球菌Word格式文档下载.docx

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快速诊断：

①直接凝集②免疫荧光菌球法③协同凝集试验④乳胶凝集试验⑤分子生物学方法

非发酵革兰阴性杆菌

1.假单胞菌属的代表菌种是何菌？

其生物学性状有何特点？

答：

铜绿假单胞菌是假单胞菌属的代表菌种。

其生物学特性主要有4℃不生长，而42℃生长。

在血琼脂、麦康凯培养基上均可形成5种不同形态的菌落，在普通培养基上可产生多种色素。

2.非发酵菌鉴定原则及初步分群试验

分群依据：

①氧化酶试验②葡萄糖氧化发酵③动力④麦康凯培养基上生长情况。

3.假单胞菌的概念及其共同特点

假单胞菌属为需氧、有鞭毛、无芽胞、无荚膜的革兰阴性菌，氧化酶试验阳性，多为腐生菌，少数为植物和动物寄生菌，大多为条件致病菌。

其共同特点是：

革兰阴性、直或微弯、较细长、散在排列、无芽胞、有荚膜，多数有鞭毛，专性需氧，生长温度范围广，最适生长温度35℃，少数能在4℃或42℃生长。

生长中可产生各种水溶性色素。

4.简述铜绿假单胞菌的检验方法

①标本的采集：

按疾病和检查目的，采取不同的标本。

②标本直接检查：

直接显微镜检查；

抗原检测；

核酸检测。

③分离培养和鉴定。

棒状杆菌属

1．简述白喉棒状杆菌的致病过程。

白喉棒状杆菌存在于白喉患者的喉头气管及鼻腔粘膜，有时皮肤、结膜等部位也可见到。

传染源为患者及带菌者，细菌多随飞沫或污染的物品传播，感染后白喉棒状杆菌在鼻咽部粘膜处繁殖并产生外毒素，引起局部炎症和全身中毒症状。

白喉杆菌在侵犯局部增殖，产生外毒素致病。

2．简述白喉杆菌体外毒力试验的原理、方法及结果判断。

①琼脂平板毒力试验。

将含有20%牛血清肉汤琼脂分注与平皿中，每只平皿10ml，50℃冷却，在凝固之前，将浸有白喉抗毒素血清稀释液的滤纸条沉于琼脂内，制成平板（Elek平板）。

在与滤纸条相垂直的方向将待检菌画直线接种，划线宽度约6-7mm，两端与皿壁连接。

同时，与之相距10mm处平行划线接种一标准产毒菌株，作为阳性对照。

37℃培养24-48小时，若菌苔两侧出现斜向外延伸的乳白色沉淀线，并与其邻近的标准产毒株的沉淀线相吻合，则为产毒株。

②SPA协同凝集试验：

将白喉抗毒素IgG先吸附在SPA上，再加入待检菌培养物上清液。

若有白喉外毒素，则与SPA-IgG结合出现可见的凝集反应。

③对流电泳：

将已知的白喉抗毒素和待检菌培养液分置琼脂板两孔之中，电泳30min后，若两孔之间出现白色沉淀线，表明待检菌为产毒株。

革兰阳性需氧杆菌

1.临床上对疑似的炭疽患者怎样鉴定病原。

若从标本中检出革兰阳性大杆菌，两端平截、呈竹节状排列，并有明显荚膜，在人工培养基上生长可产生芽孢，呈卵圆形，小于菌体，位于菌体中央；

在普通琼脂平板上形成灰白色、扁平、干燥、无光泽的菌落；

动力阴性，牛乳凝固试验、噬菌体裂解试验、串珠试验和青霉素抑菌试验均为阳性，则可报告：

“检出炭疽芽胞杆菌”。

有条件者可应用DNA探针，其敏感性高，特异性强。

其他鉴定试验作为参考指标，可根据具体情况酌情选做。

同时应注意与其它芽胞杆菌相鉴别。

放线菌属与诺卡菌属

分支杆菌

1.简述结核菌素试验的原理、方法及结果分析和实际应用。

（1）原理：

结核菌素试验属于迟发型超敏反应，用结核菌素试剂作皮肤试验，感染过结核分枝杆菌或接种过卡介苗者，一般都出现阳性反应。

（2）方法：

取5UPPD或OT0.1ml注射于前臂掌侧皮下，经48—72h检查反应情况。

应特别注意局部有无硬结，不能单独以红晕为标准。

（3）结果分析：

①阳性注射部位硬结、红肿直径0．5—1．5cm之间。

这表明机体曾感染过结核，出现超敏反应，但不表示正患结核病；

②强阳性硬结直径超过1．5cm以上，表明可能有活动性结核，应进一步检查；

③阴性注射部位有针眼大的红点或稍有红肿，硬结直径小于0．5cm，说明无结核感染，但应考虑下述情况：

如受试者处于原发感染的早期，或正患有其他传染病（如荨麻疹等）、霍奇金病、结节病、艾滋病。

（4）应用：

①选择BCG接种对象及测定接种效果，结核菌素反应阴性者应接种BCG；

②结核菌素试验对婴幼儿可做诊断结核病之用；

③可在未接种BCG的人群中作结核分枝杆菌感染的流行病学调查；

④可借用其测定肿瘤病人的细胞免疫功能。

2.结核分枝杆菌细胞壁中脂质含量高，这一特点有何意义？

结核分枝杆菌胞壁含脂质多，与其染色性、抵抗力、生长速度及致病性等特性有密切关系，脂质中的分枝菌酸使其具有抗酸性；

细胞壁含大量脂质，可防止菌体内水分的丢失，故对干燥的抵抗力特别强；

同时影响营养物质的吸收，故生长缓慢，且脂质中的磷脂、索状因子、蜡质D、硫酸脑苷脂等毒性成分以不同机制致病。

3．简述从标本中检验结核分枝杆菌的方法。

1．显微镜检查

（1）直接涂片染色镜检：

是一种临床常用的简易快速的检查方法。

直接涂片法是用接种环取病人痰液中浓厚部分或离心沉淀（3000r／min，20min）的尿沉淀物2—3接种环涂片，涂片要厚。

经自然于燥和火焰固定后进行齐-尼抗酸染色，或作金胺“o”荧光染色。

前法用油镜检查，后法用荧光显微镜高倍镜检查。

镜检时应仔细查遍整个涂片或观察至少100个视野。

结核分枝杆菌抗酸染色后呈红色，其它细菌和细胞为蓝色。

经荧光染色的结核分枝杆菌，在黑色背景中呈亮黄色。

涂片镜检结果应报告“找到抗酸性杆菌’’或“未找到抗酸性杆菌”，而不能报告“找到结核分枝杆菌”。

（2）浓缩集菌涂片检查法：

如果直接涂片镜检不易检出结核杆菌，应采用浓缩集菌涂片检查法，以提高结核杆菌的检出率。

所谓浓缩集菌涂片即为将采集标本离心，取沉淀涂片，或是采用漂浮集菌法，集菌后标本经反复多次使涂层加厚，一般取3—4个接种环，涂抹面积大约直径在15mm即可，干燥固定后染色镜检。

2．核酸检测用PCR法快速诊断结核分枝杆菌感染。

设计结核分枝杆菌特异rRNA片段的引物进行扩增，然后用结核分枝杆菌rRNA序列特异的DNA探针与之杂交。

PCR技术的特异性与敏感性均大于95％。

3．抗PPDIgG的检测用ELlSA法检测患者血清中抗PPDIgG，可作为活动性结核分枝杆菌感染的快速诊断方法之一。

肺结核病人的血清阳性率为80％—90％。

4．简述抗酸染色的步骤及结果，并举出两种抗酸菌。

①初染：

石炭酸复红加温染5min②脱色：

3%的盐酸酒精脱色1min③复染：

美兰染1min

结果：

抗酸菌为红色，非抗酸菌为蓝色。

结核分枝杆菌与麻风分枝杆菌均为抗酸菌

5．一患者怀疑患有肺结核，如何进行微生物学检查？

（包括标本采集至报告结果的全过程，检查方法应有传统方法和快速检查方法。

）

1）标本采集：

根据感染部位不同，采集不同的标本。

2）标本直接检查：

①显微镜检查②核酸检测③抗PPDIgG的检测。

3）分离培养与鉴定

4）药物敏感性试验

5）免疫学诊断

6）动物接种

厌氧性细菌

1.临床常见的致病性厌氧芽胞梭菌有哪些？

其致病条件是什么？

临床常见的致病性厌氧菌主要有破伤风梭菌、产气荚膜梭菌、肉毒梭菌与艰难梭菌。

其致病条件是大面积创伤、局部供血不足。

92.简述破伤风梭菌的形态及培养特性。

形态：

菌体细长，由周鞭毛，能运动。

无荚膜。

芽胞正圆形，比菌体大，位于菌体顶端，使细菌呈鼓槌状。

培养特性：

专性厌氧菌普通培养基不易生长。

在血平板上37℃培养48小时始见薄膜状爬行生长，伴ß

溶血。

93.简要列出破伤风的防治措施。

①采用注射破伤风类毒素的主动免疫法，作为特异性预防。

②迅速对伤口进行清创扩创，防止形成厌氧微环境，是十分重要的防治措施。

③特异性治疗使用抗毒素。

94.简要比较无芽胞厌氧菌与厌氧芽胞梭菌的感染特点。

5.产气荚膜梭菌的形态结构及培养特性。

革兰阳性粗大杆菌，芽胞位于次极端，呈椭圆形，无鞭毛。

在菌体内可形成明显的荚膜。

厌氧，但不如破伤风梭菌厌氧严格。

最适生长温度45℃时，繁殖周期仅为8min，在血平板上，多数菌株有双层溶血环。

在蛋黄琼脂平板上，菌落周围出现乳白色浑浊圈。

在牛奶培养基内能分解乳糖产酸产生“汹涌发酵”现象。

96.肉毒梭菌的致病机理及防治原则

其致病物质是肉毒毒素，肉毒毒素是已知最剧烈的神经毒素。

肉毒毒素经胃肠道吸收入血后，作用于中枢神经系统的脑神经核和外周神经-肌肉接头处，阻碍乙酰胆碱的释放，引起运动神经末梢功能失调，导致肌肉麻痹。

97.试举出四种由产气荚膜梭菌引起的疾病名称。

气性坏疽、食物中毒、坏死性肠炎、深部脓肿。

98.为什么所有的脆弱类杆菌对青霉素具有耐药性？

治疗应选用哪些抗生素。

因脆弱类杆菌是革兰阴性菌，青霉素的作用位点是五肽交联桥，革兰阴性菌无五肽交联桥，所以对青霉素耐药。

治疗应选用氯霉素、氨苄青霉素、甲硝唑等。