法医物证学教学大纲.docx

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法医物证学教学大纲

《法医物证学》教学大纲

适用于法医学专业

一、课程简介

《法医物证学》是法医学专业的主干课程之一，教学目的是使学生掌握法医物证检验的基本理论与技能，为学生今后从事法医物证的检验、教学和研究奠定基础。

法医物证学是法医学专业学生必须掌握的基本内容，因此《法医物证学》是法医学专业必修课程。

目前使用教材为《法医物证学》（第三版），侯一平主编，人民卫生出版社2009.7。

本课程主要包括：

①法医物证分析的遗传学基础，多态性遗传标记及分析技术；②常见生物性检材的提取、包装和送检；

常见生物性检材的检验和个人识别；

亲权鉴定；

法医DNA数据库等。

本课程要求学生熟悉本门学科的研究对象、任务、内容及在法庭科学中的地位、作用与意义；掌握亲权鉴定与个人识别的鉴定原则、基本理论、检验方法及检验结果的评价。

使学生在结束学习后能基本承担常规法医物证检验工作。

为了使学生系统和牢固地掌握法医物证学的理论知识和基本技能，根据法医学专业本科教学基本要求，依据国家教委规划教材，结合实践经验和体会，编写本大纲。

二、课程目标

（一）基本理论知识

《法医物证学》是以生物物证为研究对象，以提供科学证据为目的，研究应用生命科学技术解决案件中与人体有关的生物检材鉴定的一门学科，是法医学的重要分支学科，其研究内容属于法医学中的物证检验部分，是法医学研究的主要内容之一。

其内容主要包括：

物证及法医物证的基本概念；物证分析的遗传学基础；DNA多态性分析；表达产物水平遗传标记；亲权鉴定；法医物证检材的提取、包装和送检；血痕、精斑、唾液及唾液斑、混合斑、人体组织等常见生物性检材的检验与个人识别；法医物证鉴定证据意义的评估；法医DNA数据库等。

（二）基本技能

通过实验教学结合理论知识使学生进一步掌握本学科的研究对象、任务、内容及其在法庭科学中的地位、作用与意义。

通过对常见生物检材确证试验、DNA提取、PCR扩增、电泳等方法的学习，掌握常用的分子生物学技术、用于法庭科学的常用遗传标记（STR）的分型方法，以便法医工作者和法医学专业学生在以后的法医实践中能应用这些基本知识和技能解决案件中的问题。

（三）基本素质

1．通过本课程学习使学生在以后法医学检案工作中能综合运用相关知识和技能，能够对案件中常见的法医物证进行分析鉴定，为侦查、审判提供充分、有力的线索和证据。

2．培养学生良好的科学素质、心理素质和服务态度，科学的思维方式和方法，实事求是的科学作风；使学生具有独立探索、收集和获取知识和信息的能力。

3．具有良好的职业道德和职业素质；公平、公正、诚实、正直；具有责任感、敬业心。

三、学时分配

单元

名称

理论学时

实验学时

绪论

物证分析的遗传学基础

DNA多态性的分子基础

DNA长度多态性

STR自动分型

DNA序列多态性

线粒体DNA多态性

红细胞血型

白细胞血型

血清型

酶型

亲子鉴定

法医物证检材的提取、包装和送检

血痕检验

精斑检验

唾液斑检验

混合斑检验

人体组织的检验

个人识别的证据意义评估

DNA数据库

合计

四、理论教学目标与内容

第一单元绪论

目标

1.掌握

（1）物证与法医物证的概念、特点及意义；

（2）法医物证学的基本任务、基本理论与基本方法。

2.熟悉

（1）人类遗传标记的遗传规律及其在法医物证检验中的作用与地位；

（2）法医物证鉴定的基本原则及鉴定书的书写格式。

3.了解法医物证学发展概况。

内容

1.重点阐述

（1）法医物证学的概念和分类；

（2）法医物证学的两大任务—个人识别及亲权鉴定。

2.详细讲解

（1）法医物证学的性质、任务、内容、对象及意义；

（2）人类遗传标记的遗传规律及其在法医物证检验中的作用与地位；（3）法医物证学的研究方法；（4）法医物证鉴定的基本原则及鉴定书的书写格式。

3.一般介绍法医物证学的改革及进展。

第二单元　物证分析的遗传学基础

目标

1.掌握

（1）人类遗传标记用于法医物证检验的相关概念；

（2）遗传标记的法医学应用参数。

2.熟悉遗传规律及群体遗传。

3.了解遗传标记的分类。

内容

1.重点阐述

（1）遗传的分子基础，基因、等位基因等基本概念；

（2）遗传多态性的定义及意义；（3）杂合度、个人识别率、非父排除率的概念及意义。

2.详细讲解

（1）遗传规律——孟德尔遗传定律和非孟德尔遗传；

（2）Hardy-Weinberg平衡定律；（3）法医遗传学应用参数的概念、计算和意义。

3.一般介绍遗传标记不同水平的分类。

第三单元DNA多态性分析基础

目标

1.掌握

（1）DNA分子结构、功能、理化性质与DNA多态性及分析技术之间的联系；

（2）DNA长度多态性和序列多态性的概念、特征；（3）DNA长度多态性遗传标记；（4）等位基因的命名原则。

2.熟悉

（1）DNA多态性的分类；

（2）DNA的分子结构与功能、理化性质；（3）人类基因组的概况。

3.了解DNA长度多态性形成机制。

内容

1.重点阐述

（1）DNA长度多态性的概念；

（2）可变数目串联重复序列（VNTR）的概念、特征；（3）短串联重复序列（STR）的概念、特征和命名原则。

2.详细讲解

（1）DNA的分子结构与理化性质，尤其是其变性和复性；

（2）人类核基因组DNA的特征；（3）基因组重复序列的分类和基本概念。

3.一般介绍

（1）基因突变的分类与基本概念；

（2）DNA长度多态性形成的基本机制。

第四单元DNA长度多态性

目标

1.掌握

（1）限制性片段长度多态性分析技术的基本步骤；

（2）DNA纹印和DNA指纹的概念、基本特征和法医学应用；（3）PCR概念、基本原理、反应体系、技术特点；（4）VNTR基本分型技术；（5）STR分型技术及其在法医物证鉴定中的应用优势。

2.熟悉

（1）DNA指纹、DNA纹印技术的局限性；

（2）常用STR基因座的特征及在群体中遗传分布特征；（3）X、Y染色体常用STR基因座和常用的STR复合扩增试剂盒及其在法医学中的应用价值；（4）Mini-STR的特点及优势。

3.了解

（1）常用的单基因座探针和多基因座探针的特征；

（2）主要的VNTR基因座。

内容

1.重点阐述

（1）PCR的基本原理、反应体系的组成、反应条件的选择；

（2）PCR技术的特点以及在法医学中的应用优势；（3）RFLP与Amp-FLP技术的异同点；（4）常用的STR基因座的特征及在群体中遗传分布特征。

2.详细讲解

（1）DNA指纹图的原理、基本步骤及基本特征；

（2）DNA定量方法：

分光光度法，溴化乙锭-荧光法；（3）DNA纹印和DNA指纹技术的基本程序、特征、法医学应用和局限性；（4）Mini-STR的特点及优势；（5）Y染色体、X染色体STR常用基因座及分析的特点；（6）几种常用的银染和荧光STR复合扩增试剂盒。

3.一般介绍

（1）常用基因座探针；

（2）其它STR基因座的遗传特征。

第五单元　STR自动分型

目标

1.掌握

（1）STR自动分型用于法医DNA分析的优缺点；

（2）荧光标记STR复合扩增技术。

2.熟悉

（1）STR自动分型中分析图谱的影响因素；

（2）影响STR自动分型的因素；（3）常用的STR荧光复合扩增试剂盒。

3.了解

（1）STR复合扩增产物的毛细管分离；

（2）光谱分离等位基因的原理。

内容

1.重点阐述

（1）STR自动分型用于法医DNA分析的优缺点；

（2）荧光标记STR复合扩增技术以及扩增产物的毛细管电泳分离技术。

2.详细讲解

（1）荧光STR复合扩增的组成及常用的试剂盒；

（2）电泳分离扩增产物；（3）等位基因的确定与分型；（4）DNA片段分子量计算；（5）分析图谱时要考虑的多种因素，如sutter峰、off-ladder峰等；（6）STR自动分型的影响因素。

3.一般介绍

（1）毛细管分离的装置、原理；

（2）光谱分离等位基因的原理及影响因素。

第六单元DNA序列多态性

目标

1.掌握

（1）DNA序列多态性测定的基本原理及分析基本技术；

（2）DNA序列多态性用于法医学实践的优缺点。

2.熟悉等位基因特异性探针杂交技术、扩增片段限制性长度多态性和MVR-PVR序列多态性分析技术。

3.了解其他序列多态性分析技术。

内容

1.重点阐述DNA测序原理和基本技术，并加较其与长度多态性分析技术的优缺点。

2.详细讲解等位基因特异性寡核苷酸探针杂交技术（PCR-ASO）、扩增片段限制性长度多态性技术（PCR-RFLP）、MVR-PCR序列多态性分析技术的基本原理、基本技术、基本方法及法医学应用。

3.一般介绍其他序列多态性分析技术：

如DNA芯片技术、基质辅助激光解析电离/飞行时间质谱技术、变性高效液相色谱法、焦磷酸测序技术、微测序技术、实时荧光定量PCR技术等的一些基本原理、技术和法医学应用优势。

第七单元线粒体DNA多态性

目标

1.掌握

（1）mtDNA基因组的特点及法医学中应用优势和局限性；

（2）常见的mtDNA序列多态性形式和分型技术。

2.熟悉

（1）mtDNA多态性形式、特点、命名和分型技术；

（2）mtDNA的群体遗传；（3）mtDNA分型的特殊问题。

3.了解线粒体的结构和功能。

内容

1.重点阐述

（1）mtDNA基因组的遗传特点；

（2）法医学中应用优势和局限性；（3）线粒体DNA序列多态性特征，重点是单核苷酸多态性，mtDNA法医学意义及局限性；（4）常见的mtDNA序列多态性形成特点和分型技术。

2.详细讲解

（1）线粒体命名原则；

（2）法医mtDNA分型和人类线粒体全基因组DNA分析异同点；（3）mtDNA的群体遗传；（4）mtDNA分型的特殊问题。

3.一般介绍线粒体基因的结构和主要功能。

第八单元红细胞血型

目标

1.掌握

（1）红细胞血型检测的基本原理和促进因素；

（2）红细胞血型三种测定方法的原理、检验结果的评价和影响因素；（3）ABO、MNSs、Rh血型及分泌状态的抗原特征、表型、亚型、变异型、群体遗传学特点及分型方法。

2.熟悉主要红细胞血型系统的发现过程，血型抗原与抗体的概念、种类、结构特点、群体遗传学特点，亚型及稀有型的基本概念。

3.了解

（1）红细胞血型发现的历史及命名规律；

（2）Lewis等变异血型的遗传特征。

内容

1.重点阐述

（1）红细胞抗原引起的免疫反应；

（2）红细胞凝集反应的基本步骤，影响凝集反应的因素；（3）抗人球蛋白试验的原理、方法及影响因素；（4）ABO、MNSs、Rh血型及分泌状态的抗原特征、表型、亚型、变异型、群体遗传学特点及分型方法；（5）孟买型及Cis-AB型的特点及其在法医中的应用。

2.详细讲解

（1）红细胞血型抗原的化学性质、抗原决定簇；

（2）Lewis系统分泌状态与ABO血型的关系；（3）表型测定方法和群体遗传学特点。

3.一般介绍

（1）红细胞血型发现的历史及命名规律；

（2）Lewis等血型系统的抗原特征、等位基因、群体遗传学特点及分型方法。

第九单元白细胞血型

目标

1.掌握HLA基因遗传特征、群体分布及其在亲子鉴定中的应用。

2.熟悉

（1）HLA基因定位、基因结构和抗原命名原则；

（2）DNA分型的常用方法及优点。

3.了解HLA血清学分型的基本原理及检测方法。

内容

1.重点阐述

（1）主要组织相容性复合体（MHC）与人类白细胞抗原（HLA）的概念；

（2）HLA基因遗传特征和其群体分布特征；（3）HLA表型、单倍型与基因型的关系。

2.详细了解

（1）HLA基因定位及HLA区的结构；

（2）HLA的分子结构及抗原的理化性质；（3）HLA的研究简史；（4）HLA-Ⅰ类与Ⅱ类抗原结构和细胞分布；（5）HLA基因命名和抗原特异性命名原则；（6）HLA的DNA分型技术的优越性及其法科学中的应用价值。

3.一般介绍

（1）血清学分型和DNA分型方法比较；

（2）其它表型测定方法的原理，检测结果的评价。

第十单元血清型

目标

1.掌握

（1）血清型的概念、多态性及其分型原理和法医学意义；

（2）结合珠蛋白型（Hp）、维生素D结合蛋白/型特异成分（Gc）的表型与基因型的关系及遗传规律；（3）Hp和Gc表现型的测定方法及其在亲子鉴定中的应用。

2.熟悉变异型的命名原则。

3.了解

（1）血清型的研究历史；

（2）其他几种血清型的遗传多态性。

内容

1.重点阐述

（1）血清型的分类：

按分型原理不同，可将血清分为两大类，一类为同种异型，另一类为血清蛋白的电泳多态性；

（2）结合珠蛋白型（Hp）和型特异成分（Gc）表型与基因型的关系及遗传规律；（3）Hp和Gc表现型的测定方法及其在亲子鉴定中的应用。

2.详细讲解维生素D结合蛋白/同种异型的抗原差异、命名及遗传规律。

3.一般介绍其他几种血清蛋白型的遗传多态性产生的分子学基础、遗传规律，如血清类粘蛋白型（ORM）、免疫球蛋白同种异型遗传标记（Gm、Km）。

第十一单元酶型

目标

1.掌握

（1）同工酶的概念、多态性及基本分型方法；

（2）磷酸葡萄糖变位酶（PGM1）、酯酶D（EsD）的表型与基因型的关系及遗传规律；（3）PGM1和EsD表现型的测定方法及在亲子鉴定中的应用。

2.熟悉变异型的命名原则。

3.了解

（1）红细胞酶型的研究历史；

（2）其它几种酶型的遗传多态性。

内容

1.重点阐述

（1）同工酶型的分类、产生的遗传学基础，在法医学中，作为个人识别和亲子鉴定的同工酶应具备的条件；

（2）电泳分型的基本原理及方法，酶谱显色的分类；（3）不同样品的处理方法；（4）磷酸葡萄糖变位酶（PGM1）、酯酶D（EsD）的表型与基因型的关系及遗传规律；（5）PGM1和EsD表现型的测定方法及在亲子鉴定中的应用。

2.详细讲解红细胞酸性磷酸酶（EAP）、酯酶D（EsD）、乙二醛酶Ⅰ（GLOⅠ）、谷丙转氨酶（GPT）的生理生化特性，普通型、亚型及变异型在不同群体中的分布状况。

3.一般介绍红细胞酸性磷酸酶（EAP）、谷丙转氨酶（GPT）、乙二醛酶Ⅰ（GLOⅠ）等红细胞酶型的表型与基因型的关系、遗传规律，在亲子鉴定中的应用以及表现型的测定方法。

第十二单元亲子鉴定

目标

1.掌握

（1）亲子鉴定的基本概念、原理；

（2）非父权排除概率、父权指数、父权相对机会的概念、计算和意义。

2.熟悉

（1）亲子鉴定的常见案例类型；

（2）否定父权的类型；（3）法医亲子鉴定的标准；（4）错误否定父权的风险。

3.了解其他血缘关系的鉴定。

内容

1.重点阐述

（1）亲权鉴定的概念、基本原理以及遗传规律；

（2）非父排除概率、父权指数、父权相对机会的概念、计算方法及统计学意义。

2.详细讲解

（1）错误否定父权的风险：

突变和遗传变异；

（2）亲子鉴定排除父权和肯定父权的标准。

3.一般介绍

（1）错误否定父权的情况，防止错误否定父权的方法；

（2）父权指数、父权机会的计算原理。

第十三单元法医物证检材的提取、包装和送检

目标

1.掌握法医物证检材的发现、提取、包装、保存和送检的原则与方法。

2.熟悉法医物证检材的定义和特点。

3.了解法医物证检材送检程序。

内容

1.重点阐述法医物证检材的发现、提取、包装、保存和送检的过程中不同检材的不同处理方法与原则，重点是血痕、精斑、唾液斑、毛发和组织等检材。

2.详细讲解法医物证检材的定义，法医学物证一般包括人体各种体液与组织，具有容易变性、变质、降解和腐败等特点。

3.一般介绍物证检验的基本过程和两个阶段。

第十四单元　血痕检验

目标

1.掌握

（1）血痕检验的目的及基本程序；

（2）血痕预试验、确证试验、种属鉴定的基本原理、方法及意义；（3）血痕的DNA检验；血痕ABO血型测定的原理、方法、结果评价。

2.熟悉

（1）种属鉴定的DNA检验；

（2）血痕的性别鉴定。

3.了解

（1）出血部位判断及出血量估计；

（2）血痕的红细胞酶型、血清型的检验方法及结果评价。

内容

1.重点阐述

（1）血痕检验的目的及基本程序；

（2）血痕预试验（联苯胺试验、鲁米诺试验等）、确证试验（血色原结晶试验等）、种属试验（沉淀反应、抗人血红蛋白胶体金试验等）的原理、方法及意义；（3）血痕的DNA检验；（4）ABO血型测定（吸收试验、解离试验）的原理、方法及其结果评价。

2.详细讲解

（1）种属鉴定的DNA检验；

（2）血痕的性别鉴定；（3）血痕的现场勘查、血痕检验需要解决的问题；（4）现场血痕的肉眼检查，采集、提取、保存送检原则。

3.一般介绍

（1）血痕出血部位的推断，血痕的性别鉴定及出血量估计；

（2）血痕的红细胞酶型、血清型的检验方法及结果评价。

第十五单元　精斑检验

目标

1.掌握

（1）精斑检验的意义及程序；

（2）精斑预试验、确证试验、个人识别的原理、方法和结果评价。

2.熟悉精斑中血清型、酶型多态性检测的价值、条件与结果评价。

3.了解

（1）精液的组成；

（2）精液检验的其它方法和原理。

内容

1.重点阐述

（1）精斑检验的目的及基本程序；

（2）精斑的肉眼检查及紫外光检查；（3）精斑预试验（酸性磷酸酶试验）、确证试验（精子检出法、P30试验）、个人识别（DNA分型、中和法ABO血型测定）的原理、方法和结果评价。

2.详细讲解

（1）同工酶型检测（PGM1、DIA3型的表现型、基因座、测定方法）、血清型检测（Gc的表现性分型、测定方法）；

（2）精斑的DNA提取、检测方法。

3.一般介绍

（1）精液的组成及理化性质；

（2）精液检验的其它方法和原理。

第十六单元　唾液及唾液斑检验

目标

1.掌握

（1）确证唾液斑的原理及方法；

（2）唾液斑ABO血型测定原理及方法。

2.熟悉唾液斑检验的意义。

3.了解唾液斑中其它遗传标记测定的原理和方法。

内容

1.重点阐述

（1）唾液斑预试验--唾液淀粉酶的检出原理、方法、结果判断；

（2）唾液斑确证试验--口腔粘膜脱落上皮细胞检查的原理及方法；（3）唾液斑个人识别（中和法ABO血型测定）的原理及方法。

2.详细讲解

（1）唾液的组成成分、理化特性；

（2）法医现场勘查时经常碰到的唾液斑检材；（3）提取新鲜唾液及唾液斑时的注意事项。

3.一般介绍

（1）唾液中的多态性蛋白、多态性酶的检测；

（2）唾液DNA多态性分析。

第十七单元混合斑检验

目标

1.掌握

（1）确证精液及阴道分泌液混合斑的方法及个人识别的原则与方法；

（2）混合血斑的检验方法。

2.熟悉

（1）混合斑的种类；

（2）混合斑检验常见情况及意义。

3.了解血清型和酶型的测定。

内容

1.重点阐述

（1）混合精斑中阴道液成分的确证和个人识别方法；

（2）混合精斑中精液成分个人识别的原理、方法、结果评价和注意事项；（3）轮奸案混合斑检材的鉴定和检验方法；（4）混合血斑的检验方法和步骤。

2.详细了解

（1）混合斑的种类、出现情况；

（2）精子DNA分析结果对混合斑的个人识别意义。

3.一般介绍混合斑的血清型、酶型测定方法。

第十八单元　人体组织检验

目标

1.掌握毛发用于法医鉴定的意义、基本程序、原理及方法。

2.熟悉软组织、指甲、牙齿、骨骼等组织检验的基本方法和原理。

3.了解

（1）毛发的组织结构、理化性质和生物学特征；

（1）其它遗传标记用于人体组织测定的原理、价值和结果评价。

内容

1.重点阐述

（1）毛发与其他纤维的鉴别；

（2）人毛与动物毛的鉴别；（3）人毛部位的确定；（4）毛发的脱落与损伤；（5）毛发个人识别（形态学观察、ABO血型测定、DNA分析、微量元素分析）的基本方法。

2.详细讲解

（1）人体组织的分类和检验的意义；

（2）软组织、指甲、牙齿、骨骼等组织检验的基本方法和个人识别的法医学意义。

3.一般介绍

（1）毛发的结构、形态、颜色、分布、分类、生长周期、理化性质；

（2）人体组织中其他遗传标记的检测。

第十九单元法医物证鉴定证据意义的评估

目标

1.掌握用于个人识别的系统效能和具体个案鉴定能力的指标：

个人识别能力（DP）、匹配概率（Pm）和似然比（LR）的概念、计算方法及意义。

2.熟悉遗传标记对于具体个案鉴定能力的意义。

3.了解Pm和LR的计算原理。

内容

1.重点阐述用于个人识别的系统效能和具体个案鉴定能力的指标：

个人识别能力（DP）、匹配概率（Pm）和似然比（LR）的概念、计算方法及意义。

2.详细讲解DNA遗传标记对具体个案的鉴定能力及其意义。

3.一般介绍匹配概率和似然比的计算原理。

第二十单元DNA数据库

目标

1.掌握法医DNA数据库的概念、组成、功能及意义。

2.熟悉

（1）法医DNA数据库的分类和意义；

（2）建设法医DNA数据库的条件；（3）我国DNA数据库的结构和职责；（4）DNA数据库的质量控制。

3.了解DNA数据库的情况和研究现状。

内容

1.重点阐述

（1）数据库、DNA数据库的定义；

（2）法医DNA数据库的功能、意义及理论依据；（3）法医DNA数据库的主要组成：

前科库、现场库、失踪人员数据库、基础DNA数据库和国际交换数据库等；（4）DNA数据库两大功能：

信息储存和自动比对功能。

2.详细讲解

（1）建设法医DNA数据库的条件；

（2）我国DNA数据库的三级管理及职责：

中央DNA数据库、省级DNA数据库和市级DNA数据库；（3）DNA数据库质量控制的要求和影响因素。

3.一般介绍从国内和国外两个方面说明DNA数据库的研究现状。

五、实验教学目标与内容

实验一常见生物检材的DNA提取及浓度测定

目标

1.掌握

（1）常见生物检材的DNA提取方法；

（2）酚/氯仿提取法和Chelex-100快速抽提法。

2.熟悉利用紫外分光光度法进行DNA浓度测定和DNA纯度评估。

内容

1.重点阐述

（1）用于法医物证分析实验常用仪器的使用方法和常用试剂的配制方法；

（2）采用酚/氯仿法从新鲜血液、血痕、口腔拭子中提取DNA；（3）采用Chelex-100法从新鲜血液、血痕、口腔拭子中提取DNA。

2.详细讲解利用紫外分光光度计法进行DNA浓度纯度的测定。

实验二DNA多态性分析技术

（一）

目标

掌握Amelogenin位点的性别鉴定及琼脂糖电泳。

内容

1.重点阐述

（1）Amelogenin位点的性别鉴定；

（2）PCR扩增的基本原理、操作方法及注意事项。

2.详细讲解琼脂糖电泳的基本原理、操作方法及注意事项。

实验三DNA多态性分析技术

（二）

目标

1.掌握PCR-STR分型技术及硝酸银染色技术。

2.熟悉PCR-RFLP基本原理及实验结果分析。

3.了解PCR-STR自动分型技术。

内容

1.重点阐述

（1）常染色体和XY性染色体的STR分型及结果意义；

（2）STR-PCR扩增的基本原理及操作方法；（3）聚丙烯酰胺凝胶电泳方法和硝酸银染色技术检验扩增产物。

2.详细讲解PCR-RFLP基本原理及操作方法。

3.一般介绍PC

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