生物选修一 归纳.docx

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生物选修一归纳

专题一传统发酵技术的应用

课题一果酒和果醋的制作

1.果酒制作

（1）原理:

利用细菌：

酵母菌：

兼性厌氧微生物

有氧呼吸（大量繁殖）C6H12O6+6O2→6CO2+6H2O最适温度：

20℃左右

无氧呼吸（酒精发酵）C6H12O6→2C2H5OH+2CO2000最适温度：

18~25℃

（2）检测原理：

重铬酸钾+酒精+硫酸→灰绿色（三价铬离子）

2.果醋制作

（1）原理：

醋酸菌：

好氧细菌氧气、

糖源充足：

C6H12O6→3CH3COOH缺少糖源：

C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O最适温度：

30~35℃

（2）检测方法“测定PH值

3.实验装置

4.对照实验

例题一：

课题二腐乳的制作

1.利用细菌：

毛霉（异养需氧型的丝状真菌，孢子生殖分布广泛（水果、蔬菜上）、青霉、曲霉、酵母菌

2.实验流程

3.完成标志：

前期发酵后豆腐的表面长有菌丝，后期发酵制作基本没有杂菌的污染。

4.优质特点：

色泽基本一致、味道鲜美、咸淡适口、无异味、块形整齐、质地细腻、无杂质。

课题三制作泡菜并检测亚硝酸的浓度

1.利用细菌：

乳酸菌（原核生物，一类发酵糖类主要产物为乳酸的细菌的统称）

2.亚硝酸盐：

白色粉末,易溶于水。

分布广泛,常用食品添加剂。

当人体摄入的过量（0.3～0.5g）亚硝酸盐，会引起中毒，达3g时会引起死亡。

3.步骤：

1）各种菜洗净并切成小块2）将泡菜坛洗净。

3）将蔬菜和调味品放入坛，混合均匀。

加入盐水（没过菜料）

4）盖好坛盖，将坛口用水封好5）泡菜发酵（常向水槽加水）

4.泡菜腌制过程中乳酸菌、乳酸、亚硝酸盐变化

5.

6、实验材料与器具

泡菜、

对氨基苯磺酸、N-1－萘基乙二胺盐酸盐、氯化钠、氢氧化钠、氢氧化铝、氯化镉、氯化钡、亚硝酸钠、蒸馏水、

移液管、容量瓶、比色管、榨汁机等

7，

专题总结：

果醋

果酒

腐乳

泡菜

微生物类型

酵母菌，真菌，兼性厌氧

醋酸菌，细菌，需氧型

毛霉，真菌，需氧

乳酸菌，细菌，厌氧菌

原理

酵母菌的无氧呼吸产生酒精

醋酸菌在有氧条件产生醋酸

毛霉产生蛋白酶和脂肪酶

乳酸菌无氧呼吸产生乳酸

反应条件

18～25℃，

无氧

30～35℃,通入氧气

15～18℃接种,酒精含量控制在12％左右

常温，无氧条件

检测方法

重铬酸钾与其反应呈灰绿色

品尝、pH试纸检测

pH检测，亚硝酸盐的检测方法

专题二微生物的培养与应用

课题一微生物的实验室培养

1.培养基按照物理性质可分为液体培养基半固体培养基和固体培养基。

液体培养基应用于工业或生活生产，固体培养基应用于微生物的分离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。

2.按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。

选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。

鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。

3.培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等。

4.消毒与灭菌（防止外来杂菌的入侵）

消毒指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。

消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒法（对于一些不耐高温的液体）还有化学药剂（如酒精、氯气、石炭酸等）消毒、紫外线消毒。

灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。

灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。

5.制作牛肉膏蛋白胨固体培养基

（1）方法步骤：

计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。

（2）倒平板操作的步骤：

①将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞。

②右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰。

③用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约10～20mL）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。

④等待平板冷却凝固，大约需5～10min。

然后，将平板倒过来放置，使培养皿盖在下、皿底在上。

作用：

既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。

6.纯化大肠杆菌

（1）微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。

（2）平板划线法操作步骤：

①将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红。

②在火焰旁冷却接种环，并打开棉塞。

③将试管口通过火焰。

④将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液。

⑤将试管通过火焰，并塞上棉塞。

⑥左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖。

注意不要划破培养皿。

⑦灼烧接种环，待其冷却后（以免接种环温度太高，杀死菌种。

）从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线。

重复以上操作，在三、四、五区域内划线。

注意不要将最后一区的划线与第一区相连。

（2）涂布平板操作的步骤：

①将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。

②取少量菌液，滴加到培养基表面。

③将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8～10s。

④用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。

7.菌种的保存

（1）对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。

①临时保藏方法

将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养。

当菌落长成后，将试管放入4℃的冰箱中保藏。

以后每3～6个月，都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上。

②缺点：

这种方法保存的时间不长，菌种容易被污染或产生变异。

（2）对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。

在3mL的甘油瓶中，装入1mL甘油后灭菌。

将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在－20℃的冷冻箱中保存。

课题二土壤中分解尿素的细菌的分离和计数

1.筛选菌株

（1）原理：

人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。

（3）配制选择培养基的依据

根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。

例如，培养基中不加入有机物可以选择培养自养微生物；培养基中不加入氮元素，可以选择培养能固氮的微生物；加入高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。

2.统计菌落数目

（1）测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数。

（2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理

①为了保证结果准确，一般设置3～5个平板，选择菌落数在30～300的平板进行计数，并取平均值。

②统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，因此，统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。

③.为了防止菌落蔓延，影响计数，可在培养基中加入TTC

④每克样品中的菌落数=（C/V）*M其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（ml），M代表稀释倍数

3,实验设计

（1）土壤取样：

土壤中的微生物，数量最大，种类最多。

在富含有机质的土壤表层，有更多的微生物生长。

从富含有机物、潮湿、pH≈7的土壤中取样。

铲去表层土，在距地表约3～8cm的土壤层取样。

（2）样品的稀释：

通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数在30~300之间、适于计数的平板。

（3）微生物的培养与观察

①不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间。

细菌30~37℃1~2天放线菌25~28℃5~7天霉菌25~28℃3~4天

②每隔24小时统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。

课题三分解纤维素的微生物的分离

1.纤维素，一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是地球上含量最丰富的多糖类物质。

纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。

纤维素最终被水解成葡萄糖，为微生物的生长提供营养。

2.纤维素分解菌的筛选

（1）筛选方法：

刚果红染色法。

能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选。

（2）刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理

刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。

当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。

当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红－纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。

这样，我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

3.分离分解纤维素的微生物的实验流程

土壤取样→选择培养（此步是否需要，应根据样品中目的菌株数量的多少来确定）→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落

（1）土壤采集选择富含纤维素的环境（将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集，实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。

一般应将纸埋于深约10cm左右腐殖土壤中。

）

（2）刚果红染色法分离纤维素分解菌的步骤：

倒平板操作、制备菌悬液、涂布平板

（3）刚果红染色法种类

一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是在倒平板时就加入刚果红。

比较

方法一是传统的方法，缺点是操作繁琐，加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂；其优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用。

方法二的优点是操作简便，不存在菌落混杂问题，缺点是由于纤维素和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质，可以使能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应。

但这种只产生淀粉酶的微生物产生的透明圈较为模糊，因为培养基中纤维素占主要地位，因此可以与纤维素酶产生的透明圈相区分。

方法二的另一缺点是：

有些微生物具有降解色素的能力，它们在长时间培养过程中会降解刚果红形成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分。

5.课题延伸

对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选后，只是分离纯化的第一步，为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵两种。

纤维素酶的测定方法，一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。

6.为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？

在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。

专题三植物的组织培养技术

课题一菊花的组织培养

1.植物组织培养

（1）愈伤组织的细胞特点：

全能性是高，排列疏松、高度液泡化的薄壁细胞

（2）胚状体特点：

由愈伤组织细胞诱导分化出具有胚芽、胚根、胚轴的胚状结构，进而长成完整植株。

（3）不定芽特点：

凡从叶、根、或茎节间等通常不形成芽的部位生出的芽，则统称为不定芽。

在植物组织培养中，不定芽方式和胚状体方式是愈伤组织形态发生的两种最常见和最重要的方式。

2.脱分化和再分化比较

比较内容

脱分化

再分化

过程

外植体→愈伤组织

愈伤组织→幼苗

形成体特点

排列疏松、高度液泡化的薄壁细胞

有根、芽

需要条件

a.离体

b.适宜的营养

c.生长素/细胞分裂素的比例适中

d.不需光

a.离体

b.适宜的营养

c.生长素/细胞分裂素的比例高或低诱导生芽或生根

d.光照

3.生长素和细胞分裂素的比较

4、操作流程

（1）配制MS固体培养基：

配制各种母液：

将各种成分按配方比例配制成的浓缩液（培养基母液）。

·使用时根据母液的浓缩倍数，计算用量，并加蒸馏水稀释。

·配制培养基：

应加入的物质有琼脂、蔗糖、大量元素、微量元素、有机物和植物激素的母液，并用蒸馏水定容到1000毫升。

·灭菌：

采取的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。

△MS培养基中各种营养物质的作用

大量元素和微量元素提供植物细胞所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，维持细胞渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。

注意：

微生物培养基以有机营养为主，MS培养基则需提供大量无机营养。

（2）外植体的消毒

选取菊花茎段时，要取生长旺盛的嫩枝。

菊花茎段用流水冲洗后可加少许洗衣粉，用软刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右。

用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70%的酒精中摇动2~3次，持续6~7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗。

取出后仍用无菌吸水纸吸干外植体表面水分，放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中1~2min。

取出后，在无菌水中至少清洗3次，漂洗消毒液。

注意：

对外植体进行表面消毒时，就要考虑药剂的消毒效果，又要考虑植物的耐受能力。

（3）接种：

接种过程中插入外植体时形态学上端朝上，每个锥形瓶接种7～8个外植体。

外植体接种与细菌接种相似，操作步骤相同，而且都要求无菌操作。

（4）培养：

应该放在无菌箱中进行，并定期进行消毒，保持适宜的温度（18~22℃）和光照（12h）

（5）移栽：

栽前应先打开培养瓶的封口膜，让其在培养间生长几日，然后用流水清洗根部培养基。

然后将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中生活一段时间，进行壮苗。

最后进行露天栽培。

（6）栽培外植体在培养过程中可能会被污染，原因有外植体消毒不彻底；培养基灭菌不彻底；接种中被杂菌污染；锥形瓶密封性差等。

课题二月季的花药培养

1.基础知识来源：

①被子植物的花粉发育被子植物的雄蕊通常包含花丝、花药两部分。

②花药为囊状结构，内部含有许多花粉。

③花粉是由花粉母细胞经过减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞。

被子植物花粉的发育要经历小孢子四分体时期、单核期和双核期等阶段。

④在小孢子四分体时期，4个单倍体细胞连在一起，进入单核期时，四分体的4个单倍体细胞彼此分离，形成4个具有单细胞核的花粉粒。

这时的细胞含浓厚的原生质，核位于细胞的中央（单核居中期）。

⑤随着细胞不断长大，细胞核由中央移向细胞一侧（单核靠边期），并分裂成1个生殖细胞核和1个花粉管细胞核，进而形成两个细胞，一个是生殖细胞，一个是营养细胞。

⑥生殖细胞将在分裂一次，形成两个精子。

2.注意事项：

①成熟的花粉粒有两类，一类是二核花粉粒，其花粉粒中只含花粉管细胞核和生殖细胞核，二核花粉粒的精子是在花粉管中形成的；另一类是三核花粉粒，花粉在成熟前，生殖细胞就进行一次有丝分裂，形成两个精子，此花粉粒中含有两个精子核和一个花粉管核（营养核）

②花粉发育过程中的四分体和动物细胞减数分裂的四分体不同。

花粉发育过程中的四分体是花粉母细胞经减数分裂形成的4个连在一起的单倍体细胞；而动物细胞减数分裂过程中的四分体是联会配对后的一对同源染色体，由于含有四条染色单体而称为四分体。

③同一生殖细胞形成的两个精子，其基因组成完全相同。

3.产生花粉植株的两种途径

①一种是花粉通过胚状体阶段发育为植物，

②另一种是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株。

这两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。

注意：

①无论哪种产生方式，都要先诱导生芽，再诱导生根

4.影响花药培养的因素：

（1）材料的选择与培养基的组成是主要的影响因素

要求：

①选择月季的初花期。

②合适的花粉发育时期：

一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高

③花蕾：

选择完全未开放的花蕾

（2）材料的选取方法

①选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。

确定花粉发育时期的最常用的方法是醋酸洋红法。

②焙花青-铬矾法（将花粉细胞核染成蓝黑色）

材料

5.接种和培养：

①灭菌后的花蕾，要在无菌条件下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。

②在剥离花药时，要尽量不损伤花药（否则接种后容易从受伤部位长生愈伤组织），

③同时还要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成，通常每瓶接种花药7～10个,培养温度控制在25℃左右,不需要光照.幼小植株形成后才需要光照.

④一般经过20～30天培养后,会发现花药开裂,长出愈伤组织或形成胚状体。

⑤将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株。

⑥如果花药开裂释放出胚状体，则一个花药内就会产生大量幼小植株，必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培养基上，否则这些植株将很难分开。

还需要对培养出来的植株做进一步的鉴定和筛选。

专题总结：

1.植物组织培养技术与花药培养技术

相同之处是：

培养基配制方法、无菌技术及接种操作等基本相同。

不同之处在于：

花药培养的选材非常重要，需事先摸索时期适宜的花蕾；

花药裂开后释放出的愈伤组织或胚状体也要及时更换培养基；花

药培养对培养基配方的要求更为严格。

这些都使花药培养的难度大为增加。

专题六植物有效成分的提取

课题一芳香油的提取

1.天然香料来源：

植物、动物，不同植物的根、茎、叶、花、果实、种子都可以提取芳香油。

2.芳香油的提取方法：

蒸馏、压榨、萃取等。

3.芳香油的性质：

挥发性强，成分复杂，以萜类化合物及其衍生物为主。

4.水蒸气蒸馏法：

（1）原理：

水蒸汽可将挥发性较强的芳香油携带出来形成油水混合物，冷却后水油分层。

（2）方法：

水中蒸馏：

原料放在沸水中加热蒸馏。

水上蒸馏：

原料隔放在沸水上加热蒸馏。

水汽蒸馏：

利用外来高温水蒸气加热蒸馏。

（3）不足：

有些原料不适宜于水中蒸馏，如柑橘、柠檬等易焦糊，有效成分容易水解。

通常用压榨法（通过机械压缩力将液相物从液固两相混合物中分离出来的一种简单操作）

（4）蒸馏装置：

铁架台两个、酒精灯、石棉网、蒸馏瓶、橡胶塞、蒸馏头、温度计、直型冷凝管、接液管、锥形瓶，以及连接进水口和出水口的橡皮管。

（5）安装仪器一般都按照自下而上、从左到右的顺序。

拆卸仪器的顺序与安装时相反。

具体安装顺序和方法如下。

①固定热源──酒精灯。

②固定蒸馏瓶，使其离热源的距离如教科书中图6-2所示，并且保持蒸馏瓶轴心与铁架台的水平面垂直。

③安装蒸馏头，使蒸馏头的横截面与铁架台平行。

④连接冷凝管。

保证上端出水口向上，通过橡皮管与水池相连；下端进水口向下，通过橡皮管与水龙头相连。

⑤连接接液管（或称尾接管）。

⑥将接收瓶瓶口对准尾接管的出口。

常压蒸馏一般用锥形瓶而不用烧杯作接受器，接收瓶应在实验前称重，并做好记录。

⑦将温度计固定在蒸馏头上，使温度计水银球的上限与蒸馏头侧管的下限处在同一水平线上。

（6）①蒸馏装置安装完毕后，可以在蒸馏瓶中加几粒沸石，防止液体过度沸腾。

打开水龙头，缓缓通入冷水，然后开始加热。

②加热时可以观察到，蒸馏瓶中的液体逐渐沸腾，蒸气逐渐上升，温度计读数也略有上升。

当蒸气的顶端达到温度计水银球部位时，温度计读数急剧上升。

③在整个蒸馏过程中，应保证温度计的水银球上常有因冷凝作用而形成的液滴。

控制蒸馏的时间和速度，通常以每秒1～2滴为宜。

5.萃取法：

（1）原理：

芳香油易溶于有机溶剂，溶剂挥发后得到芳香油。

如石油醚、酒精、乙醚等。

（2）方法：

原料浸泡在溶剂中→得到浸泡液→有机溶剂挥发→芳香油。

（3）不足：

有机溶剂中的杂质影响芳香油的品质

6.玫瑰精油的提取

（1）材料作用：

·0.1g/mL氯化钠溶液：

促使油水混合物（乳浊液）中油和水的分离。

无水硫酸钠：

吸收油层中的水分。

（2）实验步骤：

①采集玫瑰花：

采集盛花期（5月中上旬）的玫瑰花，清水清洗沥干。

②装入蒸馏原料：

称取50g玫瑰花放入蒸馏瓶，添加200mL蒸馏水。

③安装蒸馏装置：

按照从左向右、自下到上次序安装水蒸气蒸馏装置。

④加热蒸馏：

控制蒸馏时间和速度（1～2滴/秒），获得乳白色乳浊液；拆卸装置。

⑤分离油层：

向乳浊液加入NaCl溶液后，利用分液漏斗分离出上面的油层。

⑥除去水分：

向油层中加入无水硫酸钠，24h后过滤，得到玫瑰油。

＊注意事项：

蒸馏时间不能过短，温度不能过高。

7.橘皮精油的提取

（1）橘皮精油的主要成分：

柠檬烯，主要分布在橘皮中。

（2）材料作用：

①石灰水：

防止压榨时滑脱，提高出油率，降低压榨液黏稠度，过滤不堵塞筛眼。

②小苏打、硫酸钠：

促进油和水的分离（用量分别为橘皮质量的0.25％和5％）。

（3）实验步骤：

①橘皮的处理：

将新鲜橘皮用清水清洗沥干。

②石灰水浸泡：

用7～8％石灰水浸泡橘皮24h。

③清水漂洗：

浸泡好的橘皮用流水彻底漂洗干净，沥干。

④粉碎和压榨：

将橘皮粉碎，加入小苏打和硫酸钠后，用压榨机压榨得到压榨液。

⑤过滤压榨液：

用布袋过滤，滤液再高速离心处理，分离出上层橘皮油。

⑥静置处理：

将橘皮油在5～10℃冰箱中静置5～7d，分离出上层澄清橘皮油。

⑦再次过滤：

将下层橘皮油用滤纸过滤，滤液与上层橘皮油合并，得到橘皮精油。

分析：

静置处理目的：

除去果蜡和水分。

课题二胡萝卜素的提取

1.胡萝卜素性质：

橘黄色结晶，化学性质比较稳定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂。

其中最主要的组成成分为β-胡萝卜素。

2.作用：

①治疗夜盲症、幼儿生长发育不良、干皮症等疾病；②常用于食品色素；③使癌变细胞恢复成正常细胞。

3.提取β－胡萝卜素的方法主要有三种：

①从植物中提取②从大面积养殖的岩藻中获得③利用微生物的发酵生产

4.实验步骤

①粉碎：

使原料与有机溶剂充分接触，增大溶解度。

②干燥：

脱水温度太高，干燥时间太长会导致胡萝卜素分解。

③萃取

Ⅰ、萃取剂的选择　水溶性的：

乙醇、丙酮

水不溶性的：

石油醚、乙酸乙酯、乙醚、苯、四氯化碳等

选择：

具有较高的沸点，能够充分溶解胡萝卜素，并且不与水混溶。

Ⅱ、影响萃取的因素

主要因素：

萃取剂的性质和使用量

次要因素：

原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等

一般来说，原料颗粒小，萃取温度高，时间长，需要提取的物质就能够充分溶解，萃取效果就好。

萃取前，要将胡萝卜进行粉碎和干燥

Ⅲ、胡萝卜素提取

装置的设计：

萃取过程应该避免明火加热，采用水浴加热，这是因为有机溶剂都是易燃物，直接使用明火加热容易引起燃烧爆炸。

为了防止加热时有机溶剂挥发，还要在加热瓶口安装回流冷凝装置。

萃取液的浓缩可直接使用蒸馏装置。

在浓缩之前，还要进行过滤，除去萃取液中的不溶物。

④过滤：

除去萃取液中的不溶物

⑤浓缩：

蒸发出有机溶剂

⑥鉴定：

纸层析法

Ⅰ滤纸：

18㎝×30㎝

基线：

滤纸下端距底边2㎝处做一基线，在基线上取A、B、C、D四点。

Ⅱ、点样：

用最细的注射器针头（毛细吸管）吸取样品进行点样。

点样应该快速细致，在基线上形成直径２ｍｍ左右的圆点，每次点样后，可用吹风机将溶剂吹干，注意保持滤纸干燥。

等滤纸上的点样液自然挥发干后，将滤纸卷成圆筒状，至于装有１ｃｍ深的石油醚的密封玻璃瓶中。

等各种色素完全分开后，观察标准样品中位于展开剂前沿的胡萝卜素层析带。

Q&A

１．乙醇和丙酮能够用于胡萝卜素的萃取吗？

为什么？

答：

胡萝卜素可溶于乙醇和丙酮，但它们是水溶性有机溶剂，因萃取中能与水混溶而影响萃取效果，所以不用它们作萃取剂。

2.在石油醚、醋酸乙酯、乙醚、苯和四氯化碳这几种有机溶剂中，哪种最适宜用来提取胡萝卜素？

答：

在这五种有机溶剂中，石油醚的沸点最高，在加热萃取时不易挥发，所以石油醚最适宜用作萃取剂。