番茄红素和β胡萝卜素提取文档格式.docx
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色谱法包括薄层法、柱色谱、纸色谱、气相色谱和液相色谱,本学期只做薄层色谱.
色谱法是别离鉴定有机化合物的常用方法.
即在两相间中,分配系数
原理：
利用混合物各组分在固定相和流动相的溶解度的不同,
的不同而使各组分分开.
特点：
时间短,别离效果好,需要样品量少.适用于在较高温度下容易发生化学变化的
化合物.
1.薄层色谱法
事先准备：
用铅笔和尺子轻轻画出起始线和终止线；
点样：
用直径1mm的平头毛细管点取提取物,先在废纸上点一下〔快速〕,然后在起
始线少量屡次的点样〔保证一定的浓度,一般需要50次以上〕.待溶剂挥发以后,轻
放到装好展开剂的展缸内,不要让展开剂溅起或倾斜.
胡萝卜素〔黄点〕易
展开〔爬板〕：
当展开剂爬到终止线时,停止爬行,取出.由于
挥发,所以要尽快画出黄点的位置；
Rf值的计算：
别离效果好的话Rf值应在0.15〜0.75之间.
意义：
定性鉴定,检测化学反响等等.
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点样：
在薄板一端10mm〔下〕及另一端5mm〔上〕处用铅笔轻轻划一道痕迹,用直径小于1mm的毛细管〔平口〕点样,点样时样点一定要小,可重复在一点上点几次,使样品点小而又有一定的浓度,一块板上可以点两点；
展开剂的选择：
根据样品点的极性而定,极性大的化合物可选用极性较大的展开剂.为
到达较好的别离效果,可以选用混合溶剂.做屡次展开后可确定一适宜的配比.展开时,
至溶剂前沿离板顶5mm停止.
显示方法：
A〕有色化合物可以直接观察；
B〕无色的,用显色剂显色,如碘熏法、紫
外线显色,用硅胶GF254,有样品点的位置在紫外线照射下发暗.
Rf值计算公式：
Rf=溶剂的最高浓度中央溶剂前沿至原点的中央距离.
考前须知
本次试验使用95%乙醇和石油醛提取.两种混合后要用NaCL溶液洗涤.乙醛主要进
入水相,建议水相不要弃去.点样时在一块板上点两点：
一为水相,一为有机相.观察比拟有何不同.
展开剂的配比一定要限制为石油醒：
丙酮=9:
1.否那么别离效果不太好.同时可以做一
个比拟,采用12:
1.在混合展开剂中丙酮的极大性大于石油醍,因此采用丙酮含量增大,极性增大,使得别离效果很差.如果增加石油醍的含量,使得展开剂的极性变小分离效果好.
观察：
如果红点紧追黄点,且Rf0.75,那么要增加石油醛的配比,如12：
1.
考前须知〔II〕
番茄红素为红色,-胡萝卜素为黄色,展开后的薄板放置一段时间后,样品颜色褪去.
由于-胡萝卜素极易氧化,故在提取和展开过程中,注意不要敞开口,要用瓶盖盖住.
番茄红素的双键比-胡萝卜素的双键多,因此番茄红素的极性大,在爬板时爬地慢,
在下面,-胡萝卜素的极性小,爬地快,且易氧化.
展开缸用后不要用水洗！
薄板展开后临摹在实验报告上,板用后洗干净放回窗台上地塑料筐内.
要求
在实验报告临摹一块走好的薄板一一最理想的,如果第一块走的很好的话,就不用再
走其他的板了.
薄层层析在有机化学中的应用
薄层层析在有机化学中有好多种用途,主要如下：
①证实两个化合物相等；
②测定混合物种组分的数目；
③决定适用于柱层析别离用的溶剂；
④监控柱层析别离；
⑤检查通过柱层析、结晶或萃取素谜到的别离的有效程度；
⑥监控一个反响的进程.
薄层层析〔TLC〕的优缺点
a.优点：
只需使用少量物料,物料不浪费.用许多种显示法中,可以检测出少于十分之一
微克〔107克〕的物料；
b.另一方面,也可使用多达1mg的样品,使用尺寸大〔边长9英寸〕,涂层相对较厚〔大
于500微米〕的制备性大板,往往一次就可能别离0.2-0.5g物料.
c.主耍缺点是不同用于挥发性的物料,由于它们会从板上挥发掉.
d.薄层层析可以证实两个猜测等同的化合物事实上确实等同.只需将两个化合物并排地点
在一块板上,然后将板展开.如果两个化台物在板上移动同样地距离,即有同一Rf值,
它们就有可能是等同地.如果斑点地位置不一样,那么这两个化合物肯定是不同的.重要
的是将两个化合物点在一块板上.
e.薄层层析法可以用于证实一个化台物究竟是单纯物质还是混合物.不管板在展开时用何
种溶剂,单纯的物质总是只给出一个点.另一方面,假设用各种溶剂对一个混合物进行实
验时,该混合物中组分的数目就可以被确定下来.
f.当有一个给定的混合物拟用柱层析进行别离时,可以用TLC来选择最正确溶剂.
g.TLC常可用于监控一个反响的进程,可在反响过程中的各点取出反响混合物样品并进行
TLC分析.
背景资料：
视觉的化学
眼睛时如何发挥其功能的这是一个有待化学家去探明的有趣而又有挑战性的研究课
题.光的被发觉和把这个信息传递到脑部的过程中涉及到怎样的化学呢
第一次对眼睛功能的正式研究由FranzBojl在1877年开始进行的.Boll证实蛙眼睛
的视网膜的红颜色可被强光褪成黄色.如果随后把蛙保持在暗处,视网膜的红颜色重新
又慢慢恢复.BoIl认为蛙觉察光的水平必定与一种能褪色的物质有联系.
目前大家所知的关于视觉的大局部知识是哈佛大学GeorgeWald的出色工作的结果.
这一工作开始于1933年.他最终获得了Nobel生物医学奖.Wald验证了把光转变成某种形式的,能被传递到脑部的化学信息的方法以下证实这一过程的概要.
眼睛的视网膜由两种光受体细胞组成,即视网膜杆细胞和视网膜锥细胞.视网膜杆细胞
负责暗淡光线时的色视觉,而视网膜锥细胞那么负责明亮光线时的色视觉.施加于视网膜
杆细胞和视网膜锥细胞的化学原理时相同的,但对视网膜锥细胞的化学作用原理的了解
不及视网膜杆细胞的了解详细.
每个视阿膜杆细胞中台几百万盖视紫红质分子.视紫红质是一种叫做视蛋白的蛋白质和
一个由维生素A衍生的11-顺-视网膜醛〔有时称为视黄醛〕分子组成的络合物.关于
视蛋白的结构几乎毫无所知.11-顺-视网膜醛的结构那么如下：
I】jpua〞
光的发觉涉及11-顺-视网膜醛的最初转变成它的全反式异构体.这是光在这一过程中
所扮演的唯一角色.可见光的光子的能量引起CI1和C12间的键的开裂,键开裂
后,就有可能使由此造成的自由基绕键自由旋转.当经过这种旋转后再重新形成键时,
便生成全反式视网膜醛.全反式视网膜醛比11-顺-视网膜醛稳定,这就是异构化作用
为何按以下所示方向自动地进行地原因.HCH-H
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这两种分子由于结构不同,因而形状各异.11-顺-视网膜醛具有明显弯曲地形状,且该
分子顺式双键两侧地两个局部倾向于处在不同地两个平面内.由于蛋白质有非常复杂和
专一地三维结构〔三级结构〕,因此11-顺-视网膜醛能和称为视蛋白地蛋白质以特殊地
方式互相缔合.全反式视网膜醛具有一种伸直的形状,整个分子倾向于处在单一平面内.
这种和11-顺-异构体相当不同的形状意味着全反式视网膜醛与视蛋白之间会有一种很
不同的缔合作用.
事实上,全反式视网膜醛由于其形状与这个蛋白质的形状不符合,因而缔合得非常之弱.
因此,紧接于视网膜醛异构化之后的一步是全反式视网膜醛与视蛋白解离.视蛋白在这
一解离过程中发生构型改变,而这异构型改变触发某种信息,后者由视神经传递至脑部,
脑部就把对一个光子的发觉登录下来,至于构型改变怎样被转译成神经脉冲,目前仍不
清楚.图中形象地说明了这-过程.
全反式视网膜醛受酶的作用叉被变回到11-顺-视网膜醛.11-顺-视网膜醛的再生包含
着全反式维生素A的形成,后者异构成它的异构体11-顺-异构体.维生素A被氧化成
1I-D厦-视网膜醛,后者与视蛋白结合形成视紫红质.这个过程可以说明如下：
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14
利用这一过程,可以发觉出从一种典型闪光灯射出的光子数少到10的弱光.光转换成
异构化的视网膜醛说明了一种非常高的量子效率.被一个视紫红质分子所吸收的每个光
量子实际上都能使ll-顺-视网膜醛异构成全反式视网膜醛.
可从上面那个反响图解中看出,视网膜醛从维生素A衍生,而维生素A只需将其一个
CH20H基团氧化为醛基便转化为视网膜醛了.存在于食物中的维生系A的前体为-
胡萝卜素,它可以转化为维生素Ao-胡萝卜是胡萝卜的黄色色素,它是一族称为类
胡萝卜素的长链多烯化台物的一个实例.
willstatter在1907年确定了胡萝卜素的结构,但直到1931-1933年才知道胡萝卜索
实际上存在三中异构体.-胡萝卜素和-胡萝卜素不同,-异构体C4和C5间有个
双键,不像-异构体在C5和C6间有个双键,-异构体只有一个环,与-异构体中
的一个环相同,但在-异构体中Ci和C6间的一个环是翻开的.三个异构体中-异
构体无疑是最普遍的.
-胡萝卜素在肝脏中被转变为维生素Ao从理论上说,一分子-胡萝卜素通过
C15和C15之间的双键开裂理应生成两分子维生素A,但实际上每一分子胡萝卜素只能
产生一分子维生素A.如此生成的维生索A在眼睛中被转变成11-顺-视网膜醛.
还有一个有待解决的有趣的问题,即视蛋白改变构型时导致向脑部发生信息所用的方式
问题.这个问题需要视蛋白的整个结构方面的某些有关知识.视网膜的视网膜锥细胞
的色视觉特性的本质也是未来的一个有趣的研究课题.对于和11-顺-视网膜醛有同样
获得有益的应用.
高的量子效率的其它吸光物质的研究定能在诸如照相领域中好吧,抄的豆丁的！
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出处
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