚随时取出，直至96小时，不论死亡与否，全部取出，气室向上直立，置于2～8℃冷却4～24小时。

3.3收获

3.3.1鸡胚液的收获将冷却的鸡胚取出，用碘酊消毒气室部位，然后以无菌手术破除气室部卵壳，揭去卵壳膜，剪破绒毛尿囊膜及羊膜（谨防卵黄破裂），吸取胚液。

对每个鸡胚在

吸取胚液前均应注意检查，凡胎儿腐败、胚液混浊及有任何污染可疑者，弃去不用。

死胚和活胚分别收获，每若干个鸡胚分为一组，吸取胚液放于同一灭菌的容器内，每组抽样测定血凝价，血凝价低于1：

160（微量法1：

128）者应弃去。

同时作无菌检查，应无细菌生长。

收获的胚液灭活前在2～8℃左右保存，应不超过5日。

3.3.2鸡胚胎儿收获及浸出液的制备在收获及胚液的同时，取病变胎儿，去头、）乳剂，加适宜的抗10：

1）～（5：

1次，磨碎，制成（3～2脚，用生理盐水洗．

生素适量，然后离心或以4层纱布一层铜纱网滤过，置自然沉淀1～2日，然后取样作无菌检查。

以上清夜作为配制双相油乳剂疫苗用。

4灭活将上述无菌胚液以4层纱布及一层细铜纱网滤过，混合于一个大玻璃瓶内，吸出数毫升样品备测毒价。

其余胚液和鸡胚浸出液分别计量加入10%甲醛溶液，随加随摇，使其能充分混合，甲醛溶液的最终浓度为0.1%。

加甲醛溶液后最好倾倒另一瓶中，以避免瓶口附近黏附的病毒未能接触灭活剂。

然后在37℃灭活16小时（以瓶内温度达到37℃开始计时）。

期间振摇3～4次。

在2～8℃保存，应不超过1个月。

5半成品检验

5.1无菌检验取灭活的胚液及鸡胚浸出液分别按附录448进行，应无菌生长。

5.2灭活检验取10日龄无新城疫病毒抗体的鸡胚6个，每个接种灭活胚液0.23ml，每日照蛋2次，观察5日，鸡胚非特异死亡不应超过1个。

对所有胚液分别测定血凝价，应不出现血凝，认为灭活完全。

如有可疑，应将可疑胚液进行重检，重检不合格者报废。

鸡胚浸出液也按照上述方法检查。

-7-8-9310、10个5.3毒价测定将灭活前取出的胚液进行10倍系列稀释，取10、稀释度分别接种9～10日龄无鸡新城疫病毒抗体的鸡胚5个，每胚尿囊内0.1ml，每日照蛋2次，观察5日，无论死胚、活胚均应测定血凝价，血凝价〉1：

80（微8EID病毒含量≥10,方可用每）以上者，判为感染，计算量法1：

64EID,0.1ml5050于制苗。

6单相油乳剂灭活疫苗制备

6.1油相制备取注射用白油94份，加司本-806份，混合后，加硬脂酸铝2份，随加随搅拌至透明为止，高压灭菌备用。

．

6.2水相制备取吐温-804份装入带玻璃珠的瓶中灭菌，冷却后加灭活胚液96份，充分振瑶使吐温-80完全溶解为止。

6.3乳化取油相3份放于乳化罐内，开动电机慢速转动搅拌，同时徐徐加入水相1份，加完后再以10000r/min搅拌2～5分钟，在终止搅拌前加入1%硫柳汞溶液，使其最终浓度为0.01%。

乳化后，取3～5ml以3000r/min离心15分钟，若有分层现，应重复搅拌1次。

7双相油乳剂疫苗制备

7.1用乳化罐乳化

7.1.1水相、油相制备同单相苗，但水相制备中，鸡胚液是按4%加入吐温，而鸡胚浸出液则按6%加吐温。

7.1.2取油相2份放入乳化罐内，开动电机慢速转动搅拌，同时徐徐加入胚液1份，加完后再以10000r/min搅拌。

7.1.3取鸡胚浸出液（单相苗鸡胚液等量）放于乳化罐，开动电机缓缓加入上述油包水单相苗，加完后再以10000r/min搅拌2～5分钟，在终止搅拌前加入1%硫柳汞溶液，使最终浓度为0.01.%。

乳化后取3～5ml以3000r/min离心10分钟，若分层严重应再搅拌1次。

7.2用乳化罐乳化。

8分装定量分装，加盖密封。

9成品检验

9.1物理性状

9.1.1外观为乳白色乳剂。

单相苗为油包水型。

取一清洁吸管，吸取少量疫苗滴于冷水中，应剂型9.1.2

呈油滴状不扩散。

双相苗为水包油包水型，滴于冷水中，应呈云雾状扩散。

9.1.3稳定性在37℃左右条件下放置21日，应不破乳。

9.1.4粘度用1ml吸管（出口内径1.2mm），吸取25℃左右的疫苗1ml，令其垂直自然流出，记录流出0.4ml所需时间。

单相苗在8秒以内，双相苗在5秒以内为合格。

9.2无菌检验按《无菌检验或纯粹检验标准操作规程》进行，应无菌生长。

9.3安全检验用30～60日龄健康易感鸡（HI抗体≤1：

4）6只，各肌肉或颈部皮下注射疫苗1ml，观察14日，应不出现由疫苗引起的任何局部和全身不良反应。

9.4效力检验用30～60日龄健康易感鸡（HI抗体≤1：

4）15只，其中10只各皮下或肌肉注射疫苗20μl（用0.5ml以下的注射器注射），另5只不免疫作对5ELD强毒，观察只，各肌肉注射10～28日后，连同条件相同的对照鸡5照，215014日，对照组全部死亡，免疫组至少保护7只为合格。

9.5甲醛含量测定按《甲醛含量测定法》进行，应符合《制品检验的有关规定》。

鸡新城疫灭活疫苗生产工艺流程图、主要过程控制点和控制项目

种蛋消毒非免疫种蛋*前孵化种蛋选择无相应抗体附录1.剩余水份测定法接种途径

接种*技术依据及原理1接种剂量无菌检验照蛋时间灭活检验*后孵化及照蛋卡氏法是利用卡氏试剂中的碘和二氧化硫在砒啶和甲醇溶液中能与水起定量培养温湿度毒价测定反应的原理，从而测定水份。

冷蛋时间*灭活-15℃冷冻保存获收*冷蛋冷蛋温度2材料、仪器、试剂的准备及基本要求

胶塞铝盖仪器及设备2.1分装瓶**制制油相相水清洗清洗清洗*乳化分装前、中、后无检脉动蒸汽灭菌*灭菌*

电子分析天平（精度0.1mg，称量范围0～110g），费休水份滴定仪（梅特勒DL31）。

2.2试剂

卡氏试剂、无水甲醇，纯水。

2.3检验器具

止血钳（开启苗瓶），玻璃棒（或能捣碎检品的器具），10ul注射器，烧杯。

2.4样品每批疫苗4个样品。

2.5其它检验记录纸、笔、纱布和汗布手套。

3检验步骤

3.1接通电源、打开费休水份滴定仪（梅特勒DL31）主机、打印机、天平开关。

3.2按滴定仪的RUN键滴定仪自动滴定至终点。

3.3滴定仪屏幕显示待机模式Drift值在25以下指示箭头稳定→（平指）时，开始滴定标定滴度：

3.3.1按F2键至显示屏出现H2OISO3696

3.3.2连续按F3键至显示屏出现pleaseaddsample0.0100g

3.3.3天平去皮，通过进样孔注入已称重的纯水，（用10μl注射器抽取10μl纯水置天平称重）注射器放回天平后按F3;

3.3.4按F1自动输入样品量；

3.3.5按F2显示样品重量；

3.3.6按F3确认样品重量；

3.3.7滴定至终点自动打印出结果，打印结束按F3返回到待机模式；

条开始同法操作。

1重复标定只需依上述第3.3.8

3.4水份测定：

3.4.1将样品置天平称重

3.4.2连续按F3键，显示屏出现pleaseaddsample0.0000g～5.000g;

3.4.3天平去皮后通过进样口将已称重的样品加入滴定杯中，将载样杯放回天平。

3.4.4按F3预滴定

3.4.5按F1自动输入样品量

3.4.6按F2显示样品重量

3.4.7按F3确认样品重量

3.4.8滴定至终点自动打印出结果，打印结束，按F3返回到待机模式

3.4.9

4记录与计算

5结果判定

每瓶样品含水量不得超过4.0％，如有超过时，可重检一次。

2.真空度测定法

1技术依据及原理

依据《兽用生物制品质量标准》附录中的真空度测定法，即使用高频火花真空测定器测定。

它的基本原理是利用本仪器振动形成火花束，激励谐振荡回路，使次线线圈感应出高频高压脉冲电压，使被检物产生不同颜色的辉光，根据颜色的变化来判断疫苗的真空度。

2注意事项

按照规定要求，在检验过程中至少要有一名检验员和一名复核员共同进行，2.1

确保检验结果的准确性。

2.2检验要在光线较暗的操作室里进行，便于结果判定的准确性。

2.3被检样品从冷库中取出应擦干瓶壁上的水份，样品达到室温后再进行测定。

3材料、仪器、试剂的准备及基本要求

3.1仪器及设备

电火花真空检测器。

3.2样品所有被检样品。

3.3检验记录纸、笔。

4检验步骤

4.1取待检样品，一字排列于暗室的操作台上，使瓶与瓶之间有一定距离。

4.2将真空检测器尾部电源插头插入220V电源插座里。

4.3将放电簧头对准被检样品（簧头不要触到瓶壁），打开开关，间歇适用（时开时关）。

4.4观察并记录逐瓶样品的真空状态。

5安全措施

5.1使用真空检测器时，人体不要接近仪器的头部电簧，以免高频电流的电击，（但没有生命危险）。

5.2测定样品真空时，检测器必须缓慢移动，放电簧不应在一点停留时间过长，以免把玻璃击穿，影响样品本身的效果。

5.3测定样品真空时，注意远离疫苗瓶上的金属帽，否则会造成错误信号，甚至在金属处将玻璃击穿而造成漏洞。

结果判定6

如果容器内出现白色、粉色或紫色辉光，则真空度检查合格。

3.无菌检验和纯粹检验

1技术依据及原理:

生物制品（除另有规定者外）都不应有外源微生物污染。

灭活疫苗不得含有活的本菌或本毒。

各类生物制品必须按规定作无菌检验或纯粹检验，全部操作应在无菌条件下进行。

2注意事项

2.1抽样后逐瓶检查包装、胶塞、瓶签有无破损和毁坏，瓶内有无杂质。

2.2为防止交叉污染，一个样品用一个吸管或一个注射器。

2.3各类生物制品的检验操作应在无菌条件下进行。

2.4检验过程要仔细、认真。

2.5保持实验室的清洁卫生，严格遵守常规的消毒制度。

3材料、仪器、试剂的准备及基本要求

3.1仪器

24～26℃、36～38℃温箱，检验器具，试管架，10ml、5ml、1ml吸管，记号笔，记录纸。

3.2检验用培养基

3.2.1无菌检验

厌氧性及需氧性细菌的检验用含硫乙醇酸盐培养基（简称T.G）和酪胨琼脂培养基（简称G.A）。

霉菌及腐生菌检验用葡萄糖蛋白胨汤（简称G.P）。

用适宜本菌生长的培养基。

纯粹检验3.2.2

4检验步骤

4.1抽样应随机取样并注意代表性。

4.1.1制造疫苗用的各种原菌液、毒液和其它配苗组织乳剂、稳定剂及半成品的无菌或纯粹检验，应每瓶（罐）分别抽样进行，抽样量为2～10ml。

4.1.2成品的无菌或纯粹检验应按每批或每个亚批进行，每批按瓶数百分之一抽样，但不应少于5瓶，最多不超过10瓶，分别进行检验。

4.2检验用培养基

4.2.1无菌检验

4.2.1.l厌氧性及需氧性细菌的检验用硫乙醇酸盐培养基（T.G）及酪胨琼脂（G.A）。

4.2.1.2霉菌及腐生菌检验用葡萄糖蛋白胨汤（G.P）。

4.2.2活菌纯粹检验用适于本菌生长的培养基。

4.2.3灭活检验用适于本菌生长的培养基，或对本毒敏感的细胞、组织和动物。

4.2.4杂菌计数用马丁琼脂或G.A培养基。

4.2.5病原性鉴定用T.G培养基或其他适宜培养基。

4.3检验方法及结果判定

4.3.l细菌原菌液及活菌苗半成品的纯粹检验取样接种T.G小管及适宜于本菌生长的其他培养基斜面各2支，每支0.2ml，1支置37℃培养；1支置25℃培养，观察3～5日，应纯粹。

4.3.2病毒原毒液和其它配苗组织乳剂、稳定剂及半成品的无菌检验取样接种25℃培养，观支置137℃培养；支置1，0.2m1支，每支2斜面各G.A小管及T.G．

察3～5日，应无菌生长。

4.3.3灭活检验细菌灭活后，用适于本菌生长的培养基2支，各接种0.2ml，置37℃培养5日，应无菌生长。

病毒液灭活后和细菌毒素脱毒后接种对本毒敏感的细胞、禽胚或实验动物，应正常。

4.3.4含甲醛、苯酚、汞类等防腐剂和抗生素的制品用T.G培养基50ml，接种样品（冻干制品先做10倍稀释）1ml，置37℃培养，3日后自小瓶中吸取培养物。

分别接种T.G小管和G.A斜面各2支，每支0.2m1，1支置37℃；1支置25℃，另取0.2ml，接种1支G.P小管置25℃，均培养5日，应无菌生长。

如制品允许含一定数量非病原菌，应进一步作杂菌计数和病原性鉴定。

4.3.5细菌性活疫苗（冻干制品恢复原量）及不含防腐剂、抗生素的其它制品或稀释液，将样品直接接种T.G小管、G.A斜面或适于本菌生长的其他培养基各2支，每支0.2m1，

1支置37℃；1支置25℃，另用1支G.P小管，接种0.2m1置25℃，均培养5日。

细菌性活疫苗应纯粹，其他制品应无菌生长。

4.3.6

4.3.7如培养后混浊不易判定时，可移植l次，再判定。

4.3.8每批抽检的样品必须全部无菌或纯粹生长。

如发现个别瓶有杂菌或结果可疑时，可重检原瓶（如为安瓿或冻干制品，可重抽样品），如无菌或无杂菌生长，可作无菌或纯粹通过。

如仍有杂菌，可抽取加倍数量的样品重检，个别瓶仍有杂菌，则作为污染杂菌处理。

5安全措施

检验过程中注意防止对检验人员和环境的污染。

5.1

5.2检验人员必须穿戴工作服和口罩。

5.3滴撒在操作台、地面的异物要进行消毒处理。

5.4检验完毕后开封的检品均要经过高压灭菌处理。

6记录和计算

检品在接种相关培养基后，每天观察温箱内的培养情况并记录观察结

4.杂菌计数

1技术依据及原理

某些疫（菌）苗允许有一定数量的非病原性杂菌，但这类制品如污染杂菌，必须作杂菌计数。

2注意事项

2.1为防止交叉污染，一个样品用一个吸管或一个注射器。

2.2各类生物制品的检验操作应在无菌条件下进行。

2.3检验过程要仔细、认真。

3材料、仪器、试剂的准备及基本要求