专题2 微生物的培养和应用练习试题含答案.docx

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专题2微生物的培养和应用练习试题含答案

专题3植物的组织培养技术

一、单选题

1.下列有关分解纤维素微生物的分离的叙述，不正确的是（　　）

A．纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵

B．对分解纤维素的微生物进行了初步筛选后，无需再进行其他实验

C．纤维素酶的测定方法，一般是对所产生的葡萄糖进行定量地测定

D．纤维素酶是一种复合酶

2.关于生物技术实践中的有关检验，不正确的是（　　）

A．在果酒制作实验结束时要检验是否有酒精产生，正确的操作步骤是先在试管中加入适量的发酵液，然后再加入硫酸和重铬酸钾的混合液

B．在微生物培养中，检验培养基是否被污染的方法是用一组不接种或接种无菌水的培养基与接种培养物的培养基一起培养

C．检验以尿素为唯一氮源的培养是否分离出了分解尿素的细菌，方法是在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，则说明分离成功

D．检验胡萝卜素纯度的方法是纸层析法，原理是不同的色素分子在层析液中的溶解度不同，故随层析液在滤纸上扩散的速度不同，若样品中有杂质，则会出现不同的色素点（带）

3.下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是（　　）

A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水

B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、水

C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、水

D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水

4.微生物（除病毒外）需要从外界吸收营养物质，并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。

下列有关微生物营养的说法正确的是（　　）

A．纤维素分解菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的

B．许多微生物（如细菌、放线菌）为原核生物，不含线粒体，所以只进行无氧呼吸，为厌氧型生物

C．培养基中的营养物质浓度越高对微生物的生长越有利

D．生长因子通常是微生物生长必需的，而微生物本身合成这些物质的能力往往不足

5.下列有关培养基和菌种鉴定的叙述不正确的是（　　）

A．植物组织培养常用的是固体培养基

B．可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型

C．在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌

D．利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌

6.下列有关生物技术实践的叙述，不正确的是（　　）

A．制作果醋时应不断通入无菌空气

B．在土壤中分解尿素的细菌的分离和计数实验中，应采用平板划线法

C．通过比色法来检测亚硝酸盐含量需要制备标准显色液

D．饥饿时，胰高血糖素分泌量上升，促进肝糖原和肌糖原分解

7.在平板划线操作中，错误的是（　　）

A．将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红

B．将烧红的接种环在火焰旁边冷却

C．接种环在平板上的划线位置是随机的

D．在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰

8.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂的目的是（　　）

A．筛选出能分解尿素的细菌

B．对分离的菌种作进一步鉴定

C．作细菌的营养成分

D．如指示剂变蓝就能准确地认定该菌能分解尿素

9.微生物体内能够使纤维素分解成纤维二糖的酶是（　　）

A．C1酶和Cx酶

B．C1酶和葡萄糖苷酶

C．Cx酶和葡萄糖苷酶

D．C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶

10.梯度稀释过程中用移液管把菌液从一支试管转移到下一支试管后，要用手指轻压移液管的橡皮头，吹吸三次，其目的是（　　）

A．增加试管内的溶氧量

B．使菌液与水充分混匀

C．使试管中菌液的浓度降低

D．使细菌的形态结构发生改变

11.有关平板划线操作的叙述，不正确的是（　　）

A．第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物

B．每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上的菌种

C．在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液

D．划线结束后，灼烧接种环，能及时杀死接种环上的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者

12.将细菌放在固体培养基上培养，它会繁殖并形成菌落（如下图）。

某实验小组想检验两种抗生素的杀菌作用，下列哪个实验方案最合适（　　）

A．答案A

B．答案B

C．答案C

D．答案D

13.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是（　　）

A．CO2和N2

B．葡萄糖和NH3

C．CO2和尿素

D．葡萄糖和尿素

14.刚果红是一种酸性染料，能将下列哪些物质染色（　　）

①纤维二糖　②葡萄糖　③纤维素④苏木精　⑤弹性纤维

A．①③④

B．①②③

C．②③④

D．③④⑤

15.微生物与人类生产、生活密切相关，下列相关说法不合理的是（　　）

A．土壤中的微生物能降解多种化合物，是大自然的清洁工

B．生活中许多发酵产品需要微生物，如酿醋需要的关键细菌是酵母菌

C．可利用能分解纤维素的微生物分解秸秆，并将其产物转化为乙醇

D．许多微生物也可导致人类患病

16.平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微生物的两种常用方法，下列描述正确的是（　　）

A．都要将菌液进行一系列的梯度稀释

B．平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作

C．稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基进行培养

D．都会在培养基表面形成单个的菌落

17.甲、乙、丙为三种微生物，下表中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。

甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖；甲能在Ⅰ中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，甲、丙都不能。

下列说法正确的是（　　）

注：

“＋”表示培养基中加入了这种物质，“－”表示培养基中没有加入这种物质。

A．甲、乙、丙都是异养微生物

B．甲、乙都是自养微生物，丙是异养微生物

C．甲是异养微生物，乙是固氮微生物，丙是自养微生物

D．甲是固氮微生物，乙是自养微生物，丙是异养微生物

18.在检测食品中大肠杆菌是否超标的实验中，下列操作错误的是（　　）

A．待检测食品需要经过灭菌操作后取样检测

B．配制好的培养基经高压蒸汽灭菌后倒平板

C．用稀释涂布法接种测定大肠杆菌的活菌数

D．接种后将培养皿倒置并在适宜温度下培养

19.有关倒平板的操作错误的是（　　）

A．将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上

B．使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰

C．将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上

D．等待平板冷却凝固后需要倒过来放置

20.检验培养基是否有杂菌污染的最有效方法是（　　）

A．将未接种的培养基放在实验桌培养

B．将未接种的培养基放在窗台培养

C．将未接种的培养基放在恒温箱中培养

D．将已接种的培养基放在恒温箱中培养

二、非选择题

21.炭疽杆菌是一类需氧芽胞杆菌，其代谢过程会将大量的代谢产物排出胞外。

由炭疽杆菌引起的炭疽病是一种人畜共患、死亡率较高的急性传染病。

对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过下图所示的实验确诊。

请据图回答下列问题：

（1）噬菌体的主要化学成分是_________，上述实验中噬菌体与炭疽杆菌的种间关系属于_________。

（2）微生物接种的方法很多，最常用的是___________________________________，经上述方法获得的纯种微生物如需长期保存，可采用________的方法。

（3）②是将分离培养获得的可疑菌挑选出来进行接种，此过程中对配制的液体培养基等需采取的灭菌方法是_____________，该培养基所用的碳源为________（无机碳/有机碳）。

（4）在过程③中细菌大量繁殖，并因为______________的积累而使液体培养基变浑浊。

取培养后的等量菌液加入A、B试管，再将如图处理后的两试管放在35℃环境下培养6小时后观察，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组______（高或低），则证明疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。

22.急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌、病毒通过消化道进入人体导致的，因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施。

请回答下列与检验饮用水有关的问题：

（1）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为____________________。

（2）用该方法统计样本菌落时是否需要设置对照组？

________，为什么？

____________________________。

（3）如分别取0.1mL已稀释103倍的水样分别涂布到三个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为____________。

（4）已知大肠杆菌能发酵乳糖并产酸产气，现提供足量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液和具塞试管，应如何判断待检水样中是否含有大肠杆菌？

___________________________________

________________________________________________________________________。

23.在调查和分离湖水中耐盐细菌的实验中，先将10升湖水水样浓缩至10毫升，然后各取浓缩水样1毫升，涂布到多个培养皿中培养。

请回答下列问题：

（1）可以通过提高培养基中______的浓度，筛选被调查细菌，这种培养基被称为______培养基。

（2）要提高实验结果的可靠性，排除培养基未彻底灭菌的可能性，应该设置的对照组是________。

为检验

（1）中筛选方法的效果，可以设置的对照组是__________。

（3）在微生物的培养过程中，实验室对培养基灭菌常用的方法是____________。

为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿________培养。

在培养基上产生的单个菌落在生态学中可以被称为________。

（4）根据培养皿上菌落的平均数可以计算湖水中该种细菌的密度，但计算的数据要比实际活菌的数目少，原因是____________。

24.某化工厂的污水池中；含有一种有害的、难以降解的有机化合物A。

研究人员用化合物A、磷酸盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。

实验的主要步骤如下图所示，请分析回答问题：

（1）加入化合物A的培养基属于________培养基，目的菌生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的__________。

（2）转为固体培养时，常采用平板划线的方法接种，获得单菌落后继续筛选，在每次划线之前都要灼烧接种环，目的是________________________________。

（3）某同学计划统计污水池中目的菌的总数，他选用104、105、106的稀释液进行平板培养，每种稀释液都设置了3个培养皿。

从设计实验的角度看还应该设置哪些对照实验在相同条件下同时培养？

____________________________________________。

（4）在农业生产研究中，常需要进行微生物的培养和计数。

下图是利用平板划线法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，为达到这一目的，操作上应注意。

①____________________________________________。

②____________________________________________。

③____________________________________________。

答案解析

1.【答案】B

【解析】初步筛选只是分离纯化的第一步，为确定得到的是纤维素分解菌，还需进行发酵产生纤维素酶的实验；纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵两种；纤维素酶的测定方法，一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定。

2.【答案】A

【解析】先加硫酸形成酸性环境，再加重铬酸钾溶液检测酒精，A错；如果培养基污染，则不接种或接种无菌水的培养基会生成菌落，否则没有，B正确；细菌分解尿素生成氨，培养基PH上升，酚红指示剂变红，C正确；检验胡萝卜素纯度的方法是纸层析法，色素在层析液溶解度不同，扩散速度不同而分离开来，与标准样品比较，若样品中有杂质，则分离后会出现不同的色素点（带），D正确。

3.【答案】A

【解析】能合成脲酶的细菌才能分解尿素，选择的原则是只有能够利用尿素的微生物才能够生长。

该选择培养基应只含尿素一种氮源并能让该类细菌生长，需有碳源。

分离微生物要用固体培养基；分解尿素的细菌属于异养微生物，需要加葡萄糖作为碳源。

B无氮源，错误。

C无碳源，错误。

D中牛肉膏、蛋白胨可作为氮源，D错误。

A正确。

4.【答案】D

【解析】纤维素分解菌利用的碳源是纤维素，而硝化细菌的碳源是CO2，A项错误；某些原核生物虽然没有线粒体，但它们的细胞质中含有与有氧呼吸有关的酶，因此可以进行有氧呼吸，B项错误；配制培养基时要考虑培养物对渗透压的耐受能力，C项错误。

5.【答案】C

【解析】植物组织培养通常用的是MS固体培养基，故A正确。

根据固体培养基上菌落的特征可以初步判断和鉴别细菌的类型，故B正确。

应在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂来鉴定尿素分解菌，故C错误。

因为刚果红可以与纤维素这样的多糖形成红色络合物，但和纤维二糖和葡萄糖不可以，所以可以利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌，故D正确。

6.【答案】B

【解析】土壤中分解尿素的细菌的分离实验中，采用稀释涂布平板法接种。

7.【答案】C

【解析】接种环灼烧及接种前后试管口要通过火焰，其目的是为了防止杂菌污染，将接种环先冷却再接种可以避免高温烫死菌种，因此A、B、D都是正确的。

在平板上划线时，要划三至五条平行线，而不是随机划线，因此C选项错误。

8.【答案】B

【解析】筛选出能分解尿素的细菌用选择培养基即可，不需要加指示剂。

加入指示剂的培养基，目的都是对要分离的菌种作进一步的鉴定。

9.【答案】A

【解析】纤维素酶属于复合酶，至少包含C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶三种组分。

其中C1酶和Cx酶使纤维素分解成纤维二糖。

10.【答案】B

【解析】用手指轻压移液管上的橡皮头，其目的是使菌液和水充分混匀，减小下次稀释时的误差。

11.【答案】C

【解析】在第二区域内划线时，接种环上的菌种来源于第一次划线的末端。

12.【答案】C

【解析】本题实验的目的是检验两种抗生素的杀菌作用。

设计实验时，应遵循对照原则，即设计只有细菌的空白对照组，将来与含有抗生素的实验组进行对比分析；还应遵循单一变量原则，如本题自变量为抗生素的有无或抗生素的种类。

因此，实验方案应为：

设计只有细菌的空白对照组，实验组是含有A抗生素和含有B抗生素，然后进行对比分析，故C项正确，A、B、D项错误。

13.【答案】D

【解析】能合成脲酶的微生物是尿素分解菌，该细菌是异养微生物，不能直接以二氧化碳或氮气、氨作为碳源和氮源，只能以葡萄糖和尿素等有机物作为碳源和氮源。

14.【答案】D

【解析】刚果红是一种酸性染料，可与纤维素反应形成红色复合物，在动物组织制片中用来染神经轴、弹性纤维、胚胎材料等，在植物制片中可以跟苏木精作二重染色。

15.【答案】B

【解析】酵母菌是一种真菌。

酿醋首先使用酵母菌发酵得到酒精，然后在有氧条件下再用醋酸菌发酵得到食用醋。

16.【答案】D

【解析】平板划线法不需要进行梯度稀释，稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液滴加到固体培养基的表面。

平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个菌落。

17.【答案】D

【解析】Ⅰ是无氮培养基，只有能固氮的微生物才能在其上繁殖；Ⅱ是不含有有机碳源的培养基，只有自养微生物才能在其上繁殖。

18.【答案】A

【解析】待检测食品不需要经过灭菌操作，可直接取样检测，A项错误；为了避免杂菌污染而造成的对检测结果的干扰，配制好的培养基经高压蒸汽灭菌后倒平板，B项正确；分离微生物的纯化培养，可用稀释涂布法接种测定大肠杆菌的活菌数，C项正确；接种后将培养皿倒置并在适宜温度下培养，D项正确。

19.【答案】C

【解析】倒平板的操作过程中，培养皿盖始终不能离开培养皿。

20.【答案】C

【解析】将未接种的培养基和接种的培养基一起放在恒温箱中培养，这样可以对比分析出培养基是否被杂菌污染。

C正确。

微生物的培养

21.【答案】

（1）DNA和蛋白质　寄生

（2）稀释涂布平板法和平板划线法　甘油管藏

（3）高压灭菌　有机碳

（4）代谢产物　低

【解析】

（1）噬菌体是病毒，主要化学成分是DNA和蛋白质，上述实验中噬菌体与炭疽杆菌的种间关系属于寄生。

（2）微生物接种的方法很多，最常用的是稀释涂布平板法和平板划线法，经上述方法获得的纯种微生物如需长期保存，可采用甘油管藏的方法。

（3）②是将分离培养获得的可疑菌挑选出来进行接种，此过程中对配制的液体培养基等需采取的灭菌方法是高压灭菌，该培养对象为异养型微生物，则培养基所用的碳源为有机碳。

（4）炭疽杆菌是一类需氧芽胞杆菌，其代谢过程会将大量的代谢产物排出胞外。

则在过程③中细菌大量繁殖，并因为代谢产物的积累而使液体培养基变浑浊。

取培养后的等量菌液加入A、B试管，再将如图处理后的两试管放在35℃环境下培养6小时后观察，由于噬菌体的宿主专一性，加入了噬菌体的试管中若有炭疽杆菌就会被侵染直至裂解，代谢产物减少，则若实验组液体培养基的浑浊度比对照组低，则证明疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。

22.【答案】

（1）稀释涂布平板法

（2）需要　因为需要确定培养基是否被杂菌污染（培养基灭菌是否合格）

（3）5.6×108个

（4）通过无菌操作向试管内注入一定量待检水样，再注入已灭菌的乳糖蛋白胨培养液将试管充满，塞上塞子，混匀后置于37℃恒温箱培养24h。

若试管内有气泡生成说明水样中有大肠杆菌。

【解析】

（1）此方法属于菌落计数法中的稀释涂布平板法。

（2）为了准确计数需设置对照组，以便确定培养基是否被杂菌污染，若被污染，则计数结果明显比实际多。

（3）三个菌落的平均数＝（55＋56＋57）/3＝56，则每毫升样品中菌株数＝56/0.1×103＝5.6×105个，所以每升原水样中的菌株数＝5.6×105×103＝5.6×108个。

（4）由于大肠杆菌发酵乳糖产酸产气，所以若观察到有气泡生成，则说明水样中有大肠杆菌。

23.【答案】

（1）盐（NaCl）　选择

（2）未接种（或接种等量无菌水）的培养皿　未加高浓度盐的培养基培养

（3）高压蒸汽灭菌　倒置　种群

（4）当两个或者多个细胞连在一起时平板上观察到的是一个菌落

【解析】

（1）耐盐细菌具有耐高浓度盐的特点，所以可以通过提高培养基中盐的浓度，筛选被调查细菌，淘汰其他杂菌，这样的培养基从功能上来讲属于选择培养基。

（2）为了排除培养基未彻底灭菌的可能性，应该设置的对照组是未接种（或接种等量无菌水）的培养皿，过程菌落的情况。

与高浓度盐的实验组相比，其对照组应该是未加高浓度盐的培养基培养。

（3）在微生物的培养过程中，常用对高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。

将培养皿倒置培养的目的是为了防止冷凝水影响细菌的生长。

在培养基上产生的单个菌落在生态学中可以被称为种群。

（4）当两个或者多个细胞连在一起时平板上观察到的是一个菌落，这样使得计算出来的种群密度降低。

24.【答案】

（1）选择　化合物A

（2）杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种

（3）不接种的空白培养基，证明培养基制备是否合格（是否被杂菌污染）

（4）①每次划线前要灼烧接种环　②冷却后从上一区划线末端开始划　③首尾区不重叠

【解析】