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1、 快速诊断：直接凝集免疫荧光菌球法协同凝集试验乳胶凝集试验分子生物学方法非发酵革兰阴性杆菌1. 假单胞菌属的代表菌种是何菌？其生物学性状有何特点？答：铜绿假单胞菌是假单胞菌属的代表菌种。其生物学特性主要有4不生长，而42生长。在血琼脂、麦康凯培养基上均可形成5种不同形态的菌落，在普通培养基上可产生多种色素。2.非发酵菌鉴定原则及初步分群试验分群依据：氧化酶试验葡萄糖氧化发酵动力麦康凯培养基上生长情况。3.假单胞菌的概念及其共同特点假单胞菌属为需氧、有鞭毛、无芽胞、无荚膜的革兰阴性菌，氧化酶试验阳性，多为腐生菌，少数为植物和动物寄生菌，大多为条件致病菌。其共同特点是：革兰阴性、直或微弯、较细长、

2、散在排列、无芽胞、有荚膜，多数有鞭毛，专性需氧，生长温度范围广，最适生长温度35，少数能在4或42生长。生长中可产生各种水溶性色素。4.简述铜绿假单胞菌的检验方法标本的采集：按疾病和检查目的，采取不同的标本。标本直接检查：直接显微镜检查；抗原检测；核酸检测。分离培养和鉴定。棒状杆菌属1简述白喉棒状杆菌的致病过程。白喉棒状杆菌存在于白喉患者的喉头气管及鼻腔粘膜，有时皮肤、结膜等部位也可见到。传染源为患者及带菌者，细菌多随飞沫或污染的物品传播，感染后白喉棒状杆菌在鼻咽部粘膜处繁殖并产生外毒素，引起局部炎症和全身中毒症状。白喉杆菌在侵犯局部增殖，产生外毒素致病。2简述白喉杆菌体外毒力试验的原理、方法

3、及结果判断。琼脂平板毒力试验。将含有20%牛血清肉汤琼脂分注与平皿中，每只平皿10ml，50冷却，在凝固之前，将浸有白喉抗毒素血清稀释液的滤纸条沉于琼脂内，制成平板（Elek平板）。在与滤纸条相垂直的方向将待检菌画直线接种，划线宽度约6-7mm，两端与皿壁连接。同时，与之相距10mm处平行划线接种一标准产毒菌株，作为阳性对照。37培养24-48小时，若菌苔两侧出现斜向外延伸的乳白色沉淀线，并与其邻近的标准产毒株的沉淀线相吻合，则为产毒株。SPA协同凝集试验：将白喉抗毒素IgG先吸附在SPA上，再加入待检菌培养物上清液。若有白喉外毒素，则与SPA-IgG结合出现可见的凝集反应。对流电泳：将已知的

4、白喉抗毒素和待检菌培养液分置琼脂板两孔之中，电泳30min后，若两孔之间出现白色沉淀线，表明待检菌为产毒株。革兰阳性需氧杆菌1.临床上对疑似的炭疽患者怎样鉴定病原。若从标本中检出革兰阳性大杆菌，两端平截、呈竹节状排列，并有明显荚膜，在人工培养基上生长可产生芽孢，呈卵圆形，小于菌体，位于菌体中央；在普通琼脂平板上形成灰白色、扁平、干燥、无光泽的菌落；动力阴性，牛乳凝固试验、噬菌体裂解试验、串珠试验和青霉素抑菌试验均为阳性，则可报告：“检出炭疽芽胞杆菌”。有条件者可应用DNA探针，其敏感性高，特异性强。其他鉴定试验作为参考指标，可根据具体情况酌情选做。同时应注意与其它芽胞杆菌相鉴别。放线菌属与诺卡

5、菌属分支杆菌1. 简述结核菌素试验的原理、方法及结果分析和实际应用。（1）原理：结核菌素试验属于迟发型超敏反应，用结核菌素试剂作皮肤试验，感染过结核分枝杆菌或接种过卡介苗者，一般都出现阳性反应。（2）方法：取5UPPD或OT0.1ml注射于前臂掌侧皮下，经4872h检查反应情况。应特别注意局部有无硬结，不能单独以红晕为标准。（3）结果分析：阳性 注射部位硬结、红肿直径0515cm之间。这表明机体曾感染过结核，出现超敏反应，但不表示正患结核病；强阳性 硬结直径超过15cm以上，表明可能有活动性结核，应进一步检查；阴性 注射部位有针眼大的红点或稍有红肿，硬结直径小于05cm，说明无结核感染，但应考

6、虑下述情况：如受试者处于原发感染的早期，或正患有其他传染病（如荨麻疹等）、霍奇金病、结节病、艾滋病。（4）应用：选择BCG接种对象及测定接种效果，结核菌素反应阴性者应接种BCG；结核菌素试验对婴幼儿可做诊断结核病之用；可在未接种BCG的人群中作结核分枝杆菌感染的流行病学调查；可借用其测定肿瘤病人的细胞免疫功能。2. 结核分枝杆菌细胞壁中脂质含量高，这一特点有何意义？结核分枝杆菌胞壁含脂质多，与其染色性、抵抗力、生长速度及致病性等特性有密切关系，脂质中的分枝菌酸使其具有抗酸性；细胞壁含大量脂质，可防止菌体内水分的丢失，故对干燥的抵抗力特别强；同时影响营养物质的吸收，故生长缓慢，且脂质中的磷脂、索

7、状因子、蜡质D、硫酸脑苷脂等毒性成分以不同机制致病。3简述从标本中检验结核分枝杆菌的方法。1显微镜检查 （1）直接涂片染色镜检：是一种临床常用的简易快速的检查方法。直接涂片法是用接种环取病人痰液中浓厚部分或离心沉淀（3000rmin，20min）的尿沉淀物23接种环涂片，涂片要厚。经自然于燥和火焰固定后进行齐-尼抗酸染色，或作金胺“o”荧光染色。前法用油镜检查，后法用荧光显微镜高倍镜检查。镜检时应仔细查遍整个涂片或观察至少100个视野。结核分枝杆菌抗酸染色后呈红色，其它细菌和细胞为蓝色。经荧光染色的结核分枝杆菌，在黑色背景中呈亮黄色。涂片镜检结果应报告“找到抗酸性杆菌或“未找到抗酸性杆菌”，而

8、不能报告“找到结核分枝杆菌”。 （2）浓缩集菌涂片检查法：如果直接涂片镜检不易检出结核杆菌，应采用浓缩集菌涂片检查法，以提高结核杆菌的检出率。所谓浓缩集菌涂片即为将采集标本离心，取沉淀涂片，或是采用漂浮集菌法，集菌后标本经反复多次使涂层加厚，一般取34个接种环，涂抹面积大约直径在15mm即可，干燥固定后染色镜检。2核酸检测 用PCR法快速诊断结核分枝杆菌感染。设计结核分枝杆菌特异rRNA片段的引物进行扩增，然后用结核分枝杆菌rRNA序列特异的DNA探针与之杂交。PCR技术的特异性与敏感性均大于95。3抗PPDIgG的检测 用ELlSA法检测患者血清中抗PPDIgG，可作为活动性结核分枝杆菌感染

9、的快速诊断方法之一。肺结核病人的血清阳性率为8090。4简述抗酸染色的步骤及结果，并举出两种抗酸菌。初染：石炭酸复红加温染5min脱色：3%的盐酸酒精脱色1min复染：美兰染1min 结果：抗酸菌为红色，非抗酸菌为蓝色。 结核分枝杆菌与麻风分枝杆菌均为抗酸菌5一患者怀疑患有肺结核，如何进行微生物学检查？（包括标本采集至报告结果的全过程，检查方法应有传统方法和快速检查方法。）1）标本采集：根据感染部位不同，采集不同的标本。 2）标本直接检查：显微镜检查核酸检测抗PPDIgG的检测。 3）分离培养与鉴定 4）药物敏感性试验 5）免疫学诊断 6）动物接种厌氧性细菌1.临床常见的致病性厌氧芽胞梭菌有哪

10、些？其致病条件是什么？临床常见的致病性厌氧菌主要有破伤风梭菌、产气荚膜梭菌、肉毒梭菌与艰难梭菌。其致病条件是大面积创伤、局部供血不足。9 2.简述破伤风梭菌的形态及培养特性。形态：菌体细长，由周鞭毛，能运动。无荚膜。芽胞正圆形，比菌体大，位于菌体顶端，使细菌呈鼓槌状。 培养特性：专性厌氧菌普通培养基不易生长。在血平板上37培养48小时始见薄膜状爬行生长，伴溶血。9 3.简要列出破伤风的防治措施。采用注射破伤风类毒素的 主动免疫法，作为特异性预防。迅速对伤口进行清创扩创，防止形成厌氧微环境，是十分重要的防治措施。特异性治疗使用抗毒素。9 4.简要比较无芽胞厌氧菌与厌氧芽胞梭菌的感染特点。5.产气

11、荚膜梭菌的形态结构及培养特性。革兰阳性粗大杆菌，芽胞位于次极端，呈椭圆形，无鞭毛。在菌体内可形成明显的荚膜。厌氧，但不如破伤风梭菌厌氧严格。最适生长温度45时，繁殖周期仅为8min，在血平板上，多数菌株有双层溶血环。在蛋黄琼脂平板上，菌落周围出现乳白色浑浊圈。在牛奶培养基内能分解乳糖产酸产生“汹涌发酵”现象。9 6.肉毒梭菌的致病机理及防治原则其致病物质是肉毒毒素，肉毒毒素是已知最剧烈的神经毒素。肉毒毒素经胃肠道吸收入血后，作用于中枢神经系统的脑神经核和外周神经-肌肉接头处，阻碍乙酰胆碱的释放，引起运动神经末梢功能失调，导致肌肉麻痹。9 7.试举出四种由产气荚膜梭菌引起的疾病名称。气性坏疽、食物中毒、坏死性肠炎、深部脓肿。9 8.为什么所有的脆弱类杆菌对青霉素具有耐药性？治疗应选用哪些抗生素。因脆弱类杆菌是革兰阴性菌，青霉素的作用位点是五肽交联桥，革兰阴性菌无五肽交联桥，所以对青霉素耐药。治疗应选用氯霉素、氨苄青霉素、甲硝唑等。