血液科标本采集的操作和取材单.docx
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血液科标本采集的操作和取材单
血液科-标本采集的操作和取材单
血液科标本保存
血液标本采集和保存标准流程
一、目的
血液是容易得到的生物资源,可能是正常病人唯一可得到的资源。
标本库主要贮存血清、血浆和白细胞层。
标准化的采集和贮存步骤可以保证提供高质量的标本。
二、权限
1.只采集签写知情同意书的患者,并确定采集的时间
2.血液只能在生物安全级别2(含或以上)的实验室操作,血液只能由受过培训的人员操作,所有操作按照生物安全标准进行
3.在采集到供者血液的30分钟内处理血液标本
4.在采血前,将供者的信息录入标本库的信息系统
三、使用范围
标本库的组成人员及经审批授予使用权限的人员。
四、材料和设备
血液采集盒包括:
医用(5ml和10ml)一次性注射器、一次性乳胶手套、止血带、碘酒、无菌拭子、血清储藏管、标本标签、创可贴、可封口塑料袋、标本采集表格、带有冰袋的冰壶、污物桶、笔、试管架。
通风橱
-80°C冰箱
离心机
移液器
灭菌枪头
冻存管
存放冻存管的48孔板
2个聚苯乙烯架
SmartscanSolo2D读码器
线性条码扫描仪
计算机
五、具体步骤
1.血液科病房的管理人员将知情同意书发放给患者,参与者或参与者的合法代理人在清醒,正常的精神状态下,仔细阅读知情同意书,同意后签字。
2确定采血时间,将知情同意书交给标本库。
3患者在采血前8-12小时之内没有进食或酒精或咖啡因
4护士采血前口头肯定病人的身份,核对知情同意书上的姓名、性别和签名。
5通知标本库的人员来去血标本,以确保30分钟内处理标本
6利用标本库提供的采血盒,采血用的医疗用品符合GB15980-1995标准的产品。
采血盒内包含2个含2%EDTA抗凝剂的紫帽管,2个无EDTA的红帽管,将管按1-4进行标记如下:
1)2%EDTA抗凝剂的紫帽管
2)2%EDTA抗凝剂的紫帽管
3)无EDTA的红帽管
4)无EDTA的红帽管
7.检查采血试剂盒的完整性和日期,如果有破损,需送还标本库
8.将采血管按照数字顺序1-4,收集20ml血液。
9.将采血管来回颠倒8-10次混匀,填写血液标本采集表格。
10.将采血管在采集的30分钟内送回标本库。
11入库前确保血液标本在4︒C冰箱保存
12标本库的技术人员将所处理的标本视为感染的标本
13将10个蓝色,10个黄色和10个白色的冻存管放在聚苯乙烯架子上。
14.登记血液的采集时间和处理开始的时间
15.将2个红帽管和2个紫帽管放在离心机上,配平,离心1500g,10分钟。
16.小心将管移出,避免干扰白细胞层,将管放在聚苯乙烯架子上,准备提取以下标本。
17.血清的提取
17.1血清来自3号和4号红帽管,用无菌的移液枪将3号管中的血清移出,并将1毫升的分液分入有蓝盖的冻寸管中,重复进行4号管。
17.2将血清按照100微升进行分装
18.血浆的提取
18.1血浆,血细胞层和红细胞来源于EDTA管,用无菌移液管将血浆从1管中移出,小心别碰到血细胞层。
18.2将血浆就按照100微升进行分装,放入4个黄盖的冻存管中。
19.有核细胞层
19.1用无菌移液管将有核细胞层缓慢移出,用转圈的动作将可见的有核细胞层移出,因为有核细胞层粘附于红细胞层,一些红细胞和血浆将和有核细胞一起被吸出。
19.2将有核细胞层在10个带白帽的冻存管中平均分配
20将冻存管放在48孔板上,放入-80︒C冰箱中保存,填写血液标本采集处理登记表
附件3血液标本采集记录
参考文献
1.TuckMK,ChanDW,ChiaD,GodwinAK,GrizzleWE,KruegerKE,RomW,SandaM,SorbaraL,StassS,WangW,BrennerDE.StandardOperatingProceduresforSerumandPlasmaCollection:
EarlyDetectionResearchNetworkConsensusStatementStandardOperatingProcedureIntegrationWorkingGroup.JProteomeRes.8
(1):
113-117,2009.
2.GrizzleWE,BellWC,Sexton.IssuesinCollecting,ProcessingandStoringHumanTissuesandAssociatedInformationtoSupportBiomedicalResearch.In:
TranslationalLaboratoryofEarlyCancer(Eds.Grizzle,Sirvastava).Inpress,2009.
3.CaporasoN,VaughtJ.Collection,processing,andanalysisofpreneoplasticspecimens.In:
FrancoEL,RohanTE,editors.Cancerprecursors:
epidemiology,detection,andprevention.NewYork:
Springer-Verlag;2002.p.33–45.
4.LandiMT,CaporasoN.Samplecollection,processing,andstorage.In:
Applicationsofbiomarkersincancerepidemiology,IARCScientificPub.No.142.Lyon,France:
IARC;1997.p.223–36.
骨髓标本采集和保存标准流程
一、目的
骨髓是血液恶性肿瘤的主要来源。
标本库主要贮存骨髓细胞。
标准化的采集和贮存步骤可以保证提供高质量的标本。
二、权限
1.只采集签写知情同意书的患者
2.骨髓只能在生物安全级别2(含或以上)的实验室操作,骨髓只能由受过培训的人员操作,所有操作按照生物安全标准进行
3.必须在采集到供者骨髓的120分钟内处理血液标本
4.在采血前,将供者的信息录入标本库的信息系统
三、使用范围
标本库的组成人员及经审批授予使用权限的人员。
四、材料和设备
骨髓采集盒包括:
由血液科骨髓室准备骨髓穿刺常规材料,医用(5ml和10ml)一次性注射器、一次性乳胶手套、标本标签、标本采集表格。
通风橱
-80°C冰箱
离心机
移液器
灭菌枪头
冻存管
存放冻存管的48孔板
2个聚苯乙烯架
SmartscanSolo2D读码器
线性条码扫描仪
计算机
五、具体步骤
1.血液科管理人员将知情同意书发放给患者,参与者或参与者的合法代理人在清醒,正常的精神状态下,仔细阅读知情同意书,同意后签字。
2确定骨髓穿刺时间,将知情同意书交给标本库。
3负责骨髓穿刺的医生核实病人的身份,核对知情同意书上的姓名、性别和签名。
5通知标本库的人员来去血标本,以确保120分钟内处理标本
6利用标本库提供的采血盒,采血用的医疗用品符合GB15980-1995标准的产品。
采血盒内包含1个含2%EDTA抗凝剂的紫帽管
7.检查采血试剂盒的完整性和日期,如果有破损,需送还标本库
8.收集4ml骨髓
9.将采血管来回颠倒8-10次混匀,填写骨髓标本采集表格。
10.将采血管在采集的30分钟内送回标本库。
11入库前确保骨髓标本在4︒C冰箱保存
12标本库的技术人员将所处理的标本视为感染的标本
13将4个白色的冻存管放在聚苯乙烯架子上。
14.登记骨髓的采集时间和处理开始的时间
15.有核细胞的提取
用无菌移液管将4ml骨髓吸出,加入到50ml离心管中,加入20ml红细胞裂解液(血液科自配),来回颠倒8-10次充分混匀,静置10分钟,1500转离心5分钟,去上清(一定要干净,用移液器),如果红细胞溶解不充分需要重复上述过程一次(加入红细胞裂解液10ml)。
把细胞分装4个1.5mlEP管,离心去残留上清,把细胞弹起,把4个EP管放在放入-80︒C冰箱中保存,填写骨髓标本采集处理登记表
附件3血液标本采集记录
血液标本登记表
采集单位:
__________________采集序号:
__________________
采集日期:
____年____月____日采集时间____时____分____秒采集量____ml
抗凝的全血____ml,不抗凝的全血____ml
临床诊断:
_____________________
一、患者信息:
1.患者的ID________________(勿用患者姓名)
2.患者出生日期:
_______年_______月________日
3.性别:
___男___女___不详
4.出生地:
________________________________________
二、临床表现(请勾选):
___患病___正常___有发病风险___无病携带者
三、临床信息(请勾选)
1.来源:
___体检报告___临床记录___遗传病诊断
___专家报告___解剖学报告___私人医生记录
___其他来源________________________________________________________
2.临床病例信息摘要(200~400字):
______________________________________________________________________________
3.其他家庭成员是否曾经被任何机构采样并保存(请勾选):
__是__否
4.如果是,此成员与该患者之间的关系以及此成员样本类型、保存机构和保存序号为:
_____________________________________________________________________
四、样本处理和保存信息:
1.血液样本处理
①处理时间____时____分____秒
②处理后的种类:
血清____血浆____有核细胞____全血____外周血淋巴细胞____
红细胞____
③保存的标本量:
血清____ml/份,____份;血浆____ml/份,____份;有核细胞____ml/份,____份;全血____ml/份,____份;外周血淋巴细胞____ml/份,____份;红细胞____ml/份,____份;
1.配对组织:
无有入库编号
2.组织病理诊断(请勾选):
____有____无
①是否为确定诊断(请勾选):
___是___否
②确定诊断:
_______________________诊断方法:
_______________________
3.血液标本保存信息:
入库日期:
__________________入库编号:
__________________
保存位置:
______架______层______盒_____行_____列
4.质量监控信息(请勾选):
分子完整性检测:
__有__无检测日期___________________
方法:
___DNA凝胶电泳__RT-PCR__
结果:
___________________________________
采集者姓名:
________________标本处理者姓名:
骨髓标本登记表
采集单位:
__________________采集序号:
__________________
采集日期:
____年____月____日采集时间____时____分____秒采集量____ml
抗凝的骨髓____ml
临床诊断(WHO):
_____________________
一、患者信息:
1.患者的ID________________(勿用患者姓名)
2.患者出生日期:
_______年_______月________日
3.性别:
___男___女___不详
二、临床表现(请勾选):
___患病___正常___有发病风险___无病携带者
三、临床信息(请勾选)
1.来源:
___体检报告___临床记录___遗传病诊断
___专家报告___解剖学报告___私人医生记录
___其他来源________________________________________________________
2.临床病例信息摘要(200~400字):
______________________________________________________________________________
3.其他家庭成员是否曾经被任何机构采样并保存(请勾选):
__是__否
4.如果是,此成员与该患者之间的关系以及此成员样本类型、保存机构和保存序号为:
_____________________________________________________________________
四、样本处理和保存信息:
1.骨髓样本处理
①处理时间____时____分____秒
②处理后的种类:
有核细胞____
③保存的标本量:
有核细胞____个/份,共4份
2.骨髓标本保存信息:
入库日期:
__________________入库编号:
__________________
保存位置:
______架______层______盒_____行_____列
4.质量监控信息(请勾选):
分子完整性检测:
__有__无检测日期___________________
方法:
___DNA凝胶电泳__RT-PCR__
结果:
___________________________________
采集者姓名:
________________标本处理者姓名: