复方蜥蜴散不同微粒组合剂对急性酒省略elin及胃黏膜病理精.docx
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复方蜥蜴散不同微粒组合剂对急性酒省略elin及胃黏膜病理精
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第13卷第7期2011年7月
辽宁中医药大学学报
JOURNALOFLIAONINGUNIVERSITYOFTCM
Vol.13No.7Jul.,2011
复方蜥蜴散不同微粒组合剂对急性酒精性胃黏膜损伤模型
大鼠血清Ghrelin及胃黏膜病理组织学的影响
郭利民,朱西杰,李卫强,朱微微,张静霜,徐丽华,苏维霞
(宁夏医科大学中医学院,宁夏银川750004
摘要:
目的:
研究复方蜥蜴散不同微粒组合剂对大鼠急性胃黏膜损伤的保护作用。
方法:
SD雄性大鼠随机
分为正常组,模型组,预防组(蜥蜴散组一、铝碳酸镁组一、蜥蜴散组二、铝碳酸镁组二。
正常组、模型组灌胃给予生理盐水,蜥蜴散组一、铝碳酸镁组一灌胃给予复方蜥蜴散不同微粒组合剂、铝碳酸镁,30min后正常组灌胃给予生理盐水,其余各组给予无水乙醇灌胃;蜥蜴散组二、铝碳酸镁组二灌胃给予复方蜥蜴散不同微粒组合剂、铝碳酸镁,60min后再给予无水乙醇灌胃。
用ELISA检测血清ghrelin的水平并观察胃黏膜组织病理学改变。
结果:
预防治疗组
大鼠血清ghrelin水平明显高于模型组(P<0.01
。
复方蜥蜴散不同微粒组合剂能减轻乙醇所致胃黏膜损伤,改善胃黏膜病理组织学损害。
结论:
复方蜥蜴散不同微粒组合剂对无水乙醇诱导的急性胃黏膜损伤有预防保护作用。
关键词:
急性胃黏膜损伤;复方蜥蜴散不同微粒组合剂;血清ghrelin;病理组织学
中图分类号:
R573文献标识码:
A文章编号:
1673-842X(201107-0073-03收稿日期:
2011-01-20
基金项目:
国家自然科学基金资助项目(30860360作者简介:
郭利民(1981-,女,河南洛阳人,2008级硕士研究生,研究方向:
中医治疗消化系统疾病的研究。
通讯作者:
朱西杰(1963-,男,陕西长安人,教授、主任医师,硕士研究生导师,研究方向:
中医药治疗消化系统疾病的临床及实验研究。
EffectsofDifferentCombinationofCompoundLizardsPowderonSerumGhrelinandPathologic
ChangesofGastricMucosaonEthanolInducedAcuteGastricMucosaInjuryModelinRatGUOLi-min,ZHUXi-jie,LIWei-qiang,ZHUWei-wei,ZHANGJing-shuang,XULi-hua,SUWei-xia(TraditionalChineseMedicalCollegeofNingxiaMedicalUniversity,Yinchuan750004,Ningxia,China
Abstract:
Objective:
ToexploretheprotectiveeffectofDifferentcombinationofCompoundLizardsPowder(DCLPonratwithacutegastricmucosalinjure.Methods:
MaleSDratwererandomlydividedintonormalgroup,modelgroup,treatinggroup(DCLPgroupone,Hydrotalcitegroupone,DCLPgrouptwo,Hydrotalcitegrouptwo.Normalsalinewasadministratedtonormalandethanoltomodelgroupviagastricirrigation.DCLP1andhydrotolcite1weretreatedwithDCLPorhydrotalciterespectively30minbeforeethanolwasadministrated.DCLP2andhydrotolcite2weretreatedwithDCLPorhydrotalciterespectively60minbeforeethanolwasadministrated.SerumghrelinwasdetectedviaELISAandhistopathologicalchangeof
gastricmucosawasobserved.Result:
Comparedwithmodelgroup,thelevelofserumghrelinintheratsofthe总之,突发性耳聋的中医病因病机研究需要
我们运用循证医学、临床流行病学和医学统计学的方法进行严格设计、衡量与评价,取得科学的结论。
◆
参考文献
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辽宁中医药大学学报13卷
复方蜥蜴散不同微粒组合剂(以下简称蜥蜴散是导师朱西杰教授的临床验方,以宁夏密点麻蜥粉、鹿角霜粉、海螵蛸粉、白术粉、半枝莲粉等药物为主组成。
经临床观察该复方对胃黏膜损伤引起的疾病有较好的疗效。
本研究建立无水乙醇诱导的急性胃黏膜损伤大鼠模型,观察复方蜥蜴散不同微粒组合剂对大鼠急性胃黏膜损伤的保护作用及机制,为临床应用和推广该复方提供客观的科学实验依据。
1 材 料
1.1 动物
清洁级雄性SD大鼠54只,体量(200±20g,由宁夏医科大学实验动物中心提供,合格证号sc-xk(宁2005-001。
1.2 药物及试剂
复方蜥蜴散不同微粒组合剂(复方蜥蜴散粉碎后过80目筛和过100目筛不同微粒混合由宁夏医科大学中医消化病研究所提供。
铝碳酸镁:
0.5g/片,广西南宁百会药业集团有限公司生产,批号:
090805。
无水乙醇:
天津市科密欧化学试剂有限公司(含量>95%,批号:
20090109。
0.9%氯化钠注射液:
陕西德福来药业有限公司生产,批号:
0908071701。
Ghrelin酶联免疫试剂盒:
GBD-596.LOT#G080-10EXP2010OCT。
1.3 主要仪器
Z323K台式离心机:
德国赫墨公司。
550酶标仪:
美国Bio-Rad公司。
DK-S24电热恒温水浴锅:
上海精宏实验设备有限公司。
1575型洗板机:
美国Bio-Rad公司。
2 方 法
2.1 药物配制
(1蜥蜴散糊剂:
蜥蜴散经过粉碎、高温灭菌、蒸2.5h,晾干后,用双蒸水配成0.28g/mL糊剂混悬液备用[1-2]。
(2铝碳酸镁混悬液:
5g铝碳酸镁溶于100mL生理盐水中备用。
2.2 动物分组及给药
实验前大鼠适应性喂养1周,给予标准配方的清洁级饲料喂养,自由摄食和饮水。
将54只SD大鼠分为6组(每组9只:
A正常组;B模型组;C蜥蜴散组一;D铝碳酸镁组一;E蜥蜴散组二;F铝碳酸镁组二。
A组给予生理盐水(10mL/kg灌胃,30min后给予如前同样处理;B组给予生理盐水(10mL/kg灌胃、C组给予蜥蜴散(10mL/kg灌胃、D组给予铝碳酸镁(10mL/kg灌胃,30min后各组均给予无水乙醇(10mL/kg灌胃;E组给予蜥蜴散(10mL/kg灌胃,F组给予铝碳酸镁(10mL/kg灌胃,60min后各组均给予无水乙醇(10mL/kg灌胃。
全部大鼠给予无水乙醇灌胃后于0、30、60min分别处死各组3只大鼠。
2.3 观察方法与指标
实验前大鼠禁食24h,禁水8h,10%水合氯醛
溶液腹腔注射麻醉,剖腹,心脏取血2mL在4℃,3500r/min条件下离心10min分离血清,-20℃冻存,待测ghrelin。
测定方法采用ELISA法,严格按试剂盒说明书操作。
距贲门和幽门1.5cm离断取出全胃,沿胃大弯侧剖开,冰生理盐水冲洗后,滤纸吸干铺开,取损伤最严重的一段1cm×0.5cm的胃组织,固定于10%的中性福尔马林溶液中24h,石蜡包埋,常规切片,HE染色,观察病理组织学改变。
2.4 统计学方法
采用SPSS11.5统计分析软件进行统计,计量数据以均数±标准差表示,组间差异采用单因素方差分析检验,P<0.05表示有统计学意义。
3 结 果
3.1 大体观察
正常对照组大鼠胃黏膜光泽红润,无充血水肿及出血灶(图A1;模型组大鼠胃黏膜明显充血水肿,呈暗红色条索状或片状出血,并有出血坏死(图B1;蜥蜴散组一大鼠胃黏膜有条索状出血(图C1;铝碳酸镁组一大鼠胃黏膜有条索状及小片状出血(图D1;蜥蜴散组二大鼠胃黏膜轻度充血水肿,伴有散在出血点(图E1;铝碳酸镁组二可见黏膜充血水肿,有条索状出血(图F1
。
A1正常对照组B1
模型组
C1蜥蜴散组一D1
铝碳酸镁组一
E1蜥蜴散组二F1铝碳酸镁组一
图1各组大鼠胃黏膜大体观察
3.2 胃黏膜组织病理
正常对照组黏膜无损伤,腺体结构完整,排
alltreatinggroupwassignificantlyhigher(P<0.01,andthepathologicchangesofinjuredgastricmucosaweresignificantlyimproved.Conclusion:
DifferentcombinationofCompoundLizardsPowdercanprotecttheethanol-inducedacutegastricmucosainjury.
Keywords:
acutegastricmucosalinjury;differentcombinationofcompoundlizardspowder;ghrelin;pathologyhistology
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13卷辽宁中医药大学学报
列整齐,层次清楚(图A2;模型组胃黏膜表面上皮细胞变性,黏膜充血,腺体细胞水肿,黏膜下层局灶性出血(图B2;蜥蜴散组一黏膜轻度充血水肿,有少量炎细胞浸润(图C2;铝碳酸镁组一局部微灶性出血,可见炎细胞浸润(图D2;蜥蜴散组二腺体结构基本完整,黏膜下层轻度水肿(图E2;铝碳酸镁组二黏膜轻度充血,腺体细胞水肿(图F2
。
A2正常对照组B2
模型组
C2蜥蜴散组一D2
铝碳酸镁组一
E2蜥蜴散组二F2铝碳酸镁组一
图2各组大鼠胃黏膜组织病理观察
3.3 大鼠血清ghrelin检测结果
见表1。
各预防治疗组与模型组比较
(P<0.01
说明复方蜥蜴散不同微粒组合剂和铝碳酸镁均可提高血清中ghrelin含量。
E组与C
组比较有差异(P<0.05
F组与D组相比有差异(P<0.05
说明造模前60min给药预防效果优于造模前30min给药。
表1 各组大鼠血清Ghrelin含量的比较(ng/mL,x—
±s
组别
0min
30min60min正常组(A0.018±0.0370.019±0.0490.018±0.083模型组(B0.016±0.0750.013±0.028▲0.011±0.054▲蜥蜴散组一(C0.016±0.0130.015±0.0430.016±0.017铝碳酸镁组一(D0.018±0.0250.015±0.0720.017±0.039蜥蜴散组二(E0.017±0.0620.018±0.056★0.018±0.092★铝碳酸镁组二(F0.018±0.0410.018±0.087★★0.018±0.035
注:
组一(C、D造模前30min给药;组二(E、F造模前60min给药。
与其它各组比较,▲P<0.01;与C组比较,★P<0.05;与D组比较,★★P<0.05。
4 讨 论
急性胃黏膜病变以胃黏膜急性损伤为主要的病理改变。
药物、乙醇、感染性因素、应激因素以及不良饮食习惯等因素均可致病,其发生机制复杂,致病因子多样化,但无论何种致病因子最终都致使胃黏膜的屏障功能受损和防御机能减弱而发病[3]。
Ghrelin是生长激素促泌剂受体的内源性配
体,Ghrelin与其受体结合后可以促进胃肠蠕动,
诱发移行性复合运动III相提前出现,加速胃排空[4-5]
。
胃运动功能异常可使损害因素消除减缓,加重胃黏膜损伤。
Ghrelin可以减轻胃动力异常的不良影响,从而达到保护胃黏膜的作用。
Ghrelin亦是重要的胃黏膜保护因子,可通过中枢和外周机制对酒精所致的急性胃黏膜损伤起保护作用。
Konturek等[6]研究Ghrelin可使胃黏膜血流量及组胺显著升高,从而发挥对胃黏膜损伤的保护作用。
复方蜥蜴散不同微粒组合剂在临床应用中对胃黏膜损伤引起的各种疾病有较好的疗效。
复方蜥蜴散不同微粒组合剂以蜥蜴科的动物密点麻蜥的全体为主药清热解毒,活血行气,祛瘀散结。
蜥蜴生活在沙漠之中,能适应恶劣的自然环境,而且遇敌常断尾逃生,不久尾可重生,有研究表明此药对人类组织损伤有再生和修复功能,且
能增强人体免疫功能[7]
。
现代研究证实海螵蛸可调节胃酸分泌或中和胃酸,降低血管通透性,改
善黏膜血流,提高胃黏膜屏障能力
[8-9]
。
半枝莲可促进胃肠运动,并且有增强免疫力的作用[10]。
诸药合用可增加胃黏膜血流量,改善胃运动功能,促进有害因素消除等实现对急性胃黏膜损伤的保护。
本实验证实,复方蜥蜴散不同微粒组合剂对急性酒精性胃黏膜损伤有明显的预防保护作用。
在实验中,预防治疗组与模型组比较(P<0.01
说明复方蜥蜴散不同微粒组合剂和铝碳酸镁均可提高血清中Ghrelin的水平达到保护作用。
复方蜥蜴散不同微粒组合剂组与铝碳酸镁组比较血清Ghrelin水平虽无明显差异,但复方蜥蜴散不同微粒组合剂组对胃黏膜病理损伤的改善要优于铝碳酸镁组,说明复方蜥蜴散不同微粒组合剂对胃黏膜的综合保护作用要优于铝碳酸镁,其机制有待进一步研究。
◆
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