进出口油料和植物油中多种农药残留量的测定液相色谱串联质谱法编制说明.docx

1、进出口油料和植物油中多种农药残留量的测定液相色谱串联质谱法编制说明进出口油料和植物油中77种农药残留量的测定 液相色谱-串联质谱法（项目编号2012B131）标准编制说明（征求意见稿）山西出入境检验检疫局2013年10月进出口油料和植物油中77种农药残留量的测定 液相色谱-串联质谱法编制说明一、任务来源本标准为检验检疫行业标准，由认监委批准立项。项目编号为2012B131，由山西出入境检验检疫局承担研究和起草工作。二、编制意义1、背景农药是一类用于预防、消灭或者控制农作物的害虫、病菌、鼠类、杂草和其他有害动植物以及有目的地调节植物、昆虫生长的药物。农药分子结构复杂，品种繁多。根据防治对象，农药

2、可分为杀虫剂、杀菌剂、杀螨剂、除草剂、杀鼠剂、脱叶剂、植物生长调节剂；根据结构，农药可分为有机磷类、有机氯类、拟除虫菊酯类、氨基甲酸酯类。农药主要用于蔬菜、水果、中药材、油料等农作物，可防治病虫、除草、杀螨、调节作物生长，在提高作物产量、解决世界粮食问题方面发挥了重要的积极作用。据联合国粮农 组织（FAO）统计，全世界5种主要农作物（稻、麦、棉、玉米、甘蔗）每年因虫害的损失达2000亿美元。世界粮食生产每年因虫害损失14%，病害损失11%，鼠害损失20%，而化学农药防治可挽回15%30%的产量损失。我国是油料的生产大国，是世界上产油料最多的国家之一，包括花生、大豆、油菜籽、葵花籽、棉籽、芝麻等

3、。油料作物是植物油脂和蛋白质的重要来源，与人民生活息息相关，在保证油脂和蛋白质的有效供给、改善食物结构、促进养殖业发展方面具有重要作用。这些油料作物在生长过程中易受到多种病虫害的侵袭，如大豆根腐病、花叶病、线虫、油菜菌核病、病毒病、蚜虫、花生的叶斑病、青枯病、锈病等，施用农药是防治这些病虫害最有效的手段。但随着农药的过量和不合理使用，在保证油料作物的高产丰收的同时，也对人类生命安全、生态环境造成了威胁，例如大气、水、土壤污染，增强病菌、害虫的抗药性，杀害有益生物。植物油虽然是油料作物加工后的副产品，但仍可能有一些农药在油脂产品中残留。通过农作物直接或间接污染食品的概率占农药作为污染物进入人体机

4、会的90%。针对这一问题，一些发达国家和组织对油料中农药残留限量及检测技术做了较为系统的研究，纷纷制定了严格的限量标准，其中国际食品法典委员会(CAC)对油料中50多种农药残留制定了限量标准，欧盟对油料中农药残留限量多达136种，美国也对130多种农药在油料中的残留作出了明确规定。FAO在对不同油料及其制品中农药残留限量标准也做了详细规定。日本还对芝麻、红花、向日葵等油料作物分别制订了农药残留限量标准。在农作物及其相关产品的世界贸易中，农药残留的检测非常重要。CAC、WHO/ FAO及欧盟等国家和国际组织对此均有严格的规定，我国在GB 2763食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量标准中规定

5、了100余种有关农药在油料和植物油中的最低残留量（见表1）。随着我国加入世界贸易组织，同世界各国往来的不断加深，农药容许使用的品种和用量也在不断变化。从表1中可以看出，各农药在油和油料中残留限量在0.018mg/kg之间。表1 油籽油料中各农药限量最低残留限量 基质（mg/kg）农药油料油阿维菌素0.01矮壮素0.5艾氏剂0.05胺苯磺隆0.02百草枯0.20.05百菌清0.05倍硫磷0.01苯醚甲环唑0.05苯线磷（克线磷）0.05吡虫啉0.5吡氟禾草灵和精吡氟禾草灵0.1吡氟氯禾灵1丙环唑0.1丙硫克百威0.50.05丙炔氟草胺0.02丙溴磷0.05草除灵0.2草甘膦0.05哒螨灵0.1代

6、森锰锌0.1滴滴涕（DDT）0.05狄氏剂0.05敌百虫0.1敌草快20.05敌敌畏0.1地虫硫磷0.1丁硫克百威0.05啶虫脒0.1毒杀芬0.01毒死蜱0.10.05对硫磷0.1对硫磷0.10.1多菌灵0.1多杀霉素0.1多效唑0.20.5噁草酮0.1二氯吡啶酸2二嗪磷0.2伏杀硫磷0.1氟胺氰菊酯0.2氟吡甲禾灵和高效氟吡甲禾灵0.11氟啶脲0.1氟磺胺草醚0.1氟乐灵0.050.05氟氰戊菊酯0.050.2氟烯草酸0.05福美双0.3腐霉利20.5甲氨基阿维菌素苯甲酸盐0.02甲胺磷0.1甲拌磷0.050.1甲草胺0.02甲基毒死蜱0.02甲基对硫磷0.1甲基异硫磷0.02甲咪唑烟酸0.

7、1甲萘威1甲氰菊酯0.1甲氧咪草烟0.1精噁唑禾草灵0.02久效磷0.05抗蚜威0.05克百威0.1喹禾灵和精喹禾灵0.05乐果0.050.05联苯菊酯0.5磷化铝0.05硫丹12硫双威0.1六六六0.05咯菌腈0.05绿麦隆0.1氯丹0.020.02氯氟氰菊酯和高效氯氟氰菊酯0.020.02氯化苦0.1氯菊酯20.1氯嘧磺隆0.02氯氰菊酯和高效氯氰菊酯0.05螺螨酯0.02马拉硫磷8咪酰胺0.5咪鲜胺和咪鲜胺锰盐0.5咪唑喹啉酸0.05咪唑乙烟酸0.1灭草松0.05灭多威0.2灭线磷0.02灭蚁灵0.1萘乙酸和萘乙酸钠0.05七氯0.020.02嗪草酮0.05氰戊菊酯和S-氰戊菊酯0.10

8、.1炔螨特（克螨特）0.10.1乳氟禾草灵0.05噻苯隆1噻吩磺隆0.05噻螨酮0.05三氟羧草醚0.1三氯杀螨醇0.5三唑磷0.1三唑酮0.05杀螟硫磷0.1双甲脒0.50.05水胺硫磷0.05特丁硫磷0.02涕灭威0.020.01萎锈灵0.2五氯硝基苯0.010.01戊唑醇0.1烯草酮0.1烯啶虫胺0.05烯禾啶0.5辛硫磷0.05溴甲烷5溴氰菊酯0.05亚胺硫磷0.05氧乐果0.02乙草胺0.1乙硫磷0.5乙羧氟草醚0.05乙烯利2乙酰甲胺磷2异丙草胺0.1异丙甲草胺和精异丙甲草胺0.1异狄氏剂0.01异噁草酮0.05异菌脲2茚虫威0.1仲丁灵0.05唑螨酯0.1注：“”表示未规定限量。

9、2、检测方法及研究现状我国从20世纪90年代初，开始研究制定农药在油料中最高残留限量标准和检测方法，直到20世纪90年代末才提出油料中的农药残留限量标准，与美国、日本、欧盟等发达国家和组织差距较大，检测技术比较落后，涉及农药检测种类也相对较少，不能完全覆盖目前发达国家及国际组织对油料中农药的残留限量要求。我国油料农药残留分析前处理多采用浸泡振荡、超声波提取和液-液分配、柱层析等传统方法，存在提取效率低，净化不彻底的问题，导致检测结果精密度偏低。目前报道的有关油料农药残留的检测方法主要有生化测定法和色谱快速检测法，其中色谱快速检测法是通过尽可能的简化样品前处理步骤（提取、净化、浓缩等），直接进样

10、分析蔬菜和水果中的有机磷类、有机氯类和拟除虫菊酯的农药残留，主要分析方法是气相色谱-质谱法（GC-MS），常用的检测器有氮磷检测器（NPD）、电子捕获检测器（ECD）或火焰光度检测器（FPD）。高蓉用高效液相色谱紫外检测器测定油菜籽中的多菌灵；祁彦采用液相色谱二级管阵列检测器测定大豆中的磺酰脲类农药残留；黎其万、刘宏城采用配有双通道紫外检测器的液相色谱来分析植物油中的甲萘威和克百威；2010年，曾凡刚等采用GPC-GC法快速测定植物油中4种有机磷农药残留；2008年吉林出入境检验检疫局王明泰等采用GC-MS法测定了粮谷及油料中55种有机磷农药残留量；2009年山东出入境检验检疫局庞国芳等采用G

11、PC净化-同位素稀释内标定量GC-MS对植物油中多环芳烃进行测定；郭岚等利用GPC-GC-MS对植物油中多种类型农药残留进行了同步测定的研究。在我国现行油料及植物油检测的相关标准中，主要涉及少数几种有机磷和菊酯类农残检测，且多采用GC-MS法，覆盖的基质范围小，农药检测种类少，尚未见多种类型农药残留同步测定的液质联用分析方法（LC-MS）；经查证，也无同类国家标准、行业标准或检验检疫行业标准的立项。相关检测标准及定量限见表2。表2 主要的检测标准标准号标准名称定量限（mg/kg）GB/T 14929.2-1994花生仁、棉籽油、花生油中涕灭威残留量测定方法0.0050GB/T 5009.143

12、-2003蔬菜、水果、食用油中双甲脒残留量的测定0.02GB/T 5009.172-2003大豆、花生、豆油、花生油中的氟乐灵残留量的测定0.05GB/T 5009.176-2003茶叶、水果、植物油中三氯杀螨醇残留量的测定0.096GB/T 5009.21-2004粮、油、菜中甲萘威残留量的测定0.5SN 0583-1996出口粮谷及油籽中氯苯胺灵残留量检验方法0.05SN 0584-1996出口粮谷及油籽中烯菌酮残留量检验方法0.020SN 0585-1996出口粮谷及油籽中乙酰甲胺磷残留量检验方法0.04SN 0586-2012出口粮谷及油籽中特普残留量检测方法0.010SN 0591-

13、1996出口粮谷及油籽中二噁硫磷残留量检验方法0.05SN 0592-1996出口粮谷及油籽中苯丁锡残留量检验方法0.1SN 0596-2012出口粮谷及油籽中稀禾定残留量检测方法气相色谱-质谱法0.01SN 0656-1997出口油籽中乙霉威残留量检验方法0.05SN 0687-1997出口粮谷及油籽中禾草灵残留量检验方法0.020SN 0688-1997出口粮谷及油籽中丰索磷残留量检验方法0.020SN/T 1017.4-2002出口粮谷及油籽中哒菌清残留量检验方法0.10SN/T 1017.5-2002出口粮谷及油籽中快杀稗残留量检验方法0.05SN/T 1737.1-2006除草剂残留

14、量检测方法 第1部分：气相色谱串联质谱法测定粮谷及油籽中酰胺类除草剂残留量0.020.05SN/T 1738-2006进出口粮谷和油籽中虫酰肼残留量的检验方法气相色谱串联质谱法0.10SN/T 1739-2006进出口粮谷和油籽中多种有机磷农药残留量的检测方法气相色谱串联质谱法0.0050.1DB37/T 1101-2008食品中多菌灵残留量的测定 液相色谱-串联质谱法0.001GB/T 5009.130-2003大豆及谷物中氟磺胺草醚残留量的测定0.02GB/T 5009.135-2003植物性食品中灭幼脲残留量的测定0.03GB/T5009.145-2003植物性食品中有机磷和氨基甲酸酯类

15、农药多种残留的测定0.00220.015GB/T5009.180-2003稻谷、花生仁中恶草酮残留量的测定0.05/0.1SN/T 1741-2006进出口食品中甲草胺残留量的检测方法气相色谱串联质谱法0.010SN/T 1968-2007进出口食品中扑草净残留量检测方法 气相色谱-质谱法0.01SN/T 1981-2007进出口食品中环氟菌残留量的检测方法 气相色谱-质谱法0.005SN/T 1982-2007进出口食品中氟虫腈残留量检测方法 气相色谱-质谱法0.002SN/T 1989-2007进出口食品中丁酰肼残留量检测方法 气相色谱-质谱法0.01SN/T 2152-2008进出口食品

16、中氟铃脲残留量检测方法高效液相色谱-质谱/质谱法0.005SN/T 2213-2008进出口植物源性食品中取代脲类农药残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法0.01SN/T 2158-2008进出口食品中毒死蜱残留量检测方法0.0050.02SN/T 2234-2008进出口食品中丙溴磷残留量检测方法气相色谱法和气相色谱-质谱法0.01SN/T 2235-2008进出口食品中嘧菌环胺残留量检测方法 气相色谱-质谱法0.0004/0.01SN/T 2236-2008进出口食品中氟硅唑残留量检测方法 气相色谱-质谱法0.01SN/T 2456-2010进出口食品中苯胺灵残留量的测定 气相色谱-质谱法0

17、.005SN/T 2560-2010进出口食品中氨基甲酸酯类农药残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法0.005SN/T 2647-2010进出口食品中炔苯酰草胺残留量检测方法气相色谱-质谱法0.01SN/T 2648-2010进出口食品中啶酰菌胺残留量的测定 气相色谱-质谱法0.01本标准采用QuEChERS法，用乙腈超声提取，经PSA、C18基质分散净化，高效液相色谱法串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定油料及植物油中多类型农药残留。该法具有快速、简便、廉价、有效、实用、安全、回收率高、精确度高、准确度高等优点，对油料及植物油中多类型农药残留有普遍适用性。3、制定标准的必要性和意义3.1 维

18、护消费者健康，保护生态环境油料作物在种植过程中会喷洒一些农药，深加工产品中也会有农药残留。喷洒农药会造成大气、水、土壤污染，增强病菌、害虫的抗药性，杀害有益生物。同时，这些农药因种类和剂量不同，通过食物链经生物富集作用，进入人体会对人体产生不同程度的危害，表现为急性中毒、慢性中毒和“三致”危害（致癌、致畸、致突变）。如有机氯农药在人体脂肪中积累，诱导肝脏的酶类，是肝硬化肿大的原因之一；六六六、滴滴涕会蓄积与脂肪、肝、肾、脑中，通过人乳传给胎儿引发下一代病变；有机磷农药会引起神经功能紊乱、震颤、精神错乱、语言失常等。随着油料及植物油消费量的逐年上升，农药的不合理使用导致油料和食用油中农残超标，影

19、响消费者食用安全，破坏生态环境。近年来，人们生活水平不断提高，食品安全问题越来越受到全社会以及全球人们的关注。因此制定该标准可有效地减少环境破坏，控制农药残留，保证人类健康。3.2 促进油料作物进出口贸易的顺利进行我国是油料作物的生产大国和消费大国。近年来，随着油料产量的不断提高和世界贸易组织的加入，我国同不同国家的油料作物贸易往来不断加深，中国已成为世界五大油料进口国之一。从进出口的结构来看，进口的品种集中度比较高，总体贸易逆差规模较大。在农药残留检测方面，许多国家和组织都规定了农药在油料及植物油中的最低残留量，我国在GB 2763食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量标准中也规定了100

20、余种有关农药在油料和植物油中的最低残留量，这些仍远远不能满足国际进出口贸易的需要。因此制定本标准对促进进出口贸易的顺利进行有着重要的现实意义。3.3 健全相关检测标准，提高农残在油料作物中的检测水平和速度控制农药残留的重要环节之一是检测。目前，关于油料和植物油中农药检测方法的文献报道主要有液相色谱法、气相色谱法和气质联用法；在我国现行油料及植物油检测的相关标准中，主要涉及少数几种有机磷和菊酯类农残，且多采用GC-MS法，覆盖的基质范围小，农药检测种类少，尚未见多类型农药残留同步测定的液质联用分析方法（LC-MS），这些远远不能满足人民生活食品安全的需要。本标准采用液质联用法，可同时快速地检测油

21、料及植物油中多农药残留量。该标准可大大提高现行农药检测的水平和速度，对于完善我国油料及植物油卫生标准体系起到重要的作用。三、编制依据本标准是根据GB/T 1.12009标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写规则、GB/T 第4部分 化学分析方法及SN/T 0001出口商品中农药、兽药残留量及生物毒素检验方法标准编写的基本规定的要求而进行编写的。有关技术内容是在参考国外有关标准及文献的基础上经研究、改进和验证后制定的。四、制标过程本标准起草人通过查阅相关资料和文献，参照比较国内外有关标准及文献，经室内回收率、重现性、精密度及应用范围等一系列实验研究和验证后，按GB 27402-2008、GB

22、/T 1.1-2009、GB/T 20001.4-2001规定格式编写。本标准经5个实验室验证，方法测定低限、添加回收率和精密度均符合要求。1、标准的主要内容1.1、主要试剂及标准溶液配制（1）标准储备液：分别称取5mg10mg，(精确至0.1mg)农药及相关化学品标准物质于10mL容量瓶中，根据标准品的溶解度选甲醇，乙腈等溶解并定容至刻度。标准储备液避光4保存，可使用一年。（2）混合标准中间溶液：分别准确移取一定体积的每种标准储备液，用水：乙腈（1:1）定容成1.0 g/mL的混合标准中间液，04冷藏避光保存，有效期1个月。1.2、主要设备和器材液相色谱串联质谱仪，配有电喷雾离子源(ESI)

23、；分析天平，感量分别为0.0001 g和0.01 g；离心机：转速不低于4000 r/min；涡旋混合器；超声波清洗器；组织捣碎机。1.3、实验方法（1）大豆油、玉米油、花生油、橄榄油、菜籽油、棕榈油称取5 g试样(精确到0.01 g)置于50mL的具塞离心管中，加入少许氯化钠，再加入10mL乙腈，涡旋混匀，超声提取15 min，4000 r/min离心10 min。提取液，待净化。（2）油菜籽、花生、芝麻、瓜子称取5 g试样(精确到0.01 g)置于50mL的具塞离心管中，加入少许氯化钠，再加入10mL乙腈，涡旋混匀，超声提取15 min，4000 r/min离心10 min。提取液，待净化

24、。（1）大豆油、玉米油、花生油、橄榄油、菜籽油、棕榈油取上述溶液5mL，分别加入250mgC18和250mgPSA净化，充分涡旋混合后，用滤膜过滤，待测定。（2）油菜籽、花生、芝麻、瓜子取上述溶液1mL，分别加入25mgC18和25mgPSA净化，充分涡旋混合后，用滤膜过滤，待测定。1.4、色谱条件 mm2.1 mm,1.8 m)或相当者； 甲酸和乙腈，梯度洗脱，梯度见表3； 0.3 mL/min； L； ；表3梯度洗脱程序时间（min）千分之一甲酸（%）乙腈（%）0.009912.0030703.0020806.0020806.109917.009911.5、质谱条件电离方式，电喷雾电离（E

25、SI+）；扫描方式：正离子扫描；离子源温度，110；脱溶剂气温度，380；锥孔气流，氮气，流速50L/h；去溶剂气流，氮气，流速600L/h；碰撞气，氩气，碰撞气压3.5010-4Mpa；检测方式，多反应监测（MRM）；多反应监测条件参见表4。表4 离子对、锥孔电压、碰撞气能量序号中文名称母离子（m/z）子离子（m/z）锥孔电压（V）碰撞能量（eV）1组1吡氟氯禾灵328.267*91.073628282.171822.4-二氯苯氧乙酸219.0319161.181824163吡氟禾草灵328.2791.13628282.2184丙炔氟草胺355.287379.20284462107.1835

26、585莠灭净228.3568.27383496.31266异丙草胺284.3573.21261843.28347敌草快363.4189.2230188氟乐灵366.23108.283448308.335229异噁草酮240.29125.213422219.81410甲咪唑烟酸276.3569.18384286.233611莠去津216.29174.33362296.312412虫酰肼353.013315222971813乙草胺270.35224.37241059.291614灭蝇胺167.2060.10382685.002415氟酰胺324.2993.193450262.292816啶虫咪223.256.102816125.902417吡虫啉256.60175.203018209.001418精噁唑禾草灵362.29288.32425091.31302组19三唑酮294.3569.313222197.361620氟硅唑316.35247.333818165.352621三唑醇296.3570.29201099.311622萎锈灵236.29143.23282443.214823腈菌唑289.3570.293616125.273424甲基托布津343.1090.902514151.002025嘧霉胺200.2982.26125236107.24683026烯酰吗啉388.10