SysmexXS500i血液分析仪作业指导书.docx
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SysmexXS500i血液分析仪作业指导书
Sysmex-XS-500i血液分析仪作业指导书
SysmexXS-500i血液分析仪作业指导书
SysmexAutomatedHematologyAnalyzer(XS500i)血细胞分析仪是用于检测血细胞(红细胞、白细胞和血小板)数量和白细胞分类的仪器。
检测血液中血细胞数量的变化对临床有关疾病的诊断、观察疾病的变化及治疗效果具有重要参考价值。
1、检验目的
SysmexAutomatedHematologyAnalyzer(XS500i)血细胞分析仪是用于检测血细胞(红细胞、白细胞和血小板)数量和白细胞分类的仪器。
检测血液中血细胞数量的变化对临床有关疾病的诊断、观察疾病的变化及治疗效果具有重要参考价值。
2、原理
2.1XS500i采用一束半导体激光照射标本,并依据每个细胞产生的三种信号来相互区分,即前向散射光,侧向射散光和侧向光和侧向荧光。
前向散射光反映细胞体积,侧向散射光反映细胞内涵物,如核和颗粒,侧向荧光反映细胞脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)含量。
2.2.DIFF通道:
表面活性剂可完全溶解红细胞和血小板,部分溶解白细胞。
第2种试剂使核酸染上荧光染料。
XS500i的DIFF通道可将白细胞分成5类。
在STROMATOLYSER-4DL试剂中的表面活性剂可溶解或破坏红细胞和血小板,并在白细胞膜上打出小孔。
在STROMATOLYSER-4DS试剂中的聚次甲基染料可进入破损白细胞,与核酸和细胞器结合,经波长633nm的激光照射,所产生荧光强度与细胞核酸含量成一定比例。
在STROMATOLYSER-4DL试剂中的有机酸能与嗜酸性颗粒特异结合,根据侧向散射光信号强度,能提高嗜酸性粒细胞从中性粒细胞区分出来能力。
3、仪器
SYSMEXXS-500i自动血液分析仪
4、试剂:
4.1稀释液:
CELLPACK(PK-30L)
氯化钠:
6.38g/L
硼酸:
1.0g/L
四硼酸钠0.2g/L
EDTA-2K:
0.2g/L
4.2Hb溶血素:
SULFOLYSER(SLS-210A)
月桂洗硫酸钠:
1.7g/L
4.3STORMATOLYSER4DL(FFD-200A):
非离子表面活性剂:
0.18%
有机季铵盐:
0.08%
4.4WBC分类染液:
STORMATOLYSER4DS(FFS-800A)
聚次甲基染料:
0.002%
甲醇:
3.0%
1,2-亚乙基二醇:
96.9%
5.操作步骤:
5.1.打开电脑
5.2.双击“IPU”图标,出现IPU窗口和登陆对话框。
输入用户名和密码。
点击确认进入IPU。
5.3检查废液是否已满,并倒空。
打开主机电源,IPU与主机通信连接
5.4.主机初始化,然后做本底。
5.5本底通过后,主机指示灯变绿,表示仪器处于待机状态,可以开始检测质控标本了。
5.6.质控检测:
点击“手动”按钮,出现“手工样本号”对话框,在“手工样本号”对话框再点击“质控”按钮,出现“选择质控文件”对话框,选择好质控文件后,点击确认打开所选质控文件,混匀质控标本,按“开始”键开始分析质控样本,分析完后跳出质控样本分析结果,观察结果是否在控,若在控按“接受”按钮退出,开始检测病人样本,若失控按“取消”退出,查找原因,继续检测质控样本,直到质控结果在控。
5.7.样本分析:
点击“手动”按钮,出现“手工样本号”对话框,在“手工样本号”对话框输入样本号,选择分析模式“CBC+DIFF”,样本预稀释模式“是”或“否”。
点击确认,混匀样本,按“开始”键开始分析样本。
分析结束后在“浏览器”下的“主屏”界面,观看结果、直方图和散点图,判断是否需要复片。
5.8.关机:
双击“菜单”下的“关机”按钮,跳出“关机”对话框,点击“执行”按钮,主机自动冲洗2分钟,之后提示关闭主机电源,然后关IPU窗口退出程序,最后关闭电脑。
5.9仪器维护:
5.9.1.每日维护:
每天关机自动清洗,如24小时待机,则执行一次“菜单”下的“自动清洗”。
5.9.2.每周维护:
在“控制器”“保养”下执行排空废液,堵孔去除,去除气泡。
5.9.3.每月维护:
每月或1200次分析之后开展一次每月维护,在“控制器”“保养”“每月清洗”下执行,同时执行清洗废液瓶。
6.参考范围:
6.1.1.白细胞(WBC)计数:
成人(4–10)×109/L
儿童(5-12)×109/L
新生儿(15-20)×109/L
6.1.2.白细胞分类(成人):
中性粒细胞(50-70)%
淋巴细胞(20-40)%
嗜酸性粒细胞(0.5-5)%
嗜碱性粒细胞(0-1)%
单核细胞(3-8)%
6.2.红细胞(RBC):
男(4-5.5)×1012/L
女(3.5-5)×1012/L
新生儿(6-7)×1012/L
6.3血红蛋白(HGB):
男(120-160)g/L
女(110-150)g/L
新生儿(170-200)g/L
6.4.血小板(PLT):
(100-300)×109/L
6.5.血球压积(HCT):
男0.42-0.49
女0.37-0.43
6.6.平均红细胞体积(MCV):
(86-100)fl
6.7.平均红细胞血红蛋白含量(MCH):
(26-31)pg
6.8.平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC):
(310-370)g/L
6.9.红细胞体积分布宽度变异系数(RDW-CV):
(11.6-14.0)%;
6.10.红细胞体积分布宽度标准差(RDW-SD):
(39.0-46.0)fL。
6.11.血小板体积分布宽度(PDW):
(15.5-18.1)%
6.12.平均血小板体积(MPV):
(9.4-12.5)fl;
6.13.大血小板比率(P-LCR):
(13-43)%。
7.临床意义:
7.1.白细胞
7.1.1.白细胞计数
7.1.1.1生理性增加新生儿、运动、饭后、冷水浴后、疼痛、月经期、受寒、妊娠、分娩、阵发性心动过速、阳光或紫外光照射、抽搐、恶心、呕吐、麻醉等。
7.1.1.2.病理性增加类白血病、白血病、急性化脓性细菌感染、急性溶血、急性失血、单核细胞增多症、淋巴细胞增多症、真性红细胞增多症、腮腺炎、病毒性肝炎、淋巴瘤、组织坏死、手术后、肿瘤转移、药物中毒、代谢性酸中毒、过敏等。
7.1.1.3.减少伤寒、副伤寒、斑疹伤寒、兔热病、布鲁杆菌热、流感、麻疹、风疹、革登热、传染性肝炎(亦可增多)、疟疾、过敏性休克、系统性红斑狼疮、粟粒性结核、败学症、重症细菌感染、恶液质、放射治疗、肿瘤化疗。
恶性贫血、非白细胞性贫血、再生障碍性贫血、脾功能亢进、戈谢病、Felty综合症、Che^diak-Higashi综合症、阵发性睡眠性血红蛋白尿症等。
7.1.2白细胞分类计数:
见下述各种白细胞增多、减少的临床意义
中性粒细胞(N)
1)生理性N增多:
饱餐、激动、剧烈运动、高温、严寒可使N暂时性增高、新生儿、月经期、妊娠5个月以上可增高,生理性增多都是—过性的,不伴有白细胞质量变化
2)病理性中性粒细胞增高:
原因很多,大致归为反应性增多和异常增生性增多两大类:
反应性增多是机体对各种病因刺激的应激反应,动员骨髓贮存池中的粒C释放或边缘池粒C进入血循环。
因此,增多的粒C大多为成熟的分叶核粒C或较成熟的杆状核粒C,而异常增生性增多为造血组织中原始或幼稚粒C大量增生,释放至外周血中的主要是病理性粒C。
④急性失血,可能与大出血所致的缺氧和机体的应激反应,动员骨髓贮存池中的血细胞释放有关。
⑤急性中毒
⑥恶性肿瘤非造血系统恶性肿瘤有时可出现持续性WBC增高,以N为主,可能的机制为:
a.肿瘤组织坏死的分解产物刺激骨髓中的粒细胞释放
b.某些肿瘤如肝Ca、肾Ca等肿瘤细胞可产生促粒细胞生成因子
c.恶性肿瘤骨髓转移破坏骨髓对粒细胞释放的调控作用。
异常增生性增多:
见于粒C白血病如AML、CML,骨髓增殖性疾病。
中性粒细胞减少:
①感染性疾病
病毒感染:
流感、麻诊、风诊、肝炎;细菌:
伤寒,严重的细菌感染
年老:
慢性消耗疾病或晚期恶性肿瘤伴感染→预后差
②血液系统疾病
非白血性白血病恶性贫血
③物理化学因素、放射线、核素、毒物、药物
④单核-巨噬C系统功能亢进,脾亢
⑤其它过敏性休克
淋巴细胞
增高:
生理性增高:
儿童,出生4-6天的可达50%,4-6岁后逐渐减低
病理性增高:
百日咳、传染性单核细胞增多症、淋巴细胞性白血病、传染淋巴细胞增多症、病毒性肝炎、弓形虫病
减低:
急性感染、粟粒性结核、晚期肿瘤、艾滋病、伴T淋巴细胞减少的免性缺陷
单核细胞
增高:
单核细胞性白血病、系统性红斑狼疮、亚急性细菌性心内膜炎、活动性结核、急性感染恢复期、原虫感染
减低:
使用皮质类固醇激素、再生障碍性贫血、多毛细胞白血病
嗜碱性粒细胞
增高:
慢粒、何杰金病、癌转移、铅和铋中毒等;减低无意义。
嗜酸性粒细胞
增高:
①变态反应性疾病哮喘荨麻诊药物过敏
②寄生虫病血吸虫、丝虫、囊虫
③皮肤病:
湿诊剥脱性皮、银屑病
④血液病:
CML、LyphomaE白血病
⑤某些急性肿瘤:
肿瘤转移或有坏死灶的恶性肿瘤
⑥某些传染病,传染病感染期,E常减低,唯有猩红热急性期E增加
⑦其它,风湿性疾病,垂体前叶功能减退,肾上腺皮质功能减退
⑧高E综合征,少见,这组疾病包括肺浸润和E增高,过敏性肉芽肿,E心内膜炎
减低:
临床意义较小,长期应用皮质激素后
7.2.红细胞(RBC):
7.2.1.生理性减少:
见于妊娠中后期、6个月至2岁的婴儿等。
7.2.2.病理性减少:
造血原料不足、造血功能障碍、红细胞破坏过多或失血所引起的各种贫血。
7.2.3.相对性增多:
主要因血浆容量减少所致,见于脱水、呕吐、腹泻、多尿、多汗、大面积烧伤、吸烟、高血压、肥胖等。
7.2.4.代偿性增多主要见于缺氧、新生儿、高原环境、CO中毒、严重肺气肿、肺源性心脏病、先天性心脏病、心衰等。
7.2.5.绝对性增多克隆性真性红细胞增多;非隆性红细胞增多,与促红细胞生成素产生过多有关,见于肾癌、肝细胞癌、雄激素分泌细胞肿瘤、肾囊肿、肾盂积水、肾移植、小脑血管瘤、子宫肌瘤。
7.3血红蛋白(HCG):
生理性增加:
新生儿、高原居住者。
病理性增加:
真性红细胞增多症、代偿性红细胞增多症(如先天性青紫性心脏病、慢性肺性疾病、脱水)。
减少:
各种贫血、白血病、产后、手术后、大量失血。
7.4红细胞比积(HCT):
与红细胞计数、血红蛋白测定的意义类同7.5。
7.5血小板(PLT):
7.5.1.生理性正常人血小板在一天内可有6%-10%变化;表现为早晨低,午后较高;春季低,冬季略高;平原较低,高原较高;静脉血比毛细血管血高10%;月经前低,后升高;妊娠中晚期升高,分娩后减低;运动后升高,休息后恢复。
7.5.2病理性
减少:
除创伤之外,血小板减少是引起出血的常见原因。
常见疾病有:
①、血小板生成障碍,如急性白血病、再生障碍性贫血;②、血小板破坏过多,如ITP、脾功能亢进,系统性红斑狼疮;③、血小板消耗过多,如DIC、血栓性血小板减少性紫癜。
增多(血小板大于400×109/L):
①、骨髓增生性疾病:
慢性粒细胞白血病,真性红细胞增多症;②、原发性血小板增多症;③、急性大出血,急性溶血,急性化脓性感染;④、脾切除手术后。
7.6.MCV、MCH、MCHC
主要用于贫血的形态学分类,见下表
贫血的形态学分类
贫血的形态学分类MCV(fL)MCH(pg)MCHC(g/L)
大红细胞性贫血100-16035-50310-370
正红细胞性贫血80-10027-35310-370
单纯小细胞性贫血72-8021-26300-370
小细胞低色素性贫血50-8012-30240-300
7.7.RDW-CV、RDW-SD:
7.7.1.用于缺铁性贫血的诊断和疗效观察,缺铁性贫血时RDW增大,经治疗后可恢复正常。
7.7.2.用于小细胞低色素性贫血的鉴别,缺铁性贫血时RDW增大,而轻型珠蛋白生成障碍性贫血时RDW正常。
7.7.3.RDW与MCV结合可将贫血分为6种。
①小细胞均一性:
MCV下降,RDW正常,如轻型珠蛋白生成障碍性贫血。
②小细胞不均一性:
MCV下降,RDW增大,如缺铁性贫血。
③正常细胞均一性:
MCV、RDW均正常,如某些慢性疾病。
④MCV正常,RDW增大,如早期缺铁性贫血。
⑤大细胞均一性:
MCV增大,RDW正常,如再生障碍性贫血。
⑥大细胞不均一性:
MCV、RDW均增大,如巨幼细胞性贫血。
7.8.MPV、PDW、P-LCR
7.8.1.MPV其临床意义要结合PLT的变化才二价值。
①、鉴别血小板减少的原因:
当骨髓造血功能损伤致血小板减少时,MPV减少;当血小板在周围血液中破坏增多时,导致血小板减少,MPV增大;血小板分布异常致血小板减少时,MPC正常。
②、MPV增大可作为骨髓造血功能恢复的较早期指征:
骨髓造血功能衰竭时,MPV与PLT同时持续下降;造血功能抑制越严重,MPV越小;当造血功能恢复时,MPV增大常先于PLT升高。
③、其它:
MPV增大见于骨髓纤维化、ITP、血栓性疾病及血栓前状态、脾切除、慢粒、巨大血小板综合症、镰刀细胞性贫血;MPV减小见于脾亢、化疗后、AA、巨幼细胞性贫血等。
7.8.2.PDW是反映血小板体积大小的异质性参数,增大见于急淋化疗后、巨幼细胞性贫血、脾切除、慢粒、巨大血小板综合症、血栓性疾病等;可用于鉴别原发性血小板增多症和反应性血小板增多症,前者PDW增加,后者PDW正常。
7.8.3.P-LCR代表血小板计数中体积>12fL的血小板的比值或数量,有助于识别堆集血小板、大血小板和细胞碎片,并可监测骨髓的造血功能
8.标本采集:
随机采取病人静脉血或末梢血数滴,用100g/LEDTA-K2抗凝(20ul抗凝1ml血,相当于2mgEDTAK2/1ml血)。
9.注意事项:
9.1.血细胞计数应用EDTA-K2为抗凝剂,用量为EDTA-K2*2H2O1.5—2.0mg
可抗凝1ml血不能用肝素或枸橼酸钠等抗凝剂。
9.2.采集后在室温中贮存不应超出6h;如需制用血涂片应在2h内完成。
9.3.测定前抗凝血应充混匀,任何小凝块或血小板聚集均会影响血细胞计数。
9.4.注意病理因素对血液分析仪使用的影响,特别是各系统的报警提示。
如是否有大血小板对血小板计数的影响;有无有核红细胞对白细胞计数的影响等等。
9.5.如有冷凝集现象,将血置37℃水浴箱10min后立即测试。
10.质量控制:
10.1.每日工作开始应先做上海市临床检验中心的全血质控品,。
10.2.出现失控,应校正后并重做质控,直至符合质控要求。
10.3.按要求做好仪器校正和仪器对比工作。
10.4.做好质控、失控和校正登记。
11.报告复查:
对以下情况的样本进行复查(仪器及手工)
(1)白细胞不分类或者分类不完全(初检、复检);
(2)白细胞计数不出结果:
——(初检、复检);
(3)单核细胞≥15%(初检)
(4)淋巴细胞≥50%(初检)
(5)Blast?
报警信息(初检、复检),ImmatureGran?
(初检、复检)
(6)血液科标本(初检、复检)及临床要求手工镜检标本
(7)MCHC>380g/L(初检、复检)
协商后设定(经临床检验科讨论后)
(8)WBC总数(WBC<3×109/L或WBC>30×109/L)(初检)
(9)PLT计数(PLT<80×109/L或PLT>600×109/L)(初检)
NRBC(有核红细胞)?
与AtypicalLympho?
(异淋?
),PLTClumps