人教版 微生物培养与利用单元检测.docx
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人教版微生物培养与利用单元检测
2017届人教版微生物培养与利用单元检测
1．用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时（ ）
①可以用相同的培养基 ②都需要使用接种针进行接种 ③都需要在火焰旁进行接种 ④都可以用来计数活菌
A．①② B．③④
C．①③D．②④
解析 平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基，故①正确；平板划线法采用接种针进行操作，而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作，故②错误；纯化时，要进行无菌操作，需要在火焰旁接种，避免空气中的微生物混入培养基，故③正确；平板划线法一般用于分离而不是计数，故④错误。
答案 C
2．下列有关培养基和菌种鉴定的叙述不正确的是（ ）
A．植物组织培养常用的是固体培养基
B．可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型
C．利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌
D．在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌
解析 在只含有尿素作为氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌。
答案 D
3．通过实验测定土壤中的细菌数量，下列与此操作有关的叙述中，不正确的是
（ ）
A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
B．取104、105倍的土壤稀释液0.1mL，分别涂布于各组平板上
C．将培养皿倒置，37℃恒温培养24～48小时
D．选择菌落数在300个以上的培养皿进行计数
解析 检测土壤中细菌总数，用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板，取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上，将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时，在确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300的平板进行计数。
答案 D
4．用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是（ ）
A．涂布了一个平板，统计的菌落数是230
B．涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238
C．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163
D．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233
解析 在设计实验时，一定要涂布至少3个平板作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性，所以A、B不正确。
C项虽涂布了3个平板，但是，其中1个平板的计数结果与另两个相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误，此时，不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。
答案 D
5.下表为某培养基的配方，下列叙述正确的是（ ）
成分
蛋白胨
葡萄糖
K2HPO4
伊红
美蓝
蒸馏水
含量
10g
10g
2g
0.4g
0.065g
1000mL
A.从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于选择培养基
B.该培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨
C.该培养基缺少提供生长因子的物质
D.该培养基调节合适的pH后就可以接种使用
答案 B
解析 分析表中成分可知，该培养基中没有凝固剂，为液体培养基，该培养基的营养成分齐全，但存在伊红、美蓝等鉴别物质，属于鉴别培养基，A项错误；该培养基中的蛋白胨既是唯一的氮源，也是碳源，而葡萄糖是绝大多数生物最常利用的碳源，B项正确；该培养基中存在的无机盐和蛋白胨中的某些物质可以看作是生长因子，C项错误；培养基调节完pH还要进行灭菌等操作后，才能使用，D项错误。
6.微生物培养过程中，要十分重视无菌操作。
现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染。
请分析下列操作中错误的是（ ）
①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢
②接种操作要在酒精灯火焰附近进行
③无菌繁殖脱毒苗时，植物的外植体要进行消毒
④家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌
⑤培养基要进行高压蒸汽灭菌
⑥加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌
A.①③B.②④C.③⑤D.④⑥
答案 D
解析 无菌操作包括消毒和灭菌。
需进行消毒处理的有植物的外植体及操作人员的双手等，需进行灭菌的有器皿、培养基、添加剂（指示剂或染色剂）等。
煮沸可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢，属于消毒；为防止空气中杂菌污染，接种时要在酒精灯火焰附近进行；家庭制作葡萄酒时所利用的微生物是葡萄表面的酵母菌，故不能灭菌；培养基常进行高压蒸汽灭菌。
故④⑥操作错误。
7.细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌（ ）
A.接种环、手、培养基B.高压锅、手、接种环
C.培养基、手、接种环D.接种环、手、高压锅
答案 C
解析 灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力，对于培养基、操作器皿和接种环等都需要灭菌。
消毒仅指杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害，如操作者的手和衣着需要消毒处理。
高压蒸汽通常用于培养基的灭菌。
用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。
火焰灼烧可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物的接种工具，如接种环。
8.下图中甲是稀释涂布平板法中的部分操作，乙是平板划线法的操作结果。
下列叙述中错误的是（ ）
A.甲中涂布前要将涂布器灼烧，冷却后才能取菌液
B.对于浓度较高的菌液，如甲中的稀释倍数仅为102，则所得的菌落不一定是由单一的细胞或孢子繁殖而成
C.乙培养皿中所得的菌落都符合要求
D.乙中的连续划线的起点是上一次划线的末端
答案 C
解析 灼烧后的涂布器如果没有冷却就接触菌种，会将菌体杀死，A正确。
稀释倍数过低会导致多个菌体聚集在一起繁殖成菌落，B正确。
平板划线法中最后一次划线的末端处形成的菌落才是由单一的细胞或孢子繁殖而成，这种菌落才符合要求，C错误。
连续划线中，除了第一次划线外，每一次划线的起点是上一次划线的末端，目的是使得菌体密度越来越小，保证最后划线末端处的菌落是由单一的细胞或孢子繁殖而成。
9.选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。
利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。
为选择酵母菌和硝化细菌，应选用的培养基分别为（ ）
A.伊红美蓝培养基、含青霉素培养基
B.含青霉素培养基、含氨的无机培养基
C.含氨的无机培养基、含青霉素培养基
D.含青霉素培养基、伊红美蓝培养基
答案 B
解析 酵母菌是真菌，通常可以用含青霉素的培养基进行选择培养，因为青霉素抑制细菌生长，但不能抑制真菌生长。
硝化细菌为自养型生物，能够利用氨转变为亚硝酸和硝酸所释放的能量，把无机物转变为有机物以维持自身生命活动，利用含氨的无机培养基可进行选择培养。
10.（2015·江苏，19）做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是（ ）
A.高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖
B.倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上
C.为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落
D.用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上
答案 D
解析 A项错，高压灭菌加热结束后，让其自然冷却，待压力表的压力降到零时，再慢慢打开排气阀以排除余气，然后才能开盖取物；B项错，倒平板时左手拿培养皿，右手拿锥形瓶，左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，倒入培养基后立即盖上培养皿皿盖；C项错，灼烧接种环之后，要在火焰旁冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种；D项对，在微生物的培养中，一般将培养皿倒置，在皿底上用记号笔做标记。
11.（2013·江苏，18）某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。
下列叙述正确的是（ ）
A.培养基分装到培养皿后进行灭菌
B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线
C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养
D.培养过程中每隔一周观察一次
答案 B
解析 培养基灭菌后再分装到培养皿中；转换划线角度后要灼烧接种环，冷却后再从上次划线的末端开始进行划线；接种后的培养皿必须放在恒温箱中进行培养，一般每隔12h或24h观察一次。
12.（2012·北京，5）高中生物学实验中，在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是（ ）
A.将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中
B.将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上
C.将转基因植物叶片接种到无菌培养基上
D.将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上
答案 C
解析 在酿制葡萄酒的过程中，如果灭菌不彻底会影响葡萄酒的品质，但影响不大；在制作腐乳的过程中，发酵过程有多种微生物的参与，所以该过程不进行严格的无
菌操作对结果影响不大；在植物组织培养过程中，如果灭菌不彻底，杂菌产生的物质会影响外植体的生长，甚至杀死外植体，导致培养失败，对结果影响最大；土壤浸出液本身就含有大量的杂菌，另外在选择培养基上只能生存我们所要筛选的细菌，所以无菌操作不严格，对结果影响也不会太大。
13.下列关于微生物的分离和培养的叙述中，正确的是（ ）
A.进行微生物培养前，需对培养瓶进行消毒处理
B.对细菌的分离和计数可用平板划线法和稀释涂布平板法
C.获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染
D.用含刚果红的尿素培养基筛选鉴别出能分解尿素的菌株
答案 C
解析 选项A，应对培养瓶进行灭菌处理。
选项B，对细菌进行计数时不能用平板划线法。
选项D，用含酚红的尿素培养基筛选和鉴别出分解尿素的菌株。
14.用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是（ ）
A.未接种的选择培养基
B.未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
C.接种了的选择培养基
D.接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
答案 D
解析 选择的目的是为了分离、筛选，对照遵循的原则是单一变量，因此用接种了的普通培养基和选择培养基进行对照，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目。
15.在农田土壤的表层自生固氮菌较多，用表层土制成的稀泥浆接种到特制的培养基上培养，可将自生固氮菌与其他细菌分开，对培养基的要求是（ ）
①加抗生素 ②不加抗生素 ③加氮素 ④不加氮素 ⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖 ⑦37℃恒温箱中培养
⑧28～30℃温度下培养
A.①③⑤⑦B.②④⑥⑧
C.②④⑤⑧D.①④⑥⑦
答案 C
解析 细菌对抗生素敏感，故培养基中应不加抗生素；自生固氮菌有固氮功能，故培养基中不需要加氮素；自生固氮菌是异养的，故培养基中应该加葡萄糖；其生长繁殖的适宜温度是28～30℃。
16、下面关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的叙述中，正确的是（ ）
A.只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素
B.筛选分解尿素的细菌时应以尿素作为培养基中的唯一营养物质
C.统计样品中的活菌数目时一般用平板划线法
D.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变蓝，则表明筛选到了分解尿素的细菌
答案 A
解析 只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，A正确；筛选分解尿素的细菌的实验中，采用的是以尿素为唯一“氮源”的培养基，B错误；统计样品中的活菌数目一般用稀释涂布平板法，C错误；在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂变红，这样就能初步鉴定该种细菌能够分解尿素，D错误。
17、.下列关于微生物接种的描述，正确的是（ ）
A.平板划线法只用于固体培养基的接种，而稀释涂布平板法只用于液体培养基的接种
B.平板划线法不能用于微生物的计数，而稀释涂布平板法可用于微生物的计数
C.利用平板划线法不能得到单菌落，而利用稀释涂布平板法能得到单菌落
D.平板划线法所用的接种工具不需要灭菌，而稀释涂布平板法所用的接种工具需要灭菌
答案 B
解析 这两种接种方法都可用于固体培养基的接种，都能用于形成单菌落，接种器具都要进行严格灭菌处理，A、C、D错误。
18、分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是（ ）
选项
尿素
琼脂糖
葡萄糖
硝酸盐
A
＋
＋
＋
＋
B
－
－
－
－
C
＋
＋
＋
－
D
＋
－
－
＋
注：
“＋”表示加入，“－”表示未加入。
答案 C
解析 分离土壤中分解尿素的细菌，培养基中要有碳源，且尿素作为唯一的氮源，不能添加硝酸盐。
19、下列培养基配方中能作为选择培养基、鉴别培养基的依次是（ ）
原料
①
②
③
④
蛋白胨（g）
10
10
10
10
乳糖（g）
5
5
5
5
蔗糖（g）
5
5
5
5
KH2PO4（g）
2
2
2
2
伊红（g）
0.4
美蓝（g）
0.065
琼脂（g）
10
20
NaCl（g）
20
蒸馏水（mL）
1000
1000
1000
1000
A.①③B.②①
C.②④D.③①
答案 D
解析 在培养基中加入伊红和美蓝，可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌，有伊红和美蓝的培养基为鉴别培养基。
高浓度的食盐可以抑制多种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生长，从而可以将金黄色葡萄球菌分离出来，有高浓度食盐的培养基为选择培养基。
20、下列关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述中，不正确的是（ ）
A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高压蒸汽灭菌后倒平板
B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL涂布到不同平板上培养
C.将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时
D.确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的平板进行计数
答案 D
解析 制备培养基时，需要将培养基用高压蒸汽灭菌，A正确；接种方法为稀释涂布平板法，即需要制备不同的土壤稀释液，B正确；对照组和实验组需要放置在恒温培养箱中培养，C正确；一般选择菌落数在30～300间的平板进行计数，D错误。
21.下面从土壤中筛选纤维素分解菌的实验步骤，正确的是（ ）
①土壤取样
②称取10g土壤加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中
③吸取0.1mL进行平板涂布
④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度
A.①→②→③→④B.①→③→②→④
C.①→②→④→③D.①→④→②→③
答案 C
解析 在分离土壤中某细菌时，应先选取土样（10g），然后加无菌水获得土壤浸出液，并进行不同倍数稀释，最后将稀释液涂布到培养基表面进行培养，并分离和计数。
22、.以下有关生物技术实践的叙述中，不正确的是（ ）
A.在大肠杆菌的分离和培养实验中，划线后盖好培养皿，再将培养皿倒置培养
B.在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌，符合生物与环境相适应的生物学观点
C.在酿酒生产上，常向发酵罐中加少量尿素，其目的是作为氮源，用于酵母菌合成蛋白质和核酸
D.不能用稀释涂布平板法来测定土壤溶液中某活菌数目
答案 D
23、.高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。
研究者从热泉中筛选出了能高效生产高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图所示。
（1）Ⅰ号培养基从物理状态来看，属于固体培养基，配制时要加入________作为凝固剂，从用途来看属于选择培养基，应以________作为唯一碳源。
（2）配置固体培养基的基本步骤是（ ）
A.计算、称量、倒平板、溶化、灭菌
B.计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
C.计算、称量、溶化、灭菌、倒平板
D.计算、称量、灭菌、溶化、倒平板
（3）溶化时，烧杯中加入琼脂后要不停地________，防止琼脂糊底引起烧杯破裂。
对培养基灭菌的方法一般为____________________。
（4）①过程是__________，②过程所使用的接种方法是________________法。
（5）部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放________分解培养基中的淀粉，在菌落周围形成透明圈，挑选相应的菌落，接种到Ⅱ号培养基进一步分离纯化后，再对菌种进行_______培养。
答案
（1）琼脂 淀粉
（2）C （3）搅拌 高压蒸气灭菌
（4）稀释 涂布分离 （5）淀粉酶 扩大
解析 固体培养基通常加入琼脂作为凝固剂。
本实验的目的是获得产生高温淀粉酶的嗜热菌，故其选择培养基中应以淀粉作为唯一碳源。
配置固体培养基的基本步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。
配置培养基时加热溶化时，要注意加入琼脂后要不断搅拌，防止琼脂糊底和溢出。
对培养基的灭菌一般采用高压蒸汽灭菌。
仔细观察题图可知，过程①是菌液稀释，过程②是采用涂布法接种的。
能产生淀粉酶的部分细菌能分解利用淀粉，其菌落周围会出现透明圈，取这样的菌落再分离纯化可获得相应菌种，以后可以扩大培养用于生产。
24、下图甲、乙是微生物接种常用的两种方法，请回答相关问题。
（1）图甲是利用________法进行微生物接种，图乙是利用__________________法进行微生物接种。
这两种方法所用的接种工具分别是________和________；对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是________和酒精消毒。
（2）接种操作为什么一定要在火焰附近进行？
________________________________________________________________________。
（3）接种后，在固体培养基上培养细菌时为什么进行倒置培养？
________________________________________________________________________。
（4）如图是采用上述接种方法接种后培养的效果图解，其接种方法是________（填“图甲”或“图乙”）。
答案
（1）平板划线 稀释涂布平板 接种环 涂布器 灼烧灭菌
（2）火焰附近存在着无菌区域
（3）避免培养过程产生的水分影响微生物的生长
（4）图乙
解析 图甲和图乙分别是平板划线法和稀释涂布平板法，这两种方法所用的接种工具分别是接种环和涂布器。
由于在酒精灯火焰附近存在着无菌区域，因此接种常在火焰附近进行。
在微生物培养过程中会产生水，对微生物的生长造成影响，故需要倒置培养。
25、.苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。
某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，①为土壤样品。
请回答下列问题：
（1）②中培养目的菌株的选择培养基中应加入________作为碳源，②中不同浓度碳源的培养基________（A.影响；B.不影响）细菌的数量，如果要测定②中活细菌数量，常采用____________________法。
（2）④为对照，微生物在④中不生长，在⑤中生长，④与⑤培养基的主要区别在于
________________________________________________________________________；
使用______________________________法可以在⑥上获得单菌落。
采用固体平板培养细菌时进行倒置培养的原因是__________________________________________________________
______________________________________________________________________________。
（3）实验过程中如何防止其他微生物的污染？
________________________________________________________________________。
答案
（1）苯酚 A 稀释涂布平板
（2）④的培养基没有加入苯酚作为碳源，⑤的培养基加入了苯酚作为碳源 稀释涂布平板法或平板划线 防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基
（3）培养基灭菌，接种环境灭菌，接种过程进行无菌操作
解析 根据微生物对营养的需求，在培养基中加入或不加某些物质以达到促进目的菌生长，抑制或阻止其他杂菌生长的目的，然后再用稀释涂布平板法、平板划线法或其他方法筛选出单个目的菌落，再接种培养即可获得纯目的菌。
为防止培养基中水分蒸发形成的水珠落入培养基中影响菌体生长，所以要将培养皿倒置。
在设计实验中要注意单一变量原则和对照原则，操作中要严格进行无菌操作。
26、.下表是某同学列出的分离土壤中微生物培养基的配方，据此回答下列问题：
培养基配方
KH2PO4
1.4g
Na2HPO4
2.1g
MgSO4·7H2O
0.2g
葡萄糖
10.0g
尿素
1.0g
琼脂
15.0g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL
（1）从作用上看，该培养基属于________培养基，提供氮源的物质是________，细菌能利用该氮源是由于体内能合成________酶。
（2）在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时，还需在培养基中加入________指示剂，若指示剂变________，说明有目的菌株存在。
（3）为了测定微生物的数量，接种时应采用__________________法，某同学在4个培养基上分别接种稀释倍数为106的土壤样液0.1mL，培养后菌落数分别为180、155、176、129个，则每毫升原土壤样液中上述微生物的数量为________，测定的活菌数比实际活菌数________（填“低”“高”“基本一致”）。
答案
（1）选择 尿素 脲（催化尿素分解的）
（2）酚红 红
（3）稀释涂布平板 1.6×109 低
解析
（1）题干指出表中是分离土壤中微生物的培养基配方，其中尿素是唯一氮源，能生长的菌落说明能利用尿素中的氮源，所以甲从用途上属于选择培养基。
以尿素为唯一氮源的培养基可以选择尿素分解菌。
（2）在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时，还需在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，说明有目的菌株存在。
（3）纯化微生物可以用稀释涂布平板法和平板划线法，其中稀释涂布平板法能用于微生物的计数。
1mL原土壤样液中上述微生物数量＝（180＋155＋176＋129）÷4×106×10＝1.6×109个；用稀释涂布平板法进行微生物的计数，但统计的数量比实际数量会偏少，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
27、.植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。
回答下列相关问题：
（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分形成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将______________分解成______________。
（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）染料时，CR可与纤维素形成________色复合物。
用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的________。
（3）为从富含纤维素分解菌的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落并加以鉴定，某同学设计了甲、乙两种培养基：
酵母膏
无机盐
淀粉
纤维素粉
琼脂
CR溶液
水
培养基甲
＋
＋
－
＋
－
＋
＋
培养基乙
＋
＋
＋
－
＋
＋
＋
注：
“＋”表示“有”，“－”表示“无”。
据表判断，培养基甲________（填“能”或“不能”）用于分离纤维素分解菌，原因是________
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