医学高级专业技术资格答辩病理学.docx
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医学高级专业技术资格答辩病理学
医学高级专业技术资格答辩（病理学）
[填空题]
1简述血栓的大致分类？
参考答案：
血栓可分为四种：
1.白色血栓：
发生于血流较速的部位。
2.红色血栓：
位于静脉沿续性血栓的尾部，易于脱落造成栓塞。
3.混合性血栓：
静脉的延续性血栓的体部。
4.透明血栓：
这种血栓发生于微循环小血管内，只能在显微镜下见到，故又称微血栓。
[填空题]
2简述恶性肿瘤的特点？
参考答案：
恶性肿瘤的特点包括：
1.生长速度较快，常发生坏死、出血、溃疡形成等。
2.肿瘤组织呈外生性生长并浸润包膜，与周围组织分界不清楚。
3.组织分化差，异型性大，核分裂像多见，并可见病理性核分裂像。
4.可有转移，容易复发。
5.对机体影响大，除局部压迫阻塞外还可破坏组织引起出血，合并感染，甚至造成恶病质。
[填空题]
3简述胸水涂片内间皮瘤细胞形态特征？
参考答案：
间皮瘤性胸水涂片中瘤细胞常成簇或成团排列，有时可呈乳头状或腺泡状。
核浆比例明显失调，核形不规则，染色深，有时可见到大片组织碎片。
同一涂片中可出现由正常到异型性的过渡性间皮细胞，有助于恶性肿瘤的诊断。
此外，由于间皮瘤有双相分化性能，如果同一病例出现乳头状、腺样细胞团和梭形的肉瘤样细胞则有助间皮瘤的诊断。
[填空题]
4简述完整的尸检记录应包括哪些。
参考答案：
完整的尸检记录应包括：
1.尸检申请单（含家属或单位同意尸检的签字、医生签字和医院盖章）。
2.临床病历摘要。
3.病理解剖记录：
包括大体解剖记录和镜下观察记录等，必要时应有照片。
4.病理诊断报告单，包括病理诊断、死亡原因及总结和讨论等。
[填空题]
5试述大体标本的观察包括哪些？
参考答案：
病理学研究大体观察主要运用肉眼或辅以放大镜、量尺和磅秤等工具，对大体标本及其病变的形状、大小、重量、色泽、质地、表面及切面形态、于周围组织和器官的关系等方面进行细致地解剖、观察、测量、取材和记录，必要时可摄影留作资料。
[填空题]
6试述丙肝病毒（HCV）抗体的应用？
参考答案：
此抗体特异识别丙肝病毒非结构区，而与乙肝病毒表面抗原和甲肝病毒均无交叉反应，在HCV感染的肝细胞浆中呈弥漫性阳性表达，主要用于标记丙肝病毒感染的组织，可以用于丙肝性肝炎的相关性方面的研究。
[填空题]
7应用自动脱水机出现故障后，标本应如何处理？
参考答案：
应用自动组织脱水机，有时可因停电等异常情况，造成脱水机功能紊乱出现故障，此时组织因未能按序进行，可能出现脱水不净又与蜡混合造成切片困难。
遇到此情况，可考虑用倒序方法进行处理；对于干枯的组织水化后可经1%冰醋酸软化，水洗后再进行脱水，而后透明、浸蜡、包埋、切片和染色。
[填空题]
8试述染色吸附作用的原理？
参考答案：
染色过程中吸附作用是染色的一种作用力。
是指一种物质从它的周围把另一种物质的分子、原子、离子集中在界面上的过程，或者说是指物质在相界面上浓度自动发生变化的过程。
具有吸附作用的物质叫吸附剂，被吸附的物质叫吸附物，吸附物并不能透进吸附剂内部，例如活性炭吸附毒气或色素的作用。
吸附作用又分物理吸附和化学吸附。
[填空题]
9试述细胞和组织化学过程中的注意事项？
参考答案：
影响细胞组织化学结果的因素较多，重要的注意事项包括：
1.严格控制好反应物质的浓度、温度、pH值、时间四者之间的关系。
2.选择分析纯试剂。
3.在细胞组织中的反应产物必须具有色的沉着物。
4.实验所用器皿必须清洁无污染杂质。
5.为了保证实验的可靠性、科学性，防止假阳性的发生，必须同时作对照实验。
[填空题]
10简述纤维素染色的意义？
参考答案：
纤维素染色常用于观察：
1.炎症渗出性病变。
2.弥浸性血管内凝血的透明血栓。
3.风湿性肉芽组织、一些胶原性疾病病变中纤维素样坏死。
4.全身性结缔组织病。
5.肾小球毛细血管腔内和基底膜内纤维素沉着等，如严重的急性肾小球肾炎时。
[填空题]
11简述潘氏细胞染色的应用？
参考答案：
潘氏细胞是一种位于肠腺基底部的上皮细胞，在HE染色切片被染成红色。
潘氏细胞染色用于观察：
1.溃疡性结肠炎：
潘氏细胞增多。
2.迈克尔氏憩室：
病变中有许多瘤性潘氏细胞。
3.胃粘膜肠上皮化生：
在化生腺体内可见潘氏细胞存在。
[填空题]
12简述嗜铬细胞在固定和染色中的注意事项？
参考答案：
肾上腺髓质的嗜铬细胞较易发生自溶，常规甲醛固定的组织HE染色效果较差，须经过特殊固定液固定。
目前常用的嗜铬细胞染色包括甲苯胺蓝法和Giemsa染色法。
[填空题]
13试述心肌与骨骼肌的区别？
参考答案：
心肌和骨骼肌均横纹肌，两者不完全相同：
1.心肌细胞一般只有一个细胞核，位于细胞中间，骨骼肌细胞有多个核，一般位于周边，靠近肌膜。
2.心肌纤维可有分支，骨骼肌纤维无分支，各肌原纤维的横纹排列在同一水平上。
3.心肌纤维的直径较骨骼肌小而短。
4.心肌纤维具有特殊分化的闰盘，骨骼肌无闰盘。
[填空题]
14简述原位PCR的特点和主要操作步骤？
参考答案：
原位PCR是将组织切片或细胞涂片中的核酸（DNA或RNA）片段在原位进行扩增，在扩增中掺入示踪剂，扩增后再进杂交等。
原位PCR技术吸取了原位杂交和PCR两者之优点，能在组织学上定位且敏感性高。
目前主要是用来检测组织或细胞中病原微生物，如病毒及细菌等。
主要操作步骤：
1.标本固定。
2.渗入。
3.扩增。
4.原位杂交并显色等。
[填空题]
15简述微波技术在病理学中的应用。
参考答案：
主要用于：
1.组织固定，用于快速光镜标本固定、电镜标本固定，标本的结构保存更理想。
2.用以抗原修复和暴露，提高免疫组化染色效果。
3.可用于快速石蜡切片急诊。
4.缩短免疫组化和细胞化学染色的时间，并使着色程度和背景均有改善。
[填空题]
16简述多聚-L-赖氨酸的使用方法？
参考答案：
多聚-L-赖氨酸适用于组织学、免疫组织化学、冰冻切片、细胞涂片、原位杂交等使用的玻片的防脱片处理，以防实验操作过程中组织掉片。
使用方法：
1.多聚-L-赖氨酸液体1份，蒸馏水9份混合均匀。
2.将充分洗净、预先干燥的玻片浸泡于稀释后的溶液内10秒或提拉十次，沥干。
3.于室温下凉干12-24小时或在45度以下烤箱内烘干。
可长期保存使用。
稀释后的多聚赖氨酸溶液置4℃冰箱保存，可反复使用一个月。
[填空题]
17简述F8及应用。
参考答案：
F8是一种糖蛋白，广泛存在于血管内皮、肝窦、腺窦上皮以及淋巴管内皮细胞，是血管内皮及其内源性良恶性肿瘤的特异性标记。
抗体可用于血管源性良性肿瘤和血管肉瘤的诊断，良性血管源性肿瘤阳性表达程度强于血管肉瘤。
适用于蜡块切片染色，阳性部位在细胞胞浆。
[填空题]
18试述小B细胞淋巴瘤免疫组化标记的抗体类型。
参考答案：
小B细胞淋巴瘤是非何杰金氏淋巴瘤中较常见的类型，其中又分为：
套区淋巴瘤、淋巴细胞性淋巴瘤、滤泡中心性淋巴瘤、边缘带淋巴瘤、淋巴浆细胞样淋巴瘤和浆细胞瘤等，诊断和鉴别诊断中常用的免疫组化标记抗体包括：
CD20、CD5、CD79a、CD43、CD10、CD23、CyclinD1等B细胞标记性抗体。
[填空题]
19简述我国淋巴瘤的主要类型。
参考答案：
我国淋巴瘤以非霍奇金淋巴瘤为主，发生在成人的非霍奇金淋巴瘤有弥漫性大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病和外周T细胞淋巴瘤；在儿童和青少年则以急性淋巴细胞白血病/淋巴瘤和Burkitt淋巴瘤为主；淋巴结外淋巴瘤主要有发生在胃肠道、涎腺和肺等部位粘膜相关淋巴瘤和发生在中线面部的NK/T细胞淋巴瘤。
[填空题]
20简述肺癌的大体类型。
参考答案：
1.包括：
中央型、周围型、弥漫型。
2.组织学类型包括：
鳞状细胞癌，为肺癌中最常见的类型；小细胞癌，恶性度极高，对化疗及放疗敏感，又分为三个亚型：
燕麦细胞型、中间细胞型、混合型；腺癌；大细胞癌；腺鳞癌：
属于发生支气管上皮具多向分化潜能的干细胞的混合性癌；多形性肉瘤样癌等6个基本类型。
[填空题]
21简述a-ACT抗体的应用。
参考答案：
a-ACT是一种蛋白酶，存在于大多数巨噬细胞、组织细胞和正常胃肠道上皮细胞中。
主要用于恶性纤维组织细胞瘤的诊断，但应与CD68和Lysozyme等时检测，以提高其诊断准确率。
亦可用于各种癌如胃癌、肺癌和肾癌等的研究。
适用于蜡块切片染色阳性部位在细胞胞浆。
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[填空题]
22简述前列腺特异抗体及应用。
参考答案：
前列腺特异抗体是由前列腺上皮细胞合成的一种糖蛋白，目前认为是具有特异性的肿瘤标记物之一，主要用于前列腺癌和转移性前列腺癌的诊断，但不能作为良、恶性前列腺疾病的鉴别诊断，适用于蜡块切片染色，阳性部位在细胞胞浆。
[填空题]
23简述癌基因产物P21抗体及应用。
参考答案：
P21是ras基因族中一种共同表达产物，P21基因的突变和失活是肿瘤发生发展过程中的重要因素。
研究表明P21基因的过度表达与肿瘤的类型、恶性度、分期以及病有的预后密切相关。
P21抗体主要用于胃肠道癌肿、乳腺癌、肺癌等恶性肿瘤的研究，适用于蜡块切片，染色阳性部位在细胞胞浆。
[填空题]
24简述神经元特异性烯醇化酶及应用。
参考答案：
神经元特异性烯醇化酶主要分布于神经元和一些神经内分泌细胞中，可用于神经内分泌肿瘤的辅助诊断。
但由于特异性差，在一些正常平滑肌细胞、肌上皮细胞和淋巴细胞待均有阳性表达，在免疫组化工作中，不能作为单独的诊断性标记，应与其它相应的标记物联合应用，以提高其诊断准确性。
[填空题]
25简述黑色素瘤抗体及应用。
参考答案：
黑色素瘤相关抗原存在于皮肤的交界痣和兰痣细胞中，可用于恶性黑色素瘤（不管有否色素细胞）以及软组织透明细胞肉瘤的鉴别诊断。
在恶性黑色素瘤与上皮性癌的鉴别诊断时，常为阳性，可与S100和／或Vimentin阳性，细胞角蛋白（CK）阴性，共同用于恶性黑色素瘤的诊断。
[填空题]
26简述胶质纤维酸性蛋白及应用。
参考答案：
神经胶质纤维酸性蛋白为中间丝蛋白之一，抗体可用于星形胶质瘤与脑膜瘤的鉴别诊断，包括星形细胞瘤、星形母细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤、少突胶质细胞瘤、室管膜瘤等中枢神经系统肿瘤的鉴别论断。
适用于石蜡切片染色，阳性部位在细胞胞浆。
[填空题]
27简述上皮膜抗原（EMA）及应用。
参考答案：
EMA是一组糖蛋白，广泛分布在各种正常上皮细胞膜及上皮性肿瘤中，分布范围与细胞角蛋白相似，但对内脏腺上皮的表达优于细胞角蛋白。
抗体与细胞角蛋白联合应用，对上皮源性肿瘤，尤其是低分化腺癌，可提高阳性率。
EMA高温修复可增强染色强度。
适用于蜡块切片染色，阳性部位在细胞胞浆。
[填空题]
28简述结蛋白抗体及应用。
参考答案：
结蛋白为中间丝蛋白之一，正常分布于平滑肌细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞和肌上皮细胞及其肿瘤中，结蛋白抗体主要用于子宫、皮肤、胃肠道及其它横纹肌肉瘤和肌上皮瘤的诊断和鉴别诊断。
高温修复可增强染色强度，适用于蜡块切片染色阳性部位在细胞胞浆。
[填空题]
29简述细胞角蛋白（广谱）抗体及应用。
参考答案：
广谱细胞角蛋白CK主要标记角化上皮、复层鳞状上皮、复层上皮、增生的角化细胞和单层上皮，抗体主要用于鳞癌、腺癌、移行细胞癌、小细胞癌、恶性间皮瘤、滑膜肉瘤、平滑肌肉瘤等鉴别诊断，可联合EMA和CEA等指标进行上皮性肿瘤与非上皮性肿瘤的鉴别诊断。
适用于蜡块切片染色，阳性部位在细胞胞浆。
[填空题]
30简述嗜铬素A（CgA）抗体及应用。
参考答案：
CgA是人类肾上腺髓质中含量最高的一种可溶性酸性蛋白，广泛存在于神经元及其神经细胞中，抗体可用于垂体肿瘤、胰岛细胞瘤、嗜铬细胞瘤、甲状腺髓样癌、类癌等的鉴别诊断。
适用于蜡块切片染色，阳性部位在细胞胞浆。
[填空题]
31简述癌胚抗原（CEA）及应用。
参考答案：
C.EA是一种胚胎性抗原，主要存在于胚胎消化道上皮组织、
胰腺和各种上皮性肿瘤中。
CEA分布类型与肿瘤的恶性度有关，与EMA一样可作为上皮性恶性肿瘤的重要标记，适用于蜡块切片染色，阳性部位在细胞胞浆。
[填空题]
32简述CD45（LCA）白细胞共同抗原及应用。
参考答案：
LCA是造血细胞的特异性标记，主要分布在T、B、细胞、单核细胞、粒细胞和前体细胞表面，一般不存在于非造血组织中，是区别淋巴瘤，白血病和非造血组织肿瘤的一个良好标记物。
适用于蜡块切片染色，阳性部位在细胞胞浆。
[填空题]
33简述CD30抗体及应用。
参考答案：
CD30主要标记活化T和B淋巴细胞，R-S细胞和部分淋巴滤泡间区细胞，主要用于检测何杰金氏淋巴瘤中的R-S细胞，故认为是何杰金氏淋巴瘤的一个特异性标记，目前认为CD30亦是大细胞间变型淋巴瘤的诊断性标记。
适用于蜡块切片染色，阳性部位在细胞胞浆。
[填空题]
34简述CD34内皮细胞标记抗体及应用。
参考答案：
CD34主要标记造血干细胞髓样细胞和内皮细胞，可用于良恶性血管源性肿瘤的诊断和鉴别诊断，亦可用于各种肿瘤间质中血管生成的研究。
适用于蜡块切片染色，阳性部位在细胞胞浆。
[填空题]
35简述CA125卵巢癌抗原及应用。
参考答案：
CA125是一种糖蛋白，是上皮性卵巢癌尤其是浆液性腺癌的主要标记物，对卵巢浆液性囊腺癌及其转移的鉴别诊断有参考价值，亦可用于其它恶性肿瘤的如乳腺癌、胰腺癌、肝癌和胃肠道癌等。
适用于蜡块切片染色阳性部位在细胞胞浆。
[填空题]
36简述CA19-9消化道癌抗原及应用。
参考答案：
CA19-9是一种肿瘤相关的糖类抗原，主要于消化道恶性肿瘤的研究，包括胰腺癌、胆管癌、胃癌和结直肠癌，其中以胰腺癌阳性最高，是胰腺癌诊断的一种较好的标记。
适用于石蜡切片染色，阳性部位在细胞胞浆。
[填空题]
37简述Bcl-2抗体及应用。
参考答案：
Bcl-2是B细胞淋巴瘤-2的缩写，主要用于滤泡性淋巴瘤的诊断以及与反应性淋巴滤泡增生的鉴别诊断，肿瘤性滤泡多为阳性，而正常和增生的滤泡多为阴性。
目前研究认为Bcl-2也是细胞凋亡的一种抑制因子，参与细胞凋亡的调控，亦可用于各种恶性肿瘤细胞凋亡的研究。
适用于蜡块切片染色阳性部位在细胞胞浆。
[填空题]
38简述平滑肌肌动蛋白及应用。
参考答案：
肌动蛋白是一种具有收缩能力的微丝蛋白，广泛分布于几乎所有的肌型细胞中，平滑肌肌动蛋白主要用于血管平滑肌、平滑肌瘤和平滑肌肉瘤以及肌上皮细胞和肌上皮瘤等鉴别诊断，在判断良恶性乳腺病中可标记肌上皮细胞存在和分布情况，成为一个重要的参考指标。
适用于蜡块切片染色阳性部位在细胞胞浆。
[填空题]
39试述免疫组化试剂的保存与使用须知？
参考答案：
应注意如下问题：
1.新购入的试剂，经认真核对后尽快放入4摄氏度冰箱避光保存。
2.显色试剂一定要避光保存。
3.在实验操作过程中，每滴加一种试剂后，都必须尽快将剩余的试剂放回冰箱存放。
切忌等实验完毕后再来收拾整理试剂，防止试剂在室温下放置时间过久，效价下降。
4.浓缩试剂因为包装规格小，打开瓶盖之前请稍加离心，以便把试剂沉到瓶底，防止试剂粘在瓶盖上而损耗。
[填空题]
40简述免疫组化染色中常见脱片的原因？
参考答案：
免疫组化染色中常见的脱片原因包括：
1.组织固定、脱水、透明不充分。
2.组织切片太厚，大于5um。
3.组织切片有折叠。
4.过度热的抗原修复处理。
5.抗原修复液的pH值偏高。
6.操作过程中，冲洗方法不正确等，应注意克服。
[填空题]
41试述免疫组化组织切片冰冻技术？
参考答案：
免疫组化组织切片冰冻技术是免疫组织化学染色中最常见的一种切片方法，其最突出的优点是能够较完好地保存多种抗原的免疫活性，恒冷箱冰冻切片机为较理想的冰冻切片机，切片时可不受外界温度和环境影响，连续切薄片4μm，完全能满足免疫组织化学标本要求。
切片时以-18--20℃为宜，温度过低组织易破碎；抗卷板的位臵及角度要适当，载玻片附贴组织切片要稳定，切勿上下移动。
[填空题]
42试述免疫组化细胞培养涂片的制备？
参考答案：
免疫组化细胞培养涂片的制备包括：
1.细胞培养生长的细胞涂片在已消毒过的载玻片上，37℃过夜。
2.PBS简单冲洗。
3.细胞固定，方法可以选择：
（1）10分钟1%中性福尔马林。
（2）5分钟-10度甲醇，自然干燥。
（3）5分钟冷丙酮，自然干燥。
[填空题]
43试述免疫组化冰冻切片的制备？
参考答案：
免疫组化冰冻切片的制备包括：
1.洁净玻片经95%的酒精处理后，空气中自然干燥待用。
2.冰冻组织切片厚度4-8微米。
3.冰冻切片允许室温放置30分钟，自然干燥。
4.冷丙酮（4℃冰箱中备用）固定10分钟。
5、PBS冲洗三次，接着免疫组化染色步骤即可。
[填空题]
44试述免疫组化非特异性背景的解决办法？
参考答案：
免疫组化非特异性背景的解决办法包括：
1.每步冲洗3-5分钟。
2.防止切片干燥（必要时重做）。
3.勿以折叠处观察染色结果。
4.可再配制新鲜3%H2O2封闭。
5.正常非免疫动物血清再封闭。
6.组织及时固定，固定液要符合标准。
7.重新配制粘附剂涂液。
8.延长血清蛋白时间等方法。
[填空题]
45试述免疫组化非特异性背景染色的原因？
参考答案：
免疫组化非特异性背景问题是经常出现的问题，其原因可能由于：
1.操作过程中冲洗不充分。
2.加试剂后切片干燥。
3.组织切片折叠。
4.组织中含过氧化物酶未阻断。
5.组织中含内源性生物素。
6.组织抗原弥散。
7.切片粘附剂过厚。
8.血清蛋白封闭不充分等原因。
[填空题]
46试述免疫组化染色过强问题的解决办法？
参考答案：
免疫组化染色过强问题的解决办法包括：
1.降低抗体滴度（一般指浓缩型抗体）。
2.抗体孵育时间：
室温1小时或4℃过夜；一般室温20-28℃。
3.C液和D液孵育不能超过10分钟。
4.显色时间不能超过5-10分钟，以显微镜下观察为准。
[填空题]
47试述免疫组化染色过强的原因？
参考答案：
免疫组化染色过强的原因包括：
1.抗体的浓度过高或抗体孵育时间过长。
2.孵育温度过高，超过37℃。
3.C液和D液孵育时间过长。
4.DAB显色时间过长或DAB浓度过高。
[填空题]
48简述0.01M柠檬酸缓冲液（粉剂）的使用方法？
参考答案：
0.01M柠檬酸缓冲液适用于福尔马林固定、石蜡包埋组织免疫组化抗原修复使用。
其方法：
将柠檬酸缓冲液粉剂溶于2000毫升蒸馏水摇匀后，测其pH值，应在6.0±0.1，若超出此范围，需用0.1M的HCL或NaOH调整。
注意事项：
热修复使用过的柠檬酸盐缓冲液不能反复使用。
[填空题]
49简述胰酶试剂盒使用方法？
参考答案：
胰酶消化可以大大增强免疫组化染色结果，胰酶试剂盒适用于部分中性福尔马林固定、石蜡包埋组织切片的抗原修复的免疫组化染色，酶的浓度可在0.05-0.25%之间。
注意事项：
1.玻片必须经防脱片处理。
2.胰酶试剂盒4-8℃冰箱保存，避免冰冻。
[填空题]
50简述选择免疫组化最佳固定液的标准？
参考答案：
最佳固定液标准是：
1.最好地保持细胞和组织的形态结构。
2.最大限度地保存抗原的免疫活性，一些含重金属的固定液在免疫组织化学总是禁用的。
中性缓冲福尔马林（或多聚甲醛）是适宜性较广泛的固定液，但固定时间不宜过长。
[填空题]
51简述免疫组化细胞和组织的固定作用？
参考答案：
为了更好的保持细胞和组织原有的形态结构，防止组织自溶，有必要对细胞和组织进行固定。
固定的作用不仅是使细胞内蛋白质凝固，终止或抑制外源性和内源性酶活性，更重要的是最大限度的保存细胞和组织的抗原性，使水溶性抗原转变为非可溶性抗原，防止抗原弥散或丢失，不同抗原，其稳定性也不相同，因而对固定剂的耐受性差异较大。
[填空题]
52简述免疫组化穿刺细胞吸取涂片方法？
参考答案：
免疫组化穿刺细胞吸取涂片方法主要用于实质器官的病变区，如：
肝、肾、肺、淋巴结、软组织等。
用细针穿刺吸取病变区液体成分，如穿刺液较少，可直接涂抹在载玻片上，力求细胞分布均匀。
如穿刺液较多，细胞丰富，将穿刺液制成细胞悬液，吸取1滴于载玻片上，轻轻涂抹，待涂片略干即可固定。
该法穿刺吸取直接涂片的优点是操作简便，细胞形态保持良好。
缺点是细胞分布不均匀。
[填空题]
53简述免疫组化细胞印片方法？
参考答案：
目前，免疫组织化学技术已经应用于细胞学诊断，印片方法优点是简便省时，细胞抗原保存较好；但缺点是细胞分布不均匀，玻片上细胞重叠，影响标记效果，故标本取材和制作十分重要。
新鲜标本应以最大面积剖开，充分暴露病变区，将载玻片轻轻压于病变区，脱落的细胞便粘附在玻片上，立即浸入细胞固定液内5-10分，取出后自然干燥，低温保存备用。
[填空题]
54简述石蜡组织切片抗原修复的意义及方法？
参考答案：
抗原修复的意义在于：
暴露经中性福尔马林固定、石蜡包埋后的组织中被封闭的抗原，大多采用加热的方法，其目前包括：
柠檬酸缓冲液高压锅高温高压抗原修复法、柠檬酸微波抗原修复法、柠檬酸冲洗液煮沸抗原修复法、EDTA抗原热修复水浴法等，其中效果以高压锅和微波加热修复法为较好。
[填空题]
55试述石蜡切片免疫组化染色具有那些要求？
参考答案：
石蜡切片具有组织结构保存良好、结构清晰，抗原定位准确的特点，更适合回顾性研究。
用于免疫组化的石蜡制备与常规HE制片略有不同：
1.脱水、透明等过程应在4摄氏度下进行，以尽量减少组织抗原的损失。
2.组织块大小应限于2cmX1.5cmX0.3cm。
3.浸蜡、包埋过程中，石蜡应保持在60摄氏度以下，最好选择溶点低的软蜡。
4.切片厚度4-5μm。
5.采用二次展片。
6.载玻片需经防脱片处理。
[填空题]
56简述取材对于免疫组织化学方法的要求？
参考答案：
正确的病理诊断取决于准确的显微镜下观察，切片质量的好坏直接影响诊断结果的准确性，甚至会带来错误的结果。
一张好的切片与取材和固定都有密切的关系。
对所需材料的取材，不仅要求组织细胞的形态完整保存，而且要最大程度的保存组织或细胞成分的抗原性，同时还要求抗原表达不能弥散，否则抗原的定性将无从谈起。
[填空题]
57简述免疫组化组织常用的固定液？
参考答案：
免疫组化组织常用的固定液包括：
1.10%中性缓冲福尔马林液，为国外推荐的免疫组化通用固定液。
2.4%多聚甲醛磷酸缓冲液pH7.4。
3.甲醛升汞固定液等，以中性缓冲福尔马林液为佳。
[填空题]
58简述免疫组化染色组织固定应注意的事项？
参考答案：
免疫组化染色组织固定应注意：
1.手术或穿刺离体组织，应力求保持组织新鲜，尽快固定处理。
2.组织块小于2cmX1.5cmX0.3cm，尤其厚度必须小于0.3cm。
3.固定液的量，体积一般大于组织的20倍。
4.固定时间，8-24h内，过度固定会使抗原表达假阴性。
5.组织固定后应充分洗，以减少固定液造成的人为假象。
[填空题]
59简述造成免疫组化染色阴性的原因？
参考答案：
免疫组化染色阴性的原因包括：
操作步骤错误；组织中无抗原；一抗与二抗种属连结错误；不同试剂盒显色底物选用错误，一种或多种试剂活性降低等多种原因。
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