步步高考前3个月生物通用版专题复习12 教材基础实验考点35 观察类实验和鉴定提取类实验docWord文件下载.docx
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脂肪颗粒被染成红色
C
检测植物组织中的葡萄糖
甲基绿
葡萄糖与甲基绿作用，生成绿色沉淀
D
观察DNA和RNA在细胞中的分布
斐林试剂吡罗红
斐林试剂将DNA染成绿色，吡罗红将RNA染成红色
答案 A
解析 在观察根尖分生组织细胞的有丝分裂实验中，用碱性染料如龙胆紫溶液或醋酸洋红液进行染色，使细胞核中的染色体（质）着色，醋酸洋红液可将染色体（质）染成紫红色，A项正确。
脂肪的检测试剂为苏丹Ⅲ染液或苏丹Ⅳ染液，双缩脲试剂是用来检测蛋白质的试剂，B项错误。
植物组织中的葡萄糖属于还原糖，可用斐林试剂进行检测，看是否产生砖红色沉淀；
而甲基绿可将DNA染成绿色，故C、D项错误。
5．（2010·
新课标全国，3）若要在普通显微镜下观察到质壁分离、RNA和脂肪，下列四组材料中应选择的一组是（ ）
A．水稻胚乳和花生子叶B．天竺葵叶和水稻胚乳
C．紫色洋葱和花生子叶D．天竺葵叶和紫色洋葱
答案 C
解析 在普通光学显微镜下观察细胞质壁分离所选择的材料应为成熟的植物组织细胞；
观察RNA和脂肪时均需对材料进行染色处理，取材时应选用白色或近于白色的组织，以免造成对实验观察效果的干扰，而且花生子叶中脂肪的含量较多，所以C选项正确。
6．（地方卷重组）判断下列有关观察类实验的叙述：
（1）人的口腔上皮细胞经处理后被甲基绿染色，其细胞核呈绿色（2014·
重庆，1A）（ √ ）
（2）使用显微镜观察装片，在10倍物镜下观察到的图像清晰、柔和，若直接转换至40倍物镜观察时，除调节细调节器外，还需要调用凹面镜（或调高亮度）、放大光圈（2013·
上海，13改编）（ √ ）
（3）若比较有丝分裂细胞周期不同时期的时间长短，可通过“观察多个装片、多个视野的细胞并统计”以减少实验误差（2013·
福建，4D）（ √ ）
（4）剪取大蒜根尖分生区，经染色在光镜下可见有丝分裂各时期（2014·
重庆，1B）（ ×
）
（5）在光镜的高倍镜下观察新鲜菠菜叶装片，可见叶绿体的结构（2014·
重庆，1D）（ ×
（6）制作细胞的有丝分裂装片时，洋葱根尖解离后直接用龙胆紫溶液染色（2014·
山东，4B）（ ×
（7）低温诱导染色体加倍实验中，将大蒜根尖制成装片后再进行低温处理（2014·
山东，4C）（ ×
（8）用改良苯酚品红染色观察低温诱导的植物染色体数目变化（2014·
四川，4A）（ √ ）
（9）用显微镜观察洋葱根尖装片时，需保持细胞活性以便观察有丝分裂过程（2015·
山东，3C）（ ×
题组二 鉴定提取类实验
7．（地方卷重组）判断下列有关鉴定提取类实验的叙述：
（1）鉴定待测样液中的蛋白质时，先加NaOH溶液，振荡后再加CuSO4溶液（2014·
山东，4A）（ √ ）
（2）还原糖的鉴定实验中隔水加热时，试管中液体的液面应低于烧杯中水的液面（2014·
江苏，22B）（ √ ）
（3）还原糖的鉴定实验结束时将剩余的斐林试剂装入棕色瓶，以便长期保存备用（2014·
江苏，22D）（ ×
（4）在叶绿体色素提取实验中，在95%乙醇中加入无水Na2CO3后可提高色素的溶解度（2013·
重庆，3D）（ √ ）
（5）叶绿体色素滤液细线浸入层析液，可导致滤纸条上色素带重叠（2015·
山东，3A）（ ×
（6）“利用双缩脲试剂检测生物组织中的蛋白质和利用重铬酸钾检测酵母菌培养液中的酒精”的实验中为达到实验目的，必须在碱性条件下进行（2015·
天津，5AC）（ ×
1．观察类实验
实验名称
细胞的状态
观察对象
染色剂
生物材料（及特殊要求）
死细胞
DNA和RNA的分布
吡罗红甲基
绿染色剂
人的口腔上皮细胞
DNA、RNA同时存在时染色剂要混合使用且现配现用
观察线粒体
活细胞
线粒体
健那绿
用生理盐水配制健那绿染液，用显微镜观察
观察细胞的减数分裂
染色体
无（为固
定装片）
蝗虫精母细胞
低温诱导染色体加倍
改良苯酚
品红染液
洋葱根尖细胞
染色前需漂洗干净
观察细胞的有丝分裂
龙胆紫溶
液（或醋酸
洋红液）
用显微镜观察
多种多样的细胞
活或死
细胞
无（无需染色）
酵母菌细胞、水绵细胞、叶的
保卫细胞、鱼的红细胞等
观察叶绿体
叶绿体
藓类的叶（或菠菜叶、黑藻叶）
观察植物细胞的质壁分离与复原
紫色中央液泡的大小和原生质层的位置
紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞
（1）在上述实验中低倍镜和高倍镜的使用情况如何？
除上述实验外，还有什么实验中也用到了显微镜呢？
提示 上述实验中除了“观察植物细胞的质壁分离和复原”使用低倍镜即可外，其余均需要使用高倍显微镜；
还有“脂肪的切片法鉴定”、“探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化”也用到了显微镜。
（2）在哪些实验中用到了盐酸？
各起什么作用？
提示 ①“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中，质量分数为8%的盐酸的作用：
改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞；
使染色质中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。
②在“观察根尖分生组织细胞的有丝分裂”、“低温诱导植物染色体数目变化”的实验中，质量分数为15%的盐酸与体积分数为95%的酒精1∶1混合制成解离液，使组织细胞相互分散开来。
③在“探究酶在不同pH下的活性”的实验中，盐酸提供酸性环境。
④研究通过激素的调节过程中，斯他林和贝利斯的实验，在盐酸的作用下，小肠黏膜可能产生一种化学物质。
（3）分析下列相关实验中的取材问题。
①“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中能否选用哺乳动物的成熟红细胞？
为什么？
提示 不能。
因为哺乳动物的成熟红细胞无细胞核和细胞器，几乎不含有DNA和RNA。
②能否用观察叶绿体的材料来观察线粒体？
因为叶绿体中的色素的颜色会掩盖线粒体被健那绿染色后的颜色变化。
③在“观察细胞的有丝分裂”实验中为什么应注意观察呈正方形的根尖分生区细胞？
提示 呈正方形的根尖分生区细胞分裂旺盛，而呈长方形的细胞可能是伸长区或成熟区的细胞，没有分裂能力。
④在观察减数分裂实验中为什么不宜选择动物的卵巢和植物的雌蕊？
提示 因为雄配子的产生数量远远多于雌配子，更易观察到减数分裂。
⑤选用菠菜叶观察叶绿体时，为什么要取稍带些叶肉细胞的下表皮？
提示 因为靠近下表皮的叶肉细胞中的叶绿体较大而数目较少。
⑥为什么应选取成熟的植物细胞观察质壁分离与复原实验？
提示 因其含有中央大液泡，易于发生质壁分离与复原的实验现象。
2．鉴定提取类实验
颜色
生物材料
备注
淀粉的鉴定
碘液
蓝色
脱色的叶片等
若材料有颜色，需先脱色
还原糖的鉴定
斐林试剂
砖红色沉淀
苹果或梨匀浆等
现配现用、水浴加热
脂肪的鉴定
苏丹Ⅲ（或Ⅳ）染液
橘黄（或红）色
花生种子切片
需用高倍镜观察
蛋白质的鉴定
紫色
豆浆、稀蛋清等
先加A液，后加B液，摇匀使用
绿叶中色素的提取和分离
提取液：
无水乙醇；
分离液：
层析液
①胡萝卜素：
橙黄色；
②叶黄素：
黄色；
③叶绿素a：
蓝绿色；
④叶绿素b：
黄绿色
新鲜的绿叶（如菠菜叶）
加入二氧化硅是为了研磨得更充分；
碳酸钙可防止在研磨中色素被破坏
DNA的粗提取和鉴定
二苯胺试剂
鸡血细胞等
沸水浴加热5min
（1）斐林试剂能否用于蛋白质的鉴定？
提示 不能，因为用于蛋白质鉴定的双缩脲试剂B液是0.01g/mL的CuSO4溶液，两种试剂的本质不同。
斐林试剂的本质是新制的Cu（OH）2，故应将甲液和乙液混匀后使用，而双缩脲试剂的本质是碱性条件下的Cu2＋，故应先加A液造成碱性环境，再加B液摇匀使用。
（2）脂肪的鉴定是否一定要借助显微镜？
提示 不一定，因为脂肪的鉴定有两个方案，可磨碎后在试管内鉴定，肉眼观察即可，也可做切片借助显微镜观察。
（3）绿叶中色素的提取和分离有何区别？
提示 前者用无水乙醇提取法，原理是色素能够溶于有机溶剂无水乙醇中；
而后者用纸层析法，原理是色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的色素随层析液在滤纸条上扩散得快，反之扩散得慢。
考向一 观察类实验
海南，14）下列情况中，使用普通光学显微镜不能观察到的是（ ）
A．人红细胞在蒸馏水中体积增大、破裂的现象
B．洋葱鳞片叶表皮细胞膜的暗—亮—暗三层结构
C．分布在水绵受极细光束照射部位的好氧细菌
D．洋葱根尖细胞有丝分裂中期染色体的形态和分布
解析 洋葱鳞片叶表皮细胞膜的暗—亮—暗三层结构属于亚显微结构，在电子显微镜下才能看到。
其余属于光学显微镜下可以看到的显微结构。
2．（2016·
江苏，19）下列实验都需要使用光学显微镜进行观察，有关实验现象描述合理的是（ ）
实验编号
观察到的实验现象
①
观察植物细胞的质壁分离和复原
镜检1：
几乎整个紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞呈紫色；
镜检2：
不同细胞质壁分离的位置、程度并不一致
②
观察多种多样的细胞
菠菜叶表皮细胞由细胞壁、细胞膜、细胞质和细胞核组成；
人口腔上皮细胞具有细胞核和核糖体
③
洋葱根尖伸长区细胞长，液泡大；
分生区细胞呈正方形，多数细胞中呈紫色的染色体形态清晰
④
探究酵母菌种群数量的动态变化
酵母细胞呈球形或椭圆形，细胞核、液泡和线粒体的形态、数目清晰可见
A.实验①B．实验②
C．实验③D．实验④
解析 观察植物细胞的质壁分离和复原实验时，紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞中有中央液泡，占据整个细胞体积的绝大部分，呈紫色。
不同细胞的细胞液浓度大小不同，质壁分离的位置、程度并不一致，A正确；
用光学显微镜观察多种多样的细胞时，不能观察到核糖体，而且因细胞膜紧贴着细胞壁，也不能观察到细胞膜，B错误；
观察细胞有丝分裂时，洋葱根尖伸长区高度分化，细胞长，液泡大。
分生区细胞分化程度低，呈正方形，染色体经龙胆紫染色后呈紫色，形态清晰，但只有少数细胞处于分裂期，呈紫色，C错误；
线粒体需染色后才能观察到清晰的形态，酵母菌无大液泡，且在光学显微镜下观察细胞核不明显，D错误。
3．下列有关实验的叙述，正确的是（ ）
A．溴麝香草酚蓝水溶液在酸性条件下与酒精反应呈灰绿色
B．纸层析法分离叶绿体中的色素，蓝绿色色素带最宽，可判断其含量最多
C．新鲜的黑藻叶片不可以观察细胞的质壁分离与复原
D．秋水仙素诱导染色体数目加倍的实验中，解离后要用95%的酒精进行漂洗
解析 溴麝香草酚蓝水溶液是检测二氧化碳是否存在的试剂，重铬酸钾是检测酒精存在的，A错误；
叶绿体中色素分离的实验结果如图所示：
据图分析，色素带最宽的是叶绿素a，B正确；
黑藻叶片的叶肉细胞中液泡呈无色，叶绿体的存在使原生质层呈绿色，有利于质壁分离实验现象的观察，C错误；
秋水仙素诱导染色体加倍的实验中，解离后要用清水进行漂洗，D错误。
4．以下有关实验的叙述，正确的是（ ）
A．观察植物细胞有丝分裂的操作步骤：
取材→解离→染色→漂洗→制片→观察
B．CO2可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄，也可在酸性条件下使橙色的重铬酸钾溶液变成灰绿色
C．观察线粒体，把烘干处理的口腔上皮细胞放在健那绿染液中染色
D．“体验制备细胞膜的方法”和“探索生长素类似物促进插条生根的最适浓度”的实验都要使用蒸馏水
答案 D
解析 观察植物细胞有丝分裂的操作步骤：
取材→解离→漂洗→染色→制片→观察，A项错误；
CO2可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄，酒精可在酸性条件下使橙色的重铬酸钾溶液变成灰绿色，B项错误；
健那绿染液是将活细胞中线粒体染色的专一性染料，可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色，烘干处理会把细胞杀死影响观察，C项错误；
“体验制备细胞膜的方法”和“探索生长素类似物促进插条生根的最适浓度”的实验都要使用蒸馏水，作用分别是让细胞吸水涨破和做空白对照组的处理，D项正确。
5．用洋葱鳞片叶作为实验材料难以完成实验目的的是（ ）
A．观察细胞中DNA和RNA的分布
B．观察细胞中的线粒体
C．观察低温诱导细胞染色体数目加倍
D．观察质壁分离及复原
解析 洋葱鳞片叶内表皮细胞为无色，可用于观察细胞中DNA和RNA的分布，观察线粒体实验；
洋葱鳞片叶表皮细胞已经高度分化，不再分裂，因此不能用于观察低温诱导细胞染色体数目加倍；
洋葱鳞片叶外表皮细胞内含有紫色大液泡，适于观察质壁分离与复原。
考向二 鉴定提取类实验
6．（2016·
海南，15）下列实验中，加入试剂后不能产生特定颜色的是（ ）
A．取成熟香蕉匀浆，用斐林试剂检测还原糖
B．黑暗中生长24h的天竺葵叶片，用碘液检测淀粉
C．玉米根尖经甲基绿染色后，在显微镜下观察细胞核
D．花生子叶经苏丹Ⅲ染液染色后，在显微镜下观察脂肪颗粒
解析 成熟香蕉中含有较多可溶性还原糖，用斐林试剂检测出现砖红色沉淀；
黑暗中生长24h的天竺葵叶片，淀粉被消耗殆尽，加入碘液不会变蓝色；
玉米根尖经甲基绿染色后，在显微镜下观察细胞核呈绿色；
花生子叶经苏丹Ⅲ染液染色后，在显微镜下观察脂肪颗粒呈橘黄色。
7．（2016·
江苏，5）关于生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质和DNA的鉴定实验，下列叙述正确的是（ ）
A．还原糖、DNA的鉴定通常分别使用双缩脲试剂、二苯胺试剂
B．鉴定还原糖、蛋白质和DNA都需要进行水浴加热
C．二苯胺试剂和用于配制斐林试剂的NaOH溶液都呈无色
D．脂肪、蛋白质鉴定时分别可见橘黄色颗粒、砖红色沉淀
解析 还原糖鉴定试剂是斐林试剂，DNA鉴定试剂是二苯胺试剂，A错误；
鉴定还原糖和DNA需进行水浴加热，蛋白质鉴定不需进行水浴加热，B错误；
二苯胺试剂和用于配制斐林试剂的NaOH溶液都呈无色，C正确；
脂肪鉴定时可见橘黄色颗粒，蛋白质鉴定时呈紫色，D错误。
8．（2016·
江苏，17）下列用鲜菠菜进行色素提取、分离实验的叙述，正确的是（ ）
A．应该在研磨叶片后立即加入CaCO3，防止酸破坏叶绿素
B．即使菜叶剪碎不够充分，也可以提取出4种光合作用色素
C．为获得10mL提取液，研磨时一次性加入10mL乙醇研磨效果最好
D．层析完毕后应迅速记录结果，否则叶绿素条带会很快随溶液挥发消失
解析 CaCO3可防止酸破坏叶绿素，应在研磨时加入，A错误；
即使菜叶剪碎不够充分，但色素并没有减少，也可提取出4种光合作用色素，B正确；
由于研磨时乙醇挥发，故为获得10mL提取液，研磨时应加入多于10mL乙醇，C错误；
叶绿素条带不会随层析液挥发消失，D错误。
9．下列是关于酒精的鉴定及酒精在相关实验中运用的叙述，其中错误的是（ ）
A．在提取绿叶中的色素时可用无水酒精作为提取剂提取色素
B．用苏丹Ⅲ染液鉴定花生子叶中的脂肪时，需要用酒精洗去浮色
C．在碱性条件下用重铬酸钾溶液鉴定酒精，溶液颜色由橙色变成灰绿色
D．用质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%酒精的1∶1混合液对洋葱根尖进行解离
解析 叶绿体中的色素能溶于有机溶剂，因此可以用无水乙醇或丙酮来提取，A正确；
用苏丹Ⅲ染液鉴定脂肪时需要用50%的酒精洗去浮色，B正确；
在酸性条件下用重铬酸钾溶液鉴定酒精，溶液颜色由橙色变成灰绿色，C错误；
解离根尖细胞所使用的解离液是由体积分数为95%的酒精和质量分数为15%的盐酸等体积混合形成的，D正确。
考向三 综合类
10．下列各项实验中所用的试剂，作用相同的是（ ）
A．“体验制备细胞膜的方法”和“显微镜观察叶绿体”实验中，蒸馏水的作用
B．“绿叶中色素的提取”和“检测生物组织中的脂肪”实验中，酒精的作用
C．“检测生物组织中的还原糖”和“检测生物组织中的蛋白质”实验中，CuSO4的作用
D．“观察植物细胞有丝分裂”和“低温诱导植物染色体数目变化”实验中，盐酸的作用
解析 制备细胞膜实验中蒸馏水的作用是使细胞吸水涨破，而显微镜观察叶绿体实验中蒸馏水可以保持细胞的活性，A错误；
脂肪检测过程中酒精的作用是洗去浮色，绿叶中色素的提取实验中酒精的作用是溶解色素，B错误；
检测生物组织中的还原糖实验用的是新制氢氧化铜，而检测生物组织中的蛋白质用的是铜离子，C错误；
“观察植物细胞有丝分裂”用到盐酸的作用是使细胞分离开来，“低温诱导植物染色体数目变化”实验中，盐酸的作用也是使细胞相互分离，D正确。
11．紫色洋葱是生物学实验的常用材料，以下叙述错误的是（ ）
A．观察质壁分离与复原，宜选取紫色鳞片叶外表皮细胞
B．观察有丝分裂，宜选取洋葱根尖分生区细胞
C．提取液泡中的紫色色素，可用清水作溶剂
D．选取经低温诱导的洋葱根尖制成的临时装片，在显微镜下可观察到联会现象
解析 紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞有大液泡，并且液泡里含有紫色色素，在观察质壁分离与复原实验时适宜使用，A正确；
观察有丝分裂时，需要选择连续分裂的细胞，洋葱根尖分生区细胞属于连续分裂细胞，B正确；
液泡里是以水为基础的液体环境，所以液泡中的色素是水溶性色素，可用清水作溶剂，C正确；
联会现象发生在减数分裂过程中，而洋葱根尖细胞不进行减数分裂，D错误。
12．下列是有关生物实验的四幅图，其中说法正确的是（ ）
A．图甲由左转到右后，视野中所观察到的细胞数目增多
B．图乙表明，当pH从5上升至7的过程中，酶的活性先升高后降低
C．图丙是正在发生质壁分离的细胞，细胞的吸水能力增大
D．图丁在观察植物细胞有丝分裂的实验中部位是④
解析 图甲由左侧（低倍镜）转到右侧（高倍镜）后，视野中所观察到的细胞数目减少，A错误；
图乙表明，当pH从5上升至7的过程中，酶的活性先升高后降低，B正确；
图丙可能是正在发生质壁分离的细胞，也可能是正在发生质壁分离复原的细胞，C错误；
图丁在观察植物细胞有丝分裂的实验部位是③分生区，D错误。
13．下列有关清水在相关实验中应用的说法，不正确的是（ ）
A．制备细胞膜的实验中，置于清水中的红细胞渗透压逐渐变小直至涨破
B．用健那绿染液对口腔上皮细胞染色后要用清水洗去浮色
C．将发生质壁分离的洋葱鳞片叶外表皮活细胞置于清水中后，细胞液颜色变浅
D．制作洋葱根尖分生区装片时，染色前需要用清水洗去解离使用的药液
解析 制备细胞膜的实验中，置于清水中的红细胞会渗透吸水，因此渗透压逐渐变小直至涨破，A正确；
用健那绿染液对口腔上皮细胞染色后不需要用清水洗，B错误；
将发生质壁分离的洋葱鳞片叶外表皮活细胞置于清水中后，细胞会渗透吸水，因此细胞液颜色变浅，C正确；
制作洋葱根尖分生区装片时，染色前需要用清水洗去解离使用的药液，防止解离过度，D正确。
14．下列生物实验的有关操作，正确的是（ ）
A．使用斐林试剂检测还原糖时，先在待测样液中加甲液，混合后再滴加乙液
B．观察洋葱根尖细胞有丝分裂时，用低倍镜找到分生区细胞后，再换成高倍镜观察
C．制作藓类叶片临时装片观察叶绿体时，取藓类小叶放入生理盐水中，盖上盖玻片
D．提取绿叶色素时，取鲜绿叶置于研钵中，加蒸馏水、SiO2、CaCO3一起研磨
解析 检测还原糖时，斐林试剂甲液与乙液应该现配现用、等量混合使用，还需要水浴加热才会出现砖红色沉淀，A错误；
观察洋葱根尖细胞有丝分裂时，用低倍镜找到分生区细胞后，再换成高倍镜观察，B正确；
制作藓类叶片临时装片观察叶绿体时，取藓类小叶放入清水中，盖上盖玻片，C错误；
色素不溶于水，溶于有机溶剂如无水乙醇、丙酮等。
提取绿叶中的色素时，取鲜绿叶置于研钵中，加无水乙醇、SiO2、CaCO3一起研磨，D错误。
15．为了寻找更为理想的“观察植物细胞有丝分裂”的实验材料以及探究不同材料适宜的取材时间，科研人员进行了如下实验：
步骤1：
剔除大蒜蒜瓣和红葱的老根，置于装有适量清水的烧杯中，在20～25℃下培养，每2d更换一次清水。
步骤2：
待大蒜和红葱的须根长出后，每24h测量须根长度，记录并处理数据。
结果如图1。
步骤3：
若干天后，从8：
00～16：
00，每2h取生长健壮的须根根尖制成临时装片。
观察时随机选取30个视野，统计各视野中分裂期细胞数以及细胞总数，并计算细胞分裂指数（分裂期细胞数/细胞总数），结果如图2。
分析回答：
（1）绘制图1所依据的数据，应该是同一时间测得的须根长度的__________。
（2）步骤3中，制作根尖临时装片的过程是取材→解离→______________________。
（3）植物细胞壁的胞间层由果胶组成，使相邻细胞粘连。
洋葱细胞的胞间层比大蒜、红葱厚，若以洋葱为材料进行本实验，解离时要____________________或______________________等，否则观察时会发现____________。
（4）根据本实验结果，最适宜的材料及取材时间是__________________________。
答案
（1）平均值
（2）漂洗→染色→制片
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