重复给烟碱引发大鼠降温耐受性反映及对活动和体重的阻碍.docx

重复给烟碱引发大鼠降温耐受性反映及对活动和体重的阻碍.docx

《重复给烟碱引发大鼠降温耐受性反映及对活动和体重的阻碍.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《重复给烟碱引发大鼠降温耐受性反映及对活动和体重的阻碍.docx（5页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。

重复给烟碱引发大鼠降温耐受性反映及对活动和体重的阻碍

重复给烟碱引发大鼠降温耐受性反映及对活动和体重的阻碍

杨永录黄涛孟立沈字玲韩琴

【摘要】目的观看重复给烟碱引发大鼠降温耐受性反映和对活动和体重的阻碍。

方式用无线遥测技术监测大鼠的体温和活动，观看持续5天重复注射小剂量烟碱mg/kg）对SD大鼠体温、活动和体重的阻碍。

结果①第一次给大鼠注射烟碱后可致使大约持续h的降温反映；但第三次注射烟碱后，雄性和雌性大鼠体温那么与对照组相似。

②重复给烟碱能够明显降低体重。

③每次注射烟碱和生理盐水可引发动物的活动显现短暂的增加反映；从第二次到第五次注射烟碱后雌性大鼠的活动明显多于雄性大鼠。

结论重复注射烟碱可致使雄性和雌性大鼠显现降温耐受性反映，但持续注射烟碱后，雌性大鼠的活动明显大于雄性大鼠。

另外，重复给烟碱可降低雄性和雌性大鼠的生长速度。

【关键词】烟碱；低温；体温太高；性别不同

【Abstract】ObjectiveToobservetherepeatednicotineexposureleadtotoleranceofhypothermiceffectandtheeffectonmotoractivityandbodyweighinrats.MethodsTheeffectsofdailyinjectionsofnicotineatsmalldosagemg/kg）onceadayfor5daysoncoretemperatureandmotoractivityinmaleandfemaleSpragueDawleyratsweremonitoredbyradiotelemetry.Results①Thefirstinjectionofnicotineinratsledtoahypothermicresponseforapproximatelyhours.Butafterthethirdinjectionofnicotine,changesofcoretemperatureinmaleandfemaleratsweresimilartocontrols.②Repeatedtreatmentwithnicotinesignificantlyreducedbodyweight.③Motoractivityalsoincreasedtransientlywitheachinjectionofsalineandnicotine,butthemotoractivityresponseoffemaleswassignificantlygreaterthanthemalesforthesecondthroughfifthinjectionsofnicotine.ConclusionTheresultsofthisstudyshowthatrepeatedinjectionofnicotinecanleadtotoleranceofhypothermicresponse,butmotoractivityresponseoffemaleswassignificantlygreaterthanthemaleratsaftersequentialnicotineinjections.Inaddition,repeatednicotinetreatmentattenuatedthegrowthofmaleandfemalerats.

【Keywords】Nicotine;hypothermia;tolerance;bodyweight

下丘脑体温调剂中枢内含有丰硕的烟碱型胆碱受体（N受体）和毒蕈碱型胆碱受体（M受体），二者均参与人体和哺乳类动物体温调剂进程。

M受体兴奋剂氧化震颤素和N受体兴奋剂烟碱都可穿过血脑屏障进入中枢引发啮齿类动物显现明显的降温反映［12］。

尽管实验已经证明，烟碱不仅参与降温进程，而且反复给烟碱能够显现降温耐受性反映或阻碍乙酰胆碱受体的灵敏性［24］,但未见小剂量烟碱引发体温转变和耐受性反映的时刻曲线特点和活动和体重转变与性别不同的报导。

作者考虑无线遥测技术不仅能够持续准确记录反复给药引发体温和活动的转变，而且也可幸免人工反复测量结肠温度引发动物活动改变和应激性体温太高对实验结果的阻碍。

因此，本实验用无线遥控测温技术持续观看给大鼠重复小剂量注射烟碱是不是可产生降温耐受性反映，同时也希望证明重复注射烟碱对动物活动和体重的阻碍与性别的不同。

1材料和方式

实验动物与试剂

　　实验用成年雄性和雌性SD大鼠（四川医学科学院实验动物研究所提供），体重200～250g。

酒石酸氢烟碱（Nicotinehydrogentartrate）为Sigma公司产品，用生理盐水配制成实验所需要的不同剂量浓度。

实验分组与步骤

　　实验分为两部份完成。

实验1：

不同剂量烟碱对雄性和雌性大鼠体温和活动的阻碍。

雄性和雌性大鼠各分4组（n=7），即为生理盐水组和mg/kg、mg/kg和mg/kg烟碱组，注射容量均为1ml/kg。

实验前1天下午4时，将大鼠放入清洁鼠笼内，然后置于SH800GS人工气候箱（重庆永生实验仪器厂产品）内进行适应性留宿，动物处于自由活动、进食和进水状态。

人工气候箱内温度设定为25℃，湿度为70％～80％左右，明暗时刻各为12h，上午6时开灯，下午6时关灯。

实验当天上午6时开始持续记录大鼠的体温和活动，上午11时别离给动物皮下注射不同剂量的烟碱或生理盐水后，持续记录到下午3时终止实验。

　　实验2：

小剂量重复皮下注射烟碱对体温、活动和体重的阻碍。

雄性和雌性大鼠各分2组（n=7），即生理盐水组和烟碱组。

实验前2天下午4时，将大鼠置于人工气候箱中，人工气候箱参数设定同实验1。

实验前1天上午6时开始持续记录体温和活动，实验当天上午11时别离皮下注射烟碱mg/kg（ml生理盐水）或生理盐水1ml/kg，天天注射1次，持续注射5天。

动物手术

　　用4％戊巴比妥钠溶液腹腔注射麻醉（40mg/kg）动物，依照常规手术方式切开腹部皮肤和肌肉，植入无线温度遥测探头（DataSciencesinternational,modelTA10TAF40）后，缝合腹部肌肉和皮肤，然后肌肉注射青霉素以防感染。

术后将动物别离单个饲养在大鼠塑料笼中恢复10天以上进行实验。

实验室的温度为23℃～25℃左右，明暗时刻各为12h，上午6时至下午6时为昼光（开灯），下午6时至第二天上午6时为暗光（关灯）。

体温的测量和判定体温转变的指标

　　用无线遥控测温系统（美国DSI公司产品）测量大鼠的体温，将腹腔内置有无线温度遥测探头的大鼠放入清洁鼠笼内，然后置于遥控测温仪的接收板上，大鼠腹腔内无线遥测探头每距离5min搜集一次体核温度信号，经接收板接收后，输入运算机贮存和数据处置。

　　体温反映指标用平均体温反映曲线和体温反映最大幅度与基线体温之间的差（△T）表示。

体重的称量

天天上午11时用电子天平称量大鼠体重,重复性误差＜g.

统计分析

实验1的数据是将每一个实验组距离5min的数据计算成均数±标准差（±s）表示，实验2的实验数据是将所记录距离5min的实验数据计算成每小时的均数±标准差表示，然后采纳配对t查验或集体比较t查验进行统计分析。

2实验结果

不同剂量烟碱对雄性和雌性大鼠体温和活动的阻碍

　　从表1可见，对照组大鼠皮下注射生理盐水后均显现体温升高反映，这种现象是由于注射药物和移动动物而引发的活动增加所致的应激性体温太高反映。

皮下注射mg/kg烟碱能明显阻止两性大鼠应激性体温太高反映；注射mg/kg烟碱20min后，雄性和雌性大鼠均显现轻度低温反映，在给药后50min体温恢复到对照水平；给雄性注射mg/kg烟碱20min后，低温反映最明显，较给药前体温降低达℃，在给药后90min体温恢复到对照水平；而雌性大鼠注射mg/kg烟碱后引发的低温反映与mg/kg组相似。

表1皮下注射不同剂量烟碱对大鼠体温的阻碍小剂量重复注射烟碱对大鼠体温和活动的阻碍与性别的不同

　　第一次皮下注射烟碱mg/kg）后，动物体温明显低于盐水组并持续约2h，但与给药前体温比较无降温反映（图1），显现与实验1结果不一致的现象，主若是与数据的统计方式不同有关。

实验2是持续搜集长达6天144h的数据量，每一个画图点只能取1h的平均值，如此就掩盖了烟碱引发短暂低温反映的转变进程；而实验1由于观看持续的时刻较短，每一个画图点距离只有5min，因此能准确的反映出体温的转变进程

每次给大鼠注射生理盐水都可引发应激性体温升高反映，但持续5天重复注射盐水后，大鼠应激性体温升高反映显现轻度降低现象。

烟碱组动物那么在第三次注射烟碱后体温转变与盐水组相似，第四次和第五次注射烟碱后体温那么明显高于盐水组（图1）。

另外，有趣的是雄性大鼠在第三次和第四次注射烟碱后，到下午6时动物进入暗光期的体温明显升高，即正常体温周期性上升相的体温明显高于对照组，约持续5h～6h（图1）。

从图2进一步分析能够可见，雌性大鼠第三次和第四次注射烟碱后体温升高反映是相似的。

另外，烟碱对大鼠活动的阻碍有明显的性别不同。

持续注射烟碱可引发雌性大鼠的活动显现增加现象，即从第二次到第五次注射烟碱后，雌性大鼠的活动较盐水组明显增加，但雄性大鼠的活动与盐水组比较无明显不同（图3）。

小剂量重复注射烟碱对大鼠体重的阻碍

　　皮下小剂量重复注射烟碱（mg/kg）可减慢大鼠的生长速度。

雄性大鼠第五次注射烟碱和生理盐水后，体重别离为－±和±；雌性大鼠第五次给药后，体重别离为±和±.

3讨论

本实验给大鼠皮下注射不同剂量烟碱后的体温转变与给药前比较，mg/kg烟碱能明显抑制雄性和雌性大鼠的应激性体温太高反映，mg/kg能引发两性大鼠体温较给药前平均降低℃，mg/kg引发低温效应更明显（表1），说明小剂量的烟碱不仅可引发低温反映，并有明显剂量效应关系。

皮下注射烟碱引发的这种低温反映与进入体温调剂中枢的烟碱能增进散热反映有关［2，6，7］。

　*P<,**P<vscontrolgroup

通常对重复给烟碱引发其作用减弱或消失称为烟碱的耐受性反映［4］。

本实验给大鼠重复小剂量皮下注射烟碱在较短的时刻内降温作用消失，即重复注射烟碱mg/kg3次后就显现低温耐受性反映，形成耐受性的时刻仅为3天。

本实验结果与以往的文献报导皮下注射较大剂量烟碱（2mg～5mg/kg）才能引发低温反映，而且形成耐受性反映一样为7～12天的结果明显不一致［6，8］。

以往的研究一般是采纳人工测量结肠温的方式，可能是由于每次测量温度引发应激性体温太高反映而干扰了实验结果的准确性。

因为在实验进程中调换动物笼、改换饲养环境、测量结肠温度和注射药物等操作都可引发大鼠、小鼠和家兔快速应激性体温太高的反映，通常持续1～h后体温才能恢复到基线水平［5，9］。

本实验给对照组大鼠皮下注射盐水后，也快速显现持续约1h的应激性体温太高反映。

这就说明，若是采纳一般的肛温探头人工测温法，每次距离时刻小于1h，持续数小时或数天测量的结肠温度，大体上是在前一次应激性体温太高反映尚未完全恢复的状态下所测的实验结果，如此就观看不到小剂量烟碱引发的体温转变。

本实验用无线遥控测温技术持续观看动物在正常自由状态的体温和活动，幸免了人工反复测量结肠温度时引发应激性体温升高因素的阻碍，因此实验结果是靠得住的。

最近Vann等证明，大鼠皮下烟碱mg/kg1次后就开始显现中枢神经系统N受体失活反映［8］，这也为本实验小剂量皮下重复注射烟碱快速引发大鼠低温反映耐受性的形成提供了实验依据。

　　低剂量烟碱引发雄性和雌性大鼠体温显现降温反映和降温耐受性反映无明显不同，但重复给烟碱引发降温耐受性反映时，雌性大鼠那么伴有明显活动增加现象。

这一实验结果与Booze等静脉注射注射烟碱引发雌性大鼠的活动明显高于雄性的实验结果是相似的［11］,这可能与雌性大鼠对烟碱的灵敏性高有关。

　　有趣的是实验还发觉，重复给烟碱可降低大鼠的生长速度。

有实验证明，慢性给烟碱能增进应激性体温太高反映，其缘故是重复给烟碱可提高棕色脂肪组织的代谢活动而提高产热反映［10］。

由此，作者分析本实验重复给烟碱显现大鼠体重较对照组降低的现象，可能与烟碱提高代谢活动有关。

　　总之，用无线遥测技术观看到：

①低剂量烟碱也可引发降温反映，重复注射低剂量烟碱3次后，可致使大鼠显现降温耐受性反映，但无明显性别不同；②持续注射烟碱能引发雌性大鼠的活动显现增加现象，而对雄性大鼠的活动无明显阻碍；③烟碱能降低大鼠的生长速度。

本实验结果，纠正了以往一些学者由于实验技术的缘故，以为烟碱降温效应的剂量较大和形成降温耐受性反映的时刻较长的研究结果。

关于烟碱对大鼠活动和体重的阻碍和与性别的不同还需要进一步研究。

【参考文献】

［1］RyanPM,KellyJP,ChambersPL,etal.TheCharacterizationofOxotremorineinducedHypothermicResponseintheRat［J］.PharmacolToxicol,1996,79（5）:

238240.

［2］ZarrindastMR,BarghiLashkariaS,ShafizadehM.ThePossibleCrosstolerancebetweenMorphineandNicotineinducedHypothermiainMice［J］.PharmacolBiochemBehav,2001,68

（2）:

283289.

［3］GrabusSD,MartinBR,BatmanAM,TyndaleRF,etal.NicotinePhysicalDependenceandToleranceintheMouseFollowingChronicOralAdministration［J］.Psychopharmaco,2005,178（23）:

183192.

［4］孙秀兰，胡刚，汪海.失敏态烟碱样受体［J］.中国药理学通报,2003,19（12）：

132135.

［5］杨永录，方军.AVPV1受体阻断剂对昼光和暗光中正常大鼠体温的阻碍［J］.中国病理生理学杂志，2003,19

（1）：

8386.

［6］徐江平,刘传绩.烟碱诱发大鼠体温下降形成耐受的时刻与剂量依托性［J］.军事医学科学院院刊,1995,19

（2）:

9597.

［7］PelissierAL,GantenbeinM,BruguerolleB.ChronopharmacologicalEffectsonNicotineRepeatedAdministrationonHeartRate,BodyTemperatureandLocomotorActivityCircadianRhythmsinRats［J］.LifeSci,1998,63（24）:

21892197.

［8］VannRE,JamesJR,RosecransJA,RobinsonSE.NicotinicReceptorInactivationAfteracuteandRepeatedinVivoNicotineExposuresinRats［J］.BrainRes,2006,1086

（1）:

98103.

［9］YangYonglu,GordonCJ.PossibleRoleofVasopressininThethermoregulationtoChlorpyrifosintheRat［J］.PharmacolToxicol,2002,90（6）:

311316.

［10］FewellJE,TangP.AninfluenceofNicotineontheCoreTempeRatureresponsetoaNovelEnvironmentinPregnantRats［J］.JApplPhysiol,1997,83（5）:

16121616.

［11］BoozeRM,WelchMA,WoodML,etal.BehavioralSensitizationFollowingRepeatedIntravenousNicotineAdministration:

GenderDifferencesandGonadalHormones［J］.PharmacolBiochemBehav,1999,64（4）:

827839.