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降低化学反应活化能的酶

知识点一 酶的作用和本质

 

知识点二 酶的特性

 议一议:

加酶洗衣粉为何用温水浸泡?

这种洗衣粉能否用于毛料、丝织品的洗涤?

知识点三 ATP的结构、功能、利用和转化

 

看一看:

ATP中的高能磷酸键有何特点?

诱导契合模型

酶与反应物的契合关系在某种程度上像锁与钥匙的关系,酶改变形状,使反应物与酶的活性部位相契合(称为诱导契合),这种结合使反应更快地进行。

实验变量分析与对照组设置

1.自变量:

是指人为改变的变量,如氯化铁和肝脏研磨液。

2.因变量:

是指随着自变量的变化而变化的变量,如H2O2的分解速率或酶活性。

3.无关变量:

是指除自变量外,其他对实验结果能造成影响的可能因素,如H2O2浓度、肝脏研磨液新鲜程度等。

4.对照实验:

除了一个因素以外,其余因素都保持不变的实验叫做对照实验。

它一般要设置对照组和实验组。

自我校对:

①细胞代谢 ②生命活动 ③常态 ④活跃状态 ⑤降低化学反应的活化能 ⑥催化 ⑦高效性 ⑧温和 ⑨酵母活细胞 ⑩酵母细胞死亡 ⑪酿酶 ⑫脲酶 ⑬蛋白质 ⑭尿素 ⑮RNA ⑯活细胞 ⑰蛋白质 ⑱高效性 ⑲专一性 ⑳较温和 

最适宜 

明显降低 

A—P~P~P 

高能磷酸键 

磷酸基团 

提供能量 

细胞的主动运输 

肌肉收缩 

远离腺苷 

一个游离的磷酸(Pi) 

细胞呼吸

细胞呼吸和光合作用 

共性

议一议:

温水为酶发挥洗涤作用提供最适温度(冷水抑制酶活性,热水则使酶丧失活性)。

不能。

看一看:

ATP中末端的高能磷酸键易断裂和再生成,断裂时释放出大量的自由能,是一般化学键放出能量的2倍以上。

例如:

每摩尔的高能磷酸键放出的能量约是30.54kJ,而一般的P~O键只放出能量8.37~20.92kJ。

酶的本质、生理功能及其实验验证

1.酶的本质及生理功能

来源及

化学本质

活细胞产生的具有生物催化作用的有机物

绝大多数酶是蛋白质

少数酶是RNA

合成场所

核糖体

细胞核(真核生物)

生理功能

催化作用(生物催化剂)

作用原理

降低化学反应的活化能

 

2.酶是蛋白质的验证实验(利用双缩脲试剂)

实验结果分析:

通过对照,实验组若出现紫色,证明待测酶的化学本质是蛋白质;不出现紫色,则该酶液的化学本质不是蛋白质。

3.酶具有催化作用的实验设计思路及结果分析

实验结果分析:

根据底物性质利用相应试剂检测,若底物被分解,则证明酶具有催化作用,否则不具有催化作用。

4.酶的高效性——比较过氧化氢在不同条件下的分解

(1)实验过程中的理论分析:

(2)酶具有高效性的机理是其能够显著降低反应活化能,缩短反应达到平衡点的时间,并使细胞代谢在温和条件下快速进行。

【典例1】►(2011·天津理综卷)下列有关酶的叙述正确的是(  )。

A.酶的基本组成单位是氨基酸和脱氧核糖核苷酸

B.酶通过为反应物供能和降低活化能来提高化学反应速率

C.在动物细胞培养中,胰蛋白酶可将组织分散成单个细胞

D.DNA连接酶可连接DNA双链的氢键,使双链延伸

答案 C

【训练1】►(原创题)下图为酶作用的模式图。

据图所示,下列叙述错误的是(  )。

A.甲多为蛋白质B.此反应为分解反应

C.此反应中甲、乙为反应物,丙、丁为产物D.甲与乙之间有专一性

答案 C

【训练2】►(改编题)下列有关酶的正确叙述是(  )。

①是有分泌功能的细胞产生的,在核糖体上合成的 ②有的酶从食物中获得,有的酶是体内转化而来 ③凡是活细胞都能产生酶 ④绝大多数酶是蛋白质,少数酶是RNA ⑤酶在代谢中有多种功能 ⑥酶只是起催化作用 ⑦酶只在细胞内发挥作用 ⑧反应前后酶的性质和数量均没有改变

A.①②⑤B.③④⑦⑧C.③④⑥⑧D.④⑤⑧

答案 C

与酶相关的曲线解读

1.表示酶高效性的曲线

(1)催化剂可加快化学反应速率,与无机催化剂相比,酶的催化效率更高。

(2)酶只能缩短达到化学平衡所需时间,不改变化学反应的平衡点。

(3)酶只能催化自然条件下能发生的化学反应。

2.表示酶专一性的曲线

加入酶B的反应速率与无酶A或空白对照条件下的反应速率相同,而加入酶A的反应速率随反应物浓度增大明显加快,说明酶B对此反应无催化作用。

进而说明酶具有专一性。

3.影响酶活性的曲线

(1)甲、乙曲线表明:

①在一定温度(pH)范围内,随温度(pH)的升高,酶的催化作用增强,超过这一范围,酶的催化作用逐渐减弱。

②过酸、过碱、高温都会使酶失活,而低温只是抑制酶的活性,酶分子结构未被破坏,温度升高可恢复活性。

(2)从丙图可以看出:

反应溶液pH的变化不影响酶作用的最适温度。

4.底物浓度和酶浓度对酶促反应的影响

(1)在其他条件适宜,酶量一定条件下,酶促反应速率随底物浓度增加而加快,但当底物达到一定浓度后,受酶数量和酶活性限制,酶促反应速率不再增加。

(2)在底物充足,其他条件适宜的条件下,酶促反应速率与酶浓度成正比。

【典例2】►(2011·海南单科,5)某一不可逆化学反应(S―→P+W)在无酶和有酶催化时均可以进行。

当该反应在无酶条件下进行到时间t时,向反应液中加入催化该反应的酶。

图中能正确表示加酶后反应物浓度随反应时间变化趋势的曲线是(  )。

A.甲B.乙C.丙D.丁

答案 D

——分析酶促反应曲线的要点

(1)首先要弄清横坐标和纵坐标表示的意义,相同的曲线在不同的坐标系中表示的含义不同。

其次明确曲线中的几个关键点,如:

起点、与纵横轴的交点、拐点、最低点、最高点等。

(2)在分析影响酶促反应的因素时,一般情况下,生成物的量未达到饱和时,影响因素是横坐标所表示的因素,在达到饱和后,限制因素是除横坐标所表示的因素之外的其他因素。

【训练3】►请你解读与酶有关的图示、曲线:

(1)图1和图2是与酶的特性相关的图示,请回答下列问题。

图1和图2分别表示了酶具有________________。

洗衣粉中加入的A之所以能够耐酸碱、忍受表面活性剂和较高温度,是因为它是通过________精心设计改造生产出来的;控制其合成的直接模板主要分布在细胞的________中。

(2)图3是与酶活性影响因素相关的曲线,请分析回答:

当pH从5上升到7,酶活性的变化过程是________________;从图示曲线我们还可以得出的结论是________________________________________________________________________。

(3)图4和图5是底物浓度和酶浓度对酶促反应的影响曲线,请分析回答:

图4中A点后酶促反应的速率不再增加,其限制性因素主要是________________。

从图5可以得出的结论是:

在底物足量条件下,_________________________________________。

解析 洗衣粉中的A指酶,是蛋白质工程的产物。

除了pH以外,温度等其他因素也能影响酶的活性。

答案 

(1)高效性和专一性(特异性) 蛋白质工程 细胞质

(2)先上升后下降 随着pH的变化酶的最适温度不变(温度影响酶活性) (3)酶的浓度(数量)和活性 酶促反应速率与酶浓度呈正相关

图析ATP的结构与作用

1.ATP的结构简析

(1)组成元素:

C、H、O、N、P。

(2)简称:

三磷酸腺苷。

(3)各字母代表的含义:

A——腺苷(腺嘌呤+核糖);P——磷酸基团;~——高能磷酸键。

(4)结构简式:

A—P~P~P(远离腺苷A的那个高能磷酸键容易断裂,也容易形成)。

2.ATP的形成途径

3.ATP与ADP的相互转化

注意 酶1、酶2不同:

酶1——合成酶,酶2——水解酶。

转化式:

ADP+Pi+能量

ATP

(1)ATP在生物体内含量少,但转化十分迅速,从而使细胞中的ATP总是处于一种动态平衡中。

(2)ATP与ADP的相互转化不是可逆反应。

因为转化过程中的所需酶、能量的来源和去路和反应场所都不完全相同。

但是物质是可循环利用的。

(3)ATP的形成需要满足4个条件:

2种原料(ADP和Pi)、能量和酶。

另外合成ATP的过程中有水生成。

【典例3】►(2008·天津理综,6)下列有关ATP的叙述,正确的是(  )。

①人长时间剧烈运动时,骨骼肌细胞中每摩尔葡萄糖生成ATP的量与安静时相等 ②若细胞内Na+浓度偏高,为维持Na+浓度的稳定,细胞消耗ATP的量增加 ③人在寒冷时,肾上腺素和甲状腺激素分泌增多,细胞产生ATP的量增加 ④人在饥饿时,细胞中ATP与ADP的含量难以达到动态平衡

A.①②B.②③C.③④D.①④

答案 B

【训练4】►请分析下列关于ATP的有关数据和实验,并回答下面的问题。

(1)经测定一个成年人静止状态下24h将有40kg的ATP发生转化,而细胞内ADP、ATP等仅有2~10mg。

为满足能量的需要,生物体内解决这一矛盾的合理途径是________________________。

(2)用32P标记的磷酸加入细胞培养液,短时间内快速分离出细胞内的ATP,结果ATP浓度变化不大,但部分ATP的末端磷酸基团却已带上了放射性标记。

这一事实证明______________________________________,

你得出结论的依据是_________________________________________________________。

答案 

(1)ADP与ATP之间可以快速相互转变 

(2)ATP在细胞内的含量处于动态平衡状态,细胞内ATP浓度变化不大 部分ATP末端磷酸基团带上了放射性标记,说明这是重新合成的,同时也说明原有ATP部分被分解了

探究影响酶活性的条件及酶的专一性

一、温度对酶活性的影响

1.原理解读

②温度影响酶的活性,从而影响淀粉的水解,滴加碘液,根据是否出现蓝色及蓝色的深浅来判断酶的活性。

2.实验设计思路

3.实验设计程序

淀粉     淀粉酶

↓       ↓

各自在所控制的温度下处理一段时间

淀粉与相应温度的淀粉酶混合

在各自所控制的温度下保温一段时间

滴加碘液,观察颜色变化

本实验不宜选用过氧化氢酶催化过氧化氢分解,因为过氧化氢酶催化的底物过氧化氢在加热的条件下分解也会加快。

归纳 不同温度对酶的活性和结构的影响

低温(0℃)―→升温―→最适温―→再升温―→高温

|     |    |    |    |

活性受抑制―→活性增高―→活性最高―→活性降低―→无活性

|     |    |    |   |

 未变性―→未变性―→未变性―→渐变性―→已变性

二、pH对酶活性的影响

1.原理解读

(1)H2O2

H2O+O2

(2)pH影响酶的活性,从而影响O2的生成量,可用点燃但无火焰的卫生香燃烧的情况来检验O2生成量的多少。

2.实验设计思路

O2的产生速率

归纳 不同酸碱度对酶的活性和结构的影响

过酸酸性增强最适酸碱度―→碱性增强―→过碱

 |    |      |     |    |

无活性活性降低活性最高―→活性降低―→无活性

 |    |      |     |    |

变性渐变性未变性―→渐变性―→变性

三、酶的专一性

 该实验探究中的自变量可以是不同反应物,也可以是不同酶溶液,因变量是反应物是否被分解。

(1)方案一:

用同一种酶催化两种不同物质

解读 用淀粉酶分别作用于淀粉和蔗糖后,再用斐林试剂鉴定,根据是否有砖红色沉淀生成来判断淀粉酶是否对二者都有催化作用,从而探究酶的专一性。

(2)方案二:

用两种不同酶催化同一种物质

②再用斐林试剂鉴定,从而探究酶的专一性。

【典例1】►(2011·全国卷,31)某同学从温度为55~65℃的泉水中筛选出能合成脂肪酶的细菌,并从该细菌中提取了脂肪酶。

回答下列问题。

(1)测定脂肪酶活性时,应选择________作为该酶作用的物质,反应液中应加入________溶液以维持其酸碱度稳定。

(2)要鉴定该酶的化学本质,可将该酶液与双缩脲试剂混合,若反应液呈紫色,则该酶的化学本质为________。

(3)根据该细菌的生活环境,简要写出测定该酶催化作用最适温度的实验思路。

答案 

(1)脂肪 缓冲 

(2)蛋白质 (3)在一定温度范围内(包括55~65℃)设置温度,分别测量酶活性,若所测数据出现峰值,则峰值所对应的温度即为该酶催化作用的最适温度。

否则,扩大温度范围,继续实验,直到出现峰值

【训练1】►(2011·江苏卷,31)为探究植酸酶对鲈鱼生长和消化酶活性的影响,研究者设计并进行了相关实验,实验步骤及结果如下:

①鲈鱼的驯养:

将从海洋中捕获的鲈鱼鱼苗在浮式海水网箱中饲养14d,用普通饲料投喂,备用。

②饲料的配制:

在每千克普通饲料中添加200mg植酸酶,配制成加酶饲料;并将普通饲料和加酶饲料分别制成大小相同的颗粒,烘干后储存。

③鲈鱼的饲养:

挑选体格健壮、大小一致的鲈鱼随机分组,放养于规格相同的浮式海水网箱中,放养密度为60尾/箱。

给对照组的鲈鱼定时投喂适量的普通饲料,给实验组的鲈鱼同时投喂等量加酶饲料。

④称重并记录:

投喂8周后,从每个网箱中随机取20尾鲈鱼称重。

结果显示,对照组、实验组鱼体平均增重率分别为859.3%、947.2%。

1制备鲈鱼肠道中消化酶样品,并分别测定消化酶的活性,结果如下表。

 

蛋白酶活性(U/mg)

脂肪酶活性(U/mg)

淀粉酶活性(U/mg)

对照组

1.09

0.08

0.12

实验组

1.71

0.10

0.13

根据上述实验,回答下列问题。

(1)步骤①中选用鲈鱼鱼苗而不是成体的主要原因是__________________________________________;实验前的驯养是为了___________________________________________________。

(2)步骤②中将配制好的饲料进行烘干要特别注意__________________________________,

其原因是______________________________________________________________________。

(3)步骤③中还应控制好的无关变量主要有________________________________________。

(4)本实验得出的初步结论是_____________________________________________________。

(5)推测鲈鱼的食性并说明理由:

_______________________________________________。

答案 

(1)成体生长缓慢,实验效果不明显 让鲈鱼适应实验养殖环境 

(2)温度不能过高 高温会使植酸酶变性而失去活性 (3)水温、盐度和溶解氧等 (4)添加植酸酶的饲料促进鲈鱼幼体的生长;植酸酶能提高肠道中蛋白酶的活性,而对肠道中脂肪酶和淀粉酶的活性影响较小 (5)肉食性,其肠道中蛋白酶活性显著高于脂肪酶和淀粉酶

——实验变量及其控制

 实验中的变量,指的是可被操纵的特定因素或条件。

对照实验中的变量有4种,分别为自变量、因变量、无关变量和额外变量。

1.自变量和因变量

自变量,指实验中由实验者所操纵的因素或条件;因变量,指实验中由于自变量而引起的变化和结果。

通常,自变量是原因,因变量是结果,二者具有因果关系。

实验的目的在于获得和解释这种前因后果。

例如,在“温度对酶活性的影响”的实验中,所给定的低温(冰块)、适温(37℃)、高温(沸水浴)就是自变量,而由于低温、适温、高温条件变化,唾液淀粉酶水解淀粉的反应结果也随之变化,这就是因变量,该实验即在于获得和解释温度变化(自变量)与酶的活性(因变量)的因果关系。

2.无关变量与额外变量

无关变量,指实验中除自变量以外,可能还会存在一些可变因素,对实验结果造成影响,这些变量称为无关变量。

额外变量,也称干扰变量,指实验中由于无关变量所引起的变化和结果。

显然,额外变量会对因变量有干扰作用。

例如上述实验中除自变量(低温、适温、高温)以外,试管洁净程度、唾液新鲜程度、可溶性淀粉浓度和纯度、试剂溶液的剂量、浓度和纯度、实验操作程序、温度处理的时间长短等等,都属于无关变量,要求对低温、适温、高温3组实验是等同、均衡、稳定的;如果无关变量中的任何一个或几个因素或条件,对3个实验组的给定不等同、不均衡、不稳定,则会在实验结果中产生额外变量,出现干扰,造成误差。

实验的关键之一在于控制无关变量或减少额外变量,以减少误差。

3.单一变量原则

在实验设计中仅仅改变实验中的某一项变量,其它因子不变,在此条件下,观察、研究该变量对实验材料和实验结果的影响。

除了整个实验过程中欲处理的实验因素外,其他实验条件要做到前后一致。

【训练2】►(2009·全国Ⅱ改编)请用所给的实验材料和用具,设计实验来验证哺乳动物的蔗糖酶和淀粉酶的催化作用具有专一性。

要求完成实验设计、补充实验步骤、预测实验结果、得出结论,并回答问题。

实验材料与用具:

适宜浓度的蔗糖酶、唾液淀粉酶、蔗糖、淀粉4种溶液,斐林试剂、试管、37℃恒温水浴锅、沸水浴锅。

(1)若“+”代表加入适量的溶液,“-”代表不加溶液,甲、乙等代表试管标号,请用这些符号完成下表实验设计。

 溶液

试管 

蔗糖溶液

淀粉溶液

蔗糖酶溶液

唾液淀粉酶溶液

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

(2)实验步骤

①按照上表中的设计,取试管、加溶液。

②________________________________________________________________________。

③________________________________________________________________________。

④________________________________________________________________________。

(3)结果预测:

___________________________________________________________________________。

(4)结论:

______________________________________________________________________。

(5)在上述实验中,如果仅将37℃恒温水浴锅的温度调到20℃,而在其他条件不变的情况下重做上述实验,出现砖红色试管中的颜色会比37℃时的浅,其原因是_____________________________________________。

答案 

(1)

溶液

试管 

蔗糖溶液

淀粉溶液

蔗糖酶溶液

唾液淀粉酶溶液

(2)②混匀,37℃恒温水浴一段时间 ③取出试管,分别加入适量的斐林试剂,混匀,50~65℃水浴一段时间 ④观察实验现象并记录实验结果 (3)含有蔗糖和蔗糖酶溶液的试管,以及含淀粉和淀粉酶溶液的试管中出现砖红色沉淀,其他试管中不出现砖红色沉淀 (4)酶的催化作用具有专一性

(5)20℃低于酶的最适温度,酶活性低,水解产生的还原糖少

酶相关知识的理解考查                   

1.判断正误

(1)(2010·山东高考理综-A)溶酶体内的水解酶是由核糖体合成的(  )。

(2)(2010·江苏卷-D)某种蛋白酶是由129个氨基酸脱水缩合形成的蛋白质。

用含该蛋白酶的洗衣粉去除油渍,效果比其他类型加酶洗衣粉好(  )。

(3)(2009·上海生命科学-D)将刚采摘的甜玉米立即放入沸水中片刻,可保持其甜味。

这是因为加热会破坏将可溶性糖转化为淀粉的酶(  )。

答案 

(1)√ 

(2)× (3)√

2.(2009·广东生物,3)水稻细胞内合成的某物质,能够在常温下高效分解淀粉,该物质(  )。

A.在4℃条件下易变性B.只含有C、H

C.也能催化淀粉合成D.含有羧基

答案 D

与酶相关的曲线考查

3.(2011·新课标卷)甲、乙两种酶用同一种蛋白酶处理,酶活性与处理时间的关系如右图所示。

下列分析错误的是(  )。

A.甲酶能够抗该种蛋白酶降解B.甲酶不可能是具有催化功能的RNA

C.乙酶的化学本质为蛋白质D.乙酶活性的改变是因为其分子结构的改变

答案 B

4.(2009·宁夏,2)右图表示酶活性与温度的关系。

下列叙述正确的是(  )。

A.当反应温度由t2调到最适温度时酶活性下降B.当反应温度由t1调到最适温度时酶活性上升

C.酶活性在t2时比t1高,故t2时更适合酶的保存

D.酶活性在t1时比t2低,表明t1时酶的空间结构破坏更严重

答案 B

与酶相关的实验考查5.(2010·海南生物,22)为探究NaCl和CuSO4对唾液淀粉酶活性的影响,某同学进行了实验,实验步骤和结果见下表。

请回答问题。

试管编号

实验步骤

1

2

3

4

1%的NaCl溶液/mL

1

 

 

 

1%的CuSO4溶液/mL

 

1

 

 

1%的Na2SO4溶液/mL

 

 

1

 

蒸馏水/mL

 

 

 

1

pH为6.8的缓冲液/mL

1

1

1

1

1%的淀粉溶液/mL

1

1

1

1

唾液淀粉酶溶液/mL

1

1

1

1

各试管放入37℃恒温水浴保温适宜时间

取出试管,加入1%的碘溶液0.1mL

观察结果

无色

深蓝色

浅蓝色

(1)实验中加入缓冲液的作用是__________________________________________________。

(2)分析实验结果可知:

对酶活性有影响的离子是________________,其中对酶活性有抑制作用的离子是________,对酶活性有促进作用的离子是________。

(3)该实验中设置4号试管的目的是________________;设置3号试管的目的是________________。

(4)上述实验中若用斐林试剂代替碘溶液进行检测,1~4号试管中的颜色依次是________、________、________、________。

根据上述实验结果,在操作过程中,保温之前不能加入斐林试剂,其原因是___________________________________________________________。

答案 

(1)维持反应液中pH的稳定(其他合理答案也可) 

(2)Cl-和Cu2+ Cu2+ Cl- (3)对照 确定Na+和SO

对唾液淀粉酶催化活性是否有影响 (4)深砖红色 无砖红色 浅砖红色 浅砖红色  斐林试剂中含有Cu2+,其可抑制唾液淀粉酶的活性

方法技巧 解答实验题的一般技巧和程序

(1)解题之前首先要明确实验目的,并从实验目的或实验名称中分析出

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