科委面上项目 SNP指导乳腺癌化疗的敏感性研究.docx
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科委面上项目SNP指导乳腺癌化疗的敏感性研究
受理号
项目类别
指南代码
（天津市科学技术委员会填写）
面上项目
N0104
市应用基础研究计划项目
申请书
项目名称：
药物代谢酶基因多态性指导乳腺癌新辅助化疗的研究
申请者：
所在单位：
通讯地址：
邮政编码：
电话：
传真：
电子信箱：
合作单位：
主管部门：
申请日期：
天津市科学技术委员会
二〇〇五年印制
（VER.6.0）
一、基本信息
研究项目
项目名称
药物代谢酶基因多态性指导乳腺癌新辅助化疗的研究
英文名称
Studyofadjuvantchemotherapeutictreatmentofbreastcancerdirectedundergeneticpolymorphismsofdrug-metabolizingenzymes
项目类别
面上项目
项目性质
A.应用基础研究
起止年月
2007-04至2010-04
是否有回避的评审专家
无回避的专家
技术来源
引进消化吸收
是否国际、港、澳、台合作项目
否
项目主要优势
社会效益显著
产品或技术是否出口
否
技术领域
医药
所属工程专项、重大项目名称
应用产业领域
生物与医药
现处阶段
应用基础研究
前期资助情况
指南代码
名称
肿瘤学
代码
N0104
所属学科
名称
肿瘤治疗学基础
相关学科
名称
临床药理学
代码
C03031906
代码
C03020708
关键字
乳腺癌药物遗传学单核苷酸多态性新辅助化疗药物代谢酶
主要研究内容（中文摘要）
1.药物代谢酶在乳腺癌新辅助化疗中的意义的观察性研究。
2.药物代谢酶指导的乳腺癌新辅助化疗的前瞻性研究。
预期成果及完成形式（中文摘要）
1.确定药物代谢酶相关基因多态性乳腺癌化疗疗效，毒副反应和药物代谢动力学三者之间的关系。
2.初步确定利用药物代谢酶基因多态性指导的乳腺癌新辅助化疗的临床用用价值。
发表论文5篇，其中1～2篇被SCI收录，培养硕士研究生2名，博士研究生1名。
立项目的（中文摘要）
1.确定药物代谢酶基因多态性对药物代谢动力和药物疗效之间的影响。
2.确定利用药物代谢酶指导的乳腺癌新辅助化疗的临床用用价值。
立项意义（中文摘要）
利用药物遗传学手段，指导乳腺癌新辅助化疗的前瞻性研究，为实现乳腺癌规范治疗中的个体化治疗提供新的思路。
经费预算（单位：
万元）
经费来源
预算金额
其中
2007年
2008年
2009年
2010年
来源合计
12
8
2
2
其
中
国家部委拨款
市财政拨款
8
7
0
1
区县财政配套
主管部门配套
单位自筹
4
1
2
1
银行贷款
其它
经费支出
预算金额
其中市财政拨款
计算依据
支出合计
12
8
其
中
人员费
设备费
能源材料费
11.0
8.0
DNA纯化，药物浓度测定,SNP分析
试验外协费
租赁费
差旅费
会议费
0.3
参加学术会议
国际科技合作经费
期初运行费
贷款贴息费
管理费
信息费
0.1
文献检索，复印
其它费用
0.6
论文发表
特别说明：
立项依据
项目研究的必要性及应用前景（包括项目的研究意义，国内外研究概况、水平存在问题和发展趋势，主要参考文献及出处）。
药物代谢Ⅱ相酶与乳腺癌化疗相关的有谷胱甘肽转移酶（GlutathioneS-transferase，GST）、UDP-葡萄糖基转移酶（UDP-glucuronyltransferases,UGT）、亚甲基四氢叶酸还原酶（Methylenetetrahydrofolatereductase,MTHFR）和胸苷酸合成酶（Thymidylatesynthase,TS）。
GST为多种化疗药物的解毒剂，影响ADM、MTX和CTX的疗效和副反应。
催化对DNA和脂类有破坏作用的氧离子自由基还原。
GST存在α、π、μ、ω、θ和ζ 6种亚型均有高度多态性。
GST基因SNP能预测化疗疗效和化疗不良反应[13]。
缺失或突变的GST可能与环磷酰胺的解毒作减低有关，接受环磷酰胺方案化疗的患者中携带突变型GST（Ile105Val）基因患者比携带野生型GSTA1酶的患者无病生存率高[14]。
在对251名接受CAF联合治疗的妇女的回顾分析中，GSTM1*0和GSTT1*0纯合体性缺失患者比携带野生型基因的患者癌症复发和/或死亡率显著降低[15]。
EPI在肝脏特殊通过葡萄糖醛酸转移酶（UGT2B7）形成醛酸化形式是其灭活主要途径，该基因多态性影响表阿霉素的心脏毒性[16]。
MTHFR基因第4外显子C677T变异导致MTHFR基因活性低，改变细胞内叶酸的分配并导致叶酸潴留以及巯甲基嘌呤造成的严重的毒副反应[17]。
在接受CMF治疗的乳腺癌患者中严重骨髓毒性的发生率与MTHFRC667T改变有关，C677T（A222V）纯合子催化活性低于C667T杂合子，TT基因型的患者可能在CMF方案化疗中更易出现骨髓毒性，出现严重副反应的患者5/6为TT型，而无异常毒性者为20%[18]。
提示对携带MTHFR基因变异患者化疗时应适当减少MTX用量。
TS表达增加可能是5-FU耐药机制之一。
TSER*2患者TS水平低于TSER*3的患者，因此分析TSER多态性，有助于预测患者对5-FU的反应[12]。
在结肠癌患者中，TSER*2患者在5-FU治疗后获得分期下降的可能性比TSER*3患者增加3.7倍，TSER*3患者5-FU治疗反应率为9%，而TSER*2纯合子患者为50%，且TSER*2患者的生存期有延长的趋势[12,19]。
但TSER*3患者严重副反应发生率较TSER*2患者低。
TS增强子基因存在人种差异，国人TSER*2基因型明显少于欧美和南亚人群[20]；因此将国外临床试验结果应用到国内时，需要注意药物遗传基因的多态性[21]。
目前存在主要问题
国内外已有很多研究者注意到药物代谢酶多态性与乳腺癌之间的关系，目前国内外有很多关于药物代谢酶与化疗敏感性的研究，但是目前存在的主要问题是
1.针对白血病、淋巴瘤、小细胞肺癌的研究较多，而针对与乳腺癌的研究较少[22]。
2.绝大多数研究仅仅是考虑到某一个或几个基因的多态性与化疗敏感性的关系，或者是研究某一种药物的化疗相关基因，但是临床乳腺癌都是联合化疗的，而与之相关基因有很多，因此乳腺癌化疗需要综合考虑多种相关基因多态性对于乳腺癌化疗敏感的影响[5,21]。
3.目前多数研究限于实验室，直接临床研究数据较少[5,6,13,21,22]。
4.目前关于中国人乳腺癌相关药物遗传学数据报道较少[21]。
5.药物代谢酶相关基因多态性直接用于乳腺癌化疗的前瞻性研究较少[,6,9,13,21]。
未来发展趋势和本次研究的主要目的
标准剂量的药物治疗存在着广泛的个体差异性，在临床实践中可能导致治疗效果的个体差异或者出现不良药物反应[5,6,13]。
因此为每个患者寻找到适合个体的治疗方案是每个临床医生追求的目标，也是目前乳腺癌的研究热点[21]。
寻找与药物不良反应相关的基因变异患者和用于预测药物疗效的生物学标志，始终是分子肿瘤学和肿瘤药理学研究人员不断探索的目标，也是近年来逐渐为人们关注的研究热点[5,14,21]。
本次研究的主要目的探索将目前药物遗传学领域和肿瘤药理学领域研究较多的，化疗药物代谢酶相关基因多态性与药物代谢之间关系的研究成果[5,13,14]应用于临床实践。
在临床乳腺癌治疗利用SNP分型技术和药物动力学监测，筛选乳腺癌患者药物代谢酶相关基因多态性对乳腺癌化学治疗效果、副反应和生活质量的影响，为利用化疗药物遗传多态性多态性（SNP）指导乳腺癌化疗，选择适合的化疗方案，在提高疗效的同时，降低药物不良反应带来的危险，实现真正意义上的个体化给药探索一条新的思路[13]。
参考文献：
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151-7
研究内容
、GST1、UGT1A1、UGT2B7、MTHFR
技术路线
试验2 药物代谢酶指导的乳腺癌新辅助化疗的前瞻性研究
计划观察60例患者。
目标人群是符合入选标准的乳腺癌患者。
对入选患者进行药物代谢酶基因SNP分型，根据SNP分型确定化疗方案，试验组采用“SNP指导的方案”，对照组采用常规化疗方案进行化疗。
化疗后进行药物代谢动力学监测。
观察化疗疗效、副反应。
进行药物代谢酶基因SNP分型。
由数据处理人员比较两组间的差异。
本次研究需要进行下列11个与乳腺癌化疗相关的药物代谢酶基因SNP分型CYP2A6、CYP2B6、CYP2C8、CYP29、CYP219、CYP3A4、CYP3A5、GST1、UGT1A1、UGT2B7、MTHFR
技术路线
研究步骤:
（操作流程）
所有实验步骤和操作流程均在试验开始之前约定
人员分配：
本次试验设立专职的评价小组、随机分配小组、数据收集与处理小组、临床指导小组、SNP分型小组、药代动力学检测小组
1.临床评价小组
人员：
由赵颖副主任医师、葛洁医师组成。
职责：
1.接到主诊医生申请后按照预先规定的流程判断是否能够进入试验；
2.每治疗两个周期后重新评价，确定是否有必要删除或者退出；
再评价问题：
治疗两个周期后开始评价，CR、PR、SD患者继续治疗至第4个周期；PD患者停止研究；
3.第2、4、6周期的第20天进行治疗效果，副反应（按WHO推荐的急性和亚急性毒性作用分级标准）和生活质量（按WHO推荐FACTB调查表进行）评价；
4.每次评价需由两人共同进行并记入事先规定的患者病历报告表（CRF）；
5.在CRF上逐条填写入选/排除/退出/删除标准的具体内容与结论；
6.将填写的CRF数据及时提交数据收集与处理小组。
2.随机分配小组
人员：
由孙敬岩医师组成。
职责：
1.将备选化疗方案编号事先写在白纸上，并封入同样外观的信封中；
2.指导和监督患者随机选取信封并揭示分配的方案编号；
3.CRF上记录给予患者被指定的化疗方案编号；
4.通知临床指导小组核实患者分配的方案是否临床合理；
5.试验中严格遵守随机和盲法原则；
3.数据收集与处理小组
人员：
由钱碧云副研究员及所在我院流行病研究室承担。
职责：
1.从评价小组提交的CRF中提取数据并输入计算机；
2.随时随机抽查CRF填写的客观数据指标的准确性，至少抽查10%病例；
3.核实疗效评价、副反应评价、生活质量评价中二级数据的准确性；
4.试验结束后进行数据统计与数据挖掘。
4.临床指导小组
人员：
由宁连胜主任医师、曹旭晨副主任医师组成。
职责：
1.核实患者由随机或SNP指导分配的新辅助化疗方案是否适合该患者，以及该患者是否存在化疗方案的绝对与相对禁忌症；
2.指导管床医生进行患者的常规诊断、治疗处理；
3.指导评价小组进行疑难病例评价与处理。
5.SNP分型小组
人员：
由郑伟教授、张斌主治医师承担。
职责：
1.血液标本DNA提取；
2.SNP分型操作；
3.向临床指导小组提供SNP分型指导化疗的意见；
6. 药代动力学检测小组
人员：
由闫昭副研究员及其所在我院临床药理基地承担。
职责：
1. 化疗后，指导并监督管床护士按约定时间和取血方案取血样；
2. 血药浓度检测；
3. 药物代谢动力学分析；
操作流程1.：
受试者选择
受试者选择具体操作流程如下：
操作流程：
1.患者所在治疗组的主诊医生粗评患者是否适合进入试验并向评价小组提出申请；
2.评价小组复习病例，确定见到病理诊断报告；如无病理报告督促管床医生追查病理报告，如为外院所取病理，则需本院乳腺病理科副主任以上会诊并出具病理会诊报告；
3.将患者情况与入选标准、排除标准逐条核实确定患者是否适合进入研究；
4.如患者适合进入研究则与患者签署知情同意书并分配研究编号；
5.评价小组将患者情况详实填入CRF；
6.评价小组两周期化疗后重新评价，确定剔除或者继续研究；
入选标准：
1.经组织学或细胞学确诊的可手术乳腺癌患者；
2.既往未接受过任何放疗或化疗方案；
3.仅有一个未治疗过的可测量病灶，直径≥4.0cm；
4.一般状况KSP评分≥70分；
5.年龄18~60岁；
6.预计化疗后可以进行根治性手术；
7.入组前HGB≥10g/dl，且WBC≥4.0×109/L且ANC≥2.0×109/L且PLT≥100.0×109/L；无出血倾向；
8.心电图、心肌酶谱未见异常；但孤立的无症状T波低平不是排除标准；
9.肝功能检查ALT和AST在正常上限1.5倍以内，BIL正常无基础肝病；
10.尿常规及肾功能各项指标均在正常范围；
11.符合伦理学要求，受试者自愿，签署知情同意书。
排除标准：
1.妊娠或哺乳期乳腺癌患者；
2.活动性感染或其他严重潜在疾病患者；
3.有远处转移患者或者最终不能接受手术患者；
4.在过去的12月内有临床明显的心脏病或者心肌梗死，目前不能控制的高血压；
5.患者有不可控制的癫痫发作、中枢神经系统转移或功能紊乱并且阻碍签署知情同意书或者不良反应观察或因精神病丧失劳动能力；
6.既往有其他恶性肿瘤病史；
7.治疗前对可测量病灶进行过放疗或者化疗或者内分泌治疗；
8.治疗前参与过任何试验性药物研究，包括中药、气功以及其它顺势疗法；
9.患有活动性消化性溃疡，不稳定糖尿病或者使用糖皮质激素的其它禁忌症；
10.有吸毒等不良药瘾和/或长期嗜酒者；
11.异常钙化是唯一可观察的指标；
退出标准：
1.受试者要求退出；
2.试验中发生不良事件；
3.试验中病程进展，不宜继续使用药物和/或不能继续本方案
4.同时使用其他影响疗效判断的的药物；
5.临床资料记录不全；
6.未按研究方案所定的剂量和方法给药；
删除标准：
1.误诊误入；乳腺癌以外的乳房恶性疾病；
2.临床资料无记录；或指标记录太少无法最终进行数据处理与统计；
操作方案2：
盲法随机隐藏分组
随机化设计
1.随机化分组由随机分配小组专职负责随机分组；
2.试验开始之前将各化疗方案名称封入同样的信封中，试验时随机抽取方案进行化疗；
3.由临床指导小组评价随机分配的化疗方案是否适合患者，是否存在被分配方案的绝对和相对禁
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