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推荐下载关于穿山甲与猪蹄甲的化学成分比较.docx

1、推荐下载关于穿山甲与猪蹄甲的化学成分比较键入文字关于穿山甲与猪蹄甲的化学成分比较 【编者按】医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果的论说性文章。论文网为您提供医药论文范文参考,以及论文写作指导和格式排版要求,解决您在论文写作中的难题。关于穿山甲与猪蹄甲的化学成分比较【摘要】 目的对穿山甲(I)和猪蹄甲(II)的成分进行比较。方法用薄层层析法、紫外分光光度法,氨基酸分析仪对 I、II 水解液、水提液及醇提液的成分及氨基酸进行测定比较。结果两者水提液、醇提液的薄层斑点颜色和 Rf 值相同;紫外吸收峰峰形基本一致;所含氨基酸一致,除个别氨基酸含量差异明显,其它氨基酸含量接近。结

2、论猪蹄甲和穿山甲的提取物中所含成分相似且含量接近,这为猪蹄甲代替穿山甲药用提供了理论依据。【关键词】 穿山甲 猪蹄甲 薄层层析 紫外分光光度法 氨基酸1键入文字穿山甲的鳞甲,临床用于治疗痈疽疮肿、风寒湿痹、月经停闭、乳汁不通,外用止血1,并有明显的抗肿瘤作用,用于妇科卵巢肿瘤效果显著2;猪蹄甲临床用于治疗痔疮、疽咳嗽喘息及通乳、补血等3。此外,民间有将猪蹄甲煅成炭后口服以治疗功能性子宫出血症的4用法。穿山甲是国家二级保护动物,其鳞甲为常用的贵重中药材。由于用量不断增大,野生资源已临灭绝,市场供需矛盾非常突出,因而,很有必要寻找新资源予以代用。据临床报道,猪蹄甲可代替穿山甲5,6使用,本草纲目记

3、载了穿山甲与猪蹄甲作用疗效有相同之处,均可治痈疽、恶疮、痔漏、除痰化痰等。本文对穿山甲和猪蹄甲的水和 70%乙醇提取物进行了薄层、紫外线及氨基酸含量等的分析,结果发现,两种提取物斑点颜色和 Rf 值基本相同;此外吸收峰形基本一致,含氨基酸的类型及含量也基本相同。现报道如下。1 材料及仪器穿山甲(已炮制,购于南昌中药切制厂),猪蹄甲(已炮制,购于南昌肉类加工厂)。仪器:三用紫外线分析仪(海顾村电光仪器厂),日立 835-50 型氨基酸自动分析仪,721 型可见分光光度计(上海第三分析仪器厂)。所有试剂均为 A.R 级。2 方法与结果2键入文字2.1 检测液的制备2.1.1 水解液的制备称取穿山甲

4、(I)粉末 50.0 g,加入 6 mol/L 的 HCl 250 ml,回流 48 h7,将水解液置于水浴上加热挥去 HCl,取出加入活性炭,趁热抽滤,浓缩,定容,摇匀,灌装,密封,高温灭菌,备用。称取猪蹄甲(II)粉末 50.0 g,加入 6 mol/L 的 HCl 250 ml,同穿山甲水解液的制备,得猪蹄甲水解液。2.1.2 醇提液的制备称取 I 粉末 30.0 g,加入 70%乙醇 240 ml8,回流 1 h,趁热抽滤,滤液浓缩到一定量,定容(50 ml),摇匀,灌装,备用。称取 II 粉末 30.0 g,照上法制得醇提液。3键入文字2.1.3 水提液的制备称取 I 粉末 20.0

5、 g 加入蒸馏水 200 ml,煎煮 1 h,抽滤,滤渣中再加蒸馏水 200 ml,煎煮 1 h,抽滤,合并两次滤液,浓缩,定容,摇匀灌装,密封后高温来灭菌,备用。称取 II 粉末 20.0 g,照上法制得水提液。2.2 薄层分析2.2.1 层析板的制备玻璃规格厚 2 mm 左右,光滑清洁,2 cm 10 cm 或 4 cm 20 cm。铺板:硅胶 G300 g,加入 0.7%CMC-Na 上清液 60 ml,研钵中研成均匀糊状,立即铺层,凉干,105活化 1 h,干燥器中备用。4键入文字tips:感谢大家的阅读,本文由我司收集整编。仅供参阅! 【编者按】医药论文是科技论文的一种是用来进行医药

6、科学研究和描述研究成果的论说性文章。论文网为您提供医药论文范文参考,以及论文写作指导和格式排版要求,解决您在论文写作中的难题。大孔吸附树脂分离纯化红花黄色素研究作者:张吉祥, 白晓杰, 周秋香, 欧来良, 孔德领【摘要】 目的考察 ADS-17 大孔吸附树脂对红花黄色素的分离纯化方法。方法采用静态和动态吸附,考察了 ADS-17 树脂的吸附性能,并采用紫外-可见分光光度法对红花黄色素含量进行了定量分析。结果 ADS-17 树脂对红花黄色素具有较好的吸附选择性。在最优化工艺条件下,即吸附流速 2 BV/h,50%乙醇作为洗脱剂,洗脱流速 2BV/h,产品纯度达到 85.34%。结论 ADS-17

7、 树脂用于红花黄色素的分离纯化效果良好。5键入文字【关键词】 红花 黄色素 大孔吸附树脂Abstract:ObjectiveTo study the method for separation and purification of the saffloryellow(SY) in Flor Carthami with macroporous absorption resin ADS-17. MethodsADS-17resin was systematically studied for its absorption capability by static and dynamicabsor

8、ption. UV-Vis was used to measure the content of SY.ResultsADS-17 resin could beused to produce SY with high quality. The optimal technological conditions were as follows:the flow velocity of absorption, 2 BV/h, the eluting reagent 50% ethanol, eluting velocity 2BV/h. The purity of SY was 85.34%. Co

9、nclusionThis method with ADS-17 macroporousabsorption resin is efficient to separate the safflor yellow.Key words:Flor carthami; Safflor yellow; Marcoporous absorption resin红花 Flor carthami 为菊科植物红花 Carthamus tinctorius L.的干燥花,具有活血通经、化淤止痛、扩张冠脉血管、抗氧化、保护心肌、降血压、免疫抑制和脑保护等多种药理学功效1。临床应用于冠心病、血管栓塞性疾病、高血压病、高血

10、脂、传染性肝炎有较好疗效。红花主要含有色素、黄酮类化合物、酚酸、脂肪酸等化学成分。色素主要指的是红花黄色素(Safflor yellow)和红花红色素(Carthamin),二者均为黄酮衍生物2,3。红花黄色素为黄色或棕黄色粉末,易溶于水、稀乙醇、稀丙二醇,几乎不溶于无水乙醇,不溶于乙醚、石油醚和丙酮,在红花中的含量为 20%30%。药理研究表明红花黄色素是红花中的主要有效成分,是多种查耳酮的混合物,利用分光光度法可以测定红花黄色素的总量4。近年来,人们对水溶性的红花黄色素提取做了较多的研6键入文字究,但利用大孔吸附树脂分离纯化红花黄色素的研究并不是很多57。本实验采用ADS 系列大孔吸附树脂

11、对红花黄色素进行分离纯化,只需经过吸附-脱附过程就可得到纯度较高的红花黄色素,并对提取物中黄色素的含量进行了定量测定。1 仪器与试剂1.1 仪器 UV-754 分光光度计(上海第三分析仪器厂);玻璃吸附柱(2 cm 20 cm);RE-52A旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂);HL-2 恒流泵(上海沪西仪器厂);BSZ-2 自动部分收集器(上海沪西仪器厂);THZ88-1 台式多用恒温振荡器(江苏太仓鹿河生化仪器厂);真空干燥箱(天津实验仪器厂);DT-100A 型分析天平(北京光学仪器厂)。1.2 试剂大孔吸附树脂 ADS-5、ADS-7、ADS-8、ADS-17 树脂(天津南开和成科技有限公

12、司);红花,购自河北安国医药公司,经天津医科大学中药鉴定教研室吴德康教授鉴定为菊科植物红花的干燥花;羟基红花黄色素 A 对照品(中国药品生物制品检定所);工业乙醇;其他所用试剂均为分析纯。2 方法与结果2.1 标准曲线的绘制精密称定羟基红花黄色素 A 对照品 20.0 mg,置于 25 ml 的容量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀。分别精密吸取 0.20,0.40,0.80,1.00,1.50 ml7键入文字于 50 ml 的容量瓶中,加水定容至刻度,摇匀,于 403 nm 波长处测定吸光度值。结果红花黄色素浓度在 3.224 g/ml 范围内与吸光度呈良好线性关系,吸光度对浓度作图得标准线性

13、方程为:A=0.035 2C-0.010 3,r=0.999 4。2.2 红花上样液的制备准确称取红花药材 100 g,加入 14 倍体积的去离子水室温浸泡30 min,加热提取 20 min8。过滤后将药渣按上述方法再提取 1 次,合并提取液,减压浓缩、过滤得澄清液,加水定容至 1 000 ml,备用。2.3 上样液红花黄色素含量的测定精密吸取样品溶液适量于 100 ml 容量瓶中,加水定容至刻度,于 403 nm 波长处测定吸光度值,根据标准曲线测定黄色素的含量。2.4 树脂的预处理 ADS-5,ADS-8,ADX-17, ADS-7 分别为非极性、弱极性、中极性和强极性吸附树脂,使用前先

14、用石油醚抽提 10 h,然后乙醇浸泡 24 h,湿法装柱。用乙醇洗至加水不浑浊,然后用蒸馏水洗至无醇,ADS-5,ADS-8,ADX-17 即可使用,ADS-7 树脂再需经酸碱处理后方可使用。2.5 静态吸附和解吸实验将 1.0 g 湿树脂直接加入 100 ml 具塞锥形瓶中,加入 10 ml样品溶液,将具塞锥形瓶放在 25 恒温振荡器上振荡 12 h,转速 120 次/min,吸附平衡后,取上清液测定黄色素含量。以体积分数 50%的乙醇溶液考察静态解吸率。将吸附液滤去,向达到吸附平衡的树脂中加入 10 ml 上述乙醇溶液,25 连续振荡 12h,待充分解吸后测定所得浸提液中黄色素的质量浓度,

15、分别按下式计算吸附量和解吸8键入文字为 2 BV/h 时,10 ml ADS-17 树脂的最大上柱体积为 4 BV 而不泄漏。50%乙醇洗脱时,4BV 即可完全洗脱。2.7 上样液 pH 值对动态吸附效果的影响取经过预处理的树脂各 10 ml 以湿法分别装入 4 支交换柱,各取样品溶液 50 ml 通入,用稀盐酸调节溶液的 pH 值分别为 1,3,5,7,控制流速为 2 BV/h 上样,吸附完毕后,分别用 50%的乙醇脱附,收集洗脱液 50ml,于 403 nm 测定吸光度,计算上样液不同 pH 值下上柱吸附量和解吸率(见表 2)。由表 2 可知,当药液 pH=3 时,树脂吸附量和解吸率均较高

16、。表 2 上样液 pH 值对黄色素动态吸附解吸效果的影响(略)tips:感谢大家的阅读,本文由我司收集整编。仅供参阅!2.2.2 点样液的制备将以上 I、II 醇提液、水提液各取 40 ml 浓缩至 10 ml,装入小锥形瓶中塞紧备用,水提液置冰箱中保存。2.2.3 点样分别用微量进样器取上述 I、II 醇提液的浓缩制品 15 ml,点样于硅胶 G 板上,分别10键入文字以 A、B、C 3 种不同溶剂系统展开8,结果见图 13。A 溶剂系统:展开剂 正丁醇(水饱和液)无水乙醇 (31)显示剂 5%茚三酮无水乙醇液各点 Rf 值1I=0.147 1II=0.1472I=0.224 2II=0.2

17、243I=0.345 3II=0.3494I=0.457 4II=0.44811键入文字5I=0.741 5II=0.7166II 点为绿色,其它各荧光点均为淡紫色。B 溶剂系统:展开剂 正丁醇乙醇NH3 H2O(411)显色剂 5%茚三酮无水醇液各点 Rf 值:1I=0.0822 1II=0.08222I=0.219 2II=0.21812键入文字3I=0.279 3II=0.2834I=0.627 4II=0.6305I=0.977 5II=0.9775I、5II、6II 为紫色点,其它各荧光点均为黄绿色。由以上数据可看出,I、II 醇提液或水提液在不同溶剂系统下展开后,其相应各点 Rf值

18、基本相同,荧光点的颜色也基本一致,说明二者成分基本相同。在上述两种提取液的薄层层析中,有一明显现象是 II 的斑点颜色和荧光点亮度均深于 I 的斑点,因在同一浓度下,说明 II 含有的成分量可能高于 I。tips:感谢大家的阅读,本文由我司收集整编。仅供参阅!2.3 紫外分析分别取 I、II的醇提物和水提物于 721 型可分光光度计中,在不同波长处测其吸收度 A,醇提物以70%乙醇为空白,水提物以蒸馏水为空白,结果醇提物无吸收,水提物结果如图 67。13键入文字上图可看出 I、II 水提液在 400 nm 左右都有强吸收峰,二者波形相似,说明 I、II 含的成分相近。在两次测量中,AIImax

19、-AImax(最大吸收处 A 的差)基本相等且左右图峰相似,说明 I、II 水提物最大吸收受时间影响不大,水提的方法得到的组分稳定性较好。2.4 氨基酸含量的测定将 I 水解液(0.2 g/ml),水提液(0.4 g/ml),醇提液(0.6 g/ml);II 水提液(0.2 g/ml),水提液(0.4 g/ml),醇提液(0.6 g/ml)共 6 种样品取出一定量,用日立835-50 型氨基酸自动分析仪测出其含游离氨基酸的量(浙江医学科学院食品研究所测)。结果见表 12。表 1 必需氨基酸含量比较(略)表 2 非必需氨基酸含量比较(略)由表 12 可以看出 II 水解液中必需氨基酸总量高于 I

20、 水解液的必需氨基酸总量;I、II水解液中天氨酸、苏氨酸、丝氨酸、赖氨酸等含量基本相同,其它各种氨基酸含量也十分接近;所测的 7 种必需氨基酸中有 5 种的含量基本一致,说明 I、II 含有相似的肽类或蛋白质且含量相近。I、II 水提液和醇提液中,各类氨基酸相对应的含量接近;必需氨基酸总量水提液中 II I。表中数据还可看出,水提方法所得的 I、II 的氨基酸总量远远高于 70%乙醇提取液中的氨基酸总量。3 讨论14键入文字在 TLC、UV 以及氨基酸检测中皆显示 I、II 两种供试液的成分基本相同,这为猪蹄甲代替穿山甲药用提供了一定的理论依据10。由氨基酸的测定结果可得,I、II 水提液中氨

21、基酸含量均高于它们各自醇提液,说明水提效率高于醇提,这为在提取工艺中选择合适的溶剂提供了一定的参考。在后续的工作中,我们将采用其他一系列的分析方法对穿山甲和猪蹄甲的成分作更深入全面的分析比较。【参考文献】1江苏新医学院.中药大辞典M.上海:上海科学技术出版社,1977:1728,3549.2敖保世.穿山甲散治疗卵巢肿瘤 8 例报告J.江西中医药, 1981,31(3):35.3杨立权,迟 程. 穿山甲的研究概况与展望J.云南中医学院学报,1994,17(4):46.15键入文字4赵宜红,李寅超.猪蹄甲、穿山甲的消痈作用J.中医研究,2001,14(6):60.5付 丽.浅谈猪蹄甲与穿山甲的炮制方法J.内蒙古药学,1985,(1):44.6边振考,胡春光,吕晓顺.猪蹄甲用于催乳的研究J.中国药学杂志,1991,26(11):663.7刘世勤.穿山甲的化学成分J.中药通报,1988,13(8):33.8高 英,吕振兰.穿山甲片与猪蹄甲的成分研究J.中药材,1989,12(2):330.9田淑霄,李丽华.穿山甲猪蹄甲中氨基酸含量比较分析J.河北中医学院学报,2000,15(2):28.10毕泗科,张盂慈. 猪、牛、羊蹄甲可代穿山甲药用及剂型探讨J.时珍国医国药,1999,10(12):966医药卫生栏目16键入文字tips:感谢大家的阅读,本文由我司收集整编。仅供参阅!17

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