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关于穿山甲与猪蹄甲的化学成分比较
【编者按】医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果
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关于穿山甲与猪蹄甲的化学成分比较
【摘要】目的对穿山甲（I）和猪蹄甲（II）的成分进行比较。
方法用薄层层析法、紫外
分光光度法，氨基酸分析仪对I、II水解液、水提液及醇提液的成分及氨基酸进行测定
比较。
结果①两者水提液、醇提液的薄层斑点颜色和Rf值相同;②紫外吸收峰峰形基
本一致;③所含氨基酸一致，除个别氨基酸含量差异明显，其它氨基酸含量接近。
结论
猪蹄甲和穿山甲的提取物中所含成分相似且含量接近，这为猪蹄甲代替穿山甲药用提
供了理论依据。
【关键词】穿山甲猪蹄甲薄层层析紫外分光光度法氨基酸
1
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穿山甲的鳞甲，临床用于治疗痈疽疮肿、风寒湿痹、月经停闭、乳汁不通，外用止
血[1]，并有明显的抗肿瘤作用，用于妇科卵巢肿瘤效果显著[2];猪蹄甲临床用于治疗痔
疮、疽咳嗽喘息及通乳、补血等[3]。
此外，民间有将猪蹄甲煅成炭后口服以治疗功能
性子宫出血症的[4]用法。
穿山甲是国家二级保护动物，其鳞甲为常用的贵重中药材。
由于用量不断增大，野
生资源已临灭绝，市场供需矛盾非常突出，因而，很有必要寻找新资源予以代用。
据
临床报道，猪蹄甲可代替穿山甲[5，6]使用，《本草纲目》记载了穿山甲与猪蹄甲作用
疗效有相同之处，均可治痈疽、恶疮、痔漏、除痰化痰等。
本文对穿山甲和猪蹄甲的
水和70%乙醇提取物进行了薄层、紫外线及氨基酸含量等的分析，结果发现，两种提
取物斑点颜色和Rf值基本相同;此外吸收峰形基本一致，含氨基酸的类型及含量也基本
相同。
现报道如下。
1材料及仪器
穿山甲（已炮制，购于南昌中药切制厂），猪蹄甲（已炮制，购于南昌肉类加工厂）。
仪
器：
三用紫外线分析仪（海顾村电光仪器厂），日立835-50型氨基酸自动分析仪，721型
可见分光光度计（上海第三分析仪器厂）。
所有试剂均为A.R级。
2方法与结果
2
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2.1检测液的制备
2.1.1水解液的制备
称取穿山甲（I）粉末50.0g，加入6mol/L的HCl250ml，回流48h[7]，将水解液置于
水浴上加热挥去HCl，取出加入活性炭，趁热抽滤，浓缩，定容，摇匀，灌装，密
封，高温灭菌，备用。
称取猪蹄甲（II）粉末50.0g，加入6mol/L的HCl250ml，同穿山甲水解液的制备，得
猪蹄甲水解液。
2.1.2醇提液的制备
称取I粉末30.0g，加入70%乙醇240ml[8]，回流1h，趁热抽滤，滤液浓缩到一定
量，定容（50ml），摇匀，灌装，备用。
称取II粉末30.0g，照上法制得醇提液。
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2.1.3水提液的制备
称取I粉末20.0g加入蒸馏水200ml，煎煮1h，抽滤，滤渣中再加蒸馏水200ml，
煎煮1h，抽滤，合并两次滤液，浓缩，定容，摇匀灌装，密封后高温来灭菌，备用。
称取II粉末20.0g，照上法制得水提液。
2.2薄层分析
2.2.1层析板的制备玻璃规格
厚2mm左右，光滑清洁，2cm10cm或4cm20cm。
铺板：
硅胶G300g，加入0.7%CMC-Na上清液60ml，研钵中研成均匀糊状，立即
铺层，凉干，105℃活化1h，干燥器中备用。
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tips:
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大孔吸附树脂分离纯化红花黄色素研究
作者：
张吉祥，白晓杰，周秋香，欧来良，孔德领
【摘要】目的考察ADS-17大孔吸附树脂对红花黄色素的分离纯化方法。
方法采用
静态和动态吸附，考察了ADS-17树脂的吸附性能，并采用紫外-可见分光光度法对红
花黄色素含量进行了定量分析。
结果ADS-17树脂对红花黄色素具有较好的吸附选择
性。
在最优化工艺条件下，即吸附流速2BV/h，50%乙醇作为洗脱剂，洗脱流速2
BV/h，产品纯度达到85.34%。
结论ADS-17树脂用于红花黄色素的分离纯化效果良
好。
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【关键词】红花黄色素大孔吸附树脂
Abstract：
ObjectiveTostudythemethodforseparationandpurificationofthesafflor
yellow（SY）inFlorCarthamiwithmacroporousabsorptionresinADS-17.MethodsADS-17
resinwassystematicallystudiedforitsabsorptioncapabilitybystaticanddynamic
absorption.UV-ViswasusedtomeasurethecontentofSY.ResultsADS-17resincouldbe
usedtoproduceSYwithhighquality.Theoptimaltechnologicalconditionswereasfollows:
theflowvelocityofabsorption,2BV/h,theelutingreagent50%ethanol,elutingvelocity2
BV/h.ThepurityofSYwas85.34%.ConclusionThismethodwithADS-17macroporous
absorptionresinisefficienttoseparatethesaffloryellow.
Keywords：
Florcarthami;Saffloryellow;Marcoporousabsorptionresin
红花Florcarthami为菊科植物红花CarthamustinctoriusL.的干燥花，具有活血通经、
化淤止痛、扩张冠脉血管、抗氧化、保护心肌、降血压、免疫抑制和脑保护等多种药
理学功效[1]。
临床应用于冠心病、血管栓塞性疾病、高血压病、高血脂、传染性肝炎
有较好疗效。
红花主要含有色素、黄酮类化合物、酚酸、脂肪酸等化学成分。
色素主
要指的是红花黄色素（Saffloryellow）和红花红色素（Carthamin），二者均为黄酮衍生物
[2，3]。
红花黄色素为黄色或棕黄色粉末，易溶于水、稀乙醇、稀丙二醇，几乎不溶于
无水乙醇，不溶于乙醚、石油醚和丙酮，在红花中的含量为20%～30%。
药理研究表
明红花黄色素是红花中的主要有效成分，是多种查耳酮的混合物，利用分光光度法可
以测定红花黄色素的总量[4]。
近年来，人们对水溶性的红花黄色素提取做了较多的研
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究，但利用大孔吸附树脂分离纯化红花黄色素的研究并不是很多[5～7]。
本实验采用
ADS系列大孔吸附树脂对红花黄色素进行分离纯化，只需经过吸附-脱附过程就可得到
纯度较高的红花黄色素，并对提取物中黄色素的含量进行了定量测定。
1仪器与试剂
1.1仪器UV-754分光光度计（上海第三分析仪器厂）;玻璃吸附柱（2cm20cm）;RE-52A
旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）;HL-2恒流泵（上海沪西仪器厂）;BSZ-2自动部分收集
器（上海沪西仪器厂）;THZ88-1台式多用恒温振荡器（江苏太仓鹿河生化仪器厂）;真空干
燥箱（天津实验仪器厂）;DT-100A型分析天平（北京光学仪器厂）。
1.2试剂大孔吸附树脂ADS-5、ADS-7、ADS-8、ADS-17树脂（天津南开和成科技有
限公司）;红花，购自河北安国医药公司，经天津医科大学中药鉴定教研室吴德康教授鉴
定为菊科植物红花的干燥花;羟基红花黄色素A对照品（中国药品生物制品检定所）;工业
乙醇;其他所用试剂均为分析纯。
2方法与结果
2.1标准曲线的绘制精密称定羟基红花黄色素A对照品20.0mg，置于25ml的容量
瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。
分别精密吸取0.20，0.40，0.80，1.00，1.50ml
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于50ml的容量瓶中，加水定容至刻度，摇匀，于403nm波长处测定吸光度值。
结果
红花黄色素浓度在3.2～24g/ml范围内与吸光度呈良好线性关系，吸光度对浓度作图
得标准线性方程为：
A=0.0352C-0.0103，r=0.9994。
2.2红花上样液的制备准确称取红花药材100g，加入14倍体积的去离子水室温浸泡
30min，加热提取20min[8]。
过滤后将药渣按上述方法再提取1次，合并提取液，减
压浓缩、过滤得澄清液，加水定容至1000ml，备用。
2.3上样液红花黄色素含量的测定精密吸取样品溶液适量于100ml容量瓶中，加水
定容至刻度，于403nm波长处测定吸光度值，根据标准曲线测定黄色素的含量。
2.4树脂的预处理ADS-5,ADS-8,ADX-17,ADS-7分别为非极性、弱极性、中极性和
强极性吸附树脂，使用前先用石油醚抽提10h，然后乙醇浸泡24h，湿法装柱。
用乙
醇洗至加水不浑浊，然后用蒸馏水洗至无醇，ADS-5，ADS-8，ADX-17即可使用，
ADS-7树脂再需经酸碱处理后方可使用。
2.5静态吸附和解吸实验将1.0g湿树脂直接加入100ml具塞锥形瓶中，加入10ml
样品溶液，将具塞锥形瓶放在25℃恒温振荡器上振荡12h，转速120次/min，吸附
平衡后，取上清液测定黄色素含量。
以体积分数50%的乙醇溶液考察静态解吸率。
将
吸附液滤去，向达到吸附平衡的树脂中加入10ml上述乙醇溶液，25℃连续振荡12
h，待充分解吸后测定所得浸提液中黄色素的质量浓度，分别按下式计算吸附量和解吸
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为2BV/h时，10mlADS-17树脂的最大上柱体积为4BV而不泄漏。
50%乙醇洗脱
时，4BV即可完全洗脱。
2.7上样液pH值对动态吸附效果的影响取经过预处理的树脂各10ml以湿法分别装
入4支交换柱，各取样品溶液50ml通入，用稀盐酸调节溶液的pH值分别为1，3，
5，7，控制流速为2BV/h上样，吸附完毕后，分别用50%的乙醇脱附，收集洗脱液50
ml，于403nm测定吸光度，计算上样液不同pH值下上柱吸附量和解吸率（见表2）。
由
表2可知，当药液pH=3时，树脂吸附量和解吸率均较高。
表2上样液pH值对黄色素
动态吸附解吸效果的影响（略）
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2.2.2点样液的制备
将以上I、II醇提液、水提液各取40ml浓缩至10ml，装入小锥形瓶中塞紧备用，
水提液置冰箱中保存。
2.2.3点样
分别用微量进样器取上述I、II醇提液的浓缩制品15ml，点样于硅胶G板上，分别
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以A、B、C3种不同溶剂系统展开[8]，结果见图1～3。
A溶剂系统：
展开剂正丁醇（水饱和液）∶无水乙醇（3∶1）
显示剂5%茚三酮无水乙醇液
各点Rf值
1I=0.1471II=0.147
2I=0.2242II=0.224
3I=0.3453II=0.349
4I=0.4574II=0.448
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5I=0.7415II=0.716
6II点为绿色，其它各荧光点均为淡紫色。
B溶剂系统：
展开剂正丁醇∶乙醇∶NH3H2O（4∶1∶1）
显色剂5%茚三酮无水醇液
各点Rf值：
1I=0.08221II=0.0822
2I=0.2192II=0.218
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3I=0.2793II=0.283
4I=0.6274II=0.630
5I=0.9775II=0.977
5I、5II、6II为紫色点，其它各荧光点均为黄绿色。
由以上数据可看出，I、II醇提液或水提液在不同溶剂系统下展开后，其相应各点Rf
值基本相同，荧光点的颜色也基本一致，说明二者成分基本相同。
在上述两种提取液
的薄层层析中，有一明显现象是II的斑点颜色和荧光点亮度均深于I的斑点，因在同
一浓度下，说明II含有的成分量可能高于I。
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2.3紫外分析分别取I、II
的醇提物和水提物于721型可分光光度计中，在不同波长处测其吸收度A，醇提物以
70%乙醇为空白，水提物以蒸馏水为空白，结果醇提物无吸收，水提物结果如图6～
7。
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上图可看出I、II水提液在400nm左右都有强吸收峰，二者波形相似，说明I、II含
的成分相近。
在两次测量中，AIImax-AImax（最大吸收处A的差）基本相等且左右图峰
相似，说明I、II水提物最大吸收受时间影响不大，水提的方法得到的组分稳定性较
好。
2.4氨基酸含量的测定将I水解液（0.2g/ml），水提液（0.4g/ml），醇提液（0.6g/ml）;II水
提液（0.2g/ml），水提液（0.4g/ml），醇提液（0.6g/ml）共6种样品取出一定量，用日立
835-50型氨基酸自动分析仪测出其含游离氨基酸的量（浙江医学科学院食品研究所测）。
结果见表1～2。
表1必需氨基酸含量比较（略）表2非必需氨基酸含量比较（略）
由表1～2可以看出II水解液中必需氨基酸总量高于I水解液的必需氨基酸总量;I、II
水解液中天氨酸、苏氨酸、丝氨酸、赖氨酸等含量基本相同，其它各种氨基酸含量也
十分接近;所测的7种必需氨基酸中有5种的含量基本一致，说明I、II含有相似的肽类
或蛋白质且含量相近。
I、II水提液和醇提液中，各类氨基酸相对应的含量接近;必需氨
基酸总量水提液中III。
表中数据还可看出，水提方法所得的I、II的氨基酸总量远远
高于70%乙醇提取液中的氨基酸总量。
3讨论
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在TLC、UV以及氨基酸检测中皆显示I、II两种供试液的成分基本相同，这为猪蹄
甲代替穿山甲药用提供了一定的理论依据[10]。
由氨基酸的测定结果可得，I、II水提液中氨基酸含量均高于它们各自醇提液，说明
水提效率高于醇提，这为在提取工艺中选择合适的溶剂提供了一定的参考。
在后续的工作中，我们将采用其他一系列的分析方法对穿山甲和猪蹄甲的成分作更
深入全面的分析比较。
【参考文献】
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[键入文字]
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1999,10（12）:
966
医药卫生栏目
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