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微波法提取香菇多糖的研究论文
酶-微波法提取香菇多糖的研究
摘要
香菇是侧耳科的担子菌，是药食两用菌。
其中的香菇多糖具有显著的抗肿瘤活性和有效抗肝炎病毒等作用。
本项目主要研究的是香菇多糖的酶-微波法提取，以香菇为原料提取香菇多糖，建立一种新的组合提取方法以提高香菇多糖的提取率和纯度。
本项目的主要研究内容有：
1、分别用酶解法和微波法对香菇中的香菇多糖进行提取；
2、将酶解法和微波法结合起来提取香菇多糖；
3、分析实验结果，对各种组合方式进行比较分析，建立高效的复合提取法。
关键词：
香菇香菇多糖酶解法微波法新组合最适pH及浓度
Abstract
Lentinusedodesissideotologicbasidiomycetes,isediblefungus.Thelentinanhassignificantantitumoractivityandtheeffectiveantihepatitisviruseffect.
Thisprojectmainlyisthestudyoflentinanenzymatic-microwaveextractiontoLentinusedodesasrawmaterial,extractinglentinan,establishanewcombinationtoimprovetheextractionmethodoflentinanextractionrateandpurity.Themainresearchcontents:
1,respectively,withenzymaticmethodandmicrowavemethodoninlentinanpolysaccharidesextraction;
2,theenzymaticmethodandmicrowavemethodarecombinedtoextractoflentinanpolysaccharide
3,theanalysisoftheexperimentalresults,thedifferentcombinationmethodsofcomparativeanalysis,theestablishmentofefficientcompoundextractionmethod.
Keywords:
Lentinusedodes;lentinan;enzymaticmethods;microwavemethod；Newcombination；TheoptimumpHandconcentration
目录
摘要…………………………………………………………………2
Abstract……………………………………………………………3
目录…………………………………………………………………4
1前期准备工作……………………………………………………5
1.1资料搜索与查阅………………………………………………5
1.2实验方案设计…………………………………………………5
1.3实验器材的准备…………………………………………………5
2实验过程及方法…………………………………………………5
2.1预处理…………………………………………………………6
2.2香菇多糖的提取………………………………………………6
2.2.1酶解法………………………………………………………6
2.2.2微波法………………………………………………………6
2.2.3酶—微波法…………………………………………………6
2.3苯酚-硫酸法测量香菇多糖含量……………………………6
2.3．1标准曲线的制备……………………………………………6
2.3．2香菇多糖的含量测定………………………………………6
2.4实验结果…………………………………………………………6
2.4.1葡萄糖标准曲线…………………………………………………6
2.4.2酶解法…………………………………………………………7
2.4.3微波法…………………………………………………………8
2.4.4酶—微波法……………………………………………………8
3论文结果……………………………………………………………9
3.1作品的实际应用价值……………………………………………9
3.2作品成果推广……………………………………………………9
参考文献……………………………………………………………10
1前期准备工作
1.1资料搜索与查阅
利用衡阳师范学院图书数据库、南华大学图书数据库以及网络图书数据库的资料，查阅并对香菇多糖的酶解法与微波法资料进行整理。
1.2实验方案设计
分别用酶解法与微波法对香菇多糖进行提取
a酶解法
步骤：
市场上销售的干香菇——烘干——粉碎——加酶提取——合并提取液——浓缩——香菇多糖提取液
b微波法
步骤：
市场上销售的干香菇——烘干——粉碎——微波条件下提取——合并提取液——浓缩——香菇多糖提取液
通过对比实验得出香菇多糖提取率最高时：
酶解法使用的酶及其条件；微波法使用时的功率及其使用时间
c酶--微波法
运用酶解法与微波法单独提取香菇多糖最佳提取率的条件对两种方法进行组合
酶-微波法初步步骤：
市场上销售的干香菇——烘干——粉碎——加酶提取——合并提取液——浓缩——香菇多糖提取液——加入无水乙醇配成一定体积分数的乙醇溶液（也可用其它溶剂）——在微波条件下进一步提取得到香菇多糖。
d香菇多糖含量的测定（采用苯酚—硫酸法）
1.3实验器材的准备
实验仪器:
研磨机石棉网烧杯100ml容量瓶微波炉干燥箱台秤漏斗（滤纸）蒸发皿离心机温度计玻璃棒酒精灯石棉网烧杯50ml100ml容量瓶微波炉紫外分光光度仪试管pH计
实验试剂:
蒸馏水无水乙醇6%苯酚溶液浓硫酸葡萄糖标准溶液（1mg/ml）纤维素酶木瓜蛋白酶稀盐酸
2实验过程及方法
2.1预处理
将干香菇放于干燥箱中低温（60摄氏度）烘干,再切成小块放入研磨机中研磨成粉.
2.2香菇多糖的提取
2.2.1酶解法
称取1g香菇粉，置于100ml三角烧瓶中，加入蒸馏水50ml，分别加入各种浓度的纤维素酶，并调节Ph值、温度、反应时间、得到香菇多糖提取液。
2.2.2微波法:
称取10g香菇粉，按1：
25加入蒸馏水，在一定微波条件下提取，冷却后离心。
从上清液中取样测定其多糖浓度。
2.2.3酶—微波法:
把在最适条件下酶法提取完的样品溶液，加入无水乙醇配成配成配成一定体积的乙醇溶液，在微波条件下继续提取，其他条件跟酶解法一致。
2.3苯酚-硫酸法测量香菇多糖含量
2.3．1标准曲线的制备
准确吸取1mg/ml葡萄糖标准溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0ml置于50ml容量瓶定容。
准确吸取该系列溶液各2ml,分别置于大试管中，加入苯酚试液各1ml，摇匀迅速加入浓硫酸各5ml后，置于沸水浴上加热60min,冷却后在490nm处比色，绘制标准曲线
2.3．2香菇多糖的含量测定
取样液2ml，加8ml无水乙醇，3000r/min离心10min后，傾去上清液，在加入10ml80％乙醇，同样条件离心5min,重复2次，将沉淀用水溶解并转移至100ml容量瓶中定容。
吸取1ml稀释10倍，取稀释液2ml，按上述“标准曲线的制备”中的方法测定吸光度，计算含量
2.4实验结果
2.4．1葡萄糖标准曲线
表1
Glu浓度
0.0
0.001
0.002
0.003
0.004
0.005
0.006
0.007
0.008
0.009
吸光度
0.0
0.036
0.147
0.165
0.286
0.341
0.404
0.491
0.556
0.641
图1
2.4．2酶解法
表2-1
纤维素酶浓度（％）
0.1
0.5
1.0
2.0
4.0
吸光度
0.124
0.380
0.393
0.401
0.407
表2-2
反应时间
40
60
80
100
120
吸光度
0.265
0.314
0.382
0.394
0.399
表2-3
温度（°C）
25
35
45
55
65
吸光度
0.258
0.331
0.433
0.488
0.387
表2-4
PH
3.5
4.0
5.0
6.0
吸光度
0.253
0.322
0.416
0.389
由上列表2-1至2-4中数据可得出纤维素酶时间控制在80min为最佳、最适反应浓度为0.5%、最适反应温度55°C、最适Ph值5.0
2.4．3微波法
表3-1
功率（W）
600
700
800
900
1000
多糖百分含量（％）
9.00
9.52
11.47
11.08
9.71
表3-2
时间（min）
5
8
10
12
15
多糖百分含量（％）
5.40
8.36
8.64
8.89
10.56
表3-3
温度（°C）
75
80
85
90
95
多糖百分含量（％）
10.53
11.49
9.76
9.50
9.03
由上列数据可得出微波法的最佳功率是800W、最佳反应时间15min、最适温度80°C
2.4．4酶—微波法
相比单一的微波法、纤维素酶解法,纤维素酶-微波联合提取香菇多糖的最大提取率分别高出20%和10%。
3论文结果
3.1作品的实际应用价值
香菇多糖具有显著的抗肿瘤活性和有效抗肝炎病毒等作用，具有广阔的药用价值级经济前景。
将酶解法与微波法组合起来提取香菇多糖大大提高了多糖提取率、降低成本提高经济效率且减少了对环境的污染。
3.2作品成果推广
根据该项目的实验结果，已经找到了比较合适的酶解法与微波法的联合，我们可以通过网络资源共享把论文成果推广，最大可能地实现该成果的应用价值。
参考文献
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