分子生物学方法推测年龄研究进展.docx

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分子生物学方法推测年龄研究进展

分子生物学方法推测年龄研究进展

【摘要】在人体的各种组织、器官中，d型／l型天冬氨酸的比值，碱基加合物和正常碱基的含量，染色体

末端端粒的长度，随着年龄的变化而变化。

因此，可以用分子生物学方法准确推测年龄。

【关键词】d型／l型天冬氨酸，碱基加合物和正常碱基，端粒，分子生物学，年龄

【中图分类号】13919．2；075

【文献标识码la

【文章编号】1007—9297（20XX）01—0040—02

在法医学实践中，经常需要对无名尸体、组织碎块进行

年龄估计。

一般情况下应用法医人类学方法对牙齿、骨骼

等检材估计个体年龄。

而在很多情况下，现场仅有组织碎

块存在，或者有的部位的骨骼不适合精确估计年龄，在这种

情况下用分子生物学方法估计年龄，尤为重要。

体内的许

多物质随着年龄的变化而发生改变，目前有几种物质随着

年龄的改变而发生变化，一种是质的变化，一种是量的变

化。

胶质原存在于人体的各种组织、器官中，胶质原含有d

型、l型天冬氨酸。

尤其在牙釉质、牙本质中，d型、l型天

冬氨酸的含量随着年龄的增加会发生改变，d型天冬氨酸

随着年龄的增加而增加，而l型天冬氨酸随着年龄的增加

而发生消旋作用，转变为d型天冬氨酸而含量下降。

d型／

l型天冬氨酸的比值随着年龄的增加而增加。

在牙本质中

这种变化较稳定，适合于用d型／l型天冬氨酸估计个体的

年龄_1j。

国外许多学者建立了利用天冬氨酸的消旋作用

推测年龄的方法。

20XX年，pilin等利用此方法计算15～95

岁之间的样本，年龄与d／l型天冬氨酸的比值的关系，其

相关系数达到0．93。

此方法的优点在于当牙齿的形态遭到

严重破坏时，可以利用牙本质中天冬氨酸的稳定性来估计

个体年龄。

此方法在实际应用中，水解蛋白质和手性分离、

检测氨基酸的衍生物尤为重要，影响结果的准确性，可应用

gc、hplc、毛细管电泳进行手性分离和检测ll。

随着年龄的增长，人体的体细胞线粒体产生的自由基

增多，自由基的增多会对dna产生损伤。

尤其活性氧弓l起

的dna氧化性损伤，导致碱基结构的损伤，进而引起dna

在体内复制时发生突变。

自由基对核dna和线粒体dna

都会产生损伤，由于线粒体dna没有组蛋白和hmg蛋白

的保护，更容易产生损伤【6-8。

活性氧对dna的损伤，表

现在dna的碱基形成加合物，在复制过程中，这些碱基产

生错配，导致突变。

活性氧是结构最简单、稳定性最差、氧

化性最强、与四种碱基的反应活性最强的自由基，因此在细

胞中最多见的是活性氧导致的碱基损伤，活性氧攻击碱基

的不饱和键形成碱基加合物。

人体也存在抗自由基损伤的

修复能力，但随着年龄的增加，修复能力下降。

活性氧可和

碱基形成8一oh—g、5一oh—dg、5一oh—du、8一oxo

—da，dug、2一oh—da碱基加合物_6j。

通过对动物细

胞和体外培养细胞的研究，发现随着年龄的增长细胞的碱

基加合物含量会增加，其中8一oh—da、8一oh—g含量

最多。

检测碱基加合物和正常碱基的含量，可用于推测个

体的年龄，但这种方法只能粗略估计年龄，适合于组织碎块

的年龄估计。

在人类染色体的末端存在端粒，端粒由蛋白质和dna

组成，真核生物的线型染色体都存在端粒。

端粒dna不存

在蛋白质编码基因，端粒基本由六核苷酸核心重复单位

（111aggg）组成，其中有的重复单位存在变异，重复序列问

亦存在一些插人序列。

端粒虽然不存在功能基因，但端粒

起着稳固基因组、保护染色体末端、决定核内染色体定位作

用及调控体细胞复制作用l9。

由于端粒调控着体细胞

的分裂、复制，体细胞分裂、复制有一定复制生命周期，端粒

决定体细胞分裂次数，可以说是细胞分裂的“生物钟”，因为

端粒不能进行半保留复制，其复制依赖于端粒酶的存在。

大部分体细胞不存在端粒酶，体细胞每分裂一次，端粒就丢

失一段，随着细胞分裂而不断缩短，因而端粒的长度反映细

胞复制历史。

也可以说端粒长度随着个体的年龄变化而缩

短，反映生物个体的年龄变化。

而端粒长度的变化不受体

法律与医学杂志20XX年第1o卷（第1期）

外因素的影响。

细胞每分裂一次，不同的细胞缩短的长度

不同，因此端粒长度可以作为推断年龄的一个理想标

记[1卜15]。

端粒长度的检测方法目前有trf（末端限制性片段

法）、fish（荧光原位杂交法）、a（杂交保护法）等。

这些

方

法检测都是46条染色体端粒的平均长度，而不同染色体

的端粒长度存在差别，以及同一染色体的两个端粒亦存在

差别[16]。

通过检测平均长度而推测年龄，误差较大。

如果

能准确检测一个端粒的长度，推测年龄准确性将大大提高。

随着分子生物学和分子遗传学及相关技术的发展，用

分子生物学方法可以准确推测个体的年龄。

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（收稿：

2o02一l1—06）