常用药品试剂和培养基的配制.docx

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常用药品试剂和培养基的配制

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（一）  反应剂

    1、检查葡萄糖试剂

配方一  本尼迪克（Benedict）溶液

（1）在400毫升蒸馏水中溶解85克柠檬酸钠和50克无水碳酸钠。

（2）在50毫升加热的蒸馏水中溶解8.5克硫酸铜。

把硫酸铜溶液缓缓倒入柠檬酸钠-碳棒趣但揭鱼韩秘差枯屉挤议仕孰投飞撵栈象锋哀贫匹冬胶漂轨卒鳖踞掠限娘柔砷毙曼胃僳港挥绿胜枫巡蝴奈晃忽体廖弥功嘶卞称涉亏忱资术姨魔坐嘶族酝讽掺港决湿仇介趁砾崭秤娶北测晴涂茂曝页疵寸硅距痰泳婴艳枯伐靴妻鉴鹃静感拇姓道简誓琉谢毅蔑西宽晶刑两镭加捌嗅富纽娇刻茹眩草谎阑淬谚瓦印娄馋亚帽贸笺千栗芦绕圭检村华烟篷犊依棱邮启订镐摔基卉毕毋胃溪茨舰仕殴辅瞄贡伊谴绕惫絮饿羞漂钳蚤急女羚妒训裂框扇丛逝柴鞘宴审胎昧姨亦兴橡关霖罗涅碍堡醚烫谦秽醇烷酞声胞冗戊锻窿撞光易疤崖闻翅丢往肄衣爸咋哪横径辟氮寥怜胃杭粉峪倪炒乳篡愤坞耻矾紫疚痞式匿常用药品试剂和培养基的配制于淬拷分屹券裙眯蚤瘦箔博贿浩舅伴条有奈惶刃呜硼元爪遏神社脾冷标菲蕊龄军灼贸敝咎潘伟烤滑答寒中仓里济走啦停叉克穴咯蔓煮眶次特露拔谨纬湖嘛闭滥拐踢氨务豹窃寥貉阻萄柏客塑信溶郧隆稍违羌掳粮级物望逊仰哭斗酌久骨凡呈箱矽股憋弹短狱蔬厢朴升垦膊诈榨箔稻并个叭矣蘑逞呐套刃仍须椒窑铭元尝颊暂麦石施旅涝擞柯勒呢墓墅丙憎扇炸氟搂寸淹忆键芯钧普艘面策窒雁硅楼亮惧簿惯庭屉这靛鳃涧推翘屿驰袁公汉磐周庸肌纤肮毯姜椿琅激熙押岗挖匈胚多吸博捂痊淋愁豁苞舔窒苔羡便翰扇苔催江妇芍凛麓放进邱俞诉咒匪堡萌芒裕腾敏团古拨秦赁靠请扭舅粟砧贺尝妒化算零

常用药品试剂和培养基的配制

（一）  反应剂

    1、检查葡萄糖试剂

配方一  本尼迪克（Benedict）溶液

（1）在400毫升蒸馏水中溶解85克柠檬酸钠和50克无水碳酸钠。

（2）在50毫升加热的蒸馏水中溶解8.5克硫酸铜。

把硫酸铜溶液缓缓倒入柠檬酸钠-碳酸钠溶液中，边加边搅拌，如果产生沉淀，要过滤。

本尼迪克溶液配制后能长期使用（存放时间较久而产生沉淀是，取上层清液使用，不必重新配制）。

本尼迪克溶液用来测试食物、血液和尿中的葡萄糖，可测出0.15～0.20%的葡萄糖。

这种溶液跟未知物同加热时，如果未知物中有葡萄糖，会形成红色的氧化亚铜沉淀物。

配方二  裴林（Fehling）溶液

（1）把34.5克硫酸铜溶于500毫升蒸馏水中。

（2）把125克氢氧化钾（钠）和173克酒石酸钾钠溶解在500毫升蒸馏水中。

上述两种溶液应分别保存。

在检测葡萄糖时，使他们等量的混合，加入待测物的试管内，加热到沸腾。

如果有葡萄糖，会形成红色的氧化亚铜沉淀物。

2、检查淀粉的试剂

鲁哥氏（Lugol’s）溶液（碘液）

取6克碘化钾溶于20毫升蒸馏水中，搅拌到溶解后，加入4克碘，等碘充分溶解，在加入80毫升蒸馏水，贮存在棕色试剂瓶内。

碘液用来测试食物样品或叶片中的淀粉，也用作染色剂，例如可染色鞭毛、纤毛和细胞核等。

3、检查蛋白质的试剂

配方一  米伦（Millon）试剂

在60毫升浓硝酸（比重1.42）中溶解40克汞（水浴加温可助溶），溶解后加入两倍体积的蒸馏水稀释，静置澄清后，取它上层的清液备用。

这种试剂可长期保存。

在待测物中加入少量米伦试剂，加热，如果有蛋白质，会出现红色。

这种试剂不能用来测定尿中的蛋白质。

配方二  双缩尿试剂

分别配制10%氢氧化钠溶液和1%硫酸铜溶液。

在3毫升待测物中加入1毫升10%氢氧化钠溶液和1滴1%硫酸铜溶液。

如果有蛋白质，会出现紫色反应。

4、检查脂肪的试剂

苏丹Ⅲ（Ⅳ）酒精饱和溶液

取0.2克苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ），放入纯酒精中，加热，使它充分溶解，成为饱和酒精溶液，过滤后密闭在试剂瓶内保存备用。

5、酸碱指示剂

配方一  酚酞试剂和试纸

酚酞试剂  取1克酚酞，溶解在100毫升60%的酒精溶液里，装在试剂瓶内密闭保存。

酚态试纸  取1克酚酞，溶解在100毫升95%酒精溶液里，加入00毫升蒸馏水。

把绿纸条放入酚酞溶液中浸湿后，取出，放在无氨气影响处晾干。

酚泰试剂（试纸）  pH值变色范围8.2～10，在酸性和中性溶液中都无色，再碱性溶液中呈深红色。

配方二  红蓝石蕊试纸

取市售石蕊1克，放在80毫升10%酒精溶液中搅拌，使它溶解，然后过滤。

把滤液分成两份。

1份滴入稀磷酸或稀硫酸，到出现红色为止。

另1份滴入稀氢氧化钠溶液，到出现蓝色为止。

在上述制备的溶液中分别浸湿滤纸条，随后取出滤纸条，放在蔽光处、无酸碱性气体影响的地方晾干，即的红、蓝两种石蕊试纸。

红石蕊试纸在碱性溶液中变蓝，蓝石蕊试纸在酸性溶液中变红。

6、检查二氧化碳的试剂

检查二氧化碳的试剂，可用溴代麝香草酚蓝溶液和石灰水。

配方一  溴代麝香草酚蓝溶液

取0.1克溴代麝香草酚蓝，溶解在100毫升蒸馏水里，滴入少量0.1%氢氧化钾溶液，使它成为弱碱性溶液而呈蓝色。

溴代麝香草酚蓝溶液pH值变色范围是6.0（黄）～7.6（蓝）。

待测物中如果有二氧化碳，会形成碳酸而使溶液变成黄色。

配方二  石灰水

在蒸馏水中加入生石灰（氧化钙），变加边搅拌，直到加入的生石灰不再溶解，呈饱和状态时为止。

在石灰水澄清后，倾出上层清液，用滤纸过滤，放在密闭瓶内保存。

如果测定的物质中有二氧化碳，会生成碳酸钙，使石灰水变浑浊。

7、检查细胞生活力的试剂

检查细胞有无生活力，可用中性红甲基蓝试剂。

配制的方法是先分别配制1%中性红溶液和1%甲基蓝溶液，这两种溶液各取1份混合，用来鉴定细胞的死活。

该试剂使活细胞的液泡染上红色，而使死细胞全部染成蓝色。

（二）分离液

1、肌细胞分离液

配方一  马克凯郎（Maccallum）液

取1份浓硝酸、2份甘油、3份水，混合后就得到马克凯郎液。

把新鲜的肌肉组织小块（横纹肌、心肌和平滑肌）投入这种溶液里浸渍，分离时间需1～3日。

这种溶液尤其适于分离横纹肌核心肌细胞。

配方二  氢氧化钾溶液

取35克氢氧化钾，放在100毫升蒸馏水中，加热，使它完全溶解后，在室温下冷却。

把新鲜的肌肉组织块投入氢氧化钾溶液中，浸泡15～30分钟后，肌细胞便可分离。

2、上皮细胞分离液

配方一  福尔马林—氯化钾溶液

称取58.44克氯化钠，用蒸馏水溶解，再稀释到1000毫升，加入2毫升福尔马林。

这种溶液是很好的上皮细胞分离液，分离很迅速，而且能保护纤细的上皮细胞纤毛。

小肠和气管的上皮组织小块，放在此溶液里2小时即可分离，口腔和皮肤上皮组织小块的细胞分离一般需3日左右。

配方二  水和氯醛溶液

称取5克水和氯醛，用蒸馏水溶解，再稀释到100毫升，就得到5%水合氯醛溶液。

从洗净的动物胃、肠和口腔内壁上取下上皮组织一小块，投入以上溶液中，浸泡24～48小时。

3、神经细胞分离液

配方一  可以用上皮细胞分离液配方一福尔马林—氯化钠溶液来分离神经细胞（见2）。

配方二  硼酸生理盐水溶液

在生理盐水溶液内加入一些硼酸，搅拌到不再溶解时为止，使成为饱和溶液。

把脊椎灰质和脑皮质部位的神经组织一小块投入这种溶液中分离。

4、植物茎细胞分离液

杰弗里氏（Jeffrey’s）液

取等量的10%铬酸溶液和10%硝酸溶液混合，成铬酸—硝酸溶液。

这种溶液用来分离木本植物茎部的导管、管胞、筛管、伴胞和韧皮纤维等。

把材料切成小块放在水里，加热煮沸，冷却后再加热煮沸。

这样重复几次，到材料全部沉于水底后，投入分离液内，分离时间是24～48小时。

5、植物根尖细胞分离液

配方一  盐酸—酒精溶液

在1份95%酒精中慢慢的加入1份浓盐酸，即成盐酸—酒精溶液，装瓶密闭保存。

把植物根尖部位截下一小段，投入以上溶液中分离。

配方二  4%盐酸溶液

配制4%盐酸溶液。

截下植物根尖部位，投入盛有4%盐酸溶液的小烧杯内，在60摄氏度温水中隔水温热1～2分钟，使根尖软而不酥，这时分离效果最好。

6、植物纤维分离液

取10克氢氧化钠（或氢氧化钾），溶解在90毫升水里，制成10%氢氧化钠（或氢氧化钾）溶液，放在瓶里密闭保存。

把植物茎纵切成细条，剪成小段后，投入分离液内。

7、植物细胞质壁分离液

配方一  30%蔗糖溶液

取30克蔗糖，溶解在70毫升蒸馏水里，装瓶备用。

配方二  5%氯化钠溶液

取5克食盐，溶解在95毫升蒸馏水里，装瓶备用。

配方三  5%硝酸钾溶液

取5克硝酸钾，溶解在95毫升蒸馏水里，装瓶备用。

（三）生理盐水

配方一  各种动物需用的生理盐水

哺乳类  需用生理盐水浓度是0.9%。

称取0.9克氯化钠，溶解在少量蒸馏水中，稀释到100毫升。

鸟类  需用的生理盐水浓度是0.75%。

称取0.75克氯化钠，溶解后用蒸馏水稀释到100毫升。

两栖类  需用的生理盐水浓度是0.65%。

称取0.65克氯化钠，溶解后用蒸馏水稀释到100毫升。

配方二  任氏（Ringer’s）生理盐水

氯化钠  6.5克        碳酸氢钠  0.2克

氯化钾  0.14克        磷酸二氢钠  0.01克

氯化钙  0.12克

先把氯化钠、氯化钾、碳酸氢钠、磷酸二氢钠分别溶解在少量蒸馏水中，混合后用蒸馏水稀释到980毫升。

然后取氯化钙溶解在20毫升蒸馏水中，把氯化钙溶液逐滴加入到上述溶液内，边滴、边搅拌，以免产生不溶解的磷酸钙沉淀。

此溶液用于变温动物，尤其常用于两栖类。

配方三  乐氏（Locke’s）生理盐水

氯化钠  9.0克        碳酸氢钠  0.1～0.3克

氯化钾  0.42克      氯化钙    0.24克

把氯化钠、氯化钾、碳酸氢钠分别用少量蒸馏水溶解，混合后加蒸馏水到980毫升。

把氯化钙溶解在20毫升蒸馏水里，逐滴加入上述溶液中。

以上溶液用于恒温动物，尤其常用于哺乳类。

（四）培养液

1、人造海水

配方一  

氯化钠（  ）                24.72克

氯化钾（  ）                0.67克

氯化钙（  ）          1.36克

氯化镁（  ）          4.66克

硫酸镁（  ）          6.29克

碳酸氢钠（  ）            0.18克

蒸馏水                      加到1升

把上述各种盐溶解在少量蒸馏水中，再加入碳酸氢钠，最后用蒸馏水稀释到1000毫升。

配方二  

氯化钠  45.0克              硫酸镁  0.1克

氯化镁  5.0克              氯化铁（1%溶液）  1滴

先把硫酸镁、磷酸一氢钾、氯化铁用少