PCR扩增仪操作手册.docx

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PCR扩增仪操作手册

KP-210KJ

PCR扩增仪

操作手册

翼思科技（广州）有限公司

中国教育科技股份有限公司

广州环市东路450号广东华信中心28层（510075）

28/F.GocticCentreNo.450HuanShiRoadEastGuangZhou,China

电话（Tel）：

86-20-87693188、87694019传真（fax）：

86-20-87692388、87693857

上海办事处：

上海市徐汇区肇嘉浜路168弄3号（200020）

电话（Tel）：

021--64726612传真（fax）：

************

北京办事处：

北京市朝阳区左家庄中街六号力鸿花园2号楼15层02号（100026）

电话/传真（Tel&fax）:

86-10-84604085

目　　录

介绍2

开箱2

安装3

面板功能键说明3

操作详解4

开机4

编程基础4

主菜单5

编程8

存储8

调用9

运行9

暂停10

中止11

断电处理11

关机11

系统设置11

热盖12

实例13

维护18

故障排除18

系统指标20

仪器示图20

附录一：

英文注解20

附录二：

KP-210KJ基因扩增仪简易操作规程22

介　　绍

●本系统提供了一个用户选择编程的变温样品台。

它既可恒定在某个温度设定点上，也可按一定模式在多个温度设定点之间快速升降温。

样品台上精心加工有48个6×8微板方式排列的样品井，使用0.2ml标准反应管,从而提供充足的样品批量。

●可低温操作是先进的基因扩增仪的基本特征。

其低温处理样品的能力使得PCR（英文PolymeraseChainReaction缩写）扩增前的样品处理和扩增后的样品保存再结合PCR本身，真正实现了全过程操作的自动化。

本系统采用先进可靠的压缩机制冷方案，从而提供了固定台方式最快的降温速度和超宽的低温范围。

●软件设计上，20×2字符式液晶显示器可以提供完整的实时信息提示。

全数字键操作键盘，使编程快捷方便。

本系统摒弃扩增仪传统编程方法中的程序联接（英文LINK）方式,采用了专有的自然编程法。

LINK方式使初次使用扩增仪者感到编程难以学习和掌握，并且存储的程序片段容易遭受人为损坏。

●本系统具有运行状态断电处理和低温样品长期保存的功能，可让操作者无需顾忌仪器的运行过程和担忧扩增程序何时结束的问题。

●国际上首家提供温度循环过程中保温时间可递减功能，尤其适合长链核酸（模板）扩增实验。

●用户若另选配原位PCR附件，可分别进行普通及原位PCR实验。

开　　箱

●确信包装箱体未倒置后，小心拆箱，按照装箱单清点主机与附件。

●保存好包装材料，以备下次运输之用。

●仔细审视仪器与附件外部，如有运输致损情况，立即通知厂商和运输商。

●请填写仪器保修卡回执，并尽快寄回我公司，以便我们更好地为您服务。

安　　装

场地

请选择较为坚实的、不怕湿的台面安置仪器，台面高度适中，轻松操作。

仪器四周留取一定空间，间隔20cm以上，用于通风和散热。

供电线路需承受10A电流。

提供良好接地将进一步提高电气安全性和系统可靠性。

环境

仪器正常工作的环境条件是：

环境温度：

5℃～40℃；

相对湿度：

不大于80%；

环境清洁少尘，避免阳光直射。

远离热源，水源，强烈的电磁干扰源。

通电

将仪器电源线连接上电源，按下电源开关。

提示：

通电开机前，须肯定电源接地良好。

提示：

电源线插口和电源开关皆安置在仪器背面。

面板功能键说明

[]上翻页键:

编程时可向前翻页，进行选择和检查。

[]下翻页键:

编程时可向后翻页，进行选择和检查。

[→]光标键:

编程时，可按此键移动光标，进行待编程项目的

选择。

运行时，用于切换信息，查看状态。

[Pause]暂停键:

第一次按下该键，系统暂停当前的运行，并显示

对暂停的计时；第二次按下该键，系统解除暂停

恢复原先的运行。

[Stop]中止键:

按动此键，退出当前的操作或运行状态。

[Enter]确认键:

按动此键，确认自己所设定的操作或数据输入。

[Ce]清除键:

按动此键，清除当前的数据。

[－]负号键:

用来定义零度以下的温度参数或设置负时间参数。

[.]点号键:

此键功能未用。

[0－9]数字键:

用来输入参数值。

[Util]功能键:

它包括对本机系统进行状态设置、故障诊断和温度

校正等，是供货商或维修工程师的专用键。

用户无

需掌握此键。

开　　机

提示：

请将样品台保温盖合上，以提高样品台的保温能力。

提示：

运行中请勿用手触摸样品台，以免烫伤。

开机后，将听到仪器冷却风扇的运转声，进入自检程序。

液晶显示器显示两页内容：

<-HEMA360Model->

Ver6.0@2002

若自检正常，随着二声“嘀”，液晶显示器显示主菜单内容：

**ThermalProfile**

RUNEDITSAVERASUME

主菜单（当前操作）。

运行　编程　存储　调用

此时，可以开始键盘操作。

提示：

仪器一旦关机，请等待10分钟再重新开机。

编程基础

●一个包括样品前处理和后处理样品保存的完整PCR实验，需要样品台精确提供预定的温度变化过程，该过程本系统称作方法或程序（英文ThermalProfile或Method）。

它可以划分为若干区段（英文Segment），每个区段可以单独用保温区段（英文Hold），或者循环区段（英文Cycle），或者结束区段（英文End）完整描述。

整个方法按照时间顺序自然编排各个区段，无需联接（英文LINK）。

这个设计思想与目前PCR文献中PCR方法的描述是一致的。

因此编程十分容易，符合用户的专业习惯。

●保温（英文Hold）：

在设定温度点上保持有限长时间或无限长时间，只需两个参数，即温度值和保持时间。

另外还需区分有限长和无限长。

●循环（英文Cycle）：

在多于1个温度点之间按一定模式重复变化有限次。

故要提供以下参数，即各个温度点的温度值和保持时间，循环次数，每次循环是否要求在某温度点自动递增若干时间。

●结束（英文End）：

程序运行到此，正常结束。

●程序保存（英文Save）：

程序存储区分成永久存储区和暂存区（又称工作区）。

编辑修改程序或运行程序只针对工作区中的程序操作，永久存储区的存储器可保存120个方法（或称120种程序）。

任何时候，你可以将工作区中的程序存入120个存储器中的任何一个作永久保存，也可将120个存储器中所保存的任何一种程序（或方法）调入工作区进行运行或编辑。

主菜单

我们从主菜单开始。

仪器自检结束时，显示主菜单，或者在其它状态下，按[Stop]键将回到主菜单。

**ThermalProfile**

RUNEDITSAVERASUNE

主菜单（当前操作）

运行编程存储调用

主菜单下有四种操作，即运行（英文Run），编程（英文Edit），存储（英文Save）和调用（英文Resume）。

运行和编程操作只针对工作区的程序而言，存储操作将工作区程序存入永久保存区，调用操作则与存储操作相反。

按[→]键移动光标到相应操作下，按[Enter]键确认进入该操作。

提示：

每次开机，仪器自动将上次关机前运行的程序调出

编程

进入编程状态，显示页首先显示：

Segment#01

HoldCycleEnd

第1区段

保温循环结束*

现在可以定义PCR方法中第一温度区段（Segment），你可以定义为保温（Hold），循环（Cycle），结束（End）。

保温Hold

按[→]键移动光标到Hold名下，按[Enter]键确认即可定义该区段为保温（英文Hold），显示页显示：

Holdat0℃

Holdfor0m0s

将温度保持在0℃

保温时间0分0秒

＊光标位置并不一定是在End名中。

各参数值不一定如显示那样皆为0，而是由工作原来内存程序决定。

你要输入设定温度值和保持时间（分、秒）两个参数。

另外，必须区分保温有限长和无限长两种情况。

通过操作全数字键盘，你可以输入设定参数，若输入参数超过允许范围，将被自动清除。

按[Ce]键也可清除错误的输入。

提示：

若需要更改参数，可按[→]移动光标，再输入相应数字。

提示：

负值参数的输入方法是，先按数字键，再按负号键。

提示：

温度值有效范围：

　室温-5℃～100℃时间分有效范围：

　0min～98min时间秒有效范围：

　0sec～59sec

提示：

本系统规定，时间分（min）若设置为99，表示保温时间无限长。

提示：

任何区段编程完毕，必须近[Enter]键确认，以便进入下一区段。

每个程序最多进行15区段编程。

Cycle

若选择循环（英文Cycle），则顺序显示以下页内容。

0stepPCR

循环有多少个设定点：

0阶PCR实验

提示：

循环设定温度点有效范围0～3。

每个温度点有两页显示。

第一页显示包括该温度点的温度值和保温时间：

Step1

0CHold0m0s

第1阶（第1温度点）

0℃　保温0分0秒

第二页显示：

Step1

Extendedtime0m0s

第1阶（第1温度点）

延伸时间0分0秒

该页参数如果不为0，每个循环进行到该温度点时，保温时间在上一个循环保温时间的基础上自动延长（或减少）该设定时间。

提示：

若时间参数设置为负数，则表示减少保温时间。

提示：

Cycle区段内每页参数设置后，可按[Enter]键确认并进入

下一页，也可以使用[Δ]、[▽]键。

提示：

正常使用同时，延伸时间设置必须0分0秒，否则将影响反应时间。

所有循环点、温度、时间参数设置完毕，最后显示：

TotalCycle=0

循环总次数为0

输入相应参数后，按[Enter]键确认，并转入下一区段。

若编程结束，移动光标至END

名下，按[Enter]键正常退出，显示：

Segment#03

HoldCycleEnd

第3区段

保温循环结束

ProfileatEnd!

Presstoexit

编程操作结束！

按[Stop]键退出

按[Stop]键退回主菜单，显示：

**ThermalProfile**

RUNEDITSAVERASUME

主菜单（当前操作）

运行编程存储调用

编程注意事项

若在操作过程直接按[Stop]键退出，则有如下结果：

Endcurrentprg?

Presstoexit

1、在区段外编程时，按[Stop]键，则显示：

编程结束？

按[Stop]键退出

再按[Stop]键退回主菜单。

2、在某区段内（例如区段2）编程时，按[Stop]键，则显示：

Abortcurrentseg?

Presstoexit

中止（取消）区段内编程？

按[Stop]键退出

再按[Stop]键只能退回区段外编程状态，显示：

Segment#02

HoldCycleEnd

第2区段

保温循环结束

3、若修改已有程序部分参数后，直接按键退出，显示：

Press<1>toEND!

Press<2>toabort

按〈1〉键结束

按〈2〉键结束

按数字[1]完成修改并回到主菜单；按数字[2]取消修改并回到主菜单。

提示：

[△]、[▽]键只适用于区段间查阅。

若需要查阅某区段内程序，先按[Enter]键确认进入该区段，再通过[△]、[▽]键查询。

存储

若你希望将工作区中已编辑好的程序存入永久保存区作永久保存，则在主菜

单下选择存储（SAVE）功能，则显示：

SavetoMethod#?

（0→119）1

存储到号存储器之中

你可以选择0至119号存储器中任何一个存入，例如10号存储器，按键[1]、[0]、[Enter]，显示：

Saveneedtime!

Waiting**…

存储需要时间!

请等候…

**…指示存储工作进程

正常操作完成后，显示：

Prg10issavedOK

Presstoexit

程序已存入10号存储器

按[Enter]键退出

若选择的存储器已存有程序，则显示：

Pro10alreadyexist

<1>Overwrite<2>Abort

10号存储器已有程序

按<1>存入新程序

按<2>放弃

调用

若你希望将永久保存区中某个方法调入工作区，以供检查、修改或运行，则在主菜单下选择调用（英文Resume）操作，显示：

ResumeMethod#?

（0→119）0

被调用的存储器号

你可以选择0至119个存储器中任何一个调用。

例如10号存储器，按[1]、[0]、[Enter]键，显示：

*第0，64，113号三个存贮器已做他用，不可用来存贮用户程序。

Resumeneedtime!

Waiting

调用需要时间！

请等候…

正常操作完成后，显示：

Pro10resumeOK

Presstoexit

10号存储器已调用

按［Enter］键退出

若选择的存储器未存有程序，则显示：

Noproinprg10

Presstoexit

10号存储器未存程序

按［Enter］键退出

运行

提示：

请将玻璃盖合上，以增强样品台的保温性能。

提示：

请选择合适的0.5/0.2ml反应管或使用厂家推荐的反应管以取得最佳传热效果。

提示：

插入反应管前请在样品井内滴入一滴矿物油，以增加传热效果：

若采用传热效果好的反应管，也可以不加任何矿物油。

提示：

插入反应管后，将反应管旋转半周，手感一定紧度。

这样可以减少试管与样品井的配合间隙，以增加传热效果。

提示：

严禁滴入过多的矿物油，注意防止矿物油溢流到样品台外否则将影响仪器的正常使用，缩短仪器使用寿命。

主菜单下，选择运行（英文Run）操作，将开始运行工作区中的PCR方法。

用户通过液晶显示器显示的内容，可以了解仪器已运行到什么阶段，如升温、降温还是保温状态，已运行了多少时间等。

运行信息包括两页内容，通过[→]键切换。

例如：

Upto94CBlk=55C

Cycle43m0s

升温到94℃须停留3分钟现时温度为55℃

已进行到第4个循环

Step#1TotCyc25

Oh18m20sSegment1

第1阶循环总次数25

已运行0时18分20秒进行到第1区段

若运行正常结束则显示

Programcompletes!

PressanyKey…

实验完成！

按任意键

暂停

运行中任何时候，若需要暂停，可按[Pause]键。

对于要求中途加酶的情况下需要此功能。

Pause（0h0m10s）

94C0h19m40s

已暂停（0时0分10秒）

当前温度94℃暂停时间起点0时19分40秒

再按[Pause]键，将退出暂停状态。

你将发现，处在升温或降温阶段时按暂停键，将不影响继续升温或降温，暂停功能将在到达下个温度点保温状态下发挥作用。

中止

运行中任何时候，用户可以中断运行，按[Stop]键显示：

PressStoptoabort

orCetorunagain!

按[Stop]键中止运行

或按[Ce]键继续!

提醒你，是否确定要中止程序运行或者仅仅是一次误操作，若为后者，可以

按[Ce]键继续运行。

提示：

如果执行PCR程序前，样品台已在低温状态下运行相当长时间，则会出现样品台升温达不到设定温度点的现象。

请将样品台上积聚的冷凝水揩干或用高温驱散凝聚的水，可以消除上述现象

断电处理

仪器正常运行中若遇到供电突然中断，本系统的电脑记忆电路会自动记住程序断点，一旦恢复供电，系统将从断点开始继续完成其后续之程序,显示：

Goonwiththepro

<1>Goon<2>Stop

继续运行该程序

按<1>继续，按<2>中止

若20秒内没有任何操作，程序将从中断处继续运行，但屏幕显示在正常信息后面加***，例如：

Upto94BLK=55C

Cycle43m0s***

升温到94℃须停留3分钟，现时温度为55℃

已进行第4个循环，***（程序运行曾经中断信号）

关机

仪器正常关机时机，应该是在退出主菜单时关电源开关。

**ThermalProfile**

RUNEDITSAVERESUME

主菜单（当前操作）

运行　编程　存储　调用

若在运行状态直接关闭电源开关,下次开机时,将出现类似断电处理的现象。

系统设置

主菜单下，按[Util]键，显示页显示：

FUNCTIONNO=0

Presstoexit!

选择功能

按[Stop]键退回主菜单!

该功能主要是生产厂商用于调试系统参数,用户无需掌握,也不要随意操作。

热盖

在开机后请等待十分钟,待热盖升到预定温度后,再进行PCR循环,实验可达到理

想效果。

在仪器正常使用时热盖处于95℃恒温状态，将有效地防止样品的蒸发。

当程序设定不低于或等于20℃的长期保存时，热盖将停止加热，以便于样品的

保存。

提示：

仪器运行中热盖内表面温度可能高达95℃，请勿用手触摸,以免烫伤。

提示：

使用带热盖机型,样品井内不添加任何导热剂（矿物油）,均能保证良好的传热效果。

热盖的关闭

仪器在出厂时，热盖设置为加热状态。

若实验中不需要热盖加热，可以通过面板操作将其关闭。

在主菜单下，按[Util]键,显示：

FUNCTIONNO=0

Presstoexit!

功能选择

按[Stop]键退回主菜单!

键入[3]、[Enter]键，显示：

Warmcapstats：

ON

<1>ON<2>OFF

热盖现在状态：

打开

<1>打开<2>关闭

键入[2]选择关闭热盖，显示：

Warmcapstats：

off

OK!

!

!

热盖已关闭!

执行关闭热盖操作后，热盖将一直保持关闭状态，直到通过面板操作将其打开为止。

提示：

热盖若在高温时关闭，待降到常温需15分钟以上，应避免触摸，以免烫伤。

热盖的打开

若热盖处于关闭状态，实验中需使用其加热功能，可通过面板操作将热盖打开。

在主菜单下，按[Util]键，显示：

FUNCTIONNO=0

Presstoexit!

功能选择

按[Stop]键退回主菜单!

键入[3]、[Enter]键，显示：

Warmcapstats:

OFF

<1>ON<2>OFF

热盖现在状态：

关闭

<1>打开<2>关闭

键入[1]选择打开热盖，显示：

Warmcapturnon

OK

热盖已打开!

执行打开热盖操作后，热盖将一直保持打开状态，直到通过面板操作将其关闭止。

实例

例一：

丙型肝炎的诊断：

（编程练习）

反应条件

首先：

65℃反转录15分钟

预变性：

94℃60秒

三阶：

94℃35秒

55℃45秒

72℃50秒

共循环36次

保温：

72℃200秒

长时间保温：

4℃99分钟

程序编辑完后，存入8号存储器中作永久保存，再调出8号程序来运行。

在主菜单下，移动光标至EDIT名下，按[Enter]键确认后进入编程状态，显示：

Segment#01

HoldCycleEnd

第1区段

保温循环结束

移动光标到Hold名下，按[Enter]键确认后，显示：

Holdat0C

Holdfor0m0s

将温度保持在0℃

保温时间0分0秒

按数字键输入65，按[→]键后，显示：

Holdat65C

Holdfor0m0s

将温度保持在65℃

保温时间0分0秒

Holdat65C

Hold15m0s

按数字键输入15后显示：

将温度保持在65℃

保温时间15分0秒

按[Enter]键进入下一区段，显示：

Segment#02

HoldCycleEnd

第2区段

保温循环结束

移动光标到Hold名下，按[Enter]键确认后显示：

Holdat0C

Holdfor0m0s

将温度保持在0℃

保温时间0分0秒

按数字键输入94，再按[→]键后，显示：

Holdat94C

Holdfor0m0s

将温度保持在94℃

保温时间0分0秒

按数字键输入60，显示：

Holdat94C

Holdfor0m60s

将温度保持在94℃

保温时间0分60秒

按[Enter]键进入下一区段，显示：

Segment#03

HoldCycleEnd

第3区段

保温循环结束

移动光标到Cycle名下，按[Enter]键确认后，显示：

0StepPCR

0阶PCR

按数字键输入3，按[Enter]键确认后显示：

Step1

0CHold0m0s

第1阶

0℃保温0分0秒

按数字键输入94，按[→]键移动光标后显示：

Step1

94CHold0m0s

第1阶

94℃保温0分0秒

按数字键输入35，显示：

Step1

94CHold0m35s

第1阶

94℃保温0分35秒

按[Enter]键确认后，显示：

第1阶

延伸时间0分0秒

Step1

Extendedtime0m0s

这里，未用自动延伸功能，所以各参数值设定为0，本例中该页无需修改，

故按[▽]键直接翻至下页，或按[Enter]键后转入下页显示：

Step2

0CHold0m0s

第2阶

0℃保温0分0秒

Step2

55CHold0m0s

按数字键输入55，按[→]键后显示：

第2阶

55℃保温0分0秒

按数字键输入45后，显示：

Step2

55CHoldom45s

第2阶

55℃保温0分45秒

按[Enter]键确认后，显示：

Step2

ExtendedTime0m0s

第2阶

延伸时间0分0秒

按[▽]键或[Enter]键后，显示：

Step3

0CHold0m0s

第3阶

0℃保温0分0秒

按数字键输入72，按[→]键后，显示：

Step