08核医学第四至七章.docx

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08核医学第四至七章

第四章

一、单选题

1、标记化合物的分离方法有：

（）

A、柱层析法B、透析法C、纸层析法D、薄层层析法E、以上都是

2、以下不是放射性核素示踪技术实验的基本类型的是（）

A、整体示踪试验B、离体示踪实验C、双（多）标记示踪实验D、单标记示踪实验

3、以下说法错误的是：

（）

A、发射α射线的核素一般半衰期较长，不宜用作示踪剂

B、临床体内示踪实验一般选用短半衰期核素

C、一般要求标记物的放射化学纯度>95%

D、标记物的比活度活度应足够高，使用化学量足够大，才不会破坏原来体系的平衡

4、放射性化学纯度是指特定化学形态的标记化合物的放射性活度占该标记物总放射性活度的百分值，通常要求放射纯度在（）以上

A：

90%B：

85%C：

80%D：

95%

5、放射性核素示踪技术的注意事项有：

（）

A、需要防护措施B、辐射效应对实验对象有影响C、放射性信息的分离

D、有些放射性核素价格偏贵E、以上都是

6、蛋白质或多肽的放射性碘标记技术中（）是应用最普遍的一种标记方法。

A、氯胺-T法B、固相氧化剂法C、乳过氧化酶法D、联接标记法

答案：

1-6EDDDEA

2班题目（第四、五章）：

1、某样品含微量磷酸钠，加入放射性计数为2000cpm的32P-磷酸钠0.1mg,混匀后分离得纯品磷酸钠0.2mg，放射性计数为600cmp，问原样品中磷酸钠的含量是多少？

（C）

A0.25mgB0.27mgC0.57mgD0.55mgE0.35mg

2、下面那项不是放射性核素示踪技术的特点：

（C）

A.灵敏度高

B.检测方便

C.辐射效应对实验对象有影响

D.合乎生理条件

E.同时获取结构与功能信息

3、下列选项中哪一项不是参入实验的基本方法（B）

A.选择合适的标记物B.选择合适的剂量C.将标记物引入生物体系

D.分离产物E.测量产物

4、下列研究中不适宜采用整体参入实验方法的是（D）

A．整体运动规律B．物质转化C．作用缓慢的物质D．细胞内E．精细结构

5.在整体示踪实验中，宜选用的发射体是（C）

A.α射线B.β射线C.γ射线D.α射线或β射线E.β射线或γ射线

6、离体示踪或整体给予示踪剂后取样进行离体测定的研究则多选用的发射体是（D）

A.α射线或β射线B.α射线或高能γ射线C.β射线或高能γ射线D.β射线或低能γ射线E.α射线或低能γ射线

7、关于蛋白质或多肽的放射性碘标记技术，下列说法错误的是：

（B）

A.苯环比直链易于标记且稳定

B.取代氢的速度与反应体系中的氢离子浓度成正比

C.取代氢的速度与反应体系中的碘离子浓度成正比

D.氧化剂的性质、用量、pH会影响碘标记的速度

E.标记方法分直接标记法和间接标记法

8、下列对氯胺-T法的说法正确（C）

A.标记效率低 B.损伤程度小 C.重复性好　D.用硫酸钠可使反应终止E.操作复杂

 二、多选题

1.凝胶过滤层析样品的洗脱方式（ABDE）

A开放型B封闭型C高压洗脱型D常压洗脱型E加压洗脱型

2.根据产生机制的不同，辐射自分解可分为（ABC）

A初级内分解B初级外分解C次级分解D次级外分解E初级分解

3.下列说法正确的是（ACE）

A以硅胶或氧化铝为固定相的薄层层析是根据各个组分的吸附力和分配系数的不同进行分离。

B以离子交换树脂为固定相的薄层层析是根据各个组分的吸附力和分配系数的不同进行分离。

C以离子交换树脂为固定相的薄层层析是根据各个组分离子携带电荷的性质和数量的不同进行分离。

D以聚酰胺为固定相的薄层层析是根据各个组分的共价键的不同进行分离。

E以聚酰胺为固定相的薄层层析是根据各个组分的氢键吸附能力的不同进行分离。

4.放射性核素标记化合物的不稳定因素包括（ABCDE）

A放射性核素衰变引起的不稳定

B放射性核素衰变所产生的射线引起的辐射自分解

C放射性核素标记位置不牢固引起放射性核素脱落

D放射性核素标记位置受外界因素影响引起放射性核素脱落

E定位标记物中放射性核素发生位移

1.在示踪过程中，放射化学纯度要稳定，放射性杂质太多，将直接影响实验结果。

那么标记化合物的放射性杂质主要来自以下那几个方面？

（）

A没有标记在化合物上的游离放射性核素

B待标记样品的杂质被标上放射性核素

C标记物自身不稳定所产生的放射性杂质

D标记物本省由于辐射自分解所产生的放射性杂质

E放射性核素在贮存过程中被混入了其他稳定性核素

答案：

ABCD

2.放射性核素标记化合物的特点有：

A：

不改变原有化合物的理化和生物学性质

B：

有合适的放射性物理半衰期

C：

必须用化合物中原有元素的同位素进行标记

D：

与化合物的结合要牢固

E：

发射的放射线容易测量

答案：

ABDE

1辐射自分解类型有哪些类型？

A初级内分解B初级外分解C次级分解D初级分解

答案：

ABC

2影响辐射自分解的因素有哪些

A标记化合物吸收射线能量的效率

B标记化合物的比活度

C标记化合物的化学纯度

D标记化合物的温度

答案：

ABC

3.控制辐射自分解的方法有（）

A控制标记化合物的比活度在适当的水品B稀释分散C加入自由基消除剂D降低储存温度

1放射性核素标记技术包括以下哪几个工作步骤:

A标记 B分离  C纯化  D鉴定  E检验

答案：

ABCD

2以下哪几种因素会影响辐射子分解：

A标记化合物吸收能量的效率B标记化合物的比活度C标记化合物的纯度

D标记化合物的浓度E标记化合物的化学性质

答案：

ABC

三、思考题

1、简述蛋白质（多肽）碘标记技术的基本原理。

答：

首先将碘离子氧化成单质碘，然后单质碘与蛋白质或多肽分子中的酪氨酸、组氨酸或色氨酸残基上的苯环或咪唑环反应，取代上面的氢，形成放射性碘标记化合物。

这种碘取代氢的反应在酪氨酸上进行的最快，与反应体系中的氢离子浓度成反比，与碘离子浓度成正比。

同时，氧化剂的性质、用量、浓度、pH和反应时间等都会影响放射性碘标记的速度和结果。

2、应用放射性核素稀释法有哪些必要条件？

答：

正确选用标记物和非标记物；准确稀释和充分混匀；分离纯化和测定样品的可靠方法

3、放射性核素稀释法方法的分类以及这些方法的特点？

答：

（1）分为正稀释法和反稀释法。

-

（2）正稀释法：

用已知标记物测定未知非标记物的稀释实验。

它是将已知比活度（S1）和质量（m1）的示踪剂加入到同质待测样品中，经过充分混合后，示踪剂被稀释。

取出一定量的样品分离出所测物质，测定放射性和化学量并计算比活度（S2），求出待测物质的含量（m2）。

反稀释法：

应用非标记化合物稀释待测的放射性标记化合物，测定放射性化合物化学量的方法。

测定原理和正稀释法相同。

只是测定的对象是求得放射性示踪剂的化学量m1。

4、简述参入实验的类型，其优缺点各是什么？

参入实验的基本要求是什么？

答：

参入实验分为整体参入实验和离体参入实验。

整体参入实验优点：

整体参入实验有利于观察某物质在体内转化的全貌，了

解标记物在体内的动态变化。

缺点：

体内代谢过程复杂，不易了解转变过程

的细节。

离体参入实验优点：

易于控制，有利于在分子水平阐明转化过程的具体步骤、

转化条件和影响因素。

缺点：

实验破坏完整的代谢系统，不能做出最后结论。

参入实验的基本要求：

（1）标记前身物用量是示踪量，即基本不改变系统原来的代谢情况。

（2）放化纯度尽可能高（>98％）。

（3）分离的产物要求达到放化纯度。

1、同位素标记与非同位素标记的区别是什么？

    答：

同位素标记是指用化合物中原有元素的的同位素所进行标记的，它的特点主要是标记后所得的物理化学性质与原化合物的相同；而非同位素标记是用非原化合物所含元素的放射性核素进行标记的，特它的特点是：

它与原化合物的组成部完全相同，而且物理化学及生物特性有所改变。

2、氯胺-T法的原理是什么？

答：

在水溶液中，氯胺-T缓慢形成次氯酸，造成温和的氧化环境，可将阴离子态的放射性碘氧化成分子态碘或I+，在pH7.6的环境里，I+能与蛋白质分子中的酪氨酸残基苯环3、5为上的氢原子发生置换反应，形成放射性碘标记物。

3、放射性核素标记化合物的特点是什么？

放射性核素示踪技术的核心是什么

答：

放射性核素标记化合物的特点是：

①示踪放射性核素与化合物的结合要牢固；②有合适的放射性物理半衰期；③能发射容易测量的放射线等；

核心是放射性核素要具有两个重要的特点：

①与被示踪的物质具有同一性；②与被示踪的物质具有可区分性。

4、辐射自分解有哪些类型？

并说明其发生的机制？

答:

依据辐射自分解产生的机制可分为以下类型：

初级内分解：

由标记核素本身的衰变而改变标记化合物的组成。

初级外分解：

标记核素所发出的射线直接作用于标记化合物，使其电离、激发或化学键断裂。

次级分解：

射线首先作用于标记化合物临近的水分子，使其产生活性很强的自由基从而使标记化合物分解。

5、简述放射性核素标记化合物中同位素标记与非同位素标记的方法及特点。

答：

（1）同位素标记：

被标记化合物中固有元素被其放射性核素的同位素取代所形成的标记。

特点：

所得化合物的物理化学及生物特性与原化合物基本相同

（2）非同位素标记：

凡是标记物与原来化合物不仅元素组成不同，而且在体内的生理和生化反应也可能不同的标记属非同位素标记。

特点：

组成不完全相同物理化学及生物特性有所改变

6、试比较整体示踪实验与离体示踪实验的在试验中的应用特点。

离体示踪实验

整体示踪实验

整体运动规律

-

+

精细结构

+

+

物质转化

+

+

细胞内

+

-

作用缓慢的物质

-

+

7、什么是放射性素示踪技术？

它有何只要技术特点？

答：

放射性素示踪技术是利用放射性核素追踪生物医学体系中活性物质运动规律的方法；它有以下技术特点：

1.灵敏度高；2.检测方便；3.合乎生理条件；4.同时获取结构与功能信息。

四、名词解释

1.放射性核素标记化合物（radionuclidelabelledcompounds）：

是指在化合物分子中引入具有示踪作用的放射性核素而形成的物质，它保持原有化合物的化学和生物学性质。

2.放射性核素标记技术（radionuclidelabelledtechnique）：

将放射性核素以某种方法引入到物质的分子中，使之成为物质分子中重要组成成分的一门技术。

它包括放射性核素的标记、分离、纯化和鉴定等步骤.

3.同位素标记（isotopiclabelling）：

用化合物中原有元素的同位素进行的标记，称同位素标记。

4.放射性比活度（specificactivity）：

是放射性标记化合物的一个重要参数，通常以毎毫克分子所含放射性活度表示，即MBq/mmol或GBq/mmol；当某些复杂化合物分子量不确定时，则以毎单位质量所含放射性活度表示，即MBq/g或GBq/g

5.放射化学纯度（radiochemicalpurity）：

指特定化学形态的标记化合物的放射性活度占该标记物总放射性活度的百分值，通常要求放化纯度在95%以上。

6.标记率：

指放射性核素被引入到待标记化合物上的量占总投入量的百分比。

7．分段测量：

将层析后的层析纸（板），、由上至下逐段剪开或逐段刮取，按顺序编号并分别进行放射性测量。

8.放射性扫描：

采用放射性薄层扫描仪对层析纸（板）进行连续的放射性扫描，能直接从扫描图上得到各组分的分布图。

9.柱层析法：

是将固定相装在一定体积的玻璃柱（或金属柱）中，层析柱经处理之后，将样品加到固定相之上，然后用洗脱液淋洗。

10.透析法：

根据标记物和放射性杂质的分子量不同，选着孔径合适的透析袋。

将样品置于透析袋中，并将其悬浮在较大体积的透析液中，在搅拌的条件下，每6个小时左右更换一次透析液。

经过24小时的透析作用，小分子的放射性杂质扩散到透析袋外，而大分子的标记物则存留在透析袋内达到分离目的。

11.初级外分解：

标记核素所发出的射线直接作用于标记化合物分子，使其电离，激发或化学键断裂，称为初级外分解。

五、填空题

六、判断题

1.放射性碘标记方法中氯胺-T法是依靠氯胺-T较强的氧化性将阴离子态的放射性碘氧化成分子态碘或I+。

（×）

解析：

氯胺-T是一种较温和的氧化剂，在水溶液中缓慢形成次氯酸，造成温和的氧化环境，可将阴离子态的放射性碘氧化成分子态碘或I+。

2.蛋白质与多肽的放射性碘标记技术中,对比于直链的化合物，含有苯环的化合物更易于标记且稳定。

（√）

3.蛋白质、多肽的碘化反应必须在有氧化剂存在的条件下才能完成。

（√）

4.在淋洗层析柱中，小分子物质先被洗脱出来，大分子后被洗脱出来。

（×）

解析：

大分子物质沿着凝胶粒子缝隙运动，推进速度快；而小分子物质可进入凝胶粒子的网孔内部，推进速度慢。

故在淋洗层析柱中的小分子后被洗脱出来，大分子最先被洗脱出来。

5.示踪放射性核素要求与化合物结合要牢固，合适的物理半衰期同时还要能发射容易测量的放射线。

（√）

6.放射性核素标记化合物的放射化学纯度应不小于95%。

（√）

七、问答题

一、标记化合物辐射自分解的有几种类型？

答：

初级内分解由于标记核素本身的衰变而改变标记化合物的组成。

初级外分解标记和苏所发出的射线直接作用于标记化合物分子，使其电离、激发或化学键断裂。

次级分解射线首先作用于标记化合物邻近的水分子，使其产生活性很强的自由基，它们也会使标记化合物分解。

二、标记化合物的提纯方法？

答：

1.纸层析和薄层层析2.柱层析法：

（1）凝胶过滤层析

（2）离子交换层析3）亲和层析（4）放射性高效液相色谱仪3.透析法

三、简述蛋白质或多肽分子放射性碘标记技术的基本原理。

答：

首先将碘离子氧化为单质碘，然后单质碘于蛋白质或多肽分子中的酪氨酸、组氨酸或色氨酸残基上的苯环或咪唑环反应，取代上面的氢，形成放射性碘标记化合物。

四、放射性核素标记化合物的不稳定性主要有哪些因素引起？

答：

1、放射性核素衰变引起的不稳定2、放射性核素衰变所产生的射线引起的辐射自分解

3、放射性核素标记位置不牢固或受外界因素影响引起放射性核素脱落

4、定位标记物中放射性核素发生位移

八、论述题

一．试论述薄层层析基本原理，并说明在进行薄层层析过程中要注意的些什么？

答：

薄层层析的基本原理因固定相的不同而异。

（1）.以硅胶或氧化铝为固定相，原理为各个组分的吸附力和分配系数的不同进行分离；

（2）.以离子交换树脂为固定相原理为各个组分离子携带电荷的性质和数量不同进行分离；

（3）.以聚酰胺为固定相原理为根据各组分的氢键吸附能力的不同进行分离。

因此，在应用薄层层析法时，要根据样品的性质而选用相应的固定相制成薄板，通过不同极性溶剂配伍组成展开剂，使得样品的各组分有效分离开来。

进行薄层层析的操作时要注意如下事项：

1.要确认该层析条件能将样品中的各个组分有效的分开；

2.对于高比活度的标记化合物，点样前要加入适量载体；

3.点样时，如样品放射性浓度较低，可多次重复点样。

二．论述何种因素可能影响放射性化合物标记率的测定？

应如何选择？

答：

1、测定分析方法的确定

最常用的是纸层析和薄层层析，两者都有各自的测定原理及优缺点，所以应根据实际对象选择测定方法；

2、操作因素：

【1】固定相的选择：

根据试验要求选择纸或板，对临床应用放射性药物而言，由于放射性物质半衰期短，要求测其标记率速度要快，纸色谱可以很短，十分钟之内完成，故可以选择纸色谱；一般来讲，层析纸或板长度在20cm左右；

【2】展开剂的选择：

实验要求标记组分和未标记组分分布均匀以达到正确估计标记率的目的；

【3】点样：

点样直径不能大于0.5cm，过大或过小都可造成标记率测定偏差；如果样品放射性浓度较低，可重复多次点样，但不可用热风吹干，尤其对易氧化或分解的物质，用氮气吹干；

【4】载体：

对高活度的标记化合物，点样前应适当加入载体，防止样品在层析固定相上的吸附；

3、测量放射性方法的选择

【如放射自显影、分段测量、放射性扫描等，放射自显影测量需要时间长，不适合用于标记率的测定；放射性扫描虽有速度快、分辨率好的有点，但效率低，对放射性活度有一定要求】

九、计算题

1A标记物的放射性为20，投入的总放射性为40，B标记物的总放射性为10，投入的总放射性为12，请问哪种标记物比较好？

2甲物质的总浓度为100mmol/L，放射性浓度为2450Bq，放射比活度为25Bq/mmol，问甲物质符不符合放射性核素标记化合物的放射化学纯度？

答案：

解：

A标记物的标记率为20/40*100%=50%

B标记物的标记率为10/12*100%=83%

B标记物的标记率较高，它比较好。

解：

化学浓度甲=放射性浓度甲/放射比活度甲

=2450/25

=98（mmol/L）

放射性化学纯度甲=化学浓度甲/总浓度甲

=98/100*100%

=98%

因为要求放射性核素标记化合物的放射性化学纯度>95%，所以，甲物质符合。

第五章

一、单选题

1、将已知比活度和质量的放射性标记化合物（示踪器），加到一个未知质量的非放射性的同种化合物中，其放射性核素标记化合物的放射性活度的变化是：

（）

A：

升高B：

下降C：

不变D：

不确定

2、下列哪项不是放射性核素示踪技术的特点（）

A：

灵敏度高B：

检测方便C：

合乎生理条件

D：

同时获取结构和功能信息

E：

易受其它非放射性杂质的干扰

3、放射免疫测定时，用125I标记的是：

（）

A.抗原B.抗体

C.二抗D.待测标本

E.以上均不正确

4、参入实验的基本方法是：

（）

A、寻则合适的标记物B、将标记物引入生物体系

C、分离产物D、测量产品

E以上都是

5、放射性核素示踪技术的技术特点是：

（）

A灵敏度高B检测方便

C合乎生理条件D同时获取结构与功能信息

E以上都是

6、下列有关影响放射性自显影质量常见因素的说法错误的是（）

A银晶体颗粒小和排列致密者，分辨率也较高

B乳胶层较薄，分辨率较高

C标本较厚，分辨率较高

D乳胶层与标本的距离增大，分辨率降低

E曝光时间越长，分辨率降低

7、下列哪项不是离体参入实验的优点：

（）

A.实验条件易于控制

B.有利于在分子水平阐明转化过程的具体步骤、转化条件

C.可以直接作出最后结论

D.可用于研究某些代谢过程

8、下列哪项不能提高放射自显影的分辨率的是（）

A．使用较薄乳胶层

B．降低标本厚度

C．缩短标本与乳胶层间的距离

D．使用高能示踪核素

答案：

1-5BECEE6-8：

CCD

2班题目（第五章）：

1、下列不属于核酸探针标志常用方法的是：

（C）

A.末端标记法B.缺口平移法C.揭膜核乳胶法D.PCR参入法E.随机引物法

2、下列说法不正确的是（A）

A.乳胶层较薄，影像交叉和散射增加，则分辨率降低

B乳胶层与标本的距离增大时，散射较大，使分辨率下降

C.自显影的制备的基本方法包括接触法、湿贴法等

D在自显影中，过高的本底会影响自显影的分辨率

E.定影温度在18~20℃，一般定影时间为8~15分钟

3、下列哪种核素不适合作离体示踪实验的示踪物（B）

A.125IB.131IC.3HD.14CE.35S

4、定影液中保护剂的作用是：

（B）

A．中和还原剂的氧化产物

B.与酸反应，抑制定影剂被酸分解

C.与碱反应，防止定影剂与碱作用

D防止乳胶膨胀、脱落、操作中擦伤和划伤

E以上都不对

5、下列只适合作宏观放射自显影的感光材料是：

（E）

A.液体核乳胶B.核乳胶干板C.原子揭膜核乳胶D.氚片E.X线片

6、关于影响放射性自显影质量的因素的说法错误的是（C）

A.银晶体颗粒越小、排列越紧密者，分辨率越高

B.自显影效率随如胶层的加厚而增加，其与标本的厚度也有关

C.曝光时间越长，分辨力就会越高

D.胶层与标本的距离增大时，会使分辨率降低

E.示综核素的能量过高，会使分辨力降低

7、最广泛采用的核酸探针（A）

A.基因DNA探针B.cDNA探针C.RNA探针D.寡核苷酸探针E.人工合成寡核苷酸

8、下列不属于显影液的组成的是（D）

A、显影剂B、促进剂C、保护剂D、坚膜剂E、抑制剂

9、下列是定影液中定影剂起的作用是（A）

A、除去未形成潜影的银晶体B、防止乳胶膨胀、脱落C、中和还原产物的氧化产物

D、抑制未感光的银盐分解E、起到还原作用

10、下列说法错误的一项（E）

A.曝光时间不充分时将使自显影效率下降

B.标本组织层次重叠时，分辨率降低C.定影的温度在18-20℃

D.感光材料是由卤化银和明胶所组成的乳胶

E.曝光处理不需在避光情况下

二、多选题

1.离体示踪或整体给予示踪剂后取样进行离体测定的研究多选用（BC）射线作为发射体。

A.αB.βC.低能γD.λE.γ

2．研究蛋白质，氨基酸代谢和药物在体内代谢转化，可选用如下（CDE）核素

A氕B.氘C.氚D.碳-14E.硫-35

3、放射性核素稀释法实施应满足的条件（ACD）

A.放射性核素示踪剂要有足够高的比活度或放射性浓度

B.放射性核素示踪剂比活度或放射性浓度没有要求

C.示踪剂必须与待测的充分混匀

D.精细操作

E、以上条件都不需要满足

4、正稀释法和反稀释法的区别（AB）

A、正稀释法是用已知标记物测定未知非标记物的稀释实验

B、反稀释法是应用非标记化合物稀释待测的放射性标记化合物

C、正稀释法的放射性化学量可以忽略不计

D、反稀释法中当标本有多种标记物，被测标记物的比活度一定为已知值

E、以上都不对

5.关于离体参入实验的说法正确的是（ABCE）

A.研究物质转化过程的细节通常采用离体参入实验。

B.实验条件易于控制。

C.在分子水平阐明转化过程。

D.得出的实验结果与整体实验完全相符。

E.离体实验得出的结果只能看作是一种可能，不能轻易作出左后结论。

6.参入实验的基本方法包括（ABCD）

A.选择合适的标记物。

B.将标记物引入生物体系。

C.分离产物。

D.测量产物。

E稀释分散

7、放射自显影的类型（ACD）

A．宏观放射自显影B.微观放射自显影C.光学显微镜自显影

D．电子显微镜自显影E.生物显微镜自显影

8、影响放射性自显影质量的常见因素有（BCDE）

A.乳胶的大小和密度B.乳胶的厚度C.标本的厚度D.标本与乳胶的距离E.本底

1影响放射性自显影质量的常见因素有（）

A乳胶中溴化银晶体的大小与密度B标本的厚度C标本与乳胶的距离D暴光时间

E示踪核素的能量

答案：

ABCDE

2放射性核素示踪技术的特点（）

A灵敏度高B监测方便C辐射效应对实验对象没有影响D同时获取结构与功能信息

E合乎生理条件

答案：

ABDE

3.核酸探针的标记方法有（）

A缺口平移法B随机引物法C末端标记法DPCR参入法E核酸稀释法

答案：

ABCD

4.影响放射性自显影质量的因素有（ ）

?

A乳胶厚度?

B标本厚度?

C曝光时间D示踪素的能量E本低

答案：

ABCDE

三、思考题

一、影响放射性自显影质量的常见因素有哪些？

答：

1乳胶中溴化银晶体的大小和密度2乳胶厚度3标本的厚度4标本与乳胶的距离

5暴光的时间6示踪核素的能量7本底