鉴定板说明书升级版Word文件下载.docx
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3、剩余的菌液及移液头浸入杀菌溶液内浸泡灭菌。
4、孵育过夜(18-24小时)后,先于A12孔(VP)滴加VP试剂A、B各1滴,20分钟后,再于A11孔(IND)滴加靛基质试剂一滴,数分钟后,于A10孔(PHE)滴加苯丙氨酸试剂一滴,立即判读结果。
【结果判读】
1.将测试卡放进微生物自动分析仪读板,读板完毕后,传送到电脑,点击“判别”键后,即显示被测菌名称和各项药敏的分析结果,并打印报告单。
详细操作请参照黑马微生物分析系统6.0中4.10的自动测试卡检测。
2.具体操作详见黑马微生物分析系统《操作手册》。
肠杆菌IDS-96测试板示意图
【注意事项】
1.本测试板各孔底物系统在无菌条件下冷冻干燥,密封包装,临用时先置室温预温再在无菌操作下打开,板盖不可随意掀启,以防空气杂菌污染。
2.使用前请仔细阅读本说明书、微生物分析仪《操作手册》和分析仪软件中的“帮助”系统。
3.被测菌必须是新鲜的纯养物,严格避免从平皿上刮取两种或两种以上的菌落或用陈旧的培养物进行试验。
4.必须事先做好板外的鉴定试验,即氧化酶试验和革兰氏染色镜检(必要时还需观察动力),若未做,或做得不准确,板上的鉴定结果将可能出现根本性的错误。
板外试验的方法和要求详见黑马微生物分析系统软件中的“帮助”栏。
5.沙门及志贺菌属的所有菌种,均应做血清凝集试验(玻片凝集)后,输入菌名发报告。
6.孵育48小时以后的反应结果不能作为判断的依据。
【贮存及效期】2-8℃保存
【废弃培养物处理】高压灭菌或焚烧后丢弃。
【贮存及效期】1年
附表A反应结果判读标准
孔号
试验名称
结果
阴性
阳性
A1
GLU葡萄糖发酵
紫色
黄色
A2
H2S硫化氢产生
土黄色
黑色
A3
URE尿素酶
黄色/橙色
红色
A4
ORN鸟氨酸脱羧酶
黄色
A5
ARG精氨酸水解酶
A6
LYS赖氨酸脱羧酶
红色或橙红色
A7
C氨基酸对照
黄色或橙色
A8
CIT枸橼酸盐利用
黄色或黄绿色
蓝色
A9
MLT丙二酸盐利用
A10
PHE苯丙氨酸脱氨酶
加试剂后黄色
加试剂后深褐色
A11
IND靛基质产生
加试剂后红色
A12
VP
加试剂后黄褐色
加试剂后暗红色(20分钟)
B1
ARA阿拉伯糖发酵
紫色
B2
LAC乳糖发酵
B3
SUC蔗糖发酵
B4
MEL密二糖发酵
B5
RHA鼠李糖发酵
B6
INO肌醇发酵
B7
RAF棉子糖发酵
B8
ESC七叶苷水解
深土黄色
褐黑色
B9
SAL水杨苷
B10
MDGα-甲基-D-葡萄糖苷发酵
B11
ONPG半乳糖苷酶
白色
B12
GEL明胶水解
轻轻搅动后黑色颗粒不弥散
轻轻搅动后黑色颗粒弥散
C1
SOR山梨醇发酵
C2
ADO侧金盏花醇发酵
C3
MAL麦芽糖发酵
C4
CEL纤维二糖发酵
C12
C+阳性对照孔
清晰无色或淡黄色
混浊或沉淀
其余孔
药敏试验
附表B药敏试验抗菌药物表
类别
药物名称(缩写)
NCCLS分组
青霉素类
氨苄西林(AMP)
A
氨苄西林/舒坦巴(AMS)
B
哌拉西林/他唑巴坦(PIZ)
阿莫西林/棒酸(AMC)
哌拉西林(PIP)
头孢类
头孢他啶/棒酸(CAZC)
头孢噻肟/棒酸(CTXC)
头孢呋辛(CXM)
头孢曲松(CRO)
头孢克洛(CEC)
C
头孢噻肟(CTX)
头孢比肟(FEP)
头孢他定(CAZ)
头孢哌酮/舒巴坦(CPS)
氨基糖苷类
庆大霉素(GEN)
阿米卡星(ANK)
喹诺酮类
环丙沙星(CIP)
左氧沙星(LEV)
诺氟沙星(NOR)
U
磺胺类
复方新诺明(SXT)
呋喃类
呋喃妥因(FD)
四环素类
四环素(TET)
米诺环素(MI)
O
碳青酶烯类
氨曲南(ATM)
亚胺培南(泰能)IPM
美罗培南(MRP)
多粘菌素类
多粘菌素B(PB)
多粘菌素E(CT)
注:
NCCLS分组说明:
A组:
为一级试验的首选药物,必须常规报告其敏感度,若敏感,治疗时应优先选用。
B组:
也为一级试验的首选药物,但可以有选择地报告,当细菌对A组同类药物耐药或其他原因不能使用及无效时,可以选用于治疗。
C组:
替代性或补充性药物,有选择地报告,在细菌对A、B组药物耐药或不适用时,可选用本组替代。
U组:
仅用于治疗泌尿道感染的药物,其他感染部位分离的病菌不必报
O组:
对该组细菌有临床适应症但一般不允许常规试验与报告的药物。
非发酵菌IDS-96测试板
【概述】
本测试板专供在细菌学检验中,对氧化酶阳性的革兰氏阴性杆菌(主要是非发酵菌)进行鉴定和各种抗菌药物的敏感度测定。
将被测菌加入测试板经孵育后,通过本系统分析即可将属于非发酵菌的11个属以及氧化酶阳性的发酵菌中5个属快速而准确地鉴定到种,同时判断被测菌对多种抗生素的MIC,分析其耐药程度,打印出详细的检验报告,是国内迄今最完善而简便实用的细菌分析系统。
1.非发酵菌IDS-96测试板10块
2.非发酵菌稀释液(3ml/瓶)10瓶
3.非发酵药敏培养液(10ml/瓶)10瓶
5.辅助试剂(硝酸盐还原试剂A、硝酸盐还原试剂B、无菌石蜡油、靛基质试剂、)
●氧化酶试验阳性,或氧化酶阴性但厌氧葡萄糖不产酸;
●18-24小时分离培养的单个纯菌落(或纯培养物)
挑取纯培养单个菌落于生化鉴定稀释液(3ml)瓶内壁研磨呈细菌悬液(0.5麦氏单位)。
4.连续移液器(配无菌吸头)吸取该菌液加入测试板A排的A1-11孔,B排的B1-11孔(共计22孔),每孔100ul。
5.在A1--A6孔(GLU)、(H2S)、(ORN)、(ARG)、(LYS)、(C)、(URE)分别滴加无菌石蜡2滴。
1、自非发酵菌稀释液吸菌悬液100ul,加至非发酵菌药敏培养液内,混匀,继续加入测试板的其余各孔,(所有的药敏孔、药敏生长对照C+及6.5%Nacl),每孔100ul。
2、剩余的菌液及吸头浸入杀菌溶液内浸泡灭菌。
3、撕开不干胶的纸对齐贴于鉴定板,35-37℃孵育。
4、孵育过夜(18-24小时),先于A11孔(IND)滴加靛基质试剂一滴,数分钟后再于A10孔(NIT)滴加硝酸盐还原试剂A、B各一滴,立即判读结果。
非发酵菌科IDS-96测试板示意图
1.本测试板各孔底物系在无菌条件下真空冷冻干燥,密封包装,临用时先置室温预温,再在无菌操作下打开,扳盖不可随意掀启,以防空气杂菌污染。
2.使用前请仔细阅读本说明书、微生物分析仪《操作手册》和分析仪软件中的“帮助”系统。
3.被测菌必须是新鲜的纯培养物,严格避免从平皿上刮取两种或两种以上的菌落或用陈旧的培养物进行试验。
4.必须事先做好板外的鉴定试验,即革兰氏染色镜检和氧化酶试验(必要时还要观察动力),如果未做,或做得不准确,板上的鉴定结果将可能出现根本性的错误。
5.霍乱孤菌必须立即用诊断血清作玻片凝集试验,并在规定的时间内迅速报告。
6.孵育48小时以后的反应结果不能作为判断的依据。
【贮存】2-8℃保存。
【有效期】1年
结果
H2S硫化氢
黄色或灰白色
灰黑色
ORN鸟氨酸水解
5A5
ARG精氨酸脱羧
LYS赖氨酸脱羧
氨基酸对照
黄色或橙色
NIT硝酸盐还原
加试剂后黄或深黄色
加试剂后红色或红褐色
IND靛基质
加试剂后黄色
GLU葡萄糖氧化
MAN甘露醇产酸
SUC蔗糖产酸
LAC乳糖产酸
MNE甘露糖产酸
MAL麦芽糖产酸
FRU果糖产酸
XYL木糖产酸
无色
轻轻搅动后黑色颗粒弥散
褐色或黑色
6.5NC
类别
含β-Lac抑制剂的青霉素
替卡西林/棒酸(TIM)
氨苄西林/舒巴坦(AMS)
哌拉西林/他唑巴坦(PTZ)
头孢哌酮(CFP)
头孢吡肟(FEP)
阿米卡星(AMK)
妥布霉素(TOB)
奈替米星(NET)
氧氟沙星(OFL)
氯霉素类
氯霉素(CHL)
亚胺培南(IPM)
A组:
B组:
C组:
替代性或补充性药物,有选择地报告,在细菌对A、B组药物耐药或不适用时,可选本组替代。
U组:
仅用于治疗泌尿道感染的药物,其他部位分离的病菌不必报告
链球菌/肠球菌IDS-96测试板
本测试板专供在细菌学检验中,对触酶阴性的革兰氏阳性球菌(主要是链球菌、肠球菌菌属)进行鉴定和各种抗菌药物的敏感度测定。
将被测菌加入测试板经孵育后,即可将属于链球菌、肠球菌菌属细菌快速而准确地鉴定到种,同时判断被测菌对15种抗生素的MIC,分析其耐药程度,打印出详细的检验报告,是迄今国内最完善而简便实用的细菌分析系统。
药敏部分则完全按NCCLS(2007)文件的规定执行。
1.链球菌/肠球菌IDS-96测试板10块
2.链球菌/肠球菌生化稀释液(2.5ml/瓶)10瓶
3.链球菌/肠球菌增菌液(2.5ml/瓶)10瓶
4.链球菌/肠球菌药敏培养液(10ml/瓶)10瓶
5.简易操作流程1份
6.辅助试剂(vp试剂A、vp试剂B、PYR显色试剂、马尿酸盐试剂)
1.所有的操作过程应避免杂菌污染。
2.使用本测试板的被测菌应符合以下三项要求:
●革兰氏阳性球菌,主要是单个、成对或链状排列。
●触酶试验阴性。
●18—24小时分离培养的单个纯菌落(或纯培养物)。
3.记录菌落溶血类型(α-溶血、β-溶血).
4.挑取纯培养单个菌落于0.3ml无菌水中,混匀。
5.将以上菌悬液浇于或用无菌棉拭子均匀涂于血平皿上。
6.■对于β-溶血链球菌和肠球菌,经以上24小时孵育,一般能形成较大的菌落,对于其它链球菌需经48小时孵育才可形成较大的菌落。
■对于某些对营养要求极高的苛养菌,则取菌落于链球菌专用培养液(1ml)中35—37℃孵育5小时,将以上菌悬液均匀浇于血平皿上,再置35—37℃孵育18—24小时。
7.用无菌棉拭子取菌落(培养物)于链球菌/肠球菌稀释液(2.5ml)中,使呈菌悬液(2麦氏单位)。
8.用移液器(配无菌吸头)吸取该菌悬液加入测试板A5-A12孔,每孔100ul。
9.从以上菌悬液中取500ul加入链球菌/肠球菌增菌液(2.5ml),再将此培养液加入测试板A1-A4孔,B1—B7孔,每孔100ul。
10.A1-A4、A9、B1-B7、C1孔加无菌石蜡2滴.
1.从剩余链球菌/肠球菌增菌液中取100ul,加至链球菌/肠球菌药敏培养液内,混匀,继续加入测试板的其余各孔,(所有的药敏孔、药敏生长对照C+及6.5%Nacl),每孔100ul。
2.剩余菌液及吸头浸入杀菌溶液内浸泡灭菌。
3.撕开不干胶的纸对齐贴于鉴定板,35-37℃孵育。
4.24小时观察结果(个别生长缓慢者可延长至36—48小时),在A11孔滴加VP试剂A、B各一滴,在A10孔滴加PYR试剂一滴,再在A12孔滴加马尿酸盐试剂一滴30分钟后判读结果。
【结果判读】
1、将测试卡放进微生物自动分析仪读板,读板完毕后,传送到电脑,点击“判别”键后,即显示被测菌名称和各项药敏的分析结果,并打印报告单。
详细操作请参照黑马微生物分析系统6.0中4.10自动测试卡检测。
链球菌/肠球菌鉴定/药敏测试板示意图
1.本测试板各孔底物系在无菌条件下真空冷冻干燥,密封包装,板盖不可随意掀起,以防空气杂菌污染,临用时先置室温预温,再在无菌操作下打开。
2.使用前请仔细阅读本说明书,微生物分析仪《操作手册》和分析仪软件中的“帮助”系统。
3.被测菌必须是新鲜的纯培养物,严格避免从平皿上刮取两种(或两种以上)菌落,或用陈旧的培养物进行试验。
4.必须做好板外的鉴定试验:
A、革兰氏染色镜检B、触酶试验
上述A、B为选板的依据,如果未做或做得不准确,将可能导致选板错误。
【贮存】2-8℃保存
【有效期】
孔号
SOR山梨醇产酸
RAF棉子糖产酸
TRE海藻糖产酸
BE胆汁七叶苷
ESC七叶甘水解
PGT
PGR
ARG精氨酸水解
PYR吡咯烷酮酶
黄褐色
粉红色(加试剂后)
加试剂后黄绿色
加试剂后红色(20分钟后)
HIP马尿酸盐水解
无色或淡紫色
紫色(加试剂后)
INU菊糖产酸
RIB核糖产酸
ARA阿拉伯糖产酸
GLY糖原产酸
MDGα-甲基-D-葡萄糖苷产酸
6.5NC生长
附B药敏试验抗菌药物
青霉素(PEN)
阿莫西林/棒酸(AMC)
高浓度庆大霉素(HLG)
高浓度链霉素(HLS)
大环内脂类
红霉素(ERY)
阿奇霉素(AZI)
喹诺酮类-
左氧氟沙星(LEV)
B、C
复方新诺明(T/S)
呋喃妥因(NIT)
林可类
克林霉素(CLI)
多肽类
万古霉素(VAN)
替考拉宁(TEC)
Inv
也为一级试验的首选药物。
但可以有选择地报告,当细菌对A组药物耐药或其它原因不能使用及无效时,可以选用治疗。
仅用于治疗泌尿道感染的药物,其他部位分离的病菌不必报告。
葡萄球菌、微球菌IDS-96测试板
本测试板专供在细菌学检验中,对触酶阳性的革兰氏阳性球菌(主要是葡萄球菌属、微球菌属)进行鉴定和各种抗菌药物的敏感度测定。
将被测菌加入测试板经孵育后,即可将属于葡萄球菌属、微球菌属及口腔球菌属的细菌快速而准确地鉴定到种,同时判断被测菌对23种抗生素的MIC,分析其耐药程度,打印出详细的检验报告,是迄今国内最完善而简便实用的细菌分析系统。
1.葡萄球菌/微球菌IDS-96测试板10块
2.葡萄球菌/微球菌稀释液(3ml/瓶)10瓶
3.葡萄球菌/微球菌药敏培养液(10ml/瓶)10瓶
5.辅助试剂(vp试剂A、vp试剂B、PYR显色试剂、硝酸盐还原试剂A、硝酸盐还原试剂B、石蜡油)
●无特殊营养要求的革兰氏阳性球菌,主要是成簇或四联排列;
●触酶试验阳性;
3.菌液制备:
挑取纯培养单个菌落于葡萄球菌/微球菌稀释液(3ml)瓶内壁研磨呈细菌悬液(0.5麦氏单位)。
4.用连续移液器(配无菌吸头)取该菌液加入测试板A排的A1—12孔,B排的B1—10孔,每孔100ul(共计22孔)。
5.在A1(URE)、A2(ORN)、A3(C)孔分别滴加2滴无菌石蜡油。
1.用无菌吸头葡萄球菌/微球菌稀释液取菌液100ul,加至葡萄球菌/微球菌药敏培养液中,混匀,继续加入C1—12孔、D1—12孔、E1—12孔、F1—12孔、G1—12孔、H1—12孔内,每孔100ul。
2.剩余菌液及吸头浸入杀菌溶液内浸泡灭菌。
3.撕开不干胶的纸对齐贴于鉴定板,35-37℃孵育。
4.24小时观察结果(个别生长缓慢者可延长至36—48小时),先在A12孔滴加VP试剂A、B各一滴,30分钟后,在A10孔滴加PYR试剂一滴及A11孔滴加硝酸盐还原试剂A、B各一滴,立即判读结果。
详细操作请参照