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尿常规检测
尿常规检测
一、项目名称、检验方法名称:
1、项目名称:
PH值、蛋白、葡萄糖、酮体、胆红素、隐血、亚硝酸盐、尿胆原、白细胞酯酶、比重、抗坏血酸。
2、检验方法名称:
干化学法
二、方法学原理:
1、pH值试验
[原理]利用pH值复合指示剂,如溴麝香草酚蓝及甲基红,pH值指示范围4.8-8.5。
试验一般认为无干扰,但如操作时试条上留有较多的尿液,可因尿蛋白试垫上的酸性缓冲液漏出,污染pH值试垫,使试验结果偏酸。
细菌繁殖尿样可影响ph值。
2、蛋白试验
[原理]利用Sorensen指示剂蛋白误差原理。
试条浸有四溴酚蓝或四氯酚四溴璜酞,及酸性缓冲液。
当蛋白浓度由低至高时,显色由黄绿色经绿至于蓝,蛋白阴性,试垫呈原有黄色。
试垫只对白蛋白有相应的反应,检出白蛋白150-300mg/L(_),300mg/L(+),1000mg/L(++),3000mg/L(+++)。
对于球蛋白、本周蛋白及其他尿蛋白不发生或仅轻度反应,故反应阴性并非一定不含蛋白。
而对阳性病例或与临床诊断不符合时应用磺基水杨酸法作测定来确认。
[特异性]强硷性尿(pH值大于9)、尿容器有季胺盐、氯已定等污染、操作时试条浸尿中时间太长、或某种药物治疗时可出现假阳性反应。
另一方面试条对于放射线造影剂或保存剂中的麝香草酚等不出现假阳性,而磺基水杨酸法则可出现假阳性。
3、葡萄糖试验
[原理]采用葡萄糖氧化酶及过氧化物酶偶联原理,对葡萄糖有特异性。
例如N-Mul-tistix用碘化钾显色原,显色由绿至棕色,尿葡萄糖阳性显色由黄、桔黄至棕色检出感度为4-7mmol/L。
本试验可因尿中含大量维生素而出现假阴性;高比重碱性尿,亦可使糖检出偏低,使低糖浓度尿呈假阴性。
试条只在大于正常时显示反应,对偏低尿糖无法表示,尿糖浓度与肾阈成反比。
尿糖反应阴性又未与血糖是否正常完全一致。
当尿比重大于1.020试垫显色偏低,如尿样已保存于冰箱,则需待复原到室温时再测。
[特异性]本试条不受乳糖、半乳糖或果糖影响。
故本试条不能用于儿科筛选是否有半乳糖血症、果酸尿或黑尿酸尿,应另选其他方法检测。
本试条受过氧化氢、次氯酸盐等强氧化剂干扰,可呈假阳性。
故尿容器务必清结不污染此类物品。
4、酮体试验
[原理]采用Legal原理,试垫含亚硝基铁氰化钠、甘氨酸及碱性缓冲剂,当于丙酮或乙酰乙酸作用时形成复合紫色,阳性呈淡棕色至紫色。
本试条检出感度为0.5-1.0mmol/L(5mg/dl-10mg/dl)乙酰乙酸,对丙酮敏感度较差,对B-羟丁酸无化学反应。
酮体试垫对湿度十分敏感,暴露于室内湿度中数小时即可失效,故操作时必须于取试条后立即将试盒盖紧。
试垫已褪色的不可再用,同时尿样应新鲜,如有细菌繁殖可使乙酰乙酸转为假阴性。
[特异性]酸性高比重尿可使NMultistix呈弱假阳性,尿液如有酚红或二羟基苯丙胺酸(L-dopa)代谢产物可导致假阳性结果。
5、胆红素试验
[原理]采用胆红素重氮反应原理,NMultistix用重氮化2,4-二氯苯胺及强酸性缓冲剂,呈色自浅黄色至棕黄色。
检出感度为胆红素7-14umol/L。
[特异性]氯丙嗪可导致假阳性,吡啶类化合物可呈红色而掩盖反应显色。
6、隐血试验
[原理]利用血红蛋白具有过氧化物酶样反应,使有机过氧化物和显色原显色,垫块桔黄、绿、深蓝表示隐血由少至多。
垫块检出感度为游离血红蛋白150-620ug/L,相当于5-15个红细胞/ul。
试垫检出功能可因尿比重上升或蛋白质含量增加而减弱,维生素C增加亦影响隐血检出,当其含量大于0.567mmol/L(10mg/dl)或尿液以甲醛防腐者,均可出现假阴性。
有人介绍如沉渣检查红细胞为4-8/高倍视野(HPF)或大于此数,而试条呈阴性反应时,应进一步检查是否为维生素C过多所致。
在试垫上出现绿色斑点,提示为完整红细胞所致。
[特异性]完整红细胞、血红蛋白或肌红蛋白均可呈阳性反应,如有强氧化剂例如次氯酸钙或某种产过氧化物酶的微生物污染,也可呈假阳性。
当尿机与镜检有较大出入时需用尿隐血定性试验进行复测。
试验方法、原理、试剂同粪隐血定性试验。
7、亚硝酸盐试验
[原理]采用Griess亚硝酸盐反应原理,即在酸性条件下,亚硝酸盐与对氨基苯胂酸作用,形成重氮化合物,与3羟基-1,2,3,4-氨苯喹啉产生桃红色重氮反应。
正常比重尿液,可检出亚硝酸盐范围为13-22umol/L,为尿路细菌性感染的过筛试验。
由于一些其他因素可使反应敏感性减小。
例如尿液在膀胱中滞留时间少于4-6h,不足以让细菌还原硝酸盐为亚硝酸盐,故建议以采晨尿检查为好;又如食物中完全不含硝酸盐,则即使有细菌亦不起作用;又如肠球菌虽为致病菌,但无转化硝酸盐为亚硝酸盐的特性,故虽有细菌感染亦呈阴性;抗生素治疗维生素C含量大于(25mg/dl)亦可出现假阴性。
[特异性]本试验对亚硝酸盐有特异性,但某些药物如盐酸苯偶氮吡啶可使尿呈红色,使测试结果呈假阳性。
8、尿胆原试验
[原理]NMultistix试验原理为欧氏反应原理。
对二乙氨基苯甲醛与尿胆原在酸性条件下,形成红色化合物(有的厂家生产试条原理为重氮偶合原理,尿胆原与3,3'-二甲氧基联苯-4,4-二甲氟化硼重氮盐反应而呈桃红色)。
可检出尿胆原3umol/L,正常尿含尿胆原为3-16umol/L。
本试验有较多干扰,例如甲醛防腐剂,亚硝酸盐大于0.05g/L,可减低反应灵敏性,出现假阴性。
尿胆原为不稳定成分,很快氧化为尿胆素,不与试垫反应,故尿样不新鲜亦会出现假阴性。
[特异性]欧氏反应受重氮药物代谢产物的影响,但此种反应迅速,而尿胆原反应则反应缓慢逐渐加深显色,可以鉴别。
9、白细胞酯酶试验
[原理]利用白细胞酯酶水解吡咯氨基酸酯与重氮盐作用显色。
检出敏感度为(5-15个白细胞/ul。
健康人尿液为(-),(+)或更多时为异常,但持续出现痕迹亦有异常可能,应及时镜检。
妇女应于留样时注意勿污染白带,尿糖增加或比重增加可使白细胞反应减弱,头孢菌素或草酸增加亦可使反应减弱,硝基呋喃妥英使尿呈棕色,干扰白细胞反应,其他各种尿呈异常颜色等均可影响反应。
10、比重试验
[原理]尿比重试纸是由一种特殊的高分子电解质与pH值指示剂组成。
当尿中离子与试垫作用时,氢离子浓度增加,pH值改变,由指示剂显色表示,故比重是由离子浓度间接表示。
当尿pH值大于6.5时比重偏低,可加0.005以期准确。
三、试剂品牌、包装规格、内含物:
1、试剂品牌:
HUASHENG-URINE-H-北京华晟医疗科技有限公司尿十一项检测条
2、包装规格:
100条/盒
方法的局限性:
干扰物:
1、尿液内青霉素超过4万/Ul时,对干化学法测定尿蛋白产生假阴性。
2、维生素C对干化学法测定尿糖产生假阴性。
3、尿液中污染甲醛,或高浓度胆红素,或使用某些药物(如呋喃坦啶)时,干化学法测定尿白细胞可产生假阳性。
尿蛋白>5g/L,或尿液中含有大剂量先锋Ⅳ、庆大霉素等药物时,可使结果偏低或出现假阳性。
4、尿液中含有对热不稳定酶、肌红蛋白或菌尿,可引起干化学法测定尿红细胞的假阳性。
尿液中大量维生素C的存在,可竞争性抑制反应致使干化学法产生假阴性。
注意事项:
1、留取新鲜尿,应留取清晨的第一次尿为宜,此时的尿液较浓缩,条件恒定,便于对比。
急诊病人可随时留尿。
2、用清洁有盖容器,一次性容器为好。
3、容器上应贴上标记,不可贴在盖子上,标记内容必须包括病人的全名,可识别病人标本特异性编码和标本收集时间。
4、尿标本应避免经血、白带、精液等混入,此外还应注意避免烟灰、糖纸等异物混入。
5、尿标本留取后应及时送验。
以免细菌繁殖、细胞溶解等。
6、尿胆红素、尿胆原等化学物质可因光分解或氧化而减弱,标本送验时应注意避光。
十、参考范围:
1、尿PH值:
随机尿PH4.6-8.0,多数标本为5.5-6.5,平均为6.0
2、尿蛋白:
阴性
3、葡萄糖:
1)本试验为阴性(含糖量0.11-1.11mmol/L)
2)当血糖〉8.88mmol/L(160mg/dl)超过肾糖阈值,可出现尿糖。
4、尿酮体:
阴性
5、尿胆红素:
阴性
6、尿潜血:
阴性
7、尿亚硝酸盐:
阴性
8、尿胆原:
弱阳性<16
9、尿白细胞:
阴性
10、尿比重:
晨尿或通常饮食条件下,1.015-1.025;随机尿1.003-1.035
十一、临床意义:
1、尿比密
A、高比密尿。
见于高热、脱水、心功能不全等尿少时,也可见于尿中含葡萄糖和碘造影剂时。
B、低比密尿。
经常排出比密近于1.010(与肾小球滤液比密接近)的尿称为等渗尿,主要见于慢性肾小球肾炎、肾盂肾炎等导致远端肾单位浓缩功能严重障碍的疾病。
尿比密测定有助于对糖尿病和尿崩症这两种多尿疾病的鉴别。
尿崩症时,尿量极大,尿比密很低,几近于1,而糖尿病时,尿中含有大量葡萄糖,比密增高。
1、尿蛋白:
分为功能性、体位性、病理性蛋白尿。
后者见于肾炎、肾病综合症等。
2、葡萄糖:
糖尿病、肾性糖尿病、甲亢、内服或注射大量葡萄糖及精神激动等疾病时
尿液中可出现葡萄糖。
3、尿酮体:
a、糖尿病酮症酸中毒。
b、非糖尿病性酮症者。
如大量腹泻、呕吐、饥饿、禁食过久等,均可出现,此种情况相当常见。
c、妊娠妇女常因妊娠反应、呕吐、进食少,发生酮症而致酮尿。
4、尿胆红素:
在肝实质性及阻塞性黄疸时,尿中均可出现胆红素。
在溶血性黄疸病人的尿中,一般不见胆红素。
5、尿胆原:
a)正常人为阳性(+)反应,尿液稀释20倍后多为阴性。
b)尿胆原阴性常见于完全阻塞性黄疸。
c)尿胆原增加常见于溶血性疾患及肝实质性病变,如肝炎。
6、尿亚硝酸盐:
a)正常人为阴性。
b)尿路细菌感染,如大肠埃希菌属、克雷伯杆菌属、变形杆菌属和假单胞菌属感染者可呈阳性。
7、尿白细胞酯酶:
a)正常人为阴性。
b)阳性提示尿路炎症,如肾脏或尿道炎症,包括肾盂肾炎、膀胱炎、尿道炎和
前列腺炎、表明尿液中白细胞数量每微升〉20个。
8、尿血红蛋白:
尿液中含有游离血红蛋白称为血红蛋白尿,为透明的鲜红色(含氧血红蛋白)或暗红色(含高铁血红蛋白),严重者呈浓茶色或酱油色,离心后颜色也不变。
沉渣中无红细胞,隐血试验呈阳性。
正常人尿液中无游离血红蛋白。
当体内大量溶血,尤其是血管内溶血,血液中游离血红蛋白可大量增加。
当超过1.00-1.35g/L时,即出现血红蛋白尿。
此种情况常见于血型不合输血、阵发性睡眠性血红蛋白尿、寒冷性血红蛋白尿症、急性溶血性疾病等。
还可见于各种病毒感染,链球菌败血症、疟疾、大面积烧伤、体外循环、肾透析、手术后所致的红细胞大量破坏等。
9、尿PH值
b)尿PH降低:
酸中毒、慢性肾小球肾炎、痛风、糖尿病等排酸增加,呼吸性酸中毒、CO2潴留等,尿多呈酸性。
c)尿PH升高:
频繁呕吐丢失胃酸、服用重碳酸盐、尿路感染、换气过度及丢失CO2过多的呼吸性碱中毒、尿呈碱性
d)由于尿蛋白、尿比密的测定原理也是基于模块上最后试剂的颜色变化,因此分析PH变化还有监控尿PH变化对其他模块区的干扰作用。
十二、病人准备、标本要求:
晨尿:
清晨起床后,在未进早餐和做其他运动之前排泄的尿液,又称为首次晨尿。
住院病人最适宜收集此类标本,但在采集前一天应提供收集容器和书面收集说明,如外阴,生殖器清洁方法,中段清洁尿等。
若采集后2小时内不能进行分析,可采取适当的防腐措施,晨尿常用与筛查、直立性蛋白尿检查和细胞学研究。
随机尿:
随时排泄,无需患者做任何准备的尿液,称为随机尿。
适用于常规及急诊的筛查。
十三、参考文献:
1、“全国临床检验操作规程(第三版)”、主编:
卫生部医政司
2、“实验室诊断与基础治疗常规”、主编:
上海科技出版社。