分子生物学考试知识点研究生.docx

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分子生物学考试知识点研究生

名词解释

1、沉默子（silencer）：

某些基因的负性调节元件，能够同反式因子结合从而阻断增强子及反式激活因子的作用，并最终抑制该基因的转录活性。

2、启动子：

是RNA聚合酶特异性识别和结合，并启动转录的特定DNA序列。

至少包括一个转录起始点以及一个以上的功能组件。

3、复制子（replicon）：

是从一个DNA复制起点开始的DNA复制区域，是独立完成复制的功能单位

4、终止子（terminatorT）：

是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列。

5、增强子（enhancer）：

指远离转录起始点、决定基因的时间和空间特异性、增强启动子转录活性的DNA序列。

其发挥作用的方式通常与方向、距离无关。

6、操纵子：

每一个由若干个结构基因及其上游的调控序列组成的转录区段，共同组成一个转录单位。

一个操纵子只含一个启动序列（promoter）及数个可转录的编码基因。

7、结构基因：

基因中编码RNA或蛋白质的DNA序列。

大多数真核生物结构基因的DNA序列由编码序列和非编码序列两部分组成。

8、重复基因：

指染色体上存在多数拷贝基因。

重复基因往往是生命活动最基本，最重要的功能相关的基因。

9、断裂基因：

编码序列中间插入的无编码作用的碱基序列。

10、重叠基因：

指两个或两个以上的基因共有一段DNA序列，或是指一段DNA序列成为两个或两个以上基因的组成部分。

11、管家基因：

在生物体中有些基因的表达在生命的全过程中都是必需的．是维持细胞最低功能所必不可少的基因．在一个生物个体的几乎所有细胞中持续表达，这些基因称为管家基因。

12、跳跃基因（jumpinggene）:

转座子每次移动时携带着转座必需的基因一起在基因组内跃迁，所以转座子又称跳跃基因（jumpinggene）。

是那些能够进行自我复制，并能在生物染色体间移动的基因物质。

13、假基因（pseudogene）：

一种核苷酸序列同其相应的正常功能基因基本相同，但却不能合成出功能蛋白质的失活基因。

14、密码子:

信使RNA分子中每相邻的三个核苷酸编成一组，决定多肽链上一个氨基酸或一种信号，称为密码子或三联体密码。

遗传密码特点：

1.方向性；2.连续性；3.简并性；4.通用性；5摆动性

15、反密码子：

是位于tRNA反密码环中部、可与mRNA中的三联体密码子形成碱基配对的三个相邻碱基。

在蛋白质的合成中，起解读密码、将特异的氨基酸引入合成位点的作用。

16、通用密码：

指在大部分生物中都编码相同氨基酸的一类遗传密码子，是生物界普遍采用的遗传密码。

18、副密码：

tRNA分子上决定其携带氨基酸分子的区域称为。

19、单顺反子（monocistron）：

即一个编码基因转录生成一个mRNA分子，经翻译生成一条多肽链。

20、基本转录因子（generaltranscriptionfactors）：

是RNA聚合酶结合启动子所必需的一组蛋白因子，决定三种RNA（mRNA、tRNA及rRNA）转录的类别。

21、特异转录因子（specialtranscriptionfactors）：

为个别基因转录所必需，决定该基因的时间、空间特异性表达。

22、微小RNA（microRNA,miRNA）：

是一大家族小分子非编码单链RNA，长度约20~25个碱基，由一段具有发夹环结构，长度为70~90个碱基的单链RNA前体（pre-miRNA）经Dicer酶剪切后形成。

23、反义DNA：

人工合成的与待封闭基因的某一区段互补的正常或者化学修饰的DNA片段，用来抑制或者封闭这一基因表达。

24、反义RNA：

是指核苷酸序列与其调控的RNA序列互补的RNA序列。

25、核酸分子杂交：

单链的核酸分子在合适的条件下，与具有碱基互补序列的异源核酸形成双链杂交体的过程称核酸分子杂交。

26、顺式作用元件（cis-actingelement）：

一般说来，调节序列与被调控的编码序列位于同一条DNA链上，称为顺式作用元件。

27、反式作用因子（trans-actingfactor）：

调节序列远离被调控的编码序列，实际上是其他分子的编码基因，只能通过其表达产物来发挥作用，这些蛋白质分子称为反式作用因子。

28、第一信使：

细胞间的信息物质，是由细胞分泌的调节靶细胞生命活动的化学物质的统称，包括蛋白质和肽类（如生长因子、细胞因子、胰岛素等）、氨基酸及其衍生物（如甘氨酸、甲状腺素、肾上腺素等）、类固醇激素（如糖皮质激素、性激素等）、脂酸衍生物（如前列腺素）、气体（如一氧化氮、一氧化碳）等。

29、第二信使：

细胞内的信息物质，第一信号物质经转导刺激细胞内产生的传递细胞调控信号的化学物质，包括无机离子（Ca2+）、脂类衍生物（如DAG、IP3）、核苷酸（如cAMP、cGMP）、信号蛋白分子等。

30、第三信使：

细胞核内的信息物质，负责细胞核内外信息传递的物质，又称为DNA结合蛋白，是一类可与靶基因特异序列结合的核蛋白，能调节基因的转录。

如立早基因（immediate-earlygene）的编码蛋白质。

31、自身磷酸化：

当配体与单跨膜螺旋受体结合后，催化型受体（catalyticreceptor）大多数发生二聚化，二聚体的酪氨酸蛋白激酶（tyrosineproteinkinase,TPK）被激活，彼此使对方的某些酪氨酸残基磷酸化，这一过程称为自身磷酸化。

简答题

1、DNA与RNA结构的异同和功能是什么？

DNA

RNA

结构

双链分子

单链分子

组成

碱基、戊糖、磷酸

碱基、戊糖、磷酸

碱基不同

A、G、C、T

A、G、C、U

戊糖不同

脱氧核糖

核糖

碱基互补配对

A=T、G=C

A=U、G=C

分类

细胞核DNA、线粒体DNA

mRNA、tRNA、rRNA

功能

遗传信息的载体、复制和转录的模板

翻译、转运及参与核糖体的构成

2、什么是基因？

基因的本质是什么？

基因的特点是什么？

（1）基因：

负责编码RNA或一条多肽链的DNA片段，是染色体或基因组的一段DNA序列，包括编码序列（外显子）、编码区前后对于基因表达具有调控功能的序列和单个编码序列间的间隔序列（内含子）。

（2）基因的本质：

基因是遗传的物质基础，是DNA或RNA分子上具有遗传信息的特定核苷酸序列。

基因通过复制把遗传信息传递给下一代，使后代出现与亲代相似的性状。

（3）基因的两个特点：

<1>、能忠实地复制自己，以保持生物的基本特征；

<2>、基因能够“变异”，变异基因中一小部分会导致疾病，另外的绝大多数是非致病变异。

3、什么是肽核酸？

主要应用有哪些？

肽核酸（第三代反义核苷酸药物）是指在特定的肽链上连接不同的碱基，形成肽核酸，能与其互补的DNA或RNA特异性结合，从而抑制或者封闭基因表达。

主要应用有：

为基因分析提供了更好的手段；

在细胞或者亚细胞水平上对基因表达进行定性和定量研究；

用于病毒、肿瘤、遗传病的基因治疗；

将反义RNA作为一种探针，用于对病毒基因的复制、转录及表达水平进行定性和定量研究，探究病毒的致病机理。

4、DNA突变有哪几种类型？

DNA损伤修复类型？

突变类型有：

错配、缺失、插入、重组或重排。

损伤修复类型有：

直接修复、切除修复、重组修复、SOS修复

5、什么是癌基因？

细胞癌基因？

病毒癌基因？

抑癌基因？

（1）癌基因（oncogene）:

细胞内控制细胞生长和分化的基因，它的结构异常或表达异常，可以引起细胞癌变。

（2）病毒癌基因（virusoncogene,V-onc）：

存在于病毒基因组中的癌基因，它不编码病毒的结构成分，对病毒复制也没有作用，但可以使细胞持续增殖。

（3）细胞癌基因（cellular-oncogene,C-onc）：

存在于生物正常细胞基因组中的癌基因，或称原癌基因（proto-oncogenes,pro-onc）。

未激活的癌基因，促进正常细胞生长、增殖、分化、发育。

（4）抑癌基因（cancersuppressivegene,anti-oncegene）:

抑制细胞过度生长、增殖从而遏制肿瘤形成的基因。

细胞癌基因的特点：

广泛存在于生物界中；基因序列高度保守；作用通过其产物蛋白质来体现；被激活后，形成癌性的细胞转化基因。

病毒癌基因v-onc与细胞癌基因c-onc的差别

1.v-onc通常丢失c-onc两端的某些序列

2.v-onc没有内含子

3.v-onc外显子与同源的c-onc也有微小差别

4.v-onc出现碱基取代或缺失较c-onc常见

抑癌基因的作用：

<1>其编码产物起着抑制细胞增殖信号转导，负性调节细胞周期，抑制细胞增殖的作用;<2>与癌基因是相互制约，相互协调;<3>抑癌基因的丢失，会导致肿瘤的发生

抑癌基因：

p53基因-基因组的监护人（guardian）、基因卫士

编码一个转录因子TF。

p53突变存在于多种癌（肺癌、乳腺癌、膀胱癌、结肠癌等）。

50-60%的癌与p53的突变有关。

p53的作用：

激活某些特殊基因的表达，其中最重要的是P21蛋白。

监视基因是否有突变。

6、RNA技术与反义RNA技术在抑制RNA表达上有何特点？

影响相应基因的表达。

反义RNA有三种方式：

（1）反义RNA直接作用于靶mRNA的SD序列和（或）编码区，引起翻译的直接抑制或与靶mRNA结合后引起该双链RNA分子对RNA酶3的敏感性增加，导致mRNA不稳定，容易被酶水解；

（2）反义RNA直接作用于靶mRNA的SD序列上游非编码区结合，引起核糖体结合位点区域的二级结构发生改变，阻止核糖体的结合，从而抑制靶mRNA的翻译功能；（3）反义RNA直接作用于靶mRNA的转录。

7、siRNA和miRNA的差异比较

siRNA

miRNA

前体

内源或外源长双链RNA诱导产生

内源发夹环结构的转录产物

结构

双链分子

单链分子

功能

降解mRNA

阻遏其翻译

靶mRNA结合

需完全互补

不需完全互补

生物学效应

抑制转座子活性和病毒感染

发育过程的调节

8、与RNA相比，DNA作为遗传物质携带者，其优点是什么？

DNA作为遗传物质的优点：

（1）DNA可以精确地自我复制，传递遗传信息。

使亲代与子代间保持遗传的连续性。

（2）双螺旋的双链结构保证了遗传物质的稳定，如果某些碱基因为一些原因突变，生物体就可以根据另一条链的信息来修复这个突变。

所以DNA的稳定性要高于RNA和蛋白质，可以使生物保持遗传的稳定。

（3）、胞嘧啶（C）脱氨变成尿嘧啶（U），在RNA中不能修复，而DNA可以碱基互补配对进行修复。

9、RNAi技术的原理及其应用？

主要应用：

抑制转座子活性和病毒感染；

进行基因敲除；

基因治疗（HIV感染、肝炎病毒感染及肿瘤等）

10、基因敲除相关知识点

（1）定义：

基因敲除（gene knock out）又称基因剔除，或基因打靶 （gene targeting）是指通过DNA定点同源重组，定向改变基因组中的某一特定基因，使机体特定基因失活或缺失，从而研究此基因的功能的一种分子生物学技术。

（2）基因敲除的基本程序：

打靶载体的构建；

打靶载体导入ES细胞：

重组置换；

基因敲除ES细胞注射入胚泡；

胚泡植入假孕小鼠的子宫中。

（3）重组子的筛选与鉴定

如何从众多细胞中筛出真正发生了同源重组的胚胎干细胞

常用的方法是正负筛选法（PNS法），标记基因的特异位点表达法以及PCR法，

其中应用最多的是PNS法。

正向筛选法可分为无启动子筛选法、无增强子筛选法和无polyA筛选法。

正负双向筛选系统（ positive and negative selection，PNS）含有正负选择基因各一个，正向选择基因多为neo基因，插入载体的同源序列中；负向选择基因常用HSV-tk基因，置于同源