分光光度计的使用原理.docx

分光光度计的使用原理.docx

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分光光度计的使用原理

§5测定方法一,单组分定量方法单组分是指样品溶液中含有一种组分,或者是在混合物溶液中待测组分的吸收峰与其他共有物质的吸收峰无重叠.其定量方法包括校准曲线法校准曲线法,标准对比校准曲线法法和吸收系数法.

1校准曲线法方法:

配制一系列不同含量的标准溶液,选用适宜的参比,在相同的条件下,测定系列标准溶液的吸光度,作A-c曲线曲线,即标准曲曲线线,也可用最小二乘数处理,得线性回归方回归方程.在相同条件下测定未知试样的吸光度,从标准曲线上就可以找到与之对应的未知试样的浓度.

2标准对比法即将待测溶液与某一标样溶液,在相同的条件下,测定各自的吸光度,建立朗伯比尔定律,解方程求出未知样浓度与含量.As=KcsAx=KcxcsAxcx=As

§6紫外-可见分光光度法在医学检验中的应用紫外例1.血清铜的测定例2.新生儿血清胆红素的测定