高中生物选修1复习生物技术实践考前回归.docx
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高中生物选修1复习生物技术实践考前回归
选修1复习生物技术实践考前回归
1.实验涉及的物质
（1）加盐作用
①腐乳加盐腌制：
加盐可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，在后期的制作过程中不会过早酥烂。
同时，盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。
②泡菜制作泡菜盐水：
按照清水与盐的质量比为4：
l的比例配制盐水，将盐水煮沸冷却。
③刚果红染色后加入物质的量浓度为1mol/L的NaCl溶液，15min后倒掉NaCl溶液，洗去浮色。
（2）卤汤组成
卤汤直接关系到腐乳的色、香、味。
卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的。
卤汤中的酒含量一般控制在12%左右。
加酒可以抑制微生物的生长，同时能使腐乳具有独特的香味。
香辛料种类很多，如胡椒、花椒、八角、桂皮、姜、辣椒等。
香辛料可以调制腐乳的风味，也具有防腐杀菌的作用。
（3）亚硝酸盐性质和作用
亚硝酸盐为白色粉末，易溶于水，在食品生产中用作食品添加剂。
膳食中的绝大部分亚硝酸盐在人体内以“过客”的形式随尿排出，只有在特定的条件下（适宜的pH、温度和一定的微生物作用），才会转变成致癌物——亚硝胺。
大量的动物实验表明，亚硝胺具有致癌作用，同时对动物具有致畸和致突变作用。
研究表明，人类的某些癌症可能与亚硝胺有关。
（4）测定亚硝酸盐实验中所用各种试剂、药品及作用
序号
试剂、药品
作用
1
对氨基苯磺酸（避光保存）
与亚硝酸盐发生重氮化反应
2
盐酸
调节pH成酸性
3
N－1－萘基乙二胺盐酸盐（避光保存）
与重氮化反应的产物结合，生成玫瑰红色染料，作为测定亚硝酸盐含量的指示剂
4
硅胶
干燥剂，用于干燥亚硝酸钠
5
干燥后的亚硝酸钠
制备相应浓度的标准显色液
6
氯化镉、
氯化钡
溶于蒸馏水并用浓盐酸酸化后作为亚硝酸盐的提取剂
7
氢氧化钠
中和过多的盐酸，营造碱性环境
8
氢氧化铝
作为吸附剂，使泡菜滤液脱色，变澄清
9
蒸馏水
作为溶剂
（5）果胶酶与纤维素酶的组成和作用比较
比较项目
果胶酶
纤维素酶
组成
果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等。
纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，
本质
蛋白质
来源
植物、霉菌、酵母菌和细菌等。
果汁加工业由霉菌发酵生产的果胶酶。
细菌、真菌、动物体内等都能产生纤维素酶。
作用对象
果胶
纤维素
作用
果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得更容易，而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得浑浊的果汁变得澄清。
C1酶、CX酶使纤维素分解成纤维二糖，葡萄糖苷酶将纤维二糖分解成葡萄糖。
应用
解决果汁生产存在的果肉出汁率低，耗时长和榨取果汁浑浊、黏度高、易发生沉淀两个问题。
利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素处理服装面料使之变得柔软。
（6）果胶和纤维素
名称
组成
作用
果胶
是由半乳糖醛酸聚合而成的一种高分子化合物，不溶于水。
组成植物细胞壁和胞间层的主要成分之一。
纤维素
一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是地球上含量最丰富的多糖类物质。
棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物，此外，木材、作物秸秆等也富含纤维素。
是植物细胞壁的主要成分。
（7）培养基组成
人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质——培养基。
一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。
培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。
（8）化学药剂消毒
用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源、适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液进行空气消毒等。
（9）酶制剂种类、作用、洗涤原理和实例
种类
作用
洗涤原理
洗涤实例
蛋白酶
效果最明显种类：
碱性蛋白酶、碱性脂肪酶。
难溶性大分子物质
可溶性小分子物质。
将蛋白质分解为易溶解或分散于洗涤液中的多肽或氨基酸
血渍、奶渍及各种食品类蛋白质污垢
脂肪酶
把脂肪水解为较易溶解的甘油和脂肪酸
食品的油渍、人体皮脂、口红
淀粉酶
使淀粉分解为可溶性的麦芽糖、葡萄糖等
来自面条、巧克力等污垢
纤维素酶
使纤维的结构变得蓬松，从而使渗入到纤维深处的尘土和污垢能够与洗衣粉充分接触，达到更好的去污效果
洗涤含棉织物，可使其增白、增艳、柔软，去除颗粒污垢
（10）固定化载体和凝胶色谱法凝胶
载体
凝胶
明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等。
包埋酵母细胞选用海藻酸钠作载体.
是一些微小的多孔球体，这些小球体大多数是由多糖类化合物构成的，如葡聚糖或琼脂糖，小球体内部有许多贯穿的通道。
分离血红蛋白实验使用的是交联葡聚糖凝胶（SephadexG-75，）。
“G”表示凝胶的交联程度，膨胀程度及分离范围，75表示凝胶得水值，即每克凝胶膨胀时吸水7.5g。
（11）血红蛋白组成、作用和特性
血红蛋白由四条肽链组成，包括两条α-肽链和两条β-肽链。
其中每条肽链环绕一个亚铁血红素基团，此基团可携带一分子氧或一分子二氧化碳。
血红蛋白因含有血红素而呈现红色。
血红蛋白的特性在氧气浓度高的地方很容易与氧气结合,在氧气浓度低的地方很容易与氧气分离,所以具有运输氧气的功能。
（12）缓冲溶液
由1～2种缓冲剂溶解于水中配制而成，通过调节缓冲剂的使用比例就可以得到不同pH范围内使用的缓冲液。
在一定范围内，抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响，维持pH基本不变。
生物体内进行的各种生物化学反应都是在一定的pH下进行的，为了能够在实验室条件下准确模拟生物体内的过程，就必须保持体外溶液的pH与体内环境中的pH基本一致。
血红蛋白实验使用的是物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液中（pH为7.0）
（13）植物芳香油
植物芳香油具有很强的挥发性，其组成也比较复杂，主要包括萜类化合物及其衍生物。
①玫瑰精油：
玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏。
玫瑰精油是制作高级香水的主要成分，能使人产生愉悦感。
加入NaCl，增加盐的浓度，就会出现明显的分层。
加入无水Na2SO4：
除水
②橘皮精油：
从橘皮中提取的橘皮油，无色透明，具有诱人的橘香味，主要成分为柠檬烯，是食品、化妆品和香水配料的优质原料，具有很高的经济价值。
Ca（OH）2溶液：
俗名是石灰水，pH为12，强碱性，能够破坏细胞结构，分解果胶，防止橘皮压榨时滑脱，提高出油率。
质量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4：
为了使橘皮油易于与水分离，还要分别加入相当于橘皮质量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4，并调节pH至7~8。
（14）胡萝卜素种类和性质
胡萝卜素是橘黄色结晶，化学性质比较稳定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂。
胡萝卜素的化学分子式中包含多个碳碳双键，根据双键的数目可以将胡萝卜素划分为a、β、γ三类，β-胡萝卜素是其中最主要的组成成分。
一分子的β-胡萝卜素在人或动物的小肠、肝脏等器官被氧化成两分子的维生素A，因此，胡萝卜素可以用来治疗因缺乏维生素A而引起的各种疾病，如夜盲应、幼儿生长发育不良、干皮症等。
胡萝卜素还是常用的食品色素，广泛地用作食品、饮料、饲料的添加剂。
最近发现天然胡萝卜素还具有使癌变细胞恢复成正常细胞的作用。
提取天然β-胡萝卜素的方法主要有三种，一是从植物中提取，二是从大面积养殖的岩藻中获得，三是利用微生物的发酵生产。
（15）萃取剂种类
用做溶剂的有机物分为水溶性和水不溶性两种。
乙醇和丙酮能够与水混溶，是水溶性有机溶剂；石油醚、乙酸乙醋、乙醚、苯、四氯化碳等不能与水混溶，称为水不溶性有机溶剂。
萃取胡萝卜素的有机溶剂应该具有较高的沸点，能够充分溶解胡萝卜素，并且不与水混溶。
此外还需要考虑萃取效率、对人的毒性、是否易燃、有机溶剂是否能从产品中完全除去、会不会影响产品质量等问题。
2.实验涉及的仪器和设备
（1）发酵瓶：
①A瓶上面留一定空间的作用：
提供一定量的氧气，满足发酵初期酵母菌对氧气的需求。
②图B充气口、排气口和出料口的作用
充气口：
在醋酸发酵时连接充气泵进行充气；制酒时关闭充气口。
排气口：
在酒精发酵时用来排出CO2。
排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，其目的是防止空气中微生物的污染，其作用类似于巴斯德的鹅颈瓶。
出料口：
用来取样，及时监测发酵进行的情况。
装置分析：
因酵母菌的繁殖需要空气，醋酸菌是好氧菌，所以在果酒制作的前期和果醋制作的整个过程中都需氧。
因酵母菌产生酒精是在无氧条件下进行的，故应控制充入氧的量，应在充气口设置开关。
由于在酒精发酵过程中产生CO2，因此又需设排气口；为防止空气中微生物的污染，排气口应连接一个长而弯曲的胶管。
因要对发酵的情况进行及时监测，故应设置出料口便于取料。
③A装置因为没有通气结构，可以通过定期拧松瓶盖的方式放气，但不容易向里面输入气体，较适合用来制作果酒；如果用来制作果醋需将瓶盖打开，盖上一层纱布。
B装置既可直接用来制作果酒，也可直接用来制作果醋。
装置使用：
①使用A装置每隔12h左右就要将瓶盖拧松一次，因为制酒阶段的后期，酵母菌无氧呼吸会产生大量气体，若不及时放出会把瓶子或瓶盖涨破，不打开瓶盖是防止氧气和有害杂菌进入。
②使用B装置制酒时，应该关闭充气口；制醋时，应将充气口连接气泵，输入氧气。
（2）泡菜坛
应选用火候好、无裂纹、无砂眼、坛沿深、盖子吻合好的泡菜坛。
不合格的泡菜坛容易引起蔬菜腐烂。
检查时，可将坛口向上压入水中，看坛内有无渗水现象。
也可使用玻璃制作的泡菜坛。
（3）接种工具
①接种环：
接种环是细菌培养时常用的一种接种工具,有一个象解剖针一样的金属柄,前端是一个细铁丝,细铁丝顶端弯曲成环状.使用之前先用酒精灯将环状部分烧红（灭菌）,然后蘸取菌种,均匀涂布于培养基上，接种完毕。
②涂布器：
（4）高压蒸汽灭菌锅
（5）干热灭菌箱
（6）固定化反应柱
使用固定化酶技术，将这种酶固定在一种颗粒状的载体上，再将这些酶颗粒装到一个反应柱内，柱子底端装上分布着许多小孔的筛板。
酶颗粒无法通过筛板上的小孔，而反应溶液却可以自由出入。
生产过程中，将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入，使葡萄糖溶液流过反应柱，与固定化葡萄糖异构酶接触，转化成果糖，从反应柱的下端流出。
反应柱能连续使用半年，大大降低了生产成本，提高了果糖的产量和质量。
（7）凝胶色谱柱
①凝胶色谱柱的制作：
取长40cm，内径为1.6cm的玻璃管，两端需用砂纸磨平。
柱底制作：
打孔→挖凹穴→安装移液管头部→覆盖尼龙网，再用100目尼龙纱包好。
柱顶制作：
打孔→安装玻璃管。
组装：
将上述三者按相应位置组装，并在下端出口连接带开关的尼龙管，尼龙管放入收集器。
②凝胶色谱柱的装填：
色谱柱固定于支架上。
干凝胶的计算和称量。
溶胀：
干凝胶用蒸馏水充分溶胀后，配成凝胶悬浮液。
装填：
打开下端出口，将凝胶悬浮液一次性缓慢倒入色谱柱内。
洗涤平衡：
装填完后，立即连接洗脱瓶，用20mmol/L的磷酸缓冲液洗涤平衡凝胶12h。
③样品的加入和洗脱：
加样前，打开色谱柱下端的流出口，使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到与凝胶面平齐，关闭出口。
用吸管小心地将1mL透析后的样品加到色谱柱的顶端，注意不要破坏凝胶面。
加样后，打开下端出口，使样品渗入凝胶床内。
等样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口。
小心加入物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液（pH为7.0）到适当高度，连接缓冲液洗脱瓶，打开下端出口，进行洗脱。
待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每5mL收集一管，连续收集。
（8）水蒸气蒸馏装置
有关蒸馏装置包括铁架台两个、酒精灯、石棉网、蒸馏瓶、橡胶塞、蒸馏头、温度计、直型冷凝管、接液管、锥形瓶，以及连接进水口和出水口的橡皮管，如下图。
所有仪器必须事先干燥，保证无水。
整套蒸馏装置可分为左、中、右三部分，其中左边的部分通过加热进行蒸馏，中间部分将蒸馏物冷凝，右边的部分用来接收。
①安装装置顺序：
从左到右，自下而上（拆卸顺序相反）。
②温度计位置：
温度计的水银球应与蒸馏烧瓶的支管口下沿保持水平。
③冷凝管中水流方向：
从下方进水，上方出水，与蒸气流向相反。
④加热时防暴沸：
垫石棉网，向液体中加入几片碎石或瓷片。
⑤烧瓶内液体量：
烧瓶容积的1/3～2/3。
（9）萃取装置
萃取过程应该避免明火加热，采用水浴加热，这是因为有机溶剂都是易燃物，直接使用明火加热容易引起燃烧、爆炸。
为了防止加热时有机溶剂挥发，还要在加热瓶口安装回流冷凝装置。
（10）层析装置——色谱容器
在18cm×30cm滤纸下端距底边2cm处做一基线，在基线上取A、B、C、D四点，用最细的注射器针头分别吸取0.1~0.4mL溶解在石油醚中的标准样品和提取样品，在A、D和B、C点上点样。
点样应该快速细致，在基线上形成直径为2mm左右的圆点，每次点样后，可用吹风机将溶剂吹干，注意保持滤纸干燥。
等滤纸上的点样液自然挥发干后，将滤纸卷成圆筒状，置于装有1cm深的石油醚的密封玻璃瓶中。
等各种色素完全分开后，取出滤纸，让石油醚自然挥发后，观察标准样品中位于展开剂前沿的胡萝卜素层析带。
3.实验涉及的方法
（1）消毒和灭菌：
消毒
灭菌
概念
使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）
使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法
煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法
灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象
操作空间、操作者双手等
接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等
（2）微生物接种方法——平板划线法和稀释涂布平板法的比较
方法
概念
优点
缺点
适用范围
平板
划线
法
平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落
可以观察菌落特征，对混合菌进行分离
不能计数
适用于好氧菌
稀释
涂布
平板法
稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。
可以计数，可以观察菌落特征
吸收量较少、较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延
适用于厌氧菌和兼性厌氧菌
（3）几种常用灭菌和消毒方法的比较
种类
主要方法
应用范围
消
毒
巴氏
消毒法
70～75℃煮30min或80℃煮15min
牛奶、啤酒、果酒和酱油等不宜进行高温灭菌的液体
煮沸
消毒法
100℃煮沸5～6min
家庭餐具等生活用品的消毒
紫外线
消毒
30W紫外灯照射30min
接种室、接种箱、超净的工作台
化学药
物消毒
用体积分数为70%～75%的乙醇、碘酒涂抹，来苏尔喷洒等
用于皮肤、伤口、动植物组织表面消毒和空气、手术器械、塑料或玻璃器皿等的消毒
灭
菌
灼烧灭菌
酒精灯火焰灼烧
微生物接种工具；如接种环、接种针或其他金属用具等，接种过程中的试管口或瓶口等
干热灭菌
干热灭菌箱160～170℃加热1～2h
玻璃器皿（如吸管、培养皿等）、金属用具等凡不适宜用其他方法灭菌而又能耐高温的物品
高压蒸汽灭菌
100kPa、121℃维持15～30min
培养基及多种器材、物品
（4）菌种保存方法
方法
临时保藏法
甘油管藏法
适用对象
频繁使用的菌种
长期保存的菌种
培养基类型
固体斜面培养基
液体培养基
温度
4℃
－20℃
方法
菌落长成后放入冰箱中保存，以后每3～6个月将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上
将培养的菌液与等体积灭菌后的甘油混合均匀后放在冷冻箱内保存
缺点
菌种易被污染或产生变异
（5）微生物计数方法——直接计数法与间接计数法的比较
直接计数法（稀释涂布平板法）
间接计数法（稀释涂布平板法）
主要用具
显微镜、细菌计数板
培养基
原理
利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量
当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
计数依据
菌株本身
培养基上菌落数
优点
计数方便、操作简单
计数的是活菌
缺点
不能区分细胞死活
死菌、活菌都计算在内
操作较复杂，且有一定误差.当两个或多个菌体连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
计算
公式
每毫升原液含菌株数＝400×10000×每小格平均菌株数×稀释倍数
每毫升原液含菌株数＝
×稀释倍数
结果
比实际值偏大
比实际值偏小
（6）两种刚果红（CR）染色法的比较
方法一（后置染色）
方法二（前置染色）
过程
培养基经涂布培养长出菌落→覆盖质量浓度为1mg/mL的CR溶液
倒去CR溶液→加入物质的量浓度为1mol/L的NaCl溶液
倒掉NaCl溶液→出现透明圈
配制质量浓度为10mg/mL的CR溶液→灭菌→按照每200mL培养基加入1mL的比例加入CR溶液→混匀→倒平板→接种后培养→出现透明圈
区别
先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应
倒平板时就加入刚果红
优点
显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用
操作简便，不存在菌落混杂问题
缺点
操作繁琐，加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂
①由于在纤维素粉、琼脂和土豆汁中都含有淀粉类物质，可以使能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应
②有些微生物具有降解色素的能力，长时间培养会降解刚果红，从而形成明显的透明圈，这些微生物与纤维素分解菌不易区分
（7）固定化技术的比较
方法
定义
适用
范围
模型
包埋法
将酶包裹在多孔的载体中。
常见的载体有明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等
多用于细胞的固定
化学结
合法
将酶分子或细胞相互结合，或将其结合到载体上
多用于酶的固
定
酶连接
物理吸
附法
将酶吸附到固体吸附剂的表面。
固体吸附剂多为活性炭、多孔玻璃等
多用于酶的固
定
酶吸附在载体表面
（8）分离蛋白质的方法
方法
凝胶色谱法
电泳法
概念
也称做分配色谱法，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。
指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。
原理
相对分子质量较大的蛋白质分子不能进入凝胶颗粒内部，只能分布在颗粒之间，通过的路程较短，移动速度较快；相对分子质量较小的蛋白质分子比较容易进入凝胶内部的通道，通过的路程较长，移动速度较慢，因此可将各种相对分子质量不同的蛋白质分离。
a．许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上正电或负电。
b．在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。
c．电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。
（9）电泳方法
琼脂糖凝胶电泳
聚丙烯酰胺凝胶电泳
由于琼脂糖本身不带电荷，各种分子在电场中迁移速率决定于所带电荷性质的差异及分子的大小、形状的不同
在凝胶中加入SDS，使蛋白质解聚成单链，与各种蛋白质形成蛋白质—SDS复合物，使其迁移速率完全取决于分子的大小
（10）植物芳香油各种提取方法的比较
方法
水蒸气蒸馏法
压榨法
萃取法
实验
原理
利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来
通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油
使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸发溶剂后就可获得芳香油
优点
简单易行，便于分离
生产成本低，易保持原料原来的结构和功能
产油率高，易分离
局限
性
水中蒸馏会导致某些原料焦糊和有效成分水解
分离较为困难，出油率相对较低
使用有机溶剂处理不当会影响提取物的质量
适用
范围
适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油
适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取
适用范围广，要求原料的颗粒要尽可能细小，能充分浸泡在有机溶剂中
方法
步骤
①水蒸气蒸馏
②分离油层
③除水过滤
①石灰水浸泡、漂洗
②压榨、过滤、静置
③再次过滤
①粉碎、干燥
②萃取、过滤
③浓缩
（11）几种蒸馏方法的比较
根据原料放置的位置，可分为水中蒸馏（对柑橘、柠檬等不适用）、水上蒸馏、水气蒸馏。
分类
原料位置
特点
水中蒸馏
原料放在蒸馏容器的水中，水要完全浸没原料
设备简单、成本低、易操作
水上蒸馏
容器中水的上方有筛板，原料放在筛板上，水量以沸腾时不浸湿原料为宜
蒸馏时间短，出油率高
水气蒸馏
蒸馏容器下方有一排气孔，连接外源水蒸气，上方有筛板，上面放原料
（12）胡萝卜素粗品鉴定的方法——纸层析法
纸层析是层析法的一种，是一种基于被分离物质的物理、化学及生物学特性的不同，使它们在某种基质中移动速度不同而进行分离和分析的方法。
层析原理是β－胡萝卜素与其他色素和杂质在层析液中的溶解度不同，在滤纸中的扩散速度不同。
（13）选择培养基与鉴别培养基的比较
（14）微生物的鉴别方法：
①菌落特征鉴别法：
根据微生物在固体平板培养基表面形成的菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等特征进行鉴别。
②指示剂鉴别法：
如培养基中加入酚红指示剂，培养某种微生物后，培养基变红说明该种微生物能够分解尿素。
③染色鉴别法：
如利用刚果红染色法，根据培养基中出现以纤维素分解菌为中心的透明圈来筛选分解纤维素的微生物。
4.实验涉及的过程
I.实验流程
（1）果酒和果醋的实验流程
（2）腐乳的制作流程图
（3）泡菜制作及检测亚硝酸盐含量的流程
①亚硝酸盐含量测定流程图：
配制溶液→制备标准显色液→制备样品处理液→比色
②制备样品处理液流程图：
（4）大肠杆菌的纯化培养实验流程
（5）分解尿素的细菌的分离和计数实验流程
土壤取样→样品的稀释取样涂布微生物的培养与观察
制备培养基
（6）分解纤维素的微生物的分离实验流程
（7）果胶酶相关探究实验的设计
①探究温度对果胶酶活性的影响实验流程
②探究pH对果胶酶活性的影响实验流程
用搅拌器搅拌制苹果泥，苹果泥来源要相同最好是同一个苹果
↓
将分别装有苹果泥和果胶酶的5支试管在恒温水浴,中保温，并调节pHpH梯度可设置为5、6、7、8、9
↓
将pH相同的试管混合将果胶酶加入pH相同的苹,果泥内）
↓恒温水浴
将试管中的混合物过滤，并用量筒量取果汁体积，比较果汁多少，确定最适pH
③探究果胶酶的用量
（准确称取纯的果胶酶1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg，配制成相等体积的酶的水溶液，取等量放入9支试管中，依次编号
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