色谱在食品卫生中的应用.docx

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色谱在食品卫生中的应用

色谱法在食品卫生行业中的应用及解决方案

色谱作为一种分析与分离技术，已有近百年历史。

近半个世纪以来，色谱技术发展迅速，无论是理论，还是各种分离模式，都趋向成熟，已作为分析化学的一个重要分支。

色谱技术为医药、卫生、食品、生化、环保等学科的发展做出了极大的贡献，同时在基因工程、生物工程及材料科学等方面也有着广阔的应用前景。

作为这些学科必不可少的工具和手段，色谱技术越发显示出其重要性。

最近的统计资料显示，全世界各类分析仪器中，气相色谱仪和液相色谱仪的销售额占了25%-30%。

我公司目前推出了GC5400气相色谱仪和LC-3100型液相色谱仪两款仪器。

以下将对色谱和色谱仪作相关介绍：

一、色谱法的定义及分类

色谱法或色谱分析也称之为层析法（chromatograhhy），是一种物理或物理化学的分离分析方法。

它利用混合物中各组分在两相间分配系数的差别，当溶质在两相间作相对移动时，各物质在两相间进行多次分配，从而使各组分得到分离。

可完成这种分离的仪器即色谱仪。

分配系数大的组分迁移速度慢，反之迁移速度快而被分离。

色谱分离的实质——利用不同组分在相对运动的两相中由于溶解（气——液色谱）、吸附（气——固色谱）或者其它亲和能力的差异，使不同组分在分离柱中移动速度不同（称为差速迁移），当吸附或分配过程反复多次之后，组分间极微小的差异就叠加起来，变为大的差异，从而使组分分离。

除上述两种外（这是主要的），还有络合、离子交换等。

气——液色谱又叫分配色谱，它是基于试样组分在固定相和流动相中溶解度的不同达到分离的目的。

气——固色谱又叫吸附色谱，它是通过试样组分对活性固体表面吸附亲和力的不同实现彼此的分离。

色谱法从不同的角度，有不同的分类方法，通常可按聚集状态、操作方法及分离原理等进行分类。

（一）按流动相与固定相的状态分类

1、按流动相的状态分类在色谱中流动相可以是气体、液体或超临界流体，相应分为气相色谱（GC）、液相色谱（LC）和超临界流体色谱（SFC）。

2、按固定相的状态分类固定相可以是固体或液体。

因此，气相色谱法又可分为气-固色谱法（GSC）与气-液色谱法（GLC）。

液相色谱又可分为液-固色谱法（LSC）和液-液色谱法（LLC）等。

（二）按操作形式分类

按操作形式可分为柱色谱法、平面色谱法及逆流分配等类别。

（三）按色谱过程的分离机制分类

按色谱过程的分离机制可分为吸附色谱法、分配色谱法、体积排阻色谱法、离子交换色谱法、亲和色谱法、化学键合相色谱法、毛细管电色谱法和毛细管电泳法等。

（四）按使用领域不同分类

按使用领域对色谱仪分类可分为分析型色谱仪和制备型色谱仪。

二、色谱法的优点

色谱法以其高超的分离能力为特点，它的分离效能远远高于其他分离技术如蒸馏、萃取、离心等方法。

其主要优点：

（一）分离效能高如毛细管气相色谱柱理论塔片数可达7万-12万。

而毛细管电泳仪一般有几十万理论塔板数，至于凝胶毛细管电泳柱可达上千万理论塔板数的柱效。

（二）应用范围广它几乎可用于所有化合物的分离和测定，无论是有机物、无机物、低分子或高分子化合物，甚至有生物活性的生物大分子也可以进行分离和测定。

（三）分析速度快一般在几分钟到几十分钟就可完成一次复杂样品的分离和分析。

（四）样品用量少用极少的样品就可完成一次分离和测定。

（五）灵敏度高如气相色谱可以分析几纳克的样品，火焰离子化检测器（FID）可达10-12g/s，电子捕获检测器（ECD）达10-13g/s，检测限为10-9g/L和10-12g/L。

（六）分离和测定一次完成可以和多种波谱分析仪器联用。

（七）易于自动化分离和分析自动完成，可以在工业流程中应用。

三、色谱仪的特点

（一）气相色谱仪

气相色谱法是以气体为流动相对复杂样品进行分离、检测和定量的一种分析方法。

它有分离效率高，分析速度快；样品用量少，检测灵敏度高；选择性好；应用范围广等特点。

把组分分开有许多方法，如蒸馏、萃取、结晶、差热、离心等等，但气相色谱法能把只有极微小差异的两个组分分开。

在分析汽油样品时，在2小时内获得200多个色谱峰。

许多常规分析，一般在20分钟内就完成。

由于有许多高灵敏度的检测器可供使用，因此，样品用量能很少，如气体进样1μL，液体进样0.1μL，TCD可检测出十几个PPM的杂质，FID：

几个PPM。

仪器可选择对样品组分有不同作用力的液体、固体作为固定相。

因此，可在一定的操作条件下将物理、化学性质相近的组分分开。

因为选择不同的固定相，可使组分的分配系数有较大差异。

同时，气相色谱仪可分析百分之二十目前已知的有机化合物。

对热稳定性好，易挥发的样品——直接进样。

对热稳定性差，不易挥发的样品——衍生化后进样。

对固体、大分子样品，采取热裂解方法——裂解色谱。

气相色谱在石油工业、化学工业、环保、临床化学、医药、食品工业、农药等等方面有广泛的应用。

我公司目前生产的GC5400型气相色谱仪系微机化、高性能、低价格、全新设计的通用型气相色谱仪，具有高稳定可靠、结构简洁合理、操作方便、外型美观等优点。

该仪器应用范围广，适用于环境保护、大气、水源等污染的痕量检测；毒物的分析、监测、研究；生物化学；临床应用；病理和病毒研究；食品发酵；石油化工；石油加工；油品分析；地质、探矿研究；有机化学；合成研究；卫生检疫；公害检测分析和研究等。

它具有如下的特点：

（1）先进的微机系统，卓越的控制功能

性能卓越的微机温度控制系统，采用了国际先进的控制技术，控温精度高（优于±0.05℃）、可靠性高、抗干扰能力强；具有5个独立的控温区，最高控制温度达400℃；极限温度设定及过温保护功能，确保仪器的安全运行。

全中文键盘设定各种控制和使用参数（包括检测器操作参数），逻辑性强，容易操作；机内具有自诊断、断电保护、10种方法文件存储及调用、2个外部事件控制、温控定时启动和关闭，时间程序、检测器设定、量程，极性和电流设置与显示等功能，可准确显示各路温控设定值、实际值、保留和分析时间等。

图为微机系统组成示意图

（2）灵活的进样系统，满足各种分析要求

仪器可同时安装多达三个进样器，根据分析要求，仪器可选择最佳进样器组合，且各单元可独立控温，进样器拆装简单。

（3）单填充柱/双填充柱进样器：

可实现填充柱柱头进样方式，适用多种色谱柱；增加6通阀进行气体进样分析；在填充柱进样器中使用连接件，可简便地完成0.53宽口径毛细管柱分析。

（4）提供2种毛细管柱进样系统，均适用于各种规格的毛细管柱：

a）专用毛细管柱进样器，具有隔膜吹扫和背压阀分流调节。

b）专用毛细管柱分流/不分流进样器，独立载气流路和尾吹气流路，具有隔膜吹扫和背压阀分流调节，进口清洗电磁阀，通过编制时间程序来实现毛细管柱分流/不分流进样。

（5）高灵敏度、高稳定性检测器

仪器可同时安装多达三个检测器，如FID、TCD、ECD检测器等。

根据不同的分析应用采用不同的组合，能方便的实现检测器的串联和并联工作。

新型的FID具有更低的检测限，可方便地进行喷口和离子收集极的拆卸、清洗，精确固定的发射极安装结构确保每台仪器性能的高度一致。

高灵敏度TCD采用高阻值铼钨丝，可选配多倍电子放大电路板，灵敏度最高可达10000mV·mL/mg，独特的空气隔热保温结构使TCD具有更高的稳定性。

调制脉冲式ECD恒流源，灵敏度、电流选择微机化。

（6）高精度双重稳定气路

载气流路采用稳压阀及稳流阀双重稳定设计；空气和氢气流路采用稳压阀加针形阀的稳定调节模式，稳流阀和针形阀均采用数字刻度式旋钮，具有高精度、重复性好、可靠性高且流量调节方便直观。

（7）高性能大容量柱箱

大容量柱箱可方便安装且能同时容纳毛细管柱和双填充柱；柱箱具有快速加热和快速降温即自动后开门机构，且可实现准室温控制，柱箱程序升温5阶6平台。

（8）多样免费附件，安装无忧

仪器提供初次安装使用的全套附件，如净化器、外气路管、扳手工具、注射针和各类接头，用户仅须准备气源即可。

以上附件也无须另外付费。

（9）丰富的数据处理系统，让您自由选择

a）内置式的数据采集板，使用工作站软件在电脑上进行基流监视、单柱补偿、色谱数据处理；

b）采用完全独立的双通道外置式数据采集盒和智能化软件组成的色谱工作站，无论是浮置信号或对地信号均可同时快速采集和精确色谱数据处理；

c）RS232通讯板及软件，和工作站相连实现与主机进行双向通讯和反控，即在一台电脑上完成温度、检测器参数设置和监视，以及数据处理参数的设定；

d）独特的色谱仿真软件，在电脑上模拟寻找色谱最佳操作条件，提供色谱仿真教学和培训、色谱知识库等。

以上是我公司目前生产的GC5400型气相色谱仪外观图，它由气路系统、进样系统、柱系统、检测系统、数据处理和控制系统组成。

进样系统：

分为填充柱进样和毛细管进样、毛细管分流不分流进样。

检测系统：

目前市场上应用最广的是氢火焰离子化检测器（FID）和热导检测器（TCD）、质谱检测器（MS）。

主要技术指标：

温度控制：

控温范围：

室温上7℃到400℃（增量1℃）

控温对象：

柱箱、检测器、热导池、进样器、辅助

程升阶数：

五阶

程升速率：

0.1℃~40℃/min（增量0.1℃）

恒温时间：

0~655min（增量1min）

氢火焰离子化检测器（FID）

 敏感度：

M≤1×10-11g/s（C16）

最佳测试结果：

M≤8×10-12g/s（C16）

噪 声：

≤5×10-14A

漂 移：

≤6×10-13A/h

线性范围：

≥106

热导池检测器（TCD）

灵敏度：

≥2500Mv/mL/mg（C16）

噪 声：

≤20μV

漂 移：

≤30μV/h

最高灵敏度：

≥5000mV/mL/mg（电子放大）

线性范围：

≥104

气相色谱仪技术进步的发展轨迹

自1952年世界上第一次创建实用气液色谱法以来,在短短几十年间,气相色谱仪作为现代分析检测仪器的代表,已发展成为一个有相当生产规模的产业,并形成了具有相当丰富的检测技术知识的学科.通过研究气相色谱仪的发展规律,能给使用者有益的启迪,为有关专业人员的工作带来一定的帮助.

  炉温控制（Oventemperaturecontrol）

  气相色谱仪炉温控制性能水平往往能体现这台仪器的层次和水准,炉温控制技术的衍变从柱温箱排热口的变化就可以看出来.Gc-7A没有柱温箱排热口,其升温降温速度慢得令人生畏,使操作者轻易不敢改变条件;GC-9A、GC-14A具有狭长缝型的排热口,使效果有了一定改善;Gc-17A进一步改为两个方形的排热口,降温效果令人满意。

在炉温控制的操作系统方面,Gc-7A采用机械拨盘方式,很不方便.从Gc-9A开始利用电子控制,采用键盘输入参数.可以说,岛津公司的气相色谱仪从Gc-9A才算是开始进入现代化.而Gc-17A是由工作站控制,可以很方便地进行程序控温。

气体流量控制（Flowcontrol）Gc-7A、GC-9A．Gc-14A都采用了经典的机械式表阀控制,如压力表和转子流量计。

  一般需要精确控制载气流量的部件使用转子流量计,只需粗略控制的部位使用压力表,如作为辅助燃烧气体的氢气和空气流量控制基本上都使用压力表。

  机械表阀控制优点是:

可靠,耐用、经济.它的缺点在于:

每次开机时都要从零点慢慢地调高,关闭时再调回零位,由于每次调节都有不可避免存在人为的差异,每次的流量难以保持一致,因此在检测过程中不能改变流量.而电子压力控制采用电磁阀取代机械表阀,只需要输入一个数值即可找到预定的流量或压力,方便．准确、迅速,还可以提供程序升压手段,可谓是流量控制的一次革命。

电子控制流量克服了机械控制流量的缺陷,但也带来了新的问题：

（1）如果气源压力变化太大,容易因为强烈冲击而损坏,机械式表阀则不存在这个问题。

（2）一旦遭遇意外停电,电磁阀停止工作,停止供气,色谱柱在高温没有载气通过时极易损坏。

（3）从理论上来说,转子流量计是测载气流量最稳定准确的元件,很难产生偏差;而电子压力控制必竟是一个电子模拟机械过程,长期使用后有可能出现细微的偏差。

（二）液相色谱仪

液相色谱分析是指流动相为液体的色谱技术,是色谱法中最古老的一种,但通过改进填料的粒度及柱压,在经典的液相柱色谱的基础上引入了气相色谱的塔板理论,在技术上采用了高压输液泵,高效固定相和高灵敏度的检测器,实现了分析速度快、分离效率高和操作自动化,这种色谱技术被称为高效液相色谱法（HighperformanceliquidchromatographyHPLC）。

中药的成分非常复杂,以往常用的薄层色谱等方法因其精密度、准确度、灵敏度、重现性差而不能满足现代中药的需要。

高效液相色谱正是以其稳定、可靠、高效的特点成为中药研究的最重要的分析方法。

目前高效液相色谱已经广泛应用于食品卫生行业中多种有效成分的测定。

近年来对高效液相色谱监测的研究非常多,由于高效液相色谱集经典液相色谱和气相色谱的优势于一身,无论柱效、选择性还是分析程度都达到或超过了它们,近年来对高效液相色谱的不足之处进行了改择性还是分析程度都达到或超过了它们,近年来对高效液相色谱的不足之处进行了改进,使这项技术日臻完善。

高效液相色谱的研究动向

（1）缩短分析时间,提高分离效率。

应用先进的检测仪器和方法,对流动相、固定相进行调节或改变,采用梯度洗脱、柱切换技术有望解决这个问题。

梯度洗脱的高效液相色谱法,能分析较宽极性范围的样品,较等度洗脱具有很大的优势,但对于成分更复杂、极性范围更宽的中药样品则有些力不从心。

多柱高效液相色谱法又称多维高效液相色谱法。

除具有梯度洗脱一样的改变流动相浓度的优点外,还可以改变固定相种类、键合度、粒径、柱长、柱径等及流动相种类、浓度等。

（2）进一步向自动化、智能化及联用技术上发展。

液相色谱与质谱联用在国外已成为测定低浓度生物药品中药物及代谢物的首选方法,LC-MS-MS法测定血浆中HIV-1蛋白酶,准确高效,血浆中残留的内源性组份和其他药物不干扰测定,既节省材料又节约时间。

已经应用于体液、血浆、血清中的药物分析。

中药复方注射液“清开灵”中的胆酸类物的分析采用液相色谱质谱质谱联用,效果理想。

高效液相色谱-核磁共振联用在药物分析方面的作用很不错。

新近提出的智能多柱高效液相色谱系统利用切换技术的模块式分离性能,把样品分块的切换进不同

性质的色谱柱,再用合适的流动相洗脱。

全过程采用智能化控制。

我公司目前生产的LC3100型智能全控液相色谱仪可以由LC-3100高压恒流泵与LC-UV100紫外检测器直接构成等度分析系统，也可使用LC-WS100工作站同时控制数台LC-3100高压恒流泵、LC-UV100紫外检测器及恒温柱箱等，实行多元高压梯度洗脱、波长扫描等功能。

LC-3100智能全控液相色谱系统操作既直观又方便。

它可以在不联计算机时通过仪器本身的小键盘输入所有控制信息，所有操作都在液晶屏上显示出。

也可连接计算机，使用工作站软件。

该工作站与色谱仪之间没有2次模数转换，采用纯数字通讯，且读入的均为直接二通道采样数据，不经过任何处理，不存在信号畸变，这样保证了采样精度和后处理时不丢失数据。

采样精度达18位（0.1秒/次*2通道）。

LC-WS100工作站分为实时采样、后处理、波长回放、图谱比较四个独立的单元。

其中实时采样单元可以直接监控多达4台泵及紫外检测器。

可以任意改变波长、泵的流量、氘灯开关，可以在任意时刻停泵或者切换转向阀，让组分保留在流通池里，然后自动启动波长扫描，可以得到该组分对不同波长的连续谱图。

还可以连接一个转换阀，通过事件设置控制转换阀，从而达到分离回收流动相。

这些都是其它工作站所不能做到的。

另外，所有显示数据都已经转换成AU值，无须用户进行烦琐的折换。

由于软件是在WINDOWS系统下运行，所有功能菜单化，不需要学习，一看就会，操作简便。

图为LC-3100型高效液相色谱仪的外观图

仪器特点：

标配P100高压恒流泵

UV100紫外检测器

7725i手动进样阀

ExformmaPronaos系列色谱柱

Ws100工作站软件。

数字化电脑智能全控液相色谱系统。

往复式双柱塞并联泵：

更加稳定可靠，使用寿命更长。

外型新颖，操作方便，体现人性化。

各项性能指标优异，媲美国外流行机种。

光路系统采用精密定位结构和热隔离安装技术，具有精度高，偏移小和稳定时间短的特点。

零部件均采用世界先进的数控加工中心制造。

技术指标：

高压恒流泵基本技术指标：

流量范围：

0.001～9.999mL/min

流量稳定性误差：

Sr≤0.3% ，RSD<0.06%

流量设定值误差：

Ss≤2%

压力线性和准确度：

显示压力误差≤±0.5MPa（0～42MPa）

压力脉动：

≤0.1Mpa

泵的密封性压力：

42MPa

最高工作压力：

42MPa（0.001～9.999mL/min）

外型尺寸：

450mm×300mm×160mm（长×宽×高）

紫外检测器基本技术指标:

波长范围：

190～680nm

光谱带宽：

8nm

波长示值误差：

≤±1nm

波长重复性优于0.1nm

基线噪音：

≤2×10-5AU（动态）

基线漂移：

≤2×10-4AU（动态）

最小检测量：

1×10-8g/mL（萘的甲醇溶液）

外形尺寸：

450mm×300mm×160mm（长×宽×高）

四气相色谱法在食品卫生行业中的应用举例

（一）生物质量六六六和滴滴涕的测定气相色谱法

1.适用范围

本标准适用于生物（动物：

如禽、畜、鱼、蚯蚓；植物：

如粮食、水果、蔬菜、茶、藕）中六六六、滴滴涕的分析。

2.原理概要

本法采用丙酮－石油醚提取，以浓硫酸净化，用带电子捕获检测器的气相色谱仪测定。

3.主要试剂和仪器

3.1.载气

氮气，纯度99.99％，经去氧管过滤，氧的含量小于5ppm，氢的含量小于1.0ppm。

3.2.配制标准样品和试样预处理时使用的试剂和材料

使用的试剂系分析纯，有机溶剂经重蒸，浓缩20倍用气谱测定无干扰峰。

色谱标准样品：

α-六六六、β-六六六、γ-六六六、δ-六六六、p，p′-DDE、o，p′-DDT、p，p′-DDD、p，p′-DDT，含量98％～99％，色谱纯；

石油醚：

沸程60～90℃；

丙酮（CH3COCH3）；

异辛烷（C8H18）；

苯（C6H6）：

优级纯；

浓硫酸（H2SO4）：

密度为1.84；

发烟硫酸（H2SO4·xSO3）；

高氯酸（HClO4）：

优级纯；

冰乙酸（CH3COOH）；

无水硫酸钠（Na2SO4）：

在300℃烘箱中烘烤4h，备用；

硫酸钠溶液：

20g／L；

硅藻土：

试剂级；

三氯甲烷（CHCl3）；

助滤剂Celite545；

脱脂棉（或玻璃棉）：

用丙酮回流16h，取出晾干后备用；

消化液：

将60％高氯酸及冰乙酸等体积混合。

3.3.制备色谱柱时使用的试剂和材料

色谱柱和填充物；

涂渍固定液所用溶剂三氯甲烷。

3.4.仪器

主要仪器：

带电子捕获检测器的气相色谱仪；

控制载气的压力表及流量计；

进样器：

全玻璃系统进样器；

记录器：

与仪器相匹配的记录仪；

检测器：

类型：

电子捕获检测器；

器件的特征：

可采用63Ni放射源或高温3H放射源；

检测器极化电压可采用直流电源或脉冲电源；

色谱柱：

色谱柱数量：

2～3支；

色谱柱特征：

材料：

硬质玻璃；

尺寸：

长1.8～2.0m，内径2～3mm；

色谱柱类型：

螺旋状填充柱；

色谱柱预处理：

经水冲洗后，在玻璃柱管内注满热洗液（60～70℃）。

浸泡4h，然后用水冲洗至中性，再用蒸馏水冲洗，烘干后进行硅烷化处理，将6％～10％的二氯二甲基硅烷甲醇溶液注满玻璃柱管，浸泡2h，然后用甲醇清洗至中性烘干备用；

填充物：

载体：

chromosorbWAW-DMCS或者chromosorbWAW-DMCS-HP，80～100目；

固定液：

OV-17（甲基硅酮），最高使用温度350℃；QF-1或OV-210（三氯丙基甲基硅酮），最高使用温度250℃或275℃；

液相载荷：

OV-17为1.5％；OV-210或QF-1为1.95％；

涂渍固定液的方法：

根据担体的重量称取一定量的固定液，溶在三氯甲烷中，待完全溶解后，倒入盛有担体的烧杯中，再向其中加入三氯甲烷至液面高出1～2cm，摇匀后浸2h。

然后在红外灯下将溶剂挥发干或在旋转蒸发器上慢速蒸干。

再置于120℃烘箱中，放置4h后备用；

色谱柱的填充方法：

将色谱柱的一端（接检测器）用硅烷化玻璃塞住，接真空泵，另一端接一漏斗，开动真空泵后将固定相徐徐倾入色谱柱内，并轻轻拍打色谱柱，使固定相在色谱柱内填充紧密，至固定相不再抽入柱内为止，装填完毕后，用硅烷化玻璃棉塞住色谱柱另一端；

色谱柱的老化：

将填充好的色谱柱进口按正常接在汽化室上，出口空着不接检测器，先用较低载气流速，在略高于实际使用温度而不超过固定液的使用温度下处理4～6h，然后逐渐提高载气流速老化24～48h，再降低至使用温度，接上检测器后，如基线稳定即可使用；

柱效能：

在给定条件色谱柱总分离效能即分离度要求不小于90％；

试样预处理时使用的仪器：

样品瓶：

适宜的玻璃磨口瓶；

蒸发浓缩器；

脂肪提取器；

水浴锅；

振荡器；

万能粉碎机；

组织捣碎机；

真空泵；

玻璃器皿：

250mL、500mL分液漏斗，100、250、300mL具塞锥型瓶，500mL抽滤瓶，直径7～9cm布氏漏斗，直径0.6～1.0cm，长20cm玻璃层析柱，50、100mL量筒，250mL平底烧瓶，10、20mL刻度试管（经标定），研钵；

微量注射器：

5μL、10μL；

离心机。

4.样品制备

4.1.样品性质

样品名称：

禽畜鸟兽肉、鱼肉、蚯蚓、粮食、果蔬、茶、藕。

样品状态：

固体。

样品的稳定性，在“样品名称”各种样品中六六六、滴滴涕化学性质稳定。

4.2.样品的采集

禽畜（包括鸟兽）样：

家禽取1～3只杀好的，从脊背切开，取其整体一半，去骨骼，然后捣碎，混匀，备用。

家畜，根据测试目的，取具有代表性的样品0.5～1.0kg，捣碎，混匀，备用。

鱼样：

去鳞、鳍、内脏，沿脊背纵剖后取其二分之一或数分之一（50g以下者取整体），剔刺，用滤纸吸干表面水，取20条切碎，混匀，备用。

蚯蚓样：

从田间采集蚯蚓20～50条，在玻璃器皿中自然排泥2天（皿底垫滤纸加水湿润），然后洗净，用滤纸吸干表面水，取20条切碎，混匀，备用。

粮食样：

采取500g具代表性的（小麦、稻米、玉米等）样品，粉碎，过40目筛混匀，装入样品瓶备用。

果蔬、藕样：

取其代表性的新鲜果蔬、藕的可食部位1.0kg，切碎，取200g测水分含量，其余供试验用。

茶叶样：

鲜样同粮食样，干样同果蔬、藕样。

4.3.样品的保存

生物样品，采集后应尽快分析，如暂不分析可保存在－18℃冷冻箱中。

4.4.试样的预处理

4.4.1.提取

粮食样品的提取：

A法：

准确称取10g样品（粮食样），置于250mL具塞三角瓶中，加入60mL石油醚浸泡过夜，将上清液转入250mL分液漏斗中，再用40mL石油醚分两次洗涤三角瓶及样品，合并洗涤液于分液漏斗中，待净化。

B法：

准确称取10g样品（粮食样）置于250mL具塞三角瓶中，加100mL石油醚，于电动振荡器上振荡1h，提取液转移入250mL离心杯中（每次用20mL石油醚洗涤三角瓶后，倒入离心杯中离心10min），上清液合并于分液漏斗中，待净化。

果蔬、水生植物样（藕）的提取：

A法：

准确称取200g样品（果蔬、藕样）置于组织捣碎机缸内，快速捣碎1～2min，称取匀浆50g，置于250mL三角瓶中，加丙酮100mL，振摇1min，浸泡1h后过滤入500mL分液漏斗