生化考研重点知识总结汇编.docx
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生化考研重点知识总结汇编
生化考研重点知识总结
第一章单糖
①多糖与碘显色,至少需要的葡萄糖残基数:
6
②唾液淀粉酶激活剂:
Cl-
③几个典型非还原糖:
蔗糖、糖原、淀粉
④形成N-糖肽键的单糖或衍生物是:
第二章油脂
①几个非饱和脂肪酸双键数:
⑴油酸:
1
⑵亚油酸:
2
⑶亚麻酸:
3
②人不能自身合成的必须脂肪酸:
亚油酸、亚麻酸
③四种脂类转运脂蛋白:
⑴CM:
乳糜微粒,转运外源性三酰甘油酯
⑵VLDL:
极低密度脂蛋白,转运内源性三酰甘
油酯
⑶LDL:
低密度脂蛋白,转运内源性胆固醇
⑷HDL:
高密度脂蛋白,转运外源性胆固醇
第三章氨基酸与蛋白质
①几种主要氨基酸及三字母缩写
⑴两特殊:
Pro、Gly
⑵芳香:
酪(Tyr)色(Trp/Try,吸光最强)苯(Phe)
⑶八种必需氨基酸:
甲携来一本亮色书,Met/Val/Lys/Ile/Phe/Leu/Trp/Thr
⑷侧链为羟基氨基酸:
苏(Thr)丝(Ser)酪(Tyr)
⑸酸性氨基酸:
天(Asp)谷(Glu)※对应两酰胺:
Asn、Gln
⑹碱性氨基酸:
赖(Lys)精(Arg)组(His)
⑺其它:
丙氨酸(Ala)
②PI
⑴PI的计算:
PI=(PK1+PK2)/2=(PK1+PKRCOOH)/2=(PK2+PKRNH2)/2
⑵PH的计算:
PH=PK1+Lg(R/R+)=PK2+Lg(R-/R)
⑶PH=7的水中溶蛋白,PH=6,则该蛋白PI<6:
蛋白溶后PH下降为6,表明蛋白的COOH电离出H+,则产生了R-,PH=6>PI时有R-
③蛋白二级结构
⑴α螺旋:
Sn=3.613,存在Pro时不形成α螺旋,右手螺旋
⑵β折叠:
同/反向,肽键中H与O成氢键,轴距0.35nm
⑶β转角:
转角处为Gly
④超二级结构:
无规卷曲、结构域
⑤三级结构:
作用力(二硫键、疏水作用力、氢键、静电离子键、范德华力)
⑥蛋白结构分析
⑴N端分析法:
FDNB(Sanger)、PITC(Edman)、DNS-Cl(丹磺酰氯)、氨肽酶法
⑵C端分析法:
羧肽酶法、无水肼解法※羧肽酶A:
不能水解C端为Lys、Arg、Pro的肽键;羧肽酶B:
能水解C端为Lys、Arg的肽键;C端倒数第二位是Pro时,A、B都不能水解
⑶打开二硫键:
还原法(巯基化合物,碘乙酸保护)、氧化法(过甲酸)
⑷专一切断:
胰蛋白酶(Lys、Arg-COOH肽键);CNBr(Met-COOH肽键);胰凝乳蛋白酶();
⑦显色反应
⑴Follin酚:
蓝色,酚基(Tyr)、吲哚基(Trp),组分(CuSO4+磷钼酸)
⑵Millon:
红色,酚基(Tyr),组分(HgNO3+Hg(NO3)2)
⑶坂口反应:
红色,胍基(Arg),组分(α萘酚,NaClO)
⑷黄色反应:
黄色,芳香氨基酸,组分(浓HNO3)
⑸双缩脲反应:
紫红色,肽键,多肽,组分(NaOH+CuSO4)
⑹乙醛酸反应:
紫色,吲哚基(Trp)
⑧几种重要氨基酸
⑴提供活性甲基的:
S-腺苷Met
⑵形成N-糖肽键的:
Asp
⑶胶原蛋白中含量高的氨基酸:
Gly、Ala、Pro、HO-Pro、HO-Lys
⑨蛋白分离纯化技术:
透析、超滤;密度梯度离心;凝胶过滤;PI法、盐析、有机溶剂法;电泳、离子交换;吸附层析;亲和层析
※凝胶过滤大分子先出,凝胶电泳相反:
机理
△分子运动速度决定因素:
大小、电荷量、形状
※蛋白离子交换层析与洗脱:
※凝胶电泳三效应:
电荷、分子筛、浓度效应
⑩蛋白含量测定
⑴测N:
凯氏定氮、紫外吸光、双缩脲吸光、福林酚显色吸光
⑵测M:
沉降离心、凝胶过滤(凝胶排阻层析)、SDS-PAGE
※凯氏定氮:
HNO2反应,生成的N2中氨基酸占1/2
⑾其它
⑴分离二硫基的肽段可用:
SDS-PAGE
⑵几个主要氨基酸的PI值:
⑶几种重要蛋白:
⑷镰刀贫血病:
Glu→Val,第6位
⑸与烷化剂(碘乙酸)反应的氨基酸:
Cys(半胱氨酸)
第四章酶学
①酶活化中心组成:
结合部位、催化部位
②计算:
活力单位(IU、Kat)、比活力(IU/mg)、转化数/转化周期、米氏方程
③各可逆抑制作用的动力学特点:
Km、Vmax
※几个抑制作用:
竞争抑制(丙二酸对琥珀酸脱氢酶);有有机磷(与丝氨酸羟基共价不可逆);CO、CN(作用于Cytaa3);不可逆抑制(重金属、有机砷、CN化物、硫化物、CO)
④酶促反应初速度与[E]、T有关
⑤以“三点结合”模型作用的酶:
甘油激酶
⑥酶的专一性
⑴专一水解葡萄糖形成的二酯键的酶:
⑵以O2为直接氢受体的氧化酶:
VC氧化酶、细胞色素氧化酶
⑦别构酶
⑴两独立功能部位:
活性中心、变构中心
⑵动力学曲线:
S型,其它为双曲线
⑶具有效应:
协同效应、变构效应
※典型代表—血红蛋白:
协同效应、波尔效应、变构效应
⑧酶分离纯化
⑴要求:
纯化倍数高、回收率高
※纯化倍数=比活力/纯化前总比活力
回收率=活力单位数/纯化前活力单位数
⑵方法:
同蛋白质
⑨竞争性抑制剂:
增[S]可减弱抑制作用
⑩患尿黑酸症的病人是由于:
缺少尿黑酸氧化酶(尿黑酸氧化酶遗传缺陷)
第五章核酸
①反向互补配对:
ACG-CGT(U)
②N-苷键:
Ψ(C1‘-C5),嘌呤(N9-C1‘),嘧啶(N1-C1’)
③SnRNA:
核仁不均一RNA,功能(促进转录、)
④核酸分离技术
2凝胶电泳:
三效应、分子运动速度决定因素见蛋白质
⑵离子交换层析:
阳离子交换层析,核苷酸脱下顺序:
U→G→C→A
阴离子交换层析,核苷酸脱下顺序:
C→A→U→G
3亲和层析:
可用亲和层析法分离的核酸:
mRNA(PolyA尾)
⑤DNA测序三法:
加减法(Sanger、1975),化学断裂法,双脱氧终止法(Sanger、1977、原理)
⑥不能形成两性离子的核苷酸是UMP:
原因
⑦cNMP
⑴最重要的cNMP:
cAMP、cGMP
⑵cAMP:
第二信使
⑷cAMP分子内有:
环化的磷酸二酯键
cAMP与cGMP:
生物作用并不是完全相反
第六章分子生物学与基因工程
①基因组学
⑴启动子组成3部分:
识别部位(-35、CG/CAAT),结合部位(-10、TATA),转录起始点
⑵高度重复序列:
卫星DNA、小卫星DNA、微卫星DNA
⑶原核生物基因重叠类型:
⑷基因家族按特点分三类:
简单多基因家族、复杂多基因家族、发育调控的复杂多基因家族
基因家族按组成分三类:
②DNA复制
⑴DNA复制方式:
线性(眼型),环状【θ(大肠杆菌)、滚环(病毒质粒)、D型(线粒
体、叶绿体)】
⑵DNA复制需引物:
转录不需引物
※原核DNA聚合酶功能:
损伤修复、校正、合成DNA
③基因工程酶
⑴RNase:
RNaseA(嘧啶3’→5’)、RNaseT1(G的3’→5’)、RNaseT2(A的3’→5’)
⑵DNA连接酶所需能量:
原核ATP、真核NAD+
⑶转移水解DNA-RNA中的RNA的酶:
RNaseH、逆转录酶(有RNaseH活性)
⑷牛脾磷酸二酯酶水解RNA所得产物:
5’磷酸切开,产生3’单磷酸核苷
⑸蛇毒磷酸二酯酶水解RNA所得产物:
3’-OH切开,产生5’单磷酸核苷
⑹核酸合成酶:
DDDP(依赖DNA的DNA聚合酶)、RDDP(依赖RNA的DNA聚合酶)、DDRP(依赖DNA的RNA聚合酶)
⑺RNAPol2:
RNAPolB,合成hnRNA,分布在核质中
⑻RNA用强碱水解产生:
2’-核苷酸、3’-核苷酸混合物
⑼限制内切酶切割特点:
4-8bp、6bp主要,成黏性、平齐末端,成回文序列,甲基化难切
④tRNA结构
⑴含稀有碱基最多:
D(二氢尿嘧啶)、ψ(假尿嘧啶)、I(次黄嘌呤)
⑵四环四臂五区:
D臂、TψC臂、氨基酸臂(受体臂)、反密码子臂
⑶二级:
三叶草
⑷三级:
倒L
⑤基因表达
⑴DNA重组过程中DNA连接四方式:
粘性末端连接、同聚物加尾法、加衔接物连接法、加
DNA接头连接法
⑵转位:
三类转位因子【(插入序列IS)、转座子(Tn)、可转座噬菌体】,转位后遗传
效应(突变、产生新基因、染色体畸变)
⑶转录:
转录5’端常见起始核苷酸是G、A,原核终止子在终止位点前有PolyU
⑷翻译:
参与肽链延伸的因子(EF-Tu、EF-TS、移位酶/G因子),肽基转移酶催化组分(23SrRNA),蛋白合成时生成肽键的能量来自高能酯键水解
⑸转录抑制剂:
利福平、利迪链霉素、放线素D、α-鹅膏蕈碱
⑹翻译抑制剂:
抗生素(氯霉素、链霉素、卡那霉素、新霉素、四环素、土霉素)※机理
干扰素(使起始因子eIF2磷酸化失活),毒素(抑制真核肽链延长)
⑥基因工程
⑴基因工程载体:
必备条件(自主复制、有标志基因便于筛选、易引入受体细胞、酶切位
点少、M大可携带大片基因)
常用载体(质粒、病毒、噬菌体、人工大染色体改造而来)
⑵DNA文库:
含某种生物体全部被转录成mRNA的所有基因序列
⑦密码子
⑴起始密码子:
原核(AUG、GUG、UUG,对应fMet)真核(AUG,对应Met)
※起始tRNA:
tRNAMet、tRNAfMet
⑵终止密码子:
UAA、UAG、UGA
⑶无义密码子:
UAA、UAG、UGA
⑷线粒体中三种特殊密码子:
UGA-色氨酸
⑸原核RF1识别的密码子:
UAA、UAX※RF2识别的密码子:
UAA、UGA
⑹密码子性质:
不重叠、特殊性、通用性、简并性、连续性、摆动性
※摆动性:
A-U,U-A、G,C-G,G-C、U,I-A、U、C
⑧其它
⑴SnRNA功能:
RNA成熟加工、与染色质结合、调节基因活性
⑵多拷贝基因有:
组蛋白基因、
⑶3种印迹法对应检测对象:
S-DNA、N-RNA、W-Pro
⑸Tm的影响三因素:
C三G、盐浓度(Na+)、DNA均一性(均一→窄)
Tm=(C+G)%×0.41+69.3
第七章维生素与激素
①几种重要酶的辅酶
⑴脱羧酶:
α酮酸脱羧酶(TPP/VB1)、氨基酸脱羧酶(磷酸吡哆醛(VB6)
※磷酸吡哆醛:
氨基酸脱羧酶、转氨酶的辅酶
⑵以FAD为辅酶的酶:
二氢硫辛酰胺脱氢酶、脂酰辅酶A脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、线粒体α磷酸甘油脱氢酶
⑶羧化酶的辅酶:
生物素(VB7)
⑷VB12:
钴胺素(参与甲基转移)
⑸氧化还原酶的辅酶:
NAD+
⑹以NADP为辅酶的酶:
苹果酸酶、6-p-G脱氢酶
⑺以FAK为辅酶的酶:
脂酰辅酶A脱氢酶
②几种特定功能的维生素
⑴凝血维生素:
VK,脂溶
⑵抗血维生素:
VC,水溶
⑶含A的维生素:
NAD+、NADP、FAD、CoASH
※VD:
体内活性最高的VD是:
1,25-二羟基胆钙化醇[1,25-(OH)2D3]
两种VD原:
VD3(7-脱氢胆固醇),VD2(麦角固醇)
VD3的形成:
胆固醇→7-脱氢胆固醇→VD3
③胰岛素等激素的受体是:
④含N激素受体在激素作用下与腺苷酸环化酶的耦联是由G蛋白介导实现的
⑤蛋白质类激素受体位于:
细胞质膜上
⑥类固醇激素受体位于:
细胞内
第八章生物氧化
①肌肉或神经细胞储存能量的高能化合物是:
磷酸肌酸(IP3)
②高能化合物有:
磷酸肌酸、1,3-二磷酸甘油酸、磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)、
③生物合成中主要的还原剂;NADPH,来源于HMS(磷酸戊糖途径/磷酸己糖旁路)
④生物氧化过程中,ATP生成方式:
底物水平磷酸化、氧化磷酸化
⑤线粒体的嵴:
外表面与基质接触,含有氧化磷酸化组分
⑥ATP合成酶
⑴F0F1-ATPase是:
催化ATP合成的酶形式,一种膜结合复合物,单独存在时没ATP酶活性
⑵F0:
含H+通道
⑦ATP合成机理
⑧细胞质脱下的一对氢进入线粒体的三方式:
异柠檬酸穿梭、苹果酸穿梭、甘油磷酸穿梭
⑨丙氨酸脱氢酶系的辅因子:
TPP(VB1)、CoASH、FAD、NAD+、硫辛酸、Mg2+
丙氨酸脱氢酶系的酶:
丙酮酸脱羧酶、硫辛酸乙酰转移酶、二氢硫辛酸脱氢酶
⑩醛缩酶的底物是:
F-1,6-2P
⑾在TCA、有氧呼吸链中产生的ATP最多的是:
α-酮戊二酸→琥珀酸
第九章糖代谢
㈠糖酵解
①部位:
胞液
②过程:
葡萄糖、糖元转变为丙酮酸
③三关键酶:
⑴己糖激酶:
包括(葡糖糖激酶、果糖激酶),不受ATP/AMP的调节
⑵磷酸果糖激酶:
限速,主要激活剂(2,6-二磷酸果糖),抑制剂(ATP、柠檬酸)
⑶丙酮酸激酶:
受ATP/AMP的抑制
④产能:
2ATP
⑤醛缩酶的底物:
F-1,6-P2(1,6-二磷酸果糖)
※糖代谢中既催化脱氢又催化脱羧的两种酶:
异柠檬酸脱氢酶、6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶
㈡糖的有氧氧化
①丙酮酸→乙酰辅酶A:
⑴部位:
线粒体内膜
⑵丙酮酸脱氢酶系:
3酶(丙酮酸脱羧酶、硫辛酸乙酰转移酶、二氢硫辛酸脱氢酶)
5辅(TPP(VB1)、CoASH、FAD、NAD+、硫辛酸、Mg2+)
②TCA循环:
柠檬酸循环、Krebs循环
⑴调节TCA循环运转最主要的酶:
异柠檬酸脱氢酶(限速)、α-酮戊二酸脱氢酶系
⑵部位:
线粒体基质、内膜
⑶酶:
柠檬酸合酶、异柠檬酸脱氢酶(限速)、α-酮戊二酸脱氢酶系
③1分子葡萄糖有氧氧化产生ATP数:
36(38)=2+6(4)+6+24
④草酰乙酸来源三途径:
苹果酸酶和苹果酸脱氢酶、丙酮酸脱羧酶、磷酸丙酮酸脱羧酶
㈢磷酸戊糖途径、磷酸己糖旁路HMS
①核糖的分解途径是:
HMS
②生物合成中除ATP供能外
⑴合成糖还需:
UTP
⑵合成脂肪还需:
GTP
⑶生物合成的还原力是NADPH,来源是HMS
※反应部位总结
糖酵解(EMP):
胞质
TCA:
线粒体基质、内膜
氧化磷酸化:
线粒体内膜
㈣糖元代谢
①合成糖元时,葡萄糖先活化成:
UDPG
②植物合成淀粉时需:
ADPG
③合成蔗糖需:
UDPG、6-P-G
㈤糖异生
第十章脂代谢
㈠三酰甘油代谢
①分解代谢
⑴β-氧化:
反应部位:
线粒体基质
产物:
偶数碳(乙酰CoA)、奇数碳(几个乙酰CoA+1个丙酰CoA)
反应过程:
二步脱氢(生成1FADH2+1NADH)、产ATP(5个)
⑵饱和脂肪酸分解
※酮体
生成部位:
肝内
成分:
乙酰乙酸、β-羟丁酸、丙酮
利用部位:
肝外,脑、肌
⑶不饱和脂肪酸氧化分解:
两特殊酶:
顺-反烯酯酰CoA异构酶、顺-反-β羟酯酰CoA异构酶
1分子软脂酸(16C)彻底氧化分解成CO2、H2O生成ATP数:
②脂肪酸合成
⑴脂肪酸合成代谢还原力是NADPH,来源是HMS
⑵催化胞液脂肪酸合成的限速反应由乙酰CoA羧化酶催化
⑶酰基载体为ACP,β-氧化中酰基载体是乙酰CoA
㈡磷脂代谢
①合成磷脂所需能量来自:
CTP
㈢胆固醇代谢
①在体内可直接合成胆固醇的化合物是:
脂酰CoA
第十一章氨基酸与蛋白质代谢
①几种氨基酸
⑴生酮氨基酸:
Leu、Lys
⑵生糖氨基酸:
除Leu、Lys外的
⑶生酮兼生糖氨基酸:
Phe、Tyr、Trp、Thr、Ile、Lys
⑷可转变为乙酰CoA的氨基酸:
⑸能与糖链发生糖基化的氨基酸:
②脱氨基
⑴氧化脱氨基:
L-Glu
⑵联合脱氨基:
组织中
⑶嘌呤核苷酸循环:
骨骼肌、心肌中
③直接排氨的动物:
水生动物(鱼)、原生动物
④氨的代谢
⑴氨的储存与转运:
储存方式:
转运方式:
丙氨酸-葡萄糖循环、谷氨酰胺-谷氨酸循环
※骨骼肌中脱氨基产生的氨通过什么途径转入肝脏:
丙氨酸-葡萄糖循环
⑵氨的去路-鸟氨酸循环(尿素循环)
部位:
肝(线粒体、胞质)
终产物:
尿素
关键酶:
※鸟氨酸循环生成尿素的前体是:
Arg
产物-尿素中N的来源:
N2-Asp
⑤个别氨基酸的代谢
⑴组胺的形成:
His脱羧
第十二章核苷酸代谢
㈠核苷酸合成代谢
①嘌呤碱基与嘧啶碱基中各原子来源
⑴嘌呤碱基
N1-Asp
C2、C8-C1(一碳单位)
N3、N9-Gln
C4、C5、N7-Gly
C6-CO2
⑵嘧啶碱基
C2-CO2
N3-Gln
N1、C4、C5、C6-Asp
②脱氧核苷酸的合成
⑴脱氧发生在NDP(核苷二磷酸)水平
⑵dTMP生成发生在NMP水平
※合成嘌呤需氨基酸:
Asp、Gln、Gly
合成嘧啶需氨基酸:
Gln、Asp
嘧啶核苷酸合成的重要中间产物是:
OMP
㈡核苷酸分解代谢
①嘌呤分解代谢
⑴人体嘌呤分解代谢主要终产物:
尿酸
⑵人、猿以外哺乳动物嘌呤代谢终产物:
尿囊素
※代谢综合总结:
联系糖、脂、蛋白三大物质代谢的关键物质是:
乙酰CoA、丙酮酸
氨甲蝶呤抑制:
嘌呤核苷酸、胸腺嘧啶核苷酸的从头合成