进出口油料和植物油中多种农药残留量的测定液相色谱串联质谱法编制说明.docx

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进出口油料和植物油中多种农药残留量的测定液相色谱串联质谱法编制说明.docx

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进出口油料和植物油中多种农药残留量的测定液相色谱串联质谱法编制说明

进出口油料和植物油中77种农药残留量的测定

液相色谱-串联质谱法

（项目编号2012B131）

标准编制说明

（征求意见稿）

山西出入境检验检疫局

2013年10月

《进出口油料和植物油中77种农药残留量的测定

液相色谱-串联质谱法》编制说明

一、任务来源

本标准为检验检疫行业标准，由认监委批准立项。

项目编号为2012B131，由山西出入境检验检疫局承担研究和起草工作。

二、编制意义

1、背景

农药是一类用于预防、消灭或者控制农作物的害虫、病菌、鼠类、杂草和其他有害动植物以及有目的地调节植物、昆虫生长的药物。

农药分子结构复杂，品种繁多。

根据防治对象，农药可分为杀虫剂、杀菌剂、杀螨剂、除草剂、杀鼠剂、脱叶剂、植物生长调节剂；根据结构，农药可分为有机磷类、有机氯类、拟除虫菊酯类、氨基甲酸酯类。

农药主要用于蔬菜、水果、中药材、油料等农作物，可防治病虫、除草、杀螨、调节作物生长，在提高作物产量、解决世界粮食问题方面发挥了重要的积极作用。

据联合国粮农组织（FAO）统计，全世界5种主要农作物（稻、麦、棉、玉米、甘蔗）每年因虫害的损失达2000亿美元。

世界粮食生产每年因虫害损失14%，病害损失11%，鼠害损失20%，而化学农药防治可挽回15%～30%的产量损失[]。

我国是油料的生产大国，是世界上产油料最多的国家之一，包括花生、大豆、油菜籽、葵花籽、棉籽、芝麻等。

油料作物是植物油脂和蛋白质的重要来源，与人民生活息息相关，在保证油脂和蛋白质的有效供给、改善食物结构、促进养殖业发展方面具有重要作用。

这些油料作物在生长过程中易受到多种病虫害的侵袭，如大豆根腐病、花叶病、线虫[]、油菜菌核病、病毒病、蚜虫[]、花生的叶斑病、青枯病、锈病[]等，施用农药是防治这些病虫害最有效的手段。

但随着农药的过量和不合理使用，在保证油料作物的高产丰收的同时，也对人类生命安全、生态环境造成了威胁，例如大气、水、土壤污染，增强病菌、害虫的抗药性，杀害有益生物。

植物油虽然是油料作物加工后的副产品，但仍可能有一些农药在油脂产品中残留。

通过农作物直接或间接污染食品的概率占农药作为污染物进入人体机会的90%。

针对这一问题，一些发达国家和组织对油料中农药残留限量及检测技术做了较为系统的研究，纷纷制定了严格的限量标准，其中国际食品法典委员会（CAC）对油料中50多种农药残留制定了限量标准，欧盟对油料中农药残留限量多达136种，美国也对130多种农药在油料中的残留作出了明确规定。

FAO在对不同油料及其制品中农药残留限量标准也做了详细规定。

日本还对芝麻、红花、向日葵等油料作物分别制订了农药残留限量标准。

在农作物及其相关产品的世界贸易中，农药残留的检测非常重要。

CAC、WHO/FAO及欧盟等国家和国际组织对此均有严格的规定，我国在GB2763《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》标准中规定了100余种有关农药在油料和植物油中的最低残留量（见表1）。

随着我国加入世界贸易组织，同世界各国往来的不断加深，农药容许使用的品种和用量也在不断变化。

从表1中可以看出，各农药在油和油料中残留限量在0.01～8mg/kg之间。

表1油籽油料中各农药限量

最低残留限量基质

（mg/kg）

农药

油料

油

阿维菌素

0.01

—

矮壮素

0.5

—

艾氏剂

0.05

—

胺苯磺隆

0.02

—

百草枯

0.2

0.05

百菌清

0.05

—

倍硫磷

—

0.01

苯醚甲环唑

0.05

—

苯线磷（克线磷）

—

0.05

吡虫啉

0.5

—

吡氟禾草灵和精吡氟禾草灵

0.1

—

吡氟氯禾灵

—

丙环唑

0.1

—

丙硫克百威

0.5

0.05

丙炔氟草胺

0.02

—

丙溴磷

—

0.05

草除灵

0.2

—

草甘膦

—

0.05

哒螨灵

0.1

—

代森锰锌

0.1

—

滴滴涕（DDT）

0.05

—

狄氏剂

0.05

—

敌百虫

0.1

—

敌草快

0.05

敌敌畏

0.1

—

地虫硫磷

0.1

—

丁硫克百威

0.05

—

啶虫脒

0.1

—

毒杀芬

0.01

—

毒死蜱

0.1

0.05

对硫磷

—

0.1

对硫磷

0.1

多菌灵

0.1

—

多杀霉素

0.1

—

多效唑

0.2

0.5

噁草酮

0.1

—

二氯吡啶酸

—

二嗪磷

0.2

—

伏杀硫磷

—

0.1

氟胺氰菊酯

—

0.2

氟吡甲禾灵和高效氟吡甲禾灵

0.1

氟啶脲

0.1

—

氟磺胺草醚

0.1

—

氟乐灵

0.05

氟氰戊菊酯

0.05

0.2

氟烯草酸

0.05

—

福美双

0.3

—

腐霉利

0.5

甲氨基阿维菌素苯甲酸盐

0.02

—

甲胺磷

0.1

—

甲拌磷

0.05

0.1

甲草胺

0.02

—

甲基毒死蜱

0.02

—

甲基对硫磷

—

0.1

甲基异硫磷

0.02

—

甲咪唑烟酸

0.1

—

甲萘威

—

甲氰菊酯

0.1

—

甲氧咪草烟

0.1

—

精噁唑禾草灵

0.02

—

久效磷

—

0.05

抗蚜威

0.05

—

克百威

0.1

—

喹禾灵和精喹禾灵

0.05

—

乐果

0.05

联苯菊酯

0.5

—

磷化铝

0.05

—

硫丹

硫双威

—

0.1

六六六

0.05

—

咯菌腈

0.05

—

绿麦隆

0.1

—

氯丹

0.02

氯氟氰菊酯和高效氯氟氰菊酯

0.02

氯化苦

0.1

—

氯菊酯

0.1

氯嘧磺隆

0.02

—

氯氰菊酯和高效氯氰菊酯

0.05

—

螺螨酯

0.02

—

马拉硫磷

—

咪酰胺

0.5

—

咪鲜胺和咪鲜胺锰盐

0.5

—

咪唑喹啉酸

0.05

—

咪唑乙烟酸

0.1

—

灭草松

0.05

—

灭多威

0.2

—

灭线磷

0.02

—

灭蚁灵

0.1

—

萘乙酸和萘乙酸钠

0.05

—

七氯

0.02

嗪草酮

0.05

—

氰戊菊酯和S-氰戊菊酯

0.1

炔螨特（克螨特）

0.1

乳氟禾草灵

0.05

—

噻苯隆

—

噻吩磺隆

0.05

—

噻螨酮

0.05

—

三氟羧草醚

0.1

—

三氯杀螨醇

—

0.5

三唑磷

0.1

—

三唑酮

0.05

—

杀螟硫磷

0.1

—

双甲脒

0.5

0.05

水胺硫磷

0.05

—

特丁硫磷

0.02

—

涕灭威

0.02

0.01

萎锈灵

0.2

—

五氯硝基苯

0.01

戊唑醇

0.1

—

烯草酮

0.1

—

烯啶虫胺

0.05

—

烯禾啶

0.5

—

辛硫磷

0.05

—

溴甲烷

—

溴氰菊酯

0.05

—

亚胺硫磷

0.05

—

氧乐果

0.02

—

乙草胺

0.1

—

乙硫磷

—

0.5

乙羧氟草醚

0.05

—

乙烯利

—

乙酰甲胺磷

—

异丙草胺

0.1

—

异丙甲草胺和精异丙甲草胺

0.1

—

异狄氏剂

0.01

—

异噁草酮

0.05

—

异菌脲

—

茚虫威

0.1

—

仲丁灵

0.05

—

唑螨酯

0.1

—

注：

“—”表示未规定限量。

2、检测方法及研究现状

我国从20世纪90年代初，开始研究制定农药在油料中最高残留限量标准和检测方法，直到20世纪90年代末才提出油料中的农药残留限量标准，与美国、日本、欧盟等发达国家和组织差距较大，检测技术比较落后，涉及农药检测种类也相对较少，不能完全覆盖目前发达国家及国际组织对油料中农药的残留限量要求[]。

我国油料农药残留分析前处理多采用浸泡振荡、超声波提取和液-液分配、柱层析等传统方法，存在提取效率低，净化不彻底的问题，导致检测结果精密度偏低[]。

目前报道的有关油料农药残留的检测方法主要有生化测定法和色谱快速检测法，其中色谱快速检测法是通过尽可能的简化样品前处理步骤（提取、净化、浓缩等），直接进样分析蔬菜和水果中的有机磷类、有机氯类和拟除虫菊酯的农药残留，主要分析方法是气相色谱-质谱法（GC-MS），常用的检测器有氮磷检测器（NPD）、电子捕获检测器（ECD）或火焰光度检测器（FPD）。

高蓉[]用高效液相色谱紫外检测器测定油菜籽中的多菌灵；祁彦[]采用液相色谱二级管阵列检测器测定大豆中的磺酰脲类农药残留；黎其万、刘宏城[]采用配有双通道紫外检测器的液相色谱来分析植物油中的甲萘威和克百威；2010年，曾凡刚[]等采用GPC-GC法快速测定植物油中4种有机磷农药残留；2008年吉林出入境检验检疫局王明泰[]等采用GC-MS法测定了粮谷及油料中55种有机磷农药残留量；2009年山东出入境检验检疫局庞国芳[]等采用GPC净化-同位素稀释内标定量GC-MS对植物油中多环芳烃进行测定；郭岚[]等利用GPC-GC-MS对植物油中多种类型农药残留进行了同步测定的研究。

在我国现行油料及植物油检测的相关标准中，主要涉及少数几种有机磷和菊酯类农残检测，且多采用GC-MS法，覆盖的基质范围小，农药检测种类少，尚未见多种类型农药残留同步测定的液质联用分析方法（LC-MS）；经查证，也无同类国家标准、行业标准或检验检疫行业标准的立项。

相关检测标准及定量限见表2。

表2主要的检测标准

标准号

标准名称

定量限（mg/kg）

GB/T14929.2-1994

花生仁、棉籽油、花生油中涕灭威残留量测定方法

0.0050

GB/T5009.143-2003

蔬菜、水果、食用油中双甲脒残留量的测定

0.02

GB/T5009.172-2003

大豆、花生、豆油、花生油中的氟乐灵残留量的测定

0.05

GB/T5009.176-2003

茶叶、水果、植物油中三氯杀螨醇残留量的测定

0.096

GB/T5009.21-2004

粮、油、菜中甲萘威残留量的测定

0.5

SN0583-1996

出口粮谷及油籽中氯苯胺灵残留量检验方法

0.05

SN0584-1996

出口粮谷及油籽中烯菌酮残留量检验方法

0.020

SN0585-1996

出口粮谷及油籽中乙酰甲胺磷残留量检验方法

0.04

SN0586-2012

出口粮谷及油籽中特普残留量检测方法

0.010

SN0591-1996

出口粮谷及油籽中二噁硫磷残留量检验方法

0.05

SN0592-1996

出口粮谷及油籽中苯丁锡残留量检验方法

0.1

SN0596-2012

出口粮谷及油籽中稀禾定残留量检测方法

气相色谱-质谱法

0.01

SN0656-1997

出口油籽中乙霉威残留量检验方法

0.05

SN0687-1997

出口粮谷及油籽中禾草灵残留量检验方法

0.020

SN0688-1997

出口粮谷及油籽中丰索磷残留量检验方法

0.020

SN/T1017.4-2002

出口粮谷及油籽中哒菌清残留量检验方法

0.10

SN/T1017.5-2002

出口粮谷及油籽中快杀稗残留量检验方法

0.05

SN/T1737.1-2006

除草剂残留量检测方法第1部分：

气相色谱串联质谱法测定粮谷及油籽中酰胺类除草剂残留量

0.02~0.05

SN/T1738-2006

进出口粮谷和油籽中虫酰肼残留量的检验方法

气相色谱串联质谱法

0.10

SN/T1739-2006

进出口粮谷和油籽中多种有机磷农药残留量的检测方法

气相色谱串联质谱法

0.005~0.1

DB37/T1101-2008

食品中多菌灵残留量的测定液相色谱-串联质谱法

0.001

GB/T5009.130-2003

大豆及谷物中氟磺胺草醚残留量的测定

0.02

GB/T5009.135-2003

植物性食品中灭幼脲残留量的测定

0.03

GB/T 5009.145-2003

植物性食品中有机磷和氨基甲酸酯类农药多种残留的测定

0.0022~0.015

GB/T5009.180-2003

稻谷、花生仁中恶草酮残留量的测定

0.05/0.1

SN/T1741-2006

进出口食品中甲草胺残留量的检测方法

气相色谱串联质谱法

0.010

SN/T1968-2007

进出口食品中扑草净残留量检测方法气相色谱-质谱法

0.01

SN/T1981-2007

进出口食品中环氟菌残留量的检测方法气相色谱-质谱法

0.005

SN/T1982-2007

进出口食品中氟虫腈残留量检测方法气相色谱-质谱法

0.002

SN/T1989-2007

进出口食品中丁酰肼残留量检测方法气相色谱-质谱法

0.01

SN/T2152-2008

进出口食品中氟铃脲残留量检测方法

高效液相色谱-质谱/质谱法

0.005

SN/T2213-2008

进出口植物源性食品中取代脲类农药残留量的测定

液相色谱-质谱/质谱法

0.01

SN/T2158-2008

进出口食品中毒死蜱残留量检测方法

0.005~0.02

SN/T2234-2008

进出口食品中丙溴磷残留量检测方法

气相色谱法和气相色谱-质谱法

0.01

SN/T2235-2008

进出口食品中嘧菌环胺残留量检测方法气相色谱-质谱法

0.0004/0.01

SN/T2236-2008

进出口食品中氟硅唑残留量检测方法气相色谱-质谱法

0.01

SN/T2456-2010

进出口食品中苯胺灵残留量的测定气相色谱-质谱法

0.005

SN/T2560-2010

进出口食品中氨基甲酸酯类农药残留量的测定

液相色谱-质谱/质谱法

0.005

SN/T2647-2010

进出口食品中炔苯酰草胺残留量检测方法

气相色谱-质谱法

0.01

SN/T2648-2010

进出口食品中啶酰菌胺残留量的测定气相色谱-质谱法

0.01

本标准采用QuEChERS法，用乙腈超声提取，经PSA、C18基质分散净化，高效液相色谱法串联质谱法（UPLC-MS/MS）测定油料及植物油中多类型农药残留。

该法具有快速、简便、廉价、有效、实用、安全、回收率高、精确度高、准确度高等优点，对油料及植物油中多类型农药残留有普遍适用性。

3、制定标准的必要性和意义

3.1维护消费者健康，保护生态环境

油料作物在种植过程中会喷洒一些农药，深加工产品中也会有农药残留。

喷洒农药会造成大气、水、土壤污染，增强病菌、害虫的抗药性，杀害有益生物。

同时，这些农药因种类和剂量不同，通过食物链经生物富集作用，进入人体会对人体产生不同程度的危害，表现为急性中毒、慢性中毒和“三致”危害（致癌、致畸、致突变）。

如有机氯农药在人体脂肪中积累，诱导肝脏的酶类，是肝硬化肿大的原因之一；六六六、滴滴涕会蓄积与脂肪、肝、肾、脑中，通过人乳传给胎儿引发下一代病变；有机磷农药会引起神经功能紊乱、震颤、精神错乱、语言失常等。

随着油料及植物油消费量的逐年上升，农药的不合理使用导致油料和食用油中农残超标，影响消费者食用安全，破坏生态环境。

近年来，人们生活水平不断提高，食品安全问题越来越受到全社会以及全球人们的关注。

因此制定该标准可有效地减少环境破坏，控制农药残留，保证人类健康。

3.2促进油料作物进出口贸易的顺利进行

我国是油料作物的生产大国和消费大国。

近年来，随着油料产量的不断提高和世界贸易组织的加入，我国同不同国家的油料作物贸易往来不断加深，中国已成为世界五大油料进口国之一。

从进出口的结构来看，进口的品种集中度比较高，总体贸易逆差规模较大。

在农药残留检测方面，许多国家和组织都规定了农药在油料及植物油中的最低残留量[]，我国在GB2763《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》标准中也规定了100余种有关农药在油料和植物油中的最低残留量，这些仍远远不能满足国际进出口贸易的需要。

因此制定本标准对促进进出口贸易的顺利进行有着重要的现实意义。

3.3健全相关检测标准，提高农残在油料作物中的检测水平和速度

控制农药残留的重要环节之一是检测。

目前，关于油料和植物油中农药检测方法的文献报道主要有液相色谱法、气相色谱法和气质联用法；在我国现行油料及植物油检测的相关标准中，主要涉及少数几种有机磷和菊酯类农残，且多采用GC-MS法，覆盖的基质范围小，农药检测种类少，尚未见多类型农药残留同步测定的液质联用分析方法（LC-MS），这些远远不能满足人民生活食品安全的需要。

本标准采用液质联用法，可同时快速地检测油料及植物油中多农药残留量。

该标准可大大提高现行农药检测的水平和速度，对于完善我国油料及植物油卫生标准体系起到重要的作用。

三、编制依据

本标准是根据GB/T1.1—2009《标准化工作导则第1部分：

标准的结构和编写规则》、GB/T第4部分化学分析方法》及SN/T0001《出口商品中农药、兽药残留量及生物毒素检验方法标准编写的基本规定》的要求而进行编写的。

有关技术内容是在参考国外有关标准及文献的基础上经研究、改进和验证后制定的。

四、制标过程

本标准起草人通过查阅相关资料和文献，参照比较国内外有关标准及文献，经室内回收率、重现性、精密度及应用范围等一系列实验研究和验证后，按GB27402-2008、GB/T1.1-2009、GB/T20001.4-2001规定格式编写。

本标准经5个实验室验证，方法测定低限、添加回收率和精密度均符合要求。

1、标准的主要内容

1.1、主要试剂及标准溶液配制

（1）标准储备液：

分别称取5mg～10mg，（精确至0.1mg）农药及相关化学品标准物质于10mL容量瓶中，根据标准品的溶解度选甲醇，乙腈等溶解并定容至刻度。

标准储备液避光4℃保存，可使用一年。

（2）混合标准中间溶液：

分别准确移取一定体积的每种标准储备液，用水：

乙腈（1:

1）定容成1.0μg/mL的混合标准中间液，0℃～4℃冷藏避光保存，有效期1个月。

1.2、主要设备和器材

液相色谱串联质谱仪，配有电喷雾离子源（ESI）；分析天平，感量分别为0.0001g和0.01g；离心机：

转速不低于4000r/min；涡旋混合器；超声波清洗器；组织捣碎机。

1.3、实验方法

（1）大豆油、玉米油、花生油、橄榄油、菜籽油、棕榈油

称取5g试样（精确到0.01g）置于50mL的具塞离心管中，加入少许氯化钠，再加入10mL乙腈，涡旋混匀，超声提取15min，4000r/min离心10min。

提取液，待净化。

（2）油菜籽、花生、芝麻、瓜子

称取5g试样（精确到0.01g）置于50mL的具塞离心管中，加入少许氯化钠，再加入10mL乙腈，涡旋混匀，超声提取15min，4000r/min离心10min。

提取液，待净化。

（1）大豆油、玉米油、花生油、橄榄油、菜籽油、棕榈油

取上述溶液5mL，分别加入250mgC18和250mgPSA净化，充分涡旋混合后，用滤膜过滤，待测定。

（2）油菜籽、花生、芝麻、瓜子

取上述溶液1mL，分别加入25mgC18和25mgPSA净化，充分涡旋混合后，用滤膜过滤，待测定。

1.4、色谱条件

mm×2.1mm,1.8μm）或相当者；

甲酸和乙腈，梯度洗脱，梯度见表3；

0.3mL/min；

μL；

℃；

表3梯度洗脱程序

时间（min）

千分之一甲酸（%）

乙腈（%）

0.00

2.00

3.00

6.00

6.10

7.00

1.5、质谱条件

电离方式，电喷雾电离（ESI+）；扫描方式：

正离子扫描；离子源温度，110℃；脱溶剂气温度，380℃；锥孔气流，氮气，流速50L/h；去溶剂气流，氮气，流速600L/h；碰撞气，氩气，碰撞气压3.50×10-4Mpa；检测方式，多反应监测（MRM）；多反应监测条件参见表4。

表4离子对、锥孔电压、碰撞气能量

序号

中文名称

母离子

（m/z）

子离子

（m/z）

锥孔电压（V）

碰撞能量（eV）

1组

吡氟氯禾灵

328.267

*91.07

282.17

2.4-二氯苯氧乙酸

219.0319

161.1818

吡氟禾草灵

328.27

91.1

282.2

丙炔氟草胺

355.2873

79.2028

107.1835

莠灭净

228.35

68.27

96.31

异丙草胺

284.35

73.21

43.28

敌草快

363.41

89.22

氟乐灵

366.23

108.28

308.335

异噁草酮

240.29

125.21

219.81

甲咪唑烟酸

276.35

69.18

86.23

莠去津

216.29

174.33

96.31

虫酰肼

353.0

133

297

乙草胺

270.35

224.37

59.29

灭蝇胺

167.20

60.10

85.00

氟酰胺

324.29

93.19

262.29

啶虫咪

223.2

56.10

125.90

吡虫啉

256.60

175.20

209.00

精噁唑禾草灵

362.29

288.32

91.31

2组

三唑酮

294.35

69.31

197.36

氟硅唑

316.35

247.33

165.35

三唑醇

296.35

70.29

99.31

萎锈灵

236.29

143.23

43.21

腈菌唑

289.35

70.29

125.27

甲基托布津

343.10

90.90

151.00

嘧霉胺

200.29

82.2612

107.2468

烯酰吗啉

388.10

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