全国各省市高考基因工程真题.docx
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全国各省市高考基因工程真题
基因工程
一、选择题
1．应用基因工程方法，可将酵母菌制造成“工程菌”，用于生产乙肝疫苗，在制造该“工程菌”时，应向酵母菌导入下列中的（ ）
A．乙肝病毒的表面抗原
B．抗乙肝病毒抗体的基因
C．抗乙肝病毒的抗体
D．乙肝病毒表面抗原的基因
答案：
D 解析：
运用基因工程方法生产疫苗，导入的一定是基因。
抗乙肝病毒抗体的基因是人体内已存在的基因，制作疫苗选用的是乙肝病毒表面抗原的基因，这样就可以在酵母菌体内表达出大量的乙肝病毒表面抗原，从而可以制作成疫苗。
2．科学家将比目鱼的抗冻蛋白基因转移到西红柿细胞内培育出“抗冻西红柿”，在“目的基因的检测与鉴定”环节，不需要进行的是（ ）
A．利用标记基因，将含有比目鱼抗冻蛋白基因的西红柿细胞筛选出来
B．利用分子探针，检测“抗冻西红柿”的DNA上是否插入了抗冻蛋白基因
C．利用相应的抗体，检测“抗冻西红柿”细胞中是否形成抗冻蛋白质
D．进行抗寒栽培实验，检测“抗冻西红柿”是否能在寒冷环境中生存
答案：
A 解析：
目的基因的检测与鉴定可使用基因探针检测受体细胞中是否含有目的基因，也可使用抗原—抗体杂交法检测目的基因是否翻译出蛋白质，还可在个体水平进行检测，看其是否表现出相应性状。
利用标记基因，将含有比目鱼抗冻蛋白基因的西红柿细胞筛选出来不属于目的基因的检测与鉴定环节。
3．如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制“工程菌”的示意图，已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，下列说法正确的是（ ）
A．将重组质粒导入细菌B细胞常用的方法是显微注射法
B．将完成导入过程后的细菌涂布在含氨苄青霉素的培养基上，能生长的只有导入了重组质粒的细菌
C．将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上，能生长的只有导入了质粒A的细菌
D．目的基因成功表达的标志是在受体细胞中能检测到目的基因的存在
答案：
C 解析：
将基因表达载体导入细菌B细胞常用的方法是转化法，A错误；质粒A中含有抗四环素基因与抗氨苄青霉素基因，而重组质粒中含抗氨苄青霉素基因，则在含有氨苄青霉素的培养基上能生长的是导入质粒A或重组质粒的细菌，B错误；质粒A含有抗四环素基因与抗氨苄青霉素基因，所以完成导入过程后的细菌能在含有四环素的培养基上生长，而重组质粒中的抗四环素基因已经被破坏，所以导入重组质粒的细菌不能在含有四环素的培养基上生长，C正确；根据题干信息分析，目的基因（人的生长激素基因）成功表达的标志是受体细胞能产生人的生长激素，D错误。
4．下表有关基因表达的选项中，不可能的是（ ）
选项
基因
表达的细胞
表达产物
A
细菌抗虫蛋白基因
抗虫棉叶肉细胞
细菌抗虫蛋白
B
人酪氨酸酶基因
正常人皮肤细胞
人酪氨酸酶
C
动物胰岛素基因
大肠杆菌工程菌细胞
动物胰岛素
D
兔血红蛋白基因
兔成熟红细胞
兔血红蛋白
答案：
D 解析：
细菌抗虫蛋白基因可通过转基因技术转入棉花体细胞内，在棉花的叶肉细胞中表达产生细菌抗虫蛋白，使棉花具有抗虫能力，A正确；正常人皮肤细胞中含有人酪氨酸酶基因，人酪氨酸酶基因能够表达产生人酪氨酸酶，B正确；动物胰岛素基因可通过转基因技术转移到大肠杆菌体内，在大肠杆菌工程菌细胞中合成动物胰岛素，C正确；兔属于哺乳动物，其成熟的红细胞中没有细胞核与众多细胞器，所以不可能表达出血红蛋白，D错误。
5．（2016·北京朝阳区期末）下面是质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，ampr为氨苄青霉素抗性基因，tetr为四环素抗性基因，箭头表示限制性核酸内切酶的酶切位点。
若要得到一个能在四环素培养基上生长而不能在氨苄青霉素培养基上生长的含重组质粒的细胞，应选择合适的酶切位点是（ ）
答案：
C 解析：
要得到能在四环素培养基上生长而不能在氨苄青霉素培养基上生长的含重组质粒的细胞，限制性核酸内切酶的酶切位点应在氨苄青霉素抗性基因内，破坏氨苄青霉素抗性基因，保留四环素抗性基因，C正确；ori为复制必需的序列，不能有酶切位点，A错误；B的切割会得到既能在四环素培养基上生长也能在氨苄青霉素培养基上生长的含重组质粒的细胞，B错误；D的切割会得到不能在四环素培养基上生长而能在氨苄青霉素培养基上生长的含重组质粒的细胞，D错误。
二、非选择题
6．（2015·全国卷Ⅱ）已知生物体内有一种蛋白质（P），该蛋白质是一种转运蛋白，由305个氨基酸组成。
如果将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸，240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸，改变后的蛋白质（P1）不但保留P的功能，而且具有了酶的催化活性。
回答下列问题：
（1）从上述资料可知，若要改变蛋白质的功能，可以考虑对蛋白质的________________进行改造。
（2）以P基因序列为基础，获得P1基因的途径有修饰________基因或合成________基因。
所获得的基因表达时是遵循中心法则的，中心法则的全部内容包括________________的复制，以及遗传信息在不同分子之间的流动，即___________________________________________________________。
（3）蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过________________与________________，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物________进行鉴定。
答案：
（1）氨基酸序列（或结构）
（2）P P1 DNA与RNA DNA→RNA、RNA→DNA、RNA→蛋白质（或转录、逆转录、翻译） （3）设计蛋白质结构 推测氨基酸序列 功能
7．我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。
下图为培育转基因水稻过程示意图，请分析回答有关问题。
（1）铁结合蛋白基因来自菜豆，且基因的脱氧核苷酸序列已知，可以用________法获得此目的基因或用________技术扩增目的基因。
（2）构建重组Ti质粒时，通常要用____________分别切割________。
将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用________处理农杆菌，使重组Ti质粒易于导入。
（3）将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得________________________；培养基3与培养基2的区别是________________。
检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因水稻____________。
（4）为研究外源基因的遗传方式，将T0代植株上收获的种子种植成T1代株系，检测各单株的青霉素抗性。
在检测的多数T1代株系内，抗青霉素植株与青霉素敏感植株的比例为3∶1，此结果说明外源基因的遗传符合________。
有少数T1代株系的所有植株都表现为对青霉素敏感，但其体内能检测到铁结合蛋白基因，造成这一结果最可能的原因是_______________________________________________。
答案：
（1）化学合成（从基因文库中获取目的基因）'PCR
（2）（同种）限制性核酸内切酶'含目的基因的DNA片段与质粒'CaCl2'（3）含有重组质粒（有青霉素抗性）的愈伤组织'生长素与细胞分裂素的浓度比例'（成熟）种子中铁含量'（4）基因分离定律'青霉素抗性基因没有表达（或青霉素抗性基因丢失）
8.（2016·贵阳期末）下图是利用基因工程方法培育抗虫棉的过程。
请据图回答相关问题：
（1）从苏云金芽孢杆菌的DNA上获取抗虫基因，需要用到的工具是______________，此工具主要是从________生物中分离纯化出来的，它能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的____________键断开。
（2）构建重组质粒时，常用Ti质粒作为载体，是因为Ti质粒上具有____________，它能把目的基因整合到受体细胞的______________上。
（3）E过程是利用____________技术完成的，要确定抗虫基因导入棉花细胞后，是否赋予了棉花抗虫特性，在个体水平上还需要做____________实验；若要检测具有抗虫基因的棉花是否产生了相应毒蛋白，在分子水平上可利用____________方法进行检测。
（4）将目的基因导入植物细胞，除采用上图中的方法外，还可采用________法与花粉管通道法。
答案：
（1）限制性核酸内切酶（限制酶）'原核 磷酸二酯'
（2）T DNA（可转移的DNA）'染色体DNA'（3）植物组织培养'抗虫（或抗病）接种'抗原—抗体杂交'（4）基因枪
9．组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。
下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（部分基因及部分限制酶作用位点已标识），据图分析：
（1）人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入________。
（2）人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的是：
第一，去除质粒上的__________________________________，保证T DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂与生长；第二，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利于________________。
第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等。
（3）若用限制酶Ⅰ分别切割改造过的理想质粒与带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒。
分别以含四环素与卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到细胞生长的现象是在含________________中能够生长，而在含________________中不能生长。
答案：
（1）启动子'
（2）产生吲哚乙酸的基因与合成细胞分裂素的基因（tet与tmr）'目的基因（或外源DNA）准确插入'（3）卡那霉素的培养基'四环素的培养基
解析：
（1）基因表达载体应含有启动子、终止子、目的基因、标记基因与复制原点。
图中的四环素抗性基因与卡那霉素抗性基因属于标记基因，目的基因尚未插入，所以很容易判断出质粒中没有启动子。
（2）从图可以看出限制酶Ⅱ将产生吲哚乙酸的基因完全切除，破坏了合成细胞分裂素的基因，从而保证T DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂与生长。
同时限制酶Ⅱ还切掉了一处限制酶Ⅰ的切点，使整个质粒只有唯一的限制酶作用位点，这样就保证了目的基因的准确插入。
（3）限制酶Ⅱ会切掉四环素抗性基因，而卡那霉素抗性基因仍然完好，所以成功导入抗虫基因的水稻胚细胞在含卡那霉素的培养基中可以生长，而在含四环素的培养基中不能生长。
10．（2016·石家庄二模）请据图回答下列问题：
（1）在培育转基因牛过程中，②过程常用的方法是____________。
转基因牛可通过分泌乳汁来生产人类生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有________，其作用是能够被________识别并结合，从而启动转录过程。
（2）prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅱ最可能是________细胞，Ⅲ代表的细胞具有________与________的特点。
（3）在抗虫棉培育过程中，需将抗虫基因（Bt毒蛋白基因）插入到Ti质粒的________上，通过农杆菌的转化作用就可以使抗虫基因进入棉花细胞。
要检测抗虫基因是否翻译成Bt毒蛋白，应从抗虫棉中提取蛋白质，并用____________方法进行检测。
答案：
（1）显微注射法'启动子'RNA聚合酶'
（2）B（浆）'无限增殖'产生特异性抗体'（3）T DNA'抗原—抗体杂交
解析：
（1）②过程是将重组基因表达载体导入受体细胞的过程，将目的基因导入动物细胞常用显微注射法。
在转录过程中，RNA聚合酶识别基因序列上首端的启动子并与之结合后开始转录，故基因的首端要有启动子。
（2）浆细胞能分泌特异性抗体，但不能无限增殖，故导入prG的浆细胞既能分泌特异性抗体，又能无限增殖。
（3）农杆菌中的Ti质粒上的T DNA可转移到受体细胞中并整合到受体细胞的染色体DNA上，故将抗虫基因插入到Ti质粒的T DNA上，通过农杆菌的转化作用就可以使抗虫基因进入棉花细胞。
可利用能与抗虫基因表达的蛋白质发生特异性结合的抗体，发生抗原—抗体反应，对目的基因表达的产物进行检测。
（2016全国卷1）40．[生物——选修3：
现代生物科技专题]（15分）
某一质粒载体如图所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活（Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因）。
有人将此质粒载体用BamHI酶切后，与用BamHI酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌，结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。
被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。
回答下列问题：
（1）质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有______________（答出两点即可）。
而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子与终止子。
（2）如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的与仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是______________；并且______________与______________的细胞也是不能区分的，其原因是_____________。
在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用含有原因是_____________的固体培养基。
（3）基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自于_____________
（2016全国卷
）40．图（a）中的三个DNA片段上以此表示出了EcoRI、BamHI与Sau3AI三种限制性内切酶的识别序列与切割位点，图（b）为某种表达载体示意图（载体上的EcoRI、Sau3AI的切点是唯一的）。
根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
（1）经BamHI酶切割得到的目的基因可以与上述表达载体被____________酶切后的产物连接，理由是____________。
（2）若某人利用图（b）所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子，如图（c）所示。
这三种重组子中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有____________，不能表达的原因是____________。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有____________与____________，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是____________。
【参考答案】
（1）Sau3AⅠ限制酶Sau3AⅠ与BamHⅠ切割后形成的黏性末端相同
（2）甲、丙在基因表达载体中，启动子应位于目的基因的首端，终止子应位于目的基因的尾端，这样目的基因才能表达。
图中甲、丙均不符合，所以不能表达目的基因的产物
（3）E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶T4DNA连接酶
（2016江苏卷）33.（9分）下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。
请回答下列问题：
（1）用图中质粒与目的基因构建重组质粒，应选用______两种限制酶切割，酶切后的载体与目的基因片段，通过__________酶作用后获得重组质粒。
为了扩增重组质粒，需将其转入处于__________________态的大肠杆菌。
（2）为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加__________，平板上长出的菌落，常用PCR鉴定，所用的引物组成为图2中_____________。
（3）若BamHI酶切的DNA末端与BclI酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为，对于该部位，这两种酶（填“都能”、“都不能”或“只有一种能”）切开。
（4）若用Sau3AI切图1质粒最多可能获得种大小不同的DNA片段。
【答案】
（1）BclI与HindⅢ连接感受
（2）四环素引物甲与引物丙
（3）
都不能（4）7
【解析】
（1）选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点，但BamHI可能使质粒中启动丢失，因此可能选BclI与HindⅢ。
酶切后的载体与目的基因片段，通过DNA连接酶作用后获得重组质粒。
为了扩增重组质粒，需将其转入处于感受态的大肠杆菌。
（2）为了筛选出转入重组质粒的大肠杆菌，根据质粒上的抗性基因，应在筛选平板培养基中添加四环素。
PCR技术要求两种引物分别与目的基因的两条单链结合，沿相反的方向合成子链。
（3）根据BamH I与BclI的酶切点，BamHI酶切的DNA末端与BclI酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为
，与两种酶的酶切位点均不同。
（4）根据BamHI、BclI与Sau3AI的酶切位点，Sau3AI在质粒上有三个酶切位点，完全酶切可得到记为A、B、C三种片段，若部分位点被切开，可得到AB、AC、BC、ABC四种片段，所以用Sau3AI切图1质粒最多可能获得7种大小不同的DNA片段。
（2015重庆卷，6，6分）6.下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述，正确的是
B.表达载体的复制与胰岛素基因的表达均启动于复制原（起）点
【答案】C
【解析】由于胰岛素基因只在胰岛B细胞中表达，因此在肝细胞中无胰岛素基因的转录产物mRNA，A项错误；胰岛素基因的转录启动于启动子，而不是复制原点，B项错误；抗生素抗性基因可作为标记基因在含有抗生素的培养基中将受体细胞筛选出来，C项正确；终止密码子位于信使RNA，不位于DNA上，启动子与终止子均在胰岛素基因转录中起作用；
（2015年北京，5）在应用农杆菌侵染植物叶片获得转基因植株的常规实验步骤中，不需要的是（）
A、用携带目的基因的农杆菌侵染植物细胞
B、用选择培养基筛法导入目的基因的细胞
C、用聚乙二醇诱导转基因细胞的原生物质融合
D、用适当比例的生长素与细胞分裂素诱导愈伤组织生芽
【答案】C
（2015年广东，25双选）图9为培育转基因山羊生产人贝塔B-酪蛋白的流程图
下列叙述正确的是AC
A．过程
所用的人贝塔B-酪蛋白基因可从人C-DNA文库中获得
B.过程
可选用囊胚期或原肠胚期的胚胎进行移植
C．过程
可使用胚胎分割技术扩大转基因山羊群体
D．过程
人贝塔B-酪蛋白基因在细胞质内进行转录、翻译
（2015新课标卷Ⅱ，40，15分）40.【生物——选修3：
现代生物科技专题】（15分）
已知生物体内有一种蛋白质（P），该蛋白质是一种转运蛋白，由305个氨基酸组成。
如果将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸，240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸，改变后的蛋白质（P1）不但保留P的功能，而且具有了酶的催化活性。
回答下列问题：
从上述资料可知，若要改变蛋白质的功能，可以考虑对蛋白质的进行改造。
以P基因序列为基础，获得P1基因的途径有修饰基因或合成基因。
所获得的基因表达时是遵循中心法则的，中心法则的全部内容包括的复制；以及遗传信息在不同分子之间的流动，即：
。
蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过
与，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物进行鉴定。
【答案】
（1）氨基酸序列（或结构）（1分，其他答案合理也给分）
（2）PP1（每空2分，共4分）DNA与RNA（或遗传物质）（2分）DNA→RNA、RNA→DNA
RNA→蛋白质（或转录、逆转录、翻译）（3分）
（3）设计蛋白质的结构推测氨基酸序列（每空2分，共4分）功能（1分）
【解析】本题考查蛋白质工程相关知识，难度较小。
（1）对蛋白质的 氨基酸序列（或结构）进行改造，可达到改变蛋白质的功能的目的。
（2）以P基因序列为基础，获得P1基因，可以对P基因进行修饰改造，也可以用人工方法合成P1基因；中心法则的全部内容包括 DNA的复制、DNA→RNA、RNA→DNA、RNA→蛋白质（或转录、逆转录、翻译）。
（3）蛋白质工程的基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过设计蛋白质结构与推测氨基酸序列，推测相应的核苷酸序列，并获取基因。
经表达的蛋白质，要对其进行生物功能鉴定。
（2015新课标卷Ⅰ，40，15分）40.[生物——选修3：
现代生物科技专题]
HIV属于逆转录病毒，是艾滋病的病原体。
回答下列问题：
（1）用基因工程方法制备HIV的某蛋白（目的蛋白）时，可先提取HIV中的，以其作为模板，在的作用下合成。
获取该目的蛋白的基因，构建重组表达载体，随后导入受体细胞。
（2）从受体细胞中分离纯化出目的蛋白，该蛋白作为抗原注入机体后，刺激机体产生的可与此蛋白结合的相应分泌蛋白是。
该分泌蛋白可用于检测受试者血清中的HIV，检测的原理是。
（3）已知某种菌导致的肺炎在健康人群中罕见，但是在艾滋病患者中却多发。
引起这种现象的根本原因是HIV主要感染与破坏了患者的部分细胞，降低了患者免疫系统的防卫功能。
（4）人的免疫系统有癌细胞的功能，艾滋病患者由于免疫功能缺陷，易发生恶性肿瘤。
【答案】
（1）RNA逆转录酶cDNA（或DNA）
（2）抗体抗原抗体特异性结合（3）T（或T淋巴）（4）监控与清除
【解析】
（1）HIV属于逆转录病毒，它的遗传物质是RNA，在逆转录酶的作用下可以逆转录为cDNA，用于构建基因表达载体，从而制备HIV的某蛋白。
（2）HIV的某蛋白作为抗原进入机体后，能刺激人体产生针对该抗原的一种特殊的分泌蛋白——抗体；可用该抗体进行抗原—抗体进行杂交来检测血清中是否含有HIV。
（3）HIV病毒营寄生生活，寄生在T淋巴细胞内，T细胞参与体液免疫与细胞免疫，因此少了T细胞，特异性免疫几乎全部丧失，降低了机体的免疫功能。
（4）人体的免疫系统具有防卫、监控与清除的功能，可及时清除体内产生的癌细胞，艾滋病患者的整个免疫功能缺陷，机体会发生一系列顽固性机会感染与肿瘤的发生。
（2015年海南，31．【生物－选修3：
现代生物科技专题】（15分）在体内，人胰岛素基因表达可合成出一条称为前胰岛素原的肽链，此肽链在内质网中经酶甲切割掉氨基端一段短肽后成为胰岛素原，进入高尔基体的胰岛素原经酶乙切割去除中间片段C后，产生A、B两条肽链，再经酶丙作用生成由51个氨基酸残基组成的胰岛素。
目前，利用基因工程技术可大量生产胰岛素。
回答下列问题：
（1）人体内合成前胰岛素原的细胞是＿＿＿＿＿，合成胰高血糖素的细胞是＿＿＿＿＿。
（2）可根据胰岛素原的氨基酸序列，设计并合成编码胰岛素原的＿＿＿＿＿序列，用该序列与质粒表达载体构建胰岛素原基因重组表达载体。
再经过细菌转化、筛选及鉴定，即可建立能稳定合成＿＿＿＿＿的基因工程菌。
（3）用胰岛素原抗体检测该工程菌的培养物时，培养液无抗原抗体反应，菌体有抗原抗体反应，则用该工程菌进行工业发酵时，应从＿＿＿＿＿中分离、纯化胰岛素原。
胰岛素原经酶处理便可转变为胰岛素。
【答案】
（1）胰岛B细胞胰岛A细胞
（2）DNA序列胰岛素原（3）菌体
【解析】
（1）由题意可知，前胰岛素原在细胞内经加工后成为胰岛素，人体合成胰岛素的细胞是胰岛B细胞，所以合成前胰岛素原的细胞也是胰岛B细胞；合成胰高血糖素的细胞是胰岛A细胞。
（2）根据胰岛素原的氨基酸序列，可设计并合成编码胰岛素原的DNA序列（即目的基因）；用该序列与质粒表达载体构建胰岛素原基因重组表达载体，再经过细菌转化、筛选及鉴定，即可建立能稳定合成人胰岛素原的基因工程菌。
（3）
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