附子高压蒸制降毒工艺研究模板.docx

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附子高压蒸制降毒工艺研究模板

SHAANXIINSTITUTEOFINTERNATIONALTRADE＆COMMERCE

本科生毕业论文（设计）

论文题目：

附子高压蒸制降毒工艺研究

院（系）：

医药学院（药学系）

专业：

药物制剂

学号：

105058

姓名：

何忠安

指导教师：

崔於

二零一四年五月

郑重声明

本人呈交的学位论文，是在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，所有数据、图片资料真实可靠。

尽我所知，除文中已经注明引用的内容外，本学位论文的研究成果不包含他人享有著作权的内容。

对本论文所涉及的研究工作做出贡献的其他个人和集体，均已在文中以明确的方式标明。

本学位论文的知识产权归属于培养单位。

本人签名：

日期：

摘要

通过正交试验优选附子的高压蒸制工艺。

以双酯型生物碱含量、总生物碱含量及外观质量为综合评价指标，系统研究加压蒸制工艺对附子中所含乌头碱类生物碱成分的影响，对高压蒸制时间、压力及水处理方式3个因素进行考察，采用L9（33）正交试验法优选附子的高压蒸制工艺，进一步优化附子炮制工艺，并研究该工艺的适用性。

附子最佳高压蒸制工艺为A2B2C2，即附子经润湿法处理后，O.10MPa压力下蒸制150min。

该优选的工艺简便、易行、可控，可作为代替附子传统炮制工艺的新方法。

关键词：

附子；高压蒸制；正交设计；生物碱

Abstract

Tooptimizehighpressuresteamingprocessofaconitumcarmichaelii.OrthogonaltestwasusedtooptimizehighpressuresteamingprocessofA.carmichaeliiwithappearancequality，thecontentofdiesterditerpenoidalkaloidsandtotalalkaloidascomprehensiveevaluationindex，Systemstudypressuresteamedintheprocessoflateralrootcontainstheinfluenceofaconitinetypealkaloidscomponent,highpressuresteamingtime,pressureandsofteningwaywereselectedasfactors.Furtheroptimizationoftheprocessingoflateralprocess,theapplicabilityofthestudyoftheprocess.0ptimumhighpressuresteamingtechnologywasA2B2C2，thatoftreatedbywettingmethod，steamed150minat0.10MPa．Thisoptimizedprocesswassimple，practicalandeasytocontrol，itcouldbeusedasanewmethodtoreplacetraditionalprocessingtechnologyofA．carmichaelii.

Keywords:

Aconitumcarmichaelii；highpressuresteaming；orthogonaldesign；alkaloid

目录

1绪论1

1.1选题背景1

1.2选题意义1

2国内外发展状况2

2.1国外研究现状述评2

2.1.1附子及其制剂临床应用研究2

2.2国内研究现状述评2

2.2.1附子主要化学成分3

2.2.2附子炮制工艺及含量测定研究3

2.2.3附子配伍减毒增效3

2.2.4附子应用毒性控制4

2.2.5附子相关药理实验4

3研究内容5

3.1基源研究5

3.2产地加工5

3.3炮制方法研究5

4高压蒸制工艺研究6

4.1实验方法6

4.1.1实验材料及仪器6

4.1.26种酯型生物碱的含量测定色谱条件6

4.1.3制备对照品溶液6

4.1.4供试品溶液制备6

4.1.5标准曲线的制备7

4.1.6精密度实验7

4.1.7稳定性实验7

4.1.8重复性实验7

4.1.9加样回收试验8

4.1.10样品测定8

4.2总生物碱的含量测定8

4.3高压蒸制工艺的优选8

4.4验证试验及炮制前后生物碱含量比较10

5结论12

5.1生物碱含量变化规律12

5.2黑顺片验证实验工艺12

5.3附子高压蒸制工艺的可行性12

5.3附子高压蒸制工艺的发展前景12

参考文献13

致谢15

1绪论

1.1选题背景

毛茛科植物乌头AconitumcarmichaeliiDebx.的子根的加工品，附子具有回阳救逆、补火助阳、逐风寒湿邪的功效，被历代医家首肯。

本课题已成功申报陕西省教育厅课题。

附子辛、甘，大热；有毒。

归心、肾、脾经。

具有回阳救逆，补火助阳，逐风寒湿邪的功能，用于亡阳虚脱、宫冷、心腹冷痛、虚寒吐泻、阴寒水肿、阳虚外感、寒湿痹痛。

炮附子以温肾暖脾为主，用于心腹冷痛、虚寒吐泻。

淡附子长于回阳救逆、散寒止痛，用于亡阳虚脱、肢冷脉微、阴寒水肿。

《吴普本草》载“大毒”，《名医别录》载“有大毒”，说明古人对附子的毒性有充分的认识。

生附子有毒，加工炮制后毒性降低，便于内服。

产地加工盐附子的目的是防止药物腐烂，利于贮存。

加工成黑顺片、白附片后毒性降低，可直接用药。

附子，分布于长江中、下游；北至秦岭和山东东部，南至广西北部，主产于四川、陕西、安徽、浙江、江苏，多为栽培品。

附子在我国传统医学中应用广泛、历史悠久,早在《神农本草经》中就有附子的记载，《伤寒论》、《金匮要略》中的很多方剂也含附子，以后历代本草书中大多有附子的记载。

现代药理研究表明附子具有以下作用：

强心、抗心肌缺血缺氧、强心率、对抗缓慢型心律失常，抗炎，对中枢神经系统（镇痛），降糖，抗肿瘤、抗衰老等作用。

1.2选题意义

附子所含的乌头碱等酯型生物碱既是有效成分，又是毒性成分，且安全范围小，有效的炮制可使双酯型生物碱水解成单酯型生物碱达到降毒存效的效果。

目前还不能做到同时存在控制附子毒性和保存疗效的炮制工艺规范，同时未有文献表明附子安全性和有效性的质量标准[1]。

2010年版《中国药典》中附子的制法为常压蒸法和煮法相结合，无具体工艺规范，该方法耗时耗能，需炮制人员凭经验来判断炮制终点，可控性较低，且炮制过程中有效成分损失严重。

本课题的研究对于附子炮制减毒存效具有一定的意义，可实现附子炮制生产的规范化，有效地提高附子药材的社会效益和经济效益，具有重要的现实意义。

2国内外发展状况

2.1国外研究现状述评

附子的主要成分为乌头碱，其中剧毒的双酯型生物碱为主要活性成分。

因有很强的毒性，曾用多种减毒方法进行炮制。

尽管在汉方医学中附子是重要的生药之一，但在日本药典生药总则的468品目中，未包括附子，亦没有规定鉴定试验及质量评定的方法。

2.1.1附子及其制剂临床应用研究

附子及其制剂临床应用研究是最多的，如曾对服用含有附子的汉方方剂患者进行调查，认为除了本身的副作用外，季节因素、煎煮器等都会引起生物碱的变化，因此服药指示是非常重要的。

中田真司[2]用当归芍药散加附子使长期应用甲氨蝶呤（MTX）治疗类风湿关节炎出现的间质性肺炎、全身倦怠等副作用得以改善。

日本学者报道了4例运用薏苡附子败酱散治疗获效的病例，认为该方对阴证偏虚（病程迁延，抵抗力低下的状态）；皮肤干燥（未必是全身性的，仅是局部表现亦可）。

另外，对无回盲部周围抵抗、放射性压痛者，该方亦有效[3]。

日本研究与应用麻黄附子细辛汤较多，除单方使用之外，还与桂枝汤合方治疗过敏性鼻炎，与桂枝汤去芍药合方而成桂姜枣草黄辛附汤治疗慢性头痛、感冒等症，均获较好疗效[4]。

也有学者研究表明临床治疗过程中若疗效不明显时，加用少量附子可提高疗效[5]。

日本学者曾从我国产乌头中分离出次乌头碱、乌头碱和新乌头碱,另一种称为卡乌碱。

1974年小管卓夫[6]等从日本乌头中分离得到一种水溶性的无色板状结晶，稀释至10亿分之一浓度对离体蛙心仍显示强心活性，定名为higenamine（消旋去甲乌药碱）。

2.2国内研究现状述评

中药附子自古以来为中医常用植物药之一。

《神农本草经》中列为下品，收为大热之药，用以治疗“阳衰欲脱身凉肢冷脉微欲绝”，是回阳救逆的药物，也是古代温剂中常用的生药。

多年来医药科学工作者对附子的生药、炮制、方剂、化学、药理、毒性和临床等方面进行了广泛的研究，以期减少毒性，增加疗效，寻找有效成分阐明药物作用的机理。

近代医药学的研究认为附子对神经系统、循环系统、泌尿器官、物质代谢等方面都具有作用。

目前各个方面还在进行着广泛的研究。

2.2.1附子主要化学成分

附子毒性物质成分主要为乌头碱、新乌头碱、次乌头碱等乌头属类生物碱，主要有效成分为消旋去甲乌药碱、去甲猪毛菜碱等生物碱，而乌头碱、新乌头碱、次乌头碱既是毒性成分又是有效成分[7]。

此外，还分离出具有药理活性的氯化甲基多巴胺等。

2.2.2附子炮制工艺及含量测定研究

附子在6月下旬至8月上旬，采挖后，除去母根、须根及泥沙，习称“泥附子”，再以食用胆巴等经长时间加工成下列规格:

“盐附子”、“黑顺片”、“白附片”，甘草，黑豆[8-9]制淡附片，亦有用豆腐制者。

2010年版《中国药典》中对附片（黑顺片和白附片）质量的要求：

含双酯型生物碱以新乌头碱、次乌头碱和乌头碱的总量计（不得过0.020％），含生物碱以乌头碱计，不得少于1.0%，含苯甲酰乌头原碱和苯甲酰次乌头原碱及苯甲酰新乌头原碱的总量不得少于0.010%为质量控制指标。

煎煮时间与方法上选择附子宜热水煎煮40min以上或者直接煎煮50min以上[10]。

经实验证明附子皮中生物碱的含量高，毒性大，为了保证其临床有效性与安全性，黑顺片与白附片临床应用应有所区分[11]。

黑顺片和白附片之间的相似度较高，盐附子与他们之间的相似度较低[12]。

研究表明煎煮能有效减小附子毒性且总生物碱含量基本不变，为临床大剂量使用附子提供依据。

炮制方法研究方面，采用高效液相色谱法分析附子炮制品中4个生物碱的含量，结果是双酯型生物碱的量都得到有效降低，但单酯型生物碱的含量明显增加。

说明它与《中国药典》炮制法一样，具有相同的炮制减毒功效。

2.2.3附子配伍减毒增效

附子与干姜、甘草配伍减毒增效：

研究表明附子配伍甘草后合煎液毒性成分低于单煎液，但附子配伍甘草后对附子抗炎和镇痛药效没有明显影响。

采用紫外分光光度法测定不同附子炮制品与干姜不同比例配伍前后总生物碱的煎出量各不相同，但配伍干姜后总生物碱煎出量均增加。

说明热性的附子配伍热性的干姜后增强了附子回阳救逆等功效，也印证了“附子无姜不热”这一传统的药性理论。

2.2.4附子应用毒性控制

应用附子时应当注意配伍药物以防范其毒性作用。

《本草经集注》：

“俗方每用附子，皆须甘草、人参、生姜相配者，正制其毒也。

”李可老中医在应用附子时常配伍炙甘草，当与乌头合用时再加防风、黑小豆30g，蜂蜜150g。

万一有附子中毒时，李可老中医应用经验方（生大黄、防风、黑小豆、生甘草各30g，蜂蜜150g）煎汤送服生绿豆粉30g，均在40min内救活患者[13]。

王均宁[14]等通过统计分析3188首含有附子的方剂，