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生化考研重点知识总结汇编

生化考研重点知识总结

第一章单糖

①多糖与碘显色,至少需要的葡萄糖残基数:

6

②唾液淀粉酶激活剂:

Cl-

③几个典型非还原糖:

蔗糖、糖原、淀粉

④形成N-糖肽键的单糖或衍生物是:

第二章油脂

①几个非饱和脂肪酸双键数:

⑴油酸:

1

⑵亚油酸:

2

⑶亚麻酸:

3

②人不能自身合成的必须脂肪酸:

亚油酸、亚麻酸

③四种脂类转运脂蛋白:

⑴CM:

乳糜微粒,转运外源性三酰甘油酯

⑵VLDL:

极低密度脂蛋白,转运内源性三酰甘

油酯

⑶LDL:

低密度脂蛋白,转运内源性胆固醇

⑷HDL:

高密度脂蛋白,转运外源性胆固醇

第三章氨基酸与蛋白质

①几种主要氨基酸及三字母缩写

⑴两特殊:

Pro、Gly

⑵芳香:

酪(Tyr)色(Trp/Try,吸光最强)苯(Phe)

⑶八种必需氨基酸:

甲携来一本亮色书,Met/Val/Lys/Ile/Phe/Leu/Trp/Thr

⑷侧链为羟基氨基酸:

苏(Thr)丝(Ser)酪(Tyr)

⑸酸性氨基酸:

天(Asp)谷(Glu)※对应两酰胺:

Asn、Gln

⑹碱性氨基酸:

赖(Lys)精(Arg)组(His)

⑺其它:

丙氨酸(Ala)

②PI

⑴PI的计算:

PI=(PK1+PK2)/2=(PK1+PKRCOOH)/2=(PK2+PKRNH2)/2

⑵PH的计算:

PH=PK1+Lg(R/R+)=PK2+Lg(R-/R)

⑶PH=7的水中溶蛋白,PH=6,则该蛋白PI<6:

蛋白溶后PH下降为6,表明蛋白的COOH电离出H+,则产生了R-,PH=6>PI时有R-

③蛋白二级结构

⑴α螺旋:

Sn=3.613,存在Pro时不形成α螺旋,右手螺旋

⑵β折叠:

同/反向,肽键中H与O成氢键,轴距0.35nm

⑶β转角:

转角处为Gly

④超二级结构:

无规卷曲、结构域

⑤三级结构:

作用力(二硫键、疏水作用力、氢键、静电离子键、范德华力)

⑥蛋白结构分析

⑴N端分析法:

FDNB(Sanger)、PITC(Edman)、DNS-Cl(丹磺酰氯)、氨肽酶法

⑵C端分析法:

羧肽酶法、无水肼解法※羧肽酶A:

不能水解C端为Lys、Arg、Pro的肽键;羧肽酶B:

能水解C端为Lys、Arg的肽键;C端倒数第二位是Pro时,A、B都不能水解

⑶打开二硫键:

还原法(巯基化合物,碘乙酸保护)、氧化法(过甲酸)

⑷专一切断:

胰蛋白酶(Lys、Arg-COOH肽键);CNBr(Met-COOH肽键);胰凝乳蛋白酶();

⑦显色反应

⑴Follin酚:

蓝色,酚基(Tyr)、吲哚基(Trp),组分(CuSO4+磷钼酸)

⑵Millon:

红色,酚基(Tyr),组分(HgNO3+Hg(NO3)2)

⑶坂口反应:

红色,胍基(Arg),组分(α萘酚,NaClO)

⑷黄色反应:

黄色,芳香氨基酸,组分(浓HNO3)

⑸双缩脲反应:

紫红色,肽键,多肽,组分(NaOH+CuSO4)

⑹乙醛酸反应:

紫色,吲哚基(Trp)

⑧几种重要氨基酸

⑴提供活性甲基的:

S-腺苷Met

⑵形成N-糖肽键的:

Asp

⑶胶原蛋白中含量高的氨基酸:

Gly、Ala、Pro、HO-Pro、HO-Lys

⑨蛋白分离纯化技术:

透析、超滤;密度梯度离心;凝胶过滤;PI法、盐析、有机溶剂法;电泳、离子交换;吸附层析;亲和层析

※凝胶过滤大分子先出,凝胶电泳相反:

机理

△分子运动速度决定因素:

大小、电荷量、形状

※蛋白离子交换层析与洗脱:

※凝胶电泳三效应:

电荷、分子筛、浓度效应

⑩蛋白含量测定

⑴测N:

凯氏定氮、紫外吸光、双缩脲吸光、福林酚显色吸光

⑵测M:

沉降离心、凝胶过滤(凝胶排阻层析)、SDS-PAGE

※凯氏定氮:

HNO2反应,生成的N2中氨基酸占1/2

⑾其它

⑴分离二硫基的肽段可用:

SDS-PAGE

⑵几个主要氨基酸的PI值:

⑶几种重要蛋白:

⑷镰刀贫血病:

Glu→Val,第6位

⑸与烷化剂(碘乙酸)反应的氨基酸:

Cys(半胱氨酸)

第四章酶学

①酶活化中心组成:

结合部位、催化部位

②计算:

活力单位(IU、Kat)、比活力(IU/mg)、转化数/转化周期、米氏方程

③各可逆抑制作用的动力学特点:

Km、Vmax

※几个抑制作用:

竞争抑制(丙二酸对琥珀酸脱氢酶);有有机磷(与丝氨酸羟基共价不可逆);CO、CN(作用于Cytaa3);不可逆抑制(重金属、有机砷、CN化物、硫化物、CO)

④酶促反应初速度与[E]、T有关

⑤以“三点结合”模型作用的酶:

甘油激酶

⑥酶的专一性

⑴专一水解葡萄糖形成的二酯键的酶:

⑵以O2为直接氢受体的氧化酶:

VC氧化酶、细胞色素氧化酶

⑦别构酶

⑴两独立功能部位:

活性中心、变构中心

⑵动力学曲线:

S型,其它为双曲线

⑶具有效应:

协同效应、变构效应

※典型代表—血红蛋白:

协同效应、波尔效应、变构效应

⑧酶分离纯化

⑴要求:

纯化倍数高、回收率高

※纯化倍数=比活力/纯化前总比活力

回收率=活力单位数/纯化前活力单位数

⑵方法:

同蛋白质

⑨竞争性抑制剂:

增[S]可减弱抑制作用

⑩患尿黑酸症的病人是由于:

缺少尿黑酸氧化酶(尿黑酸氧化酶遗传缺陷)

第五章核酸

①反向互补配对:

ACG-CGT(U)

②N-苷键:

Ψ(C1‘-C5),嘌呤(N9-C1‘),嘧啶(N1-C1’)

③SnRNA:

核仁不均一RNA,功能(促进转录、)

④核酸分离技术

2凝胶电泳:

三效应、分子运动速度决定因素见蛋白质

⑵离子交换层析:

阳离子交换层析,核苷酸脱下顺序:

U→G→C→A

阴离子交换层析,核苷酸脱下顺序:

C→A→U→G

3亲和层析:

可用亲和层析法分离的核酸:

mRNA(PolyA尾)

⑤DNA测序三法:

加减法(Sanger、1975),化学断裂法,双脱氧终止法(Sanger、1977、原理)

⑥不能形成两性离子的核苷酸是UMP:

原因

⑦cNMP

⑴最重要的cNMP:

cAMP、cGMP

⑵cAMP:

第二信使

⑷cAMP分子内有:

环化的磷酸二酯键

cAMP与cGMP:

生物作用并不是完全相反

第六章分子生物学与基因工程

①基因组学

⑴启动子组成3部分:

识别部位(-35、CG/CAAT),结合部位(-10、TATA),转录起始点

⑵高度重复序列:

卫星DNA、小卫星DNA、微卫星DNA

⑶原核生物基因重叠类型:

⑷基因家族按特点分三类:

简单多基因家族、复杂多基因家族、发育调控的复杂多基因家族

基因家族按组成分三类:

②DNA复制

⑴DNA复制方式:

线性(眼型),环状【θ(大肠杆菌)、滚环(病毒质粒)、D型(线粒

体、叶绿体)】

⑵DNA复制需引物:

转录不需引物

※原核DNA聚合酶功能:

损伤修复、校正、合成DNA

③基因工程酶

⑴RNase:

RNaseA(嘧啶3’→5’)、RNaseT1(G的3’→5’)、RNaseT2(A的3’→5’)

⑵DNA连接酶所需能量:

原核ATP、真核NAD+

⑶转移水解DNA-RNA中的RNA的酶:

RNaseH、逆转录酶(有RNaseH活性)

⑷牛脾磷酸二酯酶水解RNA所得产物:

5’磷酸切开,产生3’单磷酸核苷

⑸蛇毒磷酸二酯酶水解RNA所得产物:

3’-OH切开,产生5’单磷酸核苷

⑹核酸合成酶:

DDDP(依赖DNA的DNA聚合酶)、RDDP(依赖RNA的DNA聚合酶)、DDRP(依赖DNA的RNA聚合酶)

⑺RNAPol2:

RNAPolB,合成hnRNA,分布在核质中

⑻RNA用强碱水解产生:

2’-核苷酸、3’-核苷酸混合物

⑼限制内切酶切割特点:

4-8bp、6bp主要,成黏性、平齐末端,成回文序列,甲基化难切

④tRNA结构

⑴含稀有碱基最多:

D(二氢尿嘧啶)、ψ(假尿嘧啶)、I(次黄嘌呤)

⑵四环四臂五区:

D臂、TψC臂、氨基酸臂(受体臂)、反密码子臂

⑶二级:

三叶草

⑷三级:

倒L

⑤基因表达

⑴DNA重组过程中DNA连接四方式:

粘性末端连接、同聚物加尾法、加衔接物连接法、加

DNA接头连接法

⑵转位:

三类转位因子【(插入序列IS)、转座子(Tn)、可转座噬菌体】,转位后遗传

效应(突变、产生新基因、染色体畸变)

⑶转录:

转录5’端常见起始核苷酸是G、A,原核终止子在终止位点前有PolyU

⑷翻译:

参与肽链延伸的因子(EF-Tu、EF-TS、移位酶/G因子),肽基转移酶催化组分(23SrRNA),蛋白合成时生成肽键的能量来自高能酯键水解

⑸转录抑制剂:

利福平、利迪链霉素、放线素D、α-鹅膏蕈碱

⑹翻译抑制剂:

抗生素(氯霉素、链霉素、卡那霉素、新霉素、四环素、土霉素)※机理

干扰素(使起始因子eIF2磷酸化失活),毒素(抑制真核肽链延长)

⑥基因工程

⑴基因工程载体:

必备条件(自主复制、有标志基因便于筛选、易引入受体细胞、酶切位

点少、M大可携带大片基因)

常用载体(质粒、病毒、噬菌体、人工大染色体改造而来)

⑵DNA文库:

含某种生物体全部被转录成mRNA的所有基因序列

⑦密码子

⑴起始密码子:

原核(AUG、GUG、UUG,对应fMet)真核(AUG,对应Met)

※起始tRNA:

tRNAMet、tRNAfMet

⑵终止密码子:

UAA、UAG、UGA

⑶无义密码子:

UAA、UAG、UGA

⑷线粒体中三种特殊密码子:

UGA-色氨酸

⑸原核RF1识别的密码子:

UAA、UAX※RF2识别的密码子:

UAA、UGA

⑹密码子性质:

不重叠、特殊性、通用性、简并性、连续性、摆动性

※摆动性:

A-U,U-A、G,C-G,G-C、U,I-A、U、C

⑧其它

⑴SnRNA功能:

RNA成熟加工、与染色质结合、调节基因活性

⑵多拷贝基因有:

组蛋白基因、

⑶3种印迹法对应检测对象:

S-DNA、N-RNA、W-Pro

⑸Tm的影响三因素:

C三G、盐浓度(Na+)、DNA均一性(均一→窄)

Tm=(C+G)%×0.41+69.3

第七章维生素与激素

①几种重要酶的辅酶

⑴脱羧酶:

α酮酸脱羧酶(TPP/VB1)、氨基酸脱羧酶(磷酸吡哆醛(VB6)

※磷酸吡哆醛:

氨基酸脱羧酶、转氨酶的辅酶

⑵以FAD为辅酶的酶:

二氢硫辛酰胺脱氢酶、脂酰辅酶A脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、线粒体α磷酸甘油脱氢酶

⑶羧化酶的辅酶:

生物素(VB7)

⑷VB12:

钴胺素(参与甲基转移)

⑸氧化还原酶的辅酶:

NAD+

⑹以NADP为辅酶的酶:

苹果酸酶、6-p-G脱氢酶

⑺以FAK为辅酶的酶:

脂酰辅酶A脱氢酶

②几种特定功能的维生素

⑴凝血维生素:

VK,脂溶

⑵抗血维生素:

VC,水溶

⑶含A的维生素:

NAD+、NADP、FAD、CoASH

※VD:

体内活性最高的VD是:

1,25-二羟基胆钙化醇[1,25-(OH)2D3]

两种VD原:

VD3(7-脱氢胆固醇),VD2(麦角固醇)

VD3的形成:

胆固醇→7-脱氢胆固醇→VD3

③胰岛素等激素的受体是:

④含N激素受体在激素作用下与腺苷酸环化酶的耦联是由G蛋白介导实现的

⑤蛋白质类激素受体位于:

细胞质膜上

⑥类固醇激素受体位于:

细胞内

第八章生物氧化

①肌肉或神经细胞储存能量的高能化合物是:

磷酸肌酸(IP3)

②高能化合物有:

磷酸肌酸、1,3-二磷酸甘油酸、磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)、

③生物合成中主要的还原剂;NADPH,来源于HMS(磷酸戊糖途径/磷酸己糖旁路)

④生物氧化过程中,ATP生成方式:

底物水平磷酸化、氧化磷酸化

⑤线粒体的嵴:

外表面与基质接触,含有氧化磷酸化组分

⑥ATP合成酶

⑴F0F1-ATPase是:

催化ATP合成的酶形式,一种膜结合复合物,单独存在时没ATP酶活性

⑵F0:

含H+通道

⑦ATP合成机理

⑧细胞质脱下的一对氢进入线粒体的三方式:

异柠檬酸穿梭、苹果酸穿梭、甘油磷酸穿梭

⑨丙氨酸脱氢酶系的辅因子:

TPP(VB1)、CoASH、FAD、NAD+、硫辛酸、Mg2+

丙氨酸脱氢酶系的酶:

丙酮酸脱羧酶、硫辛酸乙酰转移酶、二氢硫辛酸脱氢酶

⑩醛缩酶的底物是:

F-1,6-2P

⑾在TCA、有氧呼吸链中产生的ATP最多的是:

α-酮戊二酸→琥珀酸

第九章糖代谢

㈠糖酵解

①部位:

胞液

②过程:

葡萄糖、糖元转变为丙酮酸

③三关键酶:

⑴己糖激酶:

包括(葡糖糖激酶、果糖激酶),不受ATP/AMP的调节

⑵磷酸果糖激酶:

限速,主要激活剂(2,6-二磷酸果糖),抑制剂(ATP、柠檬酸)

⑶丙酮酸激酶:

受ATP/AMP的抑制

④产能:

2ATP

⑤醛缩酶的底物:

F-1,6-P2(1,6-二磷酸果糖)

※糖代谢中既催化脱氢又催化脱羧的两种酶:

异柠檬酸脱氢酶、6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶

㈡糖的有氧氧化

①丙酮酸→乙酰辅酶A:

⑴部位:

线粒体内膜

⑵丙酮酸脱氢酶系:

3酶(丙酮酸脱羧酶、硫辛酸乙酰转移酶、二氢硫辛酸脱氢酶)

5辅(TPP(VB1)、CoASH、FAD、NAD+、硫辛酸、Mg2+)

②TCA循环:

柠檬酸循环、Krebs循环

⑴调节TCA循环运转最主要的酶:

异柠檬酸脱氢酶(限速)、α-酮戊二酸脱氢酶系

⑵部位:

线粒体基质、内膜

⑶酶:

柠檬酸合酶、异柠檬酸脱氢酶(限速)、α-酮戊二酸脱氢酶系

③1分子葡萄糖有氧氧化产生ATP数:

36(38)=2+6(4)+6+24

④草酰乙酸来源三途径:

苹果酸酶和苹果酸脱氢酶、丙酮酸脱羧酶、磷酸丙酮酸脱羧酶

㈢磷酸戊糖途径、磷酸己糖旁路HMS

①核糖的分解途径是:

HMS

②生物合成中除ATP供能外

⑴合成糖还需:

UTP

⑵合成脂肪还需:

GTP

⑶生物合成的还原力是NADPH,来源是HMS

※反应部位总结

糖酵解(EMP):

胞质

TCA:

线粒体基质、内膜

氧化磷酸化:

线粒体内膜

㈣糖元代谢

①合成糖元时,葡萄糖先活化成:

UDPG

②植物合成淀粉时需:

ADPG

③合成蔗糖需:

UDPG、6-P-G

㈤糖异生

第十章脂代谢

㈠三酰甘油代谢

①分解代谢

⑴β-氧化:

反应部位:

线粒体基质

产物:

偶数碳(乙酰CoA)、奇数碳(几个乙酰CoA+1个丙酰CoA)

反应过程:

二步脱氢(生成1FADH2+1NADH)、产ATP(5个)

⑵饱和脂肪酸分解

※酮体

生成部位:

肝内

成分:

乙酰乙酸、β-羟丁酸、丙酮

利用部位:

肝外,脑、肌

⑶不饱和脂肪酸氧化分解:

两特殊酶:

顺-反烯酯酰CoA异构酶、顺-反-β羟酯酰CoA异构酶

1分子软脂酸(16C)彻底氧化分解成CO2、H2O生成ATP数:

②脂肪酸合成

⑴脂肪酸合成代谢还原力是NADPH,来源是HMS

⑵催化胞液脂肪酸合成的限速反应由乙酰CoA羧化酶催化

⑶酰基载体为ACP,β-氧化中酰基载体是乙酰CoA

㈡磷脂代谢

①合成磷脂所需能量来自:

CTP

㈢胆固醇代谢

①在体内可直接合成胆固醇的化合物是:

脂酰CoA

第十一章氨基酸与蛋白质代谢

①几种氨基酸

⑴生酮氨基酸:

Leu、Lys

⑵生糖氨基酸:

除Leu、Lys外的

⑶生酮兼生糖氨基酸:

Phe、Tyr、Trp、Thr、Ile、Lys

⑷可转变为乙酰CoA的氨基酸:

⑸能与糖链发生糖基化的氨基酸:

②脱氨基

⑴氧化脱氨基:

L-Glu

⑵联合脱氨基:

组织中

⑶嘌呤核苷酸循环:

骨骼肌、心肌中

③直接排氨的动物:

水生动物(鱼)、原生动物

④氨的代谢

⑴氨的储存与转运:

储存方式:

转运方式:

丙氨酸-葡萄糖循环、谷氨酰胺-谷氨酸循环

※骨骼肌中脱氨基产生的氨通过什么途径转入肝脏:

丙氨酸-葡萄糖循环

⑵氨的去路-鸟氨酸循环(尿素循环)

部位:

肝(线粒体、胞质)

终产物:

尿素

关键酶:

※鸟氨酸循环生成尿素的前体是:

Arg

产物-尿素中N的来源:

N2-Asp

⑤个别氨基酸的代谢

⑴组胺的形成:

His脱羧

第十二章核苷酸代谢

㈠核苷酸合成代谢

①嘌呤碱基与嘧啶碱基中各原子来源

⑴嘌呤碱基

N1-Asp

C2、C8-C1(一碳单位)

N3、N9-Gln

C4、C5、N7-Gly

C6-CO2

⑵嘧啶碱基

C2-CO2

N3-Gln

N1、C4、C5、C6-Asp

②脱氧核苷酸的合成

⑴脱氧发生在NDP(核苷二磷酸)水平

⑵dTMP生成发生在NMP水平

※合成嘌呤需氨基酸:

Asp、Gln、Gly

合成嘧啶需氨基酸:

Gln、Asp

嘧啶核苷酸合成的重要中间产物是:

OMP

㈡核苷酸分解代谢

①嘌呤分解代谢

⑴人体嘌呤分解代谢主要终产物:

尿酸

⑵人、猿以外哺乳动物嘌呤代谢终产物:

尿囊素

※代谢综合总结:

联系糖、脂、蛋白三大物质代谢的关键物质是:

乙酰CoA、丙酮酸

氨甲蝶呤抑制:

嘌呤核苷酸、胸腺嘧啶核苷酸的从头合成

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