届苏教版酶的应用技术实践单元测试1.docx
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届苏教版酶的应用技术实践单元测试1
酶的应用技术实践单元测试
一、单选题
1．下列有关酶制剂应用的叙述，正确的是
A.纤维素酶可用于处理棉、麻制品，使其柔软
B.加酶洗衣粉的洗涤效果总比普通洗衣粉好
C.固定化葡萄糖异构酶可催化一系列化学反应
D.腐乳前期发酵主要依赖毛霉产生的淀粉酶
【答案】A
【解析】试题分析：
纤维素酶可催化纤维素水解为小分子物质，因此可用于处理棉、麻制品，使其柔软，A项正确；酶的催化作用需要适宜的条件，若洗涤条件不适宜，其洗涤效果不一定比普通洗衣粉的洗涤效果好，B项错误；固定化葡萄糖异构酶只能催化葡萄糖转化为果糖，不能催化一系列化学反应，C项错误；腐乳前期发酵主要是依赖毛霉分泌蛋白酶将蛋白质分解为小分子肽和氨基酸，D项错误。
考点：
本题考查酶制剂应用、腐乳的制作的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络结构的能力。
2．下列有关固定化酶和固定化细胞的说法，正确的是（）
A．固定化酶和固定化细胞都能反复使用但酶的活性迅速下降
B．固定化酶技术一次只能固定一种酶
C．某种固定化酶的优势在于能催化一系列生化反应
D．固定化技术常用的方法有包埋法、化学结合法、吸附法
【答案】D
【解析】固化酶和固定化细胞都能反复使用，且酶的活性不会下降，A错误；固定化细胞技术能固定一系列的酶，B错误；固定化细胞的优势在于能催化一系列生化反应，固定化酶只能催化一种化学反应，C错误；固定化技术包括包埋法、物理吸附法和化学结合法（交联法），由于细胞相对于酶来说更大，难以被吸附或结合，因此多采用包埋法，固定化酶常用物理吸附法，D正确。
【考点定位】制备和应用固相化酶
【名师点睛】固定化酶、固定化细胞的比较：
固定化酶
固定化细胞
酶的种类
一种
一系列酶
制作方法
吸附法、交联法、包埋法
吸附法、包埋法
营养物质
不需要
需要
缺点
不利于催化一系列的酶促反应
反应物不宜与酶接近，尤其是大分子物质，反应效率下降
优点
①既能与反应物接触，又能与产物分离；②可以反复利用
成本低，操作简单
3．下列有关酶的制备和应用叙述正确的是
A.酶解法和吸水涨破法常用于制备微生物的胞内酶
B.透析、电泳和酸解等方法常用于酶的分离与纯化
C.棉织物不能使用添加纤维素酶的洗衣粉进行洗涤
D.多酶片中的胃蛋白酶位于片剂的核心层
【答案】A
【解析】利用酶解法和吸水涨破法使细胞解体，用于制备胞内酶；酶的纯化和分离的方法有透析法、离心沉降法和电泳法；纤维素酶能去除棉纺织品表面浮毛，平整织物表面，故可用添加纤维素酶的洗衣粉洗涤棉织物；多酶片中的胃蛋白酶位于片剂的最外层，保持其他酶在胃中不被破坏。
4．下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述，错误的是
A.温度、pH值是固定化酶活性的重要限制因素
B.利用包埋法固定化细胞时，包埋材料需具有较好的透水、透气性
C.利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类的作用只是作为反应底物
D.与固定化酶相比，固定化细胞对酶活性的影响更小
【答案】C
【解析】酶的活性受温度、pH值等因素的影响，A正确；利用包埋法固定化细胞时，包埋材料需具有较好的透水、透气性，B正确；利用固定化酵母细胞进行发酵时，糖类除了作为反应底物外，还为酵母菌提供碳源，C错误；固定化细胞内的酶有细胞膜的保护，所以比固定化酶对酶活性的影响更小，D正确。
【考点定位】制备固定化细胞和固定化酶
【名师点睛】固定化酶、固定化细胞的比较：
固定化酶
固定化细胞
酶的种类
一种
一系列酶
制作方法
吸附法、交联法、包埋法
吸附法、包埋法
是否需要营养物质
否
是
缺点
不利于催化一系列的酶促反应
反应物不宜与酶接近，尤其是大分子物质，反应效率下降
优点
①既能与反应物接触，又能与产物分离②可以反复利用
成本低，操
5．下列关于果胶酶说法，不正确的是
A．果胶酶可以分解细胞壁的主要成分果胶
B．果胶酶是由半乳糖醛酸聚合而成的一种高分子化合物
C．果胶酶不特指某种酶，而是分解果胶的一类酶的总称
D．果胶酶的活性受T、PH、酶活性抑制剂的影响
【答案】B
【解析】
试题分析：
果胶酶是一种蛋白质，由氨基酸聚合而成的一种高分子化合物，所以C错误。
考点：
本题考查酶的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
6．下列有关固定化酶和固定化细胞的说法正确的是（）。
A．某种固定化酶的优势在于能催化系列生化反应
B．固定化细胞技术一次只能固定一种酶
C．固定化酶和固定化细胞的共同点是所固定的酶都可以反复使用
D．固定化酶和固定化细胞都能反复使用，但酶的活性迅速下降
【答案】C
【解析】某种固定化酶只能催化一种生化反应，其优势是酶可以反复利用；固定化细胞技术一次能固定多种酶；固定化酶和固定化细胞都能反复使用，并且固定化细胞酶的活性影响较小。
7．下列有关酶活力的叙述中，正确的是
A．温度越高，酶活力越大B．酶活力越高，酶催化反应速率越大
C．酶活力的大小由底物浓度决定D．酶活力的大小由酶的浓度决定
【答案】B
【解析】
8．尿素分解菌能分解尿素是因为可以合成（）
A．素酶B．酶C．蛋白酶D．细菌酶
【答案】B
【解析】尿素分解菌能分解尿素的原理是可以合成脲酶。
9．下列有关生物技术实践应用的叙述，正确的是（）
A．固定化酶技术在多步连续催化反应方面优势明显
B．与自然发酵相比，人工接种发酵获得的产品品质更好
C．相同pH时，加酶洗衣粉洗涤效果好于普通洗衣粉
D．向鸡血细胞中加入冷却的95%的酒精，可以获得无杂质的DNA
【答案】B
【解析】
试题分析：
固定化酶技术固定的是一种酶只能催化一种或一类反应，不能多步连续催化反应，A错误；人工接种发酵所用的菌种好于自然菌种，所以发酵获得的产品品质更好，B正确；适宜PH条件下加酶洗衣粉洗涤效果才能好于普通洗衣粉，C错误；向鸡血细胞中加入冷却的95%的酒精，可以对DNA进行粗提纯，D错误。
考点：
本题考查有关生物技术实践应用的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。
10．生物体内的酶很容易降解、失活，洗衣粉中的酶却能在较长时间内保持活性，原因是（ ）
A.洗衣粉中的酶活性不受温度影响
B.洗衣粉中的酶外层有特殊的化学物质层层包裹
C.生物体内的酶是蛋白质，洗衣粉中的酶是无机物
D.加入的酶种类很多，总有一部分保持活性
【答案】B
【解析】生物体内的酶活性受温度影响，洗衣粉中酶活性也受温度影响，A错误；洗衣粉中的酶外层有特殊的化学物质层层包裹，使洗衣粉中的酶却能在较长时间内保持活性，B正确；生物体内的酶是蛋白质，洗衣粉中的酶也是蛋白质，C错误；加酶洗衣粉的酶不易失活，原因是该酶是通过基因工程生产出的特殊酶；用特殊化学物质将酶包裹，使其与洗涤剂隔离；加酶洗衣粉的酶能耐酸、耐碱、耐较高温度和能忍受表面活性剂，D错误。
11．下列有关酵母细胞固定化实验操作目的及结果分析，错误的是（）
A．干酵母细胞处于休眠状态，需置于蒸馏水中活化
B．配制海藻酸钠溶液时需要
小火或间断加热，以防海藻酸钠焦糊
C．若海藻酸钠的浓度偏低时凝胶珠呈白色，固定的细胞数目过少
D．凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡时间的长短，不影响发酵效果
【答案】D
【解析】干酵母细胞处于休眠状态，需置于蒸馏水中活化，A正确；配制海藻酸钠溶液时需要
小火或间断加热，以防海藻酸钠焦糊，B正确；若海藻酸钠的浓度偏低时凝胶珠呈白色，固定的细胞数目过少，C正确；凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡时间的长短，影响发酵效果，D错误。
【考点定位】本题主要考查酵母细胞固定化技术。
12．下面是制备固定化酵母细胞的步骤，正确的是（）
①配制CaCl2溶液②海藻酸钠溶化③海藻酸钠与酵母细胞混合
④酵母细胞的活化⑤固定化酵母细胞
A．①②③④⑤B．④①③②⑤C．④⑤②①③D．④①②③⑤
【答案】D
【解析】
试题分析：
制备固定化酵母细胞的步骤是：
细胞的活化、配制物质的量浓度为0.05mol/L的CaCl2溶液、配制海藻酸钠溶液、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合、固定化酵母细胞，故D正确。
考点：
本题考查固定化细胞的有关知识，意在考查考生识记能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
13．在设计生物实验时，往往要科学地设计对照实验，在研究温度和pH对果胶酶活性的影响时，是否设置了对照实验，是什么对照实验
A．不需要对照实验B．有对照，空白对照
C．有对照，相互对照D．有对照，自身对照
【答案】C
【解析】
试题分析：
研究温度和pH对果胶酶活性的影响时，需要设计相互对照。
考点：
本题主要考查对照的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解，把握知识间的内在联系的能力。
14．下图中所示的固定化酶技术中属于包埋法的一组是
A.①②B.①③④C.①④D.③④
【答案】D
【解析】试题分析：
包埋法即将酶包埋于网格或胶囊中如图③、④所示，图中①为吸附法，②为化学结合法，D正确。
考点：
本题考查固定化酶技术的知识。
意在考查能用文字、图表以及数学方式等多种表达形式准确地描述生物学方面的内容。
15．下列关于酶和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述，正确的是（）
A．作为消化酶使用时，蛋白酶制剂以口服方式给药
B．从酶的固定方式看，吸附法比交
联法对酶活性影响大
C．探究加酶洗衣粉洗涤效果时实验中，洗涤方式、水温、浸泡时间等都属无关变量
D．将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗，目的是洗去CaCl2和杂菌
【答案】ACD
【解析】
试题分析：
酶的固定方式有包埋法、化学结合法和物理吸附法，物理吸附的过程是利用吸附剂本身的表面张力，从而对附近的分子产生吸附，吸附剂不会与被吸附物质发生化学反应而使其发生性质改变，所以吸附法对酶活性影响很小，B错误；消化酶在人体消化道内发挥作用，蛋白酶制剂一般在最外面加上糖衣后通过口服方式给药，A项正确；探究加酶洗衣粉洗涤效果时实验中，洗涤方式、水温、浸泡时间等都属无关变量,C正确；制备固定化酵母细胞时，将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗的目的是洗去CaCl2和杂菌，防止凝胶珠硬度过大和杂菌的污染，D项正确。
考点：
本题考查固定化酶和酵母细胞的固定化的知识，意在考查学生对所学知识要点的理解以及学生把握知识间内在联系的能力。
16．固定化酶技术是近几年新兴发展起来的一项酶应用技术，它很好的解决了酶的重新利用的能力，大大提高了酶的利用率，从而避免了酶的浪费问题。
下列关于固定化酶技术的说法正确的是（）
A．固定化酶技术就是固定反应物,将酶依附着载体围绕反应旋转的技术
B．固定化酶的优势在于能催化一系列的酶促反应
C．固定化酶中的酶无法重复利用
D．固定化酶是将酶固定在一定空间内的技术
【答案】D
【解析】
试题分析：
固定化酶技术是利用物理或化学方法将酶固定在一定空间内的技术，包括包埋法、化学结合法和物理吸附法，A项错误，D项正确；固定化酶的优势在于既能与反应物接触，又能与产物分离，并可以被反复利用，B、C项错误。
考点：
本题考查固定化酶技术的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
17．下列关于生物技术实践的叙述中，正确的是
A．用移液管稀释菌液时，吹吸三次的目的是使菌液获得充足的氧气
B．参与制作果酒、果醋和腐乳的菌种中只有毛霉是真核生物
C．海藻酸钠溶液浓度过髙会导致制作的凝胶珠颜色过浅呈白色
D．变酸的果酒表面观察到的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的
【答案】D
【解析】用移液管稀释菌液时，吹吸三次的目的是使菌液与水充分混匀，A错误；参与制作果酒酵母菌为真菌，B错误；海藻酸钠溶液浓度过低会导致制作的凝胶珠颜色过浅呈白色，C错误；在变酸的果酒表面观察到的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的，D正确。
【考点定位】测定某种微生物的数量；制备和应用固相化酶；酒酵母制酒及乙酸菌由酒制醋
【名师点睛】实验操作中，用移液管稀释菌液时，吹吸三次的目的是使菌液与水充分混匀，海藻酸钠溶液浓度过低会导致制作的凝胶珠颜色过浅呈白色，用花菜提取DNA时加入食盐目的是溶解DNA，参与制作果酒酵母菌为真菌
18．下列关于固定化酶的说法，正确的是（）。
A.酶的种类多样，可催化一系列的酶促反应
B.酶被固定在不溶于水的载体上，可反复利用
C.酶作为催化剂，反应前后结构不改变，所以固定化酶可永远利用下去
D.固定化酶由于被固定在载体上，所以丧失了酶的高效性和专一性特点
【答案】B
【解析】固定化酶不能催化一系列酶促反应的进行；固定化酶被固定在不溶于
水的载体上，可以重复利用，但是随着利用次数的增加，受到外界因素的影
响，其活性会逐渐降低；固定化酶具有高效性和专一性的特点。
19．下列生物中不能产生果胶酶的是
A．植物 B．动物C．霉菌D．酵母菌
【答案】B
【解析】动物没有细胞壁，不能产生果胶酶。
20．下列有关固定化酵母技术的叙述中正确的是（）
A．实验中需要先利用蒸馏水消耗酵母细胞中的有机物
B．固定化酵母细胞的常用方法是吸附法，这种方法对酵母细胞活性影响最小
C．实验中使用CaCl2溶液处理的目的是使酵母细胞处于感受态，提高发酵效率
D．若最终凝胶珠的颜色泛白，可能是由于海藻酸钠的浓度偏低
【答案】D
【解析】略
二、非选择题
21．下图1表示制备固定化酵母细胞的某步操作，图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图，请据图分析回答：
（1）图1中，将溶化好的海藻酸钠溶液，加入已活化的酵母细胞，进行充分搅拌，使其混合均匀，再转移至注射器中。
（2）图1中X溶液为，其作用是。
（3）某同学在图1步骤结束后得到右图所示的实验结果，出现此结果的可能原因有海藻酸钠浓度过（“高”或“低”）或注射器中的混合液推进速度过（“快”或“慢”）。
（4）图1中制备的凝胶珠用后再转移到图
2装置中，发酵过程中搅拌的目的是。
【答案】
（1）冷却至室温
（2）CaCl2溶液使海藻酸钠形成凝胶珠
（3）高快
（4）蒸馏水洗涤为了使培养液与酵母菌充分接触（2分）
【解析】
试题分析：
（1）刚溶化的海藻酸钠要冷却至室温，才能与活化的酵母细胞混合制备混合液，以免高温使酵母细胞失活，
（2）混合液加入CaCl2溶液进行固定化酵母细胞，故图1中X溶液为CaCl2溶液，CaCl2的作用是使海藻酸钠形成凝胶珠。
（3）图3中所示的凝胶珠不是圆形或椭圆形，说明海藻酸钠浓度偏高或注射器中的混合液推进速度过快形成的。
（4）制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤（去除残留的CaCl2）后再转移到图2装置中进行发酵，发酵过程中搅拌的目的是使培养液与酵母细胞充分接触，以利于发酵过程的顺利进行。
考点：
本题考查固定化细胞相关知识，意在考查考生能从课外材料中获取相关的生物学信息，并能运用这些信息，结合所学知识解决相关的生物学问题。
22．草莓汁酸甜适口,深受大众喜爱，加工草莓汁时，草莓中的果胶易导致果汁浑浊，影响品质，为探究制作果汁的最佳条件，研究人员进行了实验，结果如下表所示。
组别
果胶酶用量（mL/kg）
pH
温度（℃）
草莓汁透光率（％）
1
0.025
2.5
35
24.55
2
0.035
4.5
35
96.47
3
0.035
2.5
45
22.70
4
0.045
3.5
35
96.47
5
0.045
2.5
55
13.12
请回答：
（1）草莓细胞中，去掉果胶，会使植物组织变得松散，这是因为果胶具有____________的作用。
果胶酶通过_______________作用促进果胶的水解反应，使草莓细胞彼此容易分开。
（2）生产过程中，既可获得澄清度高的草莓汁，又可减少酶的用量，降低成本的条件组合是第_______组。
为测定该组条件下处理后的草莓汁中是否还有果胶，可取一定量的草莓汁与等量的_______________混合。
（3）果胶酶可从某些微生物如______________中提取，为提高生产效率，可将此酶固定在适宜介质上制成___________________。
（4）在合适条件下，将果胶酶与海藻酸钠混合后，滴加到一定浓度的钙离子溶液中，使液滴形成凝胶固体小球。
该过程是对酶进行__________。
A.吸附B.包埋C.装柱D.洗涤
【答案】将植物细胞粘合在一起催化295%乙醇黑曲霉（或苹果青霉）固定化酶B
【解析】试题分析：
根据表格分析，该实验的自变量有果胶酶用量，pH、温度，因变量是草莓汁透光率，草莓汁透光率越高，说明果胶酶分解程度越高，因此表格中2、4组酶的酶的用量与pH组合最佳，且说明35℃比较适宜。
（1）植物细胞壁的成分主要为纤维素和果胶，果胶具有将植物细胞粘合在一起的作用；根据酶的专一性，果胶酶通过催化作用促进果胶的水解反应，使草莓汁澄清。
（2）分析表格可知，草莓汁透光率越高，果胶分解的越充分，表格中组别2和组别4草莓汁的澄清度最高，而组别2的酶用量少，可以降低成本；为测定该组条件下处理后的草莓汁中是否还有果胶，可取一定量的草莓汁与等量的95%乙醇混合。
（3）果胶酶可从某些微生物如黑曲霉（或苹果青霉）中提取，为提高生产效率，可将此酶固定在适宜介质上制成固定化酶。
（4）固定化酶和固定化细胞的方法主要有包埋法、物理吸附法和化学结合法。
题干所述方法是将提纯的果胶酶与海藻酸钠混合后，滴加到一定浓度的钙离子溶液中，使液滴形成凝胶固体小球，所以该过程属于包埋法。
【点睛】解答本题的关键是分析表格数据，根据草莓汁透光率越高，果胶分解的越充分，确定2和4组实验的分解效率高，且2组酶的用量少，从而确定最佳的实验组合。
23．为探究洗衣粉加酶后的洗涤效果，将一种无酶洗衣粉分成3等份，进行3组实验。
甲、乙组在洗衣粉中加入1种或2种酶，丙组不加酶，在不同温度下清洗同种化纤布上的2种污渍，其他实验条件均相同，下表为实验记录。
请回答下列问题。
水温/℃
10
20
30
40
50
组别
甲
乙
丙
甲
乙
丙
甲
乙
丙
甲
乙
丙
甲
乙
丙
清除血渍
时间/min
67
66
88
52
51
83
36
34
77
11
12
68
9
11
67
清除油渍
时间/min
93
78
95
87
63
91
82
46
85
75
27
77
69
8
68
（1）提高洗衣粉去污能力的方法有过__________________________________。
甲组在洗衣粉中加入了_____________________________________________。
乙组在洗衣粉中加入了_____________________________________________。
（2）甲、乙组洗涤效果的差异，说明酶的作用具有________________________。
（3）如果甲、乙和丙3组均在水温为80℃时洗涤同一种污渍，请比较这3组洗涤效果之间的差异并说明理由_____________________________________。
【答案】
（1）加酶和适当提高温度蛋白酶蛋白酶和脂肪酶
（2）专一性（3）没有差异，因为高温使酶失活
【解析】本题考查解读表格的能力和运用所给信息处理实验问题的能力。
（1）根据所给信息，提高洗衣粉去污能力的方法有加酶和适当提高温度。
（2）加的酶的种类不同，洗涤效果有差异，说明酶的专一性充分体现。
（3）解读表格可以看出，没有差异，因为高温使酶失活。
24．杨梅果酒具有很高的营养价值及养生价值，下图为生产杨梅果酒的主要工艺流程。
请回答下列问题：
（1）生产果酒常用的菌种是____________，酒精发酵的适宜温度为____________。
（2）为提高果汁的澄清度和出汁率，步骤②常添加的酶是____________，步骤④常往果汁中加入一定的蔗糖，控制总糖含量在18%〜24%，加入蔗糖的主要目的是____________。
（3）发酵前常往果汁中添加一定量的偏重亚硫酸钾，一方面可以起到调整果汁pH的作用，同时还能缓慢释放出SO2，对原料和成品起____________作用，但偏重亚硫酸钾用量不宜过多，否则会____________，从而影响发酵过程。
（4）工业生产中利用重铬酸钾溶液检验酒精的原理是________________________。
【答案】酵母菌18〜25℃果胶酶为酵母菌进行细胞呼吸提供原料、提高果酒的产量和口味杀菌抑制酵母菌的生长酸性条件下，酒精可与重铬酸钾溶液发生反应，使溶液由橙色变成灰绿色
【解析】试题分析：
熟记并理解果酒制作的原理、实验操作的流程、注意事项以及果胶酶的作用等相关基础知识，形成清晰的知识网络。
在此基础上，从题意和图示中提取有效信息并对相关的问题情境进行作答。
（1）生产果酒常用的菌种是酵母菌。
20℃左右最适合酵母菌繁殖，因此酒精发酵时一般将温度控制在18〜25℃。
（2）果胶酶分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，使果胶水解为半乳糖醛酸，从而提高水果的出汁率，并使果汁变得澄清。
可见，为提高果汁的澄清度和出汁率，步骤②常添加的酶是果胶酶。
步骤④为酒精发酵，往果汁中加入蔗糖的主要目的是：
为酵母菌进行细胞呼吸提供原料、提高果酒的产量和口味。
（3）发酵前常往果汁中添加一定量的偏重亚硫酸钾，一方面可以起到调整果汁pH的作用，同时还能缓慢释放出SO2，对原料和成品起杀菌作用，但偏重亚硫酸钾用量不宜过多，否则会抑制酵母菌的生长，从而影响发酵过程。
（4）工业生产中利用重铬酸钾溶液检验酒精的原理是：
酸性条件下，酒精可与重铬酸钾溶液发生反应，使溶液由橙色变成灰绿色。
25．果酒、面包制作需要酵母菌，酵母菌可以用液体培养基（培养液）来培养，培养液中酵母菌种群的增长情况与发酵食品的制作有密切关系。
（1）酵母菌与醋酸杆菌相比，在结构上的主要区别是。
（2）土壤是酵母菌的大本营，若从含有酵母菌、醋酸菌、青霉菌、毛霉等的土壤中分离到较纯的酵母菌，最简便的方案是在条件下选择培养。
（3）通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数，血球计数板每个大方格由400个小方格组成，容积为0．1mm3。
如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应先后再计数。
若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有5个酵母菌，则10mL该培养液中酵母菌总数有个。
（4）酵母细胞多采用__________法固定化。
固定酵母细胞时首先将干酵母放入_________中活化，若制得凝胶珠颜色过浅，可能因为。
【答案】
（1）有核膜包被的细胞核
（2）无氧（3）稀释2×108（4）包埋蒸馏水海藻酸钠浓度过低
【解析】
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