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临检室作业指导书文档
临检室作业指导书
文件编号:
ZYJ-3-LJ-01~43
第A版
编制:
审核:
批准:
生效日期:
2006年8月8日
竹山县人民医院检验科
序号
主题内容
代号
页号
1
精液常规检查
ZYJ-3-LJ-01
5
2
粪便常规检查(直接涂片法)
ZYJ-3-LJ-02
8
3
粪便潜血试验定性(纸片法)
ZYJ-3-LJ-03
10
4
血疟原虫(MP)厚血片检查法
ZYJ-3-LJ-04
12
5
血疟原虫(MP)薄血片检查法
ZYJ-3-LJ-05
14
6
尿人绒毛膜促性腺激素定性
ZYJ-3-LJ-06
17
7
一小时尿沉渣计数
ZYJ-3-LJ-07
19
8
ABX-MICROS60红细胞计数
ZYJ-3-LJ-08
21
9
ABX-MICROS60白细胞检验
ZYJ-3-LJ-09
23
10
ABX-MICROS60白细胞分类计数
ZYJ-3-LJ-10
26
11
ABX-MICROS60血红蛋白检测
ZYJ-3-LJ-11
29
12
全血血细胞沉降率测定
ZYJ-3-LJ-12
31
13
ABX-MICROS60红细胞比积的测定
ZYJ-3-LJ-13
33
14
ABX-MICROS60平均红细胞体积检测
ZYJ-3-LJ-14
36
15
ABX-MICROS600血小板(PLT)测定
ZYJ-3-LJ-15
39
16
红细胞平均血红蛋白含量测定
ZYJ-3-LJ-16
42
17
红细胞平均血红蛋白浓度测定
ZYJ-3-LJ-17
44
18
尿液酸碱度测定(干法学法)
ZYJ-3-LJ-18
46
19
尿葡萄糖定性实验(干化学法)
ZYJ-3-LJ-19
49
20
尿蛋白定性测定(干法学法)
ZYJ-3-LJ-20
52
21
尿血红蛋白测定(干化学法)
ZYJ-3-LJ-21
55
22
尿胆原定性测定(干法学法)
ZYJ-3-LJ-22
57
23
脑脊液蛋白定性试验(潘氏法)
ZYJ-3-LJ-23
59
24
脑脊液外观检查(目测法)
ZYJ-3-LJ-24
62
25
脑脊液有形成分检查(显微镜法)
ZYJ-3-LJ-25
64
26
尿亚硝酸盐定性测定(干法学法
ZYJ-3-LJ-26
68
27
凝血酶原时间(PT)测定
ZYJ-3-LJ-27
70
28
活化部分凝血活酶时间测定
ZYJ-3-LJ-28
74
29
血浆纤维蛋白原(Fbg)测定
ZYJ-3-LJ-29
78
30
骨髓巨核细胞计数
ZYJ-3-LJ-30
82
31
前列腺液常规检查(玻片法)
ZYJ-3-LJ-31
84
32
异常白细胞检查(显微镜法)
ZYJ-3-LJ-32
85
33
异常红细胞检查(显微镜法)
ZYJ-3-LJ-33
89
34
浆膜腔积液粘蛋白定性检查
ZYJ-3-LJ-34
94
35
浆膜腔积液化学检查
ZYJ-3-LJ-35
97
36
浆膜腔积液外观检查(目测法)
ZYJ-3-LJ-36
100
37
浆膜腔积液有形成分检查
ZYJ-3-LJ-37
102
38
血球分析仪操作维护规程
ZYJ-3-LJ-38
105
39
ABO血型鉴定(生理盐水法)
ZYJ-3-LJ-39
109
40
阴道分泌物常规检查
ZYJ-3-LJ-40
114
41
血球分析仪操作手册
ZYJ-3-LJ-41
116
42
尿乳糜定性检查
ZYJ-3-LJ-42
117
43
网织红细胞计数
ZYJ-3-LJ-43
119
44
45
46
47
48
49
50
修订页
序号
文件编号
页码
需更改的内容
更改内容
批准人
批准日期
1
2
3
4
5
6
7
8
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11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
精液常规检查
1.实验原理
记录精液量、颜色、透明度、粘稠度和是否液化。
显微镜检查包括精子计数、活动力、活动率、形态。
2.标本采集
2.1标本采集前病人准备:
必须禁欲(包括遗精和手淫)3~7天。
这是因为少于48小时采取的精液,因相距时间太短,精液中精子的数量可能偏少,容易造成少精症的假象。
如果超过7天,精子活率、活力都有所下降,也可造成弱精子症的假象。
精液检查应间隔一周或两周,要进行2~3次检查。
因为一个人精子的产生在一年中,可因季节、气候等,诸多因素的影响而有一些变化。
2.2标本种类:
精液
2.3标本要求:
用清洁干燥小瓶收集,不应采用避孕套内精液。
3.标本储存:
立即送检。
4.标本运输:
室温运输,冬季需保温运输。
5.标本拒收标准:
久置标本,污染标本,避孕套内标本。
6.操作步骤
7.1记录精液量、颜色、透明度、粘稠度和液化时间。
7.2精子活动率:
取新鲜标本混匀后,在温玻片上用高倍镜观察100个精子,计数活动精子与不活动精子的比例,计算精子活动的百分率。
精子活动率=活动精子数/(活动精子数+不活动精子数)×100%
7.3取上述新鲜湿片标本,观察精子的活动力,可按下列五级报告:
0级:
精子完全不活动,加温后仍不活动;
I级:
精子运动不良,运动迟缓,原地打转或抖动,向前运动能力差;
II级:
精子活动较好,运动速度尚可,游动方向不定,呈直线或非直线运动,带有回旋;
III级:
为中速运动;
IV级:
精子活动好,快速直线运动,很快超越一个视野,活泼有力。
7.4精子计数:
7.4.1于试管内加精子稀释液0.38ml,吸液化精液20μl,加入稀释液内摇匀。
7.4.2充分摇匀后,滴入血细胞计数池内,静置1-2min,待精子下沉后,以精子头部作为基准进行计数。
7.4.3如精子数少,可计数两个大方格内精子数,总数乘以10万即为每毫升精液内精子数,再换算成×109/L报告。
7.4.4如精子数多,可计数5个中方格内精子数,总数乘以100万即为每毫升精液内精子数,再换算成×109/L报告。
7.5精子形态观察:
革兰氏或瑞氏染色后用油镜观察。
异常精子可有:
头部过大、过小、尖细、外缘不齐、双头等;中部消失、分枝或肿胀;尾部呈双尾,卷曲度短或消失(缺尾)。
7.6细胞:
红、白细胞<5/高倍视野。
7.7pH:
7.2-8.0,平均7.8。
7.8其它成分:
精液中可有结晶体、卵磷脂小体、淀粉样体、脂滴、脱落上皮细胞等。
8.结果判断与分析
8.1一般性状检查
8.1.1量:
正常人一次排精2~5ml。
8.1.2颜色和透明度:
正常刚射出的精液呈乳白色或灰白色,液化后呈半透明乳白色,久未排精者可呈淡黄色。
鲜红色或暗红色的血精见于生殖系统炎症、结核、和肿瘤,黄色脓样精液,见于精囊炎或前列腺炎。
8.1.3粘稠度和液化:
正常新鲜的精液排出后数秒呈粘稠胶冻状,在精液中纤溶酶的作用下30分钟后开始液化。
如果粘稠度降低呈米汤样,可能是精子数量减少,见于生殖系统炎症,精液不凝固见于精囊阻塞或损伤;如果精液1小时后不液化,可能是由于炎症破坏纤溶酶所致,如前列腺炎,精子不液化可以抑制精子活动力而影响受孕。
8.1.4酸碱度:
pH值。
正常精液呈弱碱性pH7.2-8.0,以利于中和酸性的阴道分泌物,pH值小于7或大于8都能影响精子的活动和代谢,不利于受孕。
8.2显微镜检查。
8.2.1精子存活率:
排精后30~60分钟,正常精子存活率应为80%~90%,精子存活率降低是导致不育的重要原因。
8.2.2精子活动力:
正常精子活动力应在III级以上,若>40%的精子活动不良,常是导致男性不育的重要原因。
精子活动力低,主要见于精索静脉曲张、泌尿生殖系统非特异性感染,应用某些药物如抗疟药、雄激素等所致。
8.2.3精子计数:
正常人精子计数为10~130×109/L,相当于一次排出的精子总数为400×106~600×106。
当精子计数值<20×106/ml或一次排精总数<100×106为精子减少,超过致孕极限而导致不育。
精液直接涂片或离心沉淀后均未查到精子为无精症。
见于先天性睾丸发育不全、畸形或后天睾丸损伤和萎缩(如睾丸结核、炎症、淋病、垂体或肾上腺功能异常的内分泌性疾病等)、输精管阻塞或是先天性输精管及精囊缺陷,是导致少精或无精的重要原因,也是导致不育的重要原因。
检查有无精子也是检查输精管结扎术的效果观察。
结扎六周后,连续检查无精子,说明手术成功,如果结扎两个月后,精液中仍有精子,说明手术不成功。
8.2.4精子形态:
正常精液中,异常形态精子应少于10%~15%,如果精液中异常形态精子数>20%,将会导致不育,可能是由于精索静脉曲张、血液中有毒代谢产物、铅污染等或应用大剂量放射线及使用细胞毒性药物导致的精子形态异常。
如果精液中发现>1%的病理性未成熟细胞,包括精原细胞、精母细胞和发育不完全的精细胞,提示睾丸的曲细精管的生精功能受到药物或其他因素影响或损伤。
如果精子凝集>10%,提示生殖道感染或免疫功能异常。
9.注意事项
9.1出现一次异常结果,应隔一周后复查,反复查2-3次才能得出比较正确的结果。
9.2如低倍镜、高倍镜检查均无精子,应将精液离心沉淀后再涂片检查,如两次均无精子,报告“无精子”。
10.操作性能:
快速简便
11.方法局限性:
易受人为主观经验不足影响结果判断。
12.参考文献
中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程(第二版).1997,149-150
粪便常规检查(直接涂片法)
1.实验原理:
本实验是利用肉眼观察粪便的颜色和性状,以及利用粪便生理盐水涂片在显微镜下观察涂片中是否有虫卵、幼虫、各种细胞、包囊、结晶等。
2.标本采集
2.1标本采集前病人准备:
无须特殊准备。
2.2标本种类:
粪便
2.3标本要求:
标本应取自粪便的不同部位特别是病理性改变比较明显的部位。
3.标本储存:
粪便应取指头大小存放于干燥、清洁、无吸水性的容器内。
粪便的容器必须有盖且有明显的标记。
4.标本运输:
室温运输。
5.标本拒收标准:
尿液、植物、泥土、污水等污染标本;干结粪便。
6.操作步骤
6.1肉眼观察粪的颜色、性状。
6.2再用竹片搜集少量不同部位的粪便标本,涂抹于滴有一滴生理盐水的洁净玻片上。
6.3盖上盖玻片,涂片的厚度以能透过印刷物字迹为准。
6.4先在低倍镜下观察有无包囊、虫卵、幼虫等,再在高倍镜下观察有无红细胞、白细胞、各种结晶,并观察粪便中的菌群分布。
7.结果判断与分析
7.1粪便颜色根据观察所见报告,如黄色、褐色、土灰色、绿色、红色、柏油样等。
正常粪便因粪胆素而呈棕黄色,但可因饮食、药物或病理原因影响而改变粪便颜色:
灰白色见于钡餐后、服硅酸铝、阻塞性黄疸、胆汁减少或缺乏;绿色见于食用含叶绿素的蔬菜后及含胆绿素时;红色见于下消化道出血、食用西红柿、西瓜等;柏油样便见于上消化道出血等。
酱色常见于阿米巴痢疾、食用大量咖啡、巧克力等;米泔水样见于霍乱。
7.2性状可报告为软、硬、糊状、泡沫状、稀汁样、血水样、血样、粘液血样、粘液脓样、有不消化食物等。
正常时为有形软便。
7.2.1球形硬便:
便秘时可见。
7.2.2粘液稀便:
见于肠壁受刺激或发炎时,如肠炎、痢疾和急性血吸虫病等。
7.2.3粘液脓性血便:
多见于细菌性痢疾。
7.2.4酱色粘液(可带脓)便:
多见于阿米巴痢疾。
7.2.5稀汁样便:
可见于急性肠胃炎,大量时见于伪膜性肠炎及了隐孢子虫感染。
7.2.6米泔样便并有大量肠粘膜脱落,见于霍乱等。
7.2.7扁平带状便:
可能因直肠或肛门狭窄所致。
7.3蛔虫、蛲虫、绦虫节片等较大虫体,肉眼即可分辩。
钩虫虫体常需将粪便冲洗过筛后方可看到。
服驱虫剂后排便时应检查有无虫体。
驱绦虫后应仔细寻找有无虫头。
8.临床意义:
为各类消化道疾病提供协助性诊断;查找并鉴别寄生虫。
9.操作性能:
快速简便
10.方法局限性:
有时会受主观因素的影响。
11.参考文献
中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程(第二版).1997,139-141
12.注意事项
12.1虫卵的报告方式:
未找到者注明“未找到虫卵”,找到一种报告一种,找到几种报告几种,并在该虫卵后面注明数量若干,以低倍视野计算。
12.2应注意将植物纤维及其细胞与寄生虫、人体细胞相鉴别,并注意有无肌纤维、结缔组织、弹力纤维、淀粉颗粒、脂肪小滴球等。
若大量出现,则提示消化不良或胰腺外分泌功能不全。
12.2细胞中应该注意红细胞、白细胞、嗜酸性粒细胞(直接涂片干后用瑞氏染色)、上皮细胞、巨噬细胞等。
12.3夏科-雷登结晶:
为无色或浅黄色两端尖而透明具有折光性的菱形结晶,大小不一。
常见于肠道溃疡,尤以阿米巴感染粪便中最易检出。
过敏性腹泻及钩虫病患者粪便亦常可见到。
12.4细菌:
占粪便净重的1/3(4000亿/g干粪),正常菌群主要是大肠杆菌和肠球菌,占80%;而过路菌(产气杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌等)不超过10%;芽孢菌(如梭状菌)和酵母菌为常住菌,但总量不超过10%。
正常菌群消失或比例失调可因大量应用抗生素所致,除涂片染色找细菌外,应采用不同培养基培养鉴定。
粪便潜血试验(ST-OBT)定性(纸片法)
1.实验原理:
粪便潜血纸片法是一种用于检测粪便中是否含有潜血的试剂。
反应原理如下:
血红素(Hb)+双氧水(H2O2)→水(H2O)+氧(O2)
氧(O2)+氨基比林→蓝紫色
2.标本采集
2.1标本采集前病人准备:
收集标本前三天禁食动物性食物、肝脏及含叶绿素食物、铁剂、中药以免引起假阳性反应。
2.2标本种类:
粪便
2.3标本要求:
标本应取自粪便的不同部位;收集标本后迅速检查,以免因长时间放置使潜血反应的敏感度降低。
3.标本储存:
粪便应取指头大小存放于干燥、清洁、无吸水性的容器内。
粪便的容器必须有盖且有明显的标记。
4.标本运输:
室温运输。
5.标本拒收标准:
久置硬结粪便。
6.试剂
6.1试剂名称:
隐血试剂带
6.2试剂生产厂家:
广州市花都高尔宝生物技术有限公司
6.3包装规格:
25人份/筒
6.4试剂盒组成:
6.4.1潜血试纸(OBPaper):
试纸上涂有氨基比林。
6.4.2标准色板
潜血试纸5pcs*60
6.5试剂储存条件及有效期:
25摄氏度以下干燥环境中保存,有效期内皆可使用。
7.操作步骤
7.1取一洁净干燥玻片,滴加生理盐水一滴。
7.2用竹片搜集少量不同部位之粪便,均匀涂抹于玻片上。
7.3将试剂带浸入粪便中,湿透(约1秒钟)后取出。
7.4在30至60秒内观察试剂带颜色并与标准色板对照,测得结果。
8.结果判断与分析
8.1试剂带呈现深绿色,报告为“+++”
8.2试剂带呈现绿色,报告为“++”
8.3试剂带呈现淡绿色,报告为“+”
8.4试剂带呈现黄绿色,报告为“弱阳性”
8.5试剂带呈现黄色,报告为“阴性”。
9.临床意义
9.1适合于检测粪便之潜血。
9.2消化道出血时(如溃疡病、恶性肿瘤、肠结核、伤寒、钩虫病等)本试验可阳性。
9.3消化道恶性肿瘤时,粪便潜血可持续阳性。
10.操作性能:
快速简便、安全性高、灵敏度适中。
11.方法局限性:
呈色反应与判读的时间控制会受主观因素影响
12.参考文献
中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程(第二版).1997,142-143
13.注意事项
13.1本品为一次性使用体外诊断试剂。
13.2超过有效期,不能使用。
血疟原虫(MP)厚血片检查法(手工法)
1.实验原理
应用瑞氏染色法对制备好的厚血片进行染色后在显微镜下查找疟原虫。
2.标本采集
2.1标本采集前病人准备:
间日疟及三日疟患者应在发作后数小时至10余小时采血;恶性疟患者,应在发作后20h左右采血。
2.2标本种类:
全血或末梢血
2.3标本要求:
厚血片的溶血要及时。
3.标本储存:
厚血片的放置期限在夏季不超过48h,冬季不超过72h。
4.标本运输:
室温运输。
5.标本拒收标准:
细菌污染。
6.操作步骤
6.1在洁净玻片上,滴患者血液2滴。
6.2用推片角将血液由内向外转涂成直径约1cm、厚薄均匀的血膜,在室温中自然干燥。
6.3在干燥的血膜上滴加蒸馏水数滴,完全覆盖血膜,溶血数分钟。
脱去血红蛋白的血膜呈浅灰色,倾去溶血液。
6.4不必待干,进行瑞氏染色。
6.5干后镜检。
7.结果判断与分析:
在油镜下观察20个视野或以上才能报告“未检出疟原虫”;发现虫体后还应在薄血片上进行分类鉴别。
8.临床意义:
本实验有利于提高疟原虫的阳性检出率。
9.操作性能:
快速简便、阳性检出率高、利于人群普查初筛。
10.方法局限性
10.1易受溶血不完全的影响。
10.2经验缺乏者易受其他杂物的影响。
10.3存在主观判断的失误。
10.4不易鉴别出疟原虫的种类。
11.参考文献
中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程(第二版).1997,85-86
12.注意事项
12.1染色后,水洗时不要先倒去染液,应让清水流进染液,使沉渣冲走。
12.2注意区别易与疟原虫混淆的其他杂物。
血疟原虫(MP)薄血片检查法(手工法)
1.实验原理
应用瑞氏染色法对制备好的薄血片进行染色后在显微镜下查找疟原虫,并鉴别其形态种类。
2.标本采集
2.1标本采集前病人准备:
间日疟及三日疟患者应在发作后数小时至10余小时采血;恶性疟患者,应在发作后20h左右采血。
2.2标本种类:
全血或末梢血
2.3标本要求:
薄血片的血膜厚度要适度均匀以利镜检。
3.标本储存:
室温存贮,尽快检查。
4.标本运输:
室温运输。
5.标本拒收标准:
细菌污染。
6.操作步骤
6.1以常法推制成薄片。
6.2血膜完全干燥后即可进行瑞氏染色。
6.3在油镜下进行检查。
7.结果判断与分析
在油镜下观察,进行形态鉴别。
薄血片上3种疟原虫形态特点:
形态特点
间日疟原虫
三日疟原虫
恶性疟原虫
(环状体)
早期滋养体
虫体大小
较大,
约为红细胞的1/3
较大,
约为红细胞的1/3
较小,
约为红细胞的1/6
细胞浆
浅蓝色,
呈较薄之环状
浅蓝色,
呈较厚之环状
浅蓝色,环状较细薄,常位于细胞之边缘,有时1个细胞内有2个环状体
染色质
可长得很大,甚至充满整个红细胞
与间日疟原虫同
红色小点,1个环状体具有1-2个-或更多
晚期滋养体
虫体大小
可长得很大,甚至充满整个红细胞
较小
在末梢血液中查不到
细胞浆
呈阿米巴状,
变化很多
呈坚实带状,
变化不多
疟色素
棕黄色,呈微小短杆状,四散分布
黄绿色,呈较粗颗粒状,四散分布
斑点
薛氏小点,鲜红细小,均匀分布
齐氏小点,红色
裂殖体
虫体大小
很大
较小
在末梢血液中查不到
细胞浆
松散,比较不规则
坚实较圆
裂殖子数目
12-24个,平均16个
6-12个
裂殖子形态
排列不规则
排列不规则或呈花朵状
配子母体
虫体大小
圆形,
约为红细胞1/2以上
圆形,与红细胞等大或较小
半月形,两端钝圆(雄),两端较尖(雌)
细胞浆
深蓝色
深蓝色
蓝色
染色质
结实,深红色,
位于一边
结实,深红色,
位于一边
结实,深红色,
位于中央
疟色素
沿边分布
沿边分布
黑褐色,密集于中央
红细胞
胀大,色较淡
正常或缩小
正常,偶然缩小,色深
8.临床意义:
本实验用于对疟原虫的形态进行鉴别分类。
9.操作性能:
快速简便、操作简单。
10.方法局限性
10.1阳性检出率较低。
10.2存在主观判断的失误。
11.参考文献
中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程(第二版).1997,85-86
12.注意事项
12.1染色后,水洗时不要先倒去染液,应让清水流进染液,使沉渣冲走。
12.2注意区别易与疟原虫混淆的其他杂物。
12.3薄片油镜检查,须找出100或100个以上视野才能报告“未检出疟原虫”。
12.4找到环状体后,须再仔细寻找更为成熟的阶段,以便分类。
如确实未找到更为成熟阶段的疟原虫,可报告为“检出环状体疟原虫”。
12.5有可能出现2种或3种疟原虫混合感染时,以间日疟与恶性疟原虫混合感染为常见,须注意鉴别。
尿