植物组培实验报告共17页Word文件下载.docx

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根和芽的分化由生长素和细胞分裂素的比率所决定，这一比率高时促进生根，比率低时促进茎芽的分化，比率适中时，组织则倾向于以一种无结构的方式生长。

通过改变培养基中这两类生长调节物质的相对浓度可以控制器官的分化。

　　7.污染：

批在组培过程中，由于真菌、幼苗等微生物的侵染，在培养容器内滋生大量的菌斑，使试管苗不能生长和发育的现象。

　　8.褐变：

指在组培过程中，培养材料向培养基中释放褐色物质，致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随之慢慢变褐而死亡的现象。

　　9.玻璃化现象：

指试管苗因生理失调而引起的嫩茎、叶片出现半透明状和水渍状的现象。

　　10.无菌操作：

亦称接种。

指将经过表面灭菌后的植物材料在无菌环境中切碎或分离出器官、组织或细胞转移到无菌培养基上的过程。

由于整个过程均在无菌条件下进行，所以将这个过程称为无菌操作。

　　11.植物组织培养：

指在无菌条件下，将离体的植物器官（如叶、花、未成熟的果实、种子）、组织（如形成层、花药组织、胚乳）、胚胎（如成熟和未成熟的胚）、细胞或原生质体，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，使其长成完整的植株或生产具有经济价值的其他产品。

这是广义的植物组织培养概念，而狭义的植物组织培养是指以植物各部分离体组织或愈伤组织为外植体的离体无菌培养。

　　12.培养基：

培养基是提供植物或其他生物生长发育所需各种养分的介质。

　　13.胚状体：

亦称体细胞胚。

指在组培过程中，由植物体细胞所形成的类似于合子胚的结构。

它具有根、茎结构，能够一次性形成再生植株。

其与正常的受精卵发育方式相似，在形成过程中也要经过原胚、球形胚、心形胚等阶段。

14.外植体：

由活体植物上切取下来，用以进行离体培养的那部分组织或器官。

　　15.愈伤组织：

原指植物在受伤后伤口表面形成的一团无序生长的薄壁细胞，在组织培养中，是指在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。

其特点是：

细胞分裂快，结构疏松，缺少结构组织，颜色浅而透明。

　　16.初代培养：

是指在组培过程中，最初建立的外植体无菌培养阶段。

即无菌接种完成后，送入培养室的外植体在适宜的光、温、气等条件下被诱导成无菌短枝（或称茎梢）、不定芽（丛生芽）、胚状体或原球茎等中间繁殖体的过程。

　　17.中间繁殖体：

通过初代培养所获得的不定芽、无菌茎梢、胚状体或原球茎等无菌材料。

　　18.继代培养：

中间繁殖体由于数量有限，所以需要将他们切割、分离后转移到新的培养基中培养增殖的过程。

　　19.繁殖系数：

指单位植物种苗的收获量与接种量之比。

　　20.原球茎：

亦称绿色小球。

多指兰科植物的茎尖经组培，形成一个扁形球状物，，其基部生有假根。

它们在形态上与种子萌发时由胚形成的原球茎相似。

　　21.悬浮培养：

亦称植物细胞悬浮培养。

指使细胞团在液体培养基中进行培养的一种方法。

通常可分为成批培养和连续培养两种类型。

　　22.后生遗传变异：

亦称驯化现象。

指细胞在发育、分化过程中，对基因表达的调控上所发生的变化，其不涉及基因结构的变化。

后生遗传变异在取消诱发条件后，还能通过细胞分裂在一定时间内继续存在。

在一般情况下，它不通通过再生过程遗传给植株，因而这种变异无法继续表现在再生植株的二次组培中。

　　23.嵌合体：

亦称异源嵌镶体。

植物体的突变往往只影响分生组织的一部分，使突变的组织呈扇状或层状。

用这种分生组织所繁殖的植物，因同时具有两个或多个遗传性状不同的组织，而表现出不同的性状和特点的现象。

　　24.原生质体融合　　25.早熟萌发　　26.单倍体植株　　27.外植体　　28.愈伤组织培养：

　　29.玻璃化现象30.体细胞胚　　31.无病毒苗　　32.植板率　　检测法　　选择题　　1．一植株下列（B）部位病毒的含量最低。

　　A叶片细胞B茎尖生长点细胞　　C茎节细胞D叶柄细胞　　2．对于不易生根，较难形成完整植株的植物来说，最好的脱毒方法是（C）。

　　Ａ茎尖脱毒Ｂ愈伤组织脱毒　　Ｃ微尖嫁接脱毒Ｄ花药脱毒　　3．培养基的pH一般是（C）。

　　A～～　　C～～　　4．下列不属于生长素类的植物激素是（A）。

　　AKtBIAA　　CNAADIBA　　5．1962年，Murashige和Skoog为培养烟草花叶细胞设计了（B）培养基，其特点是无机盐浓度较高。

　　ＡＷhiteＢＭＳ　　ＣN6ＤＭiller　　6．第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是（B）。

AMorelBHaberlandt　　CSchleidenDWhite　　7．下列不属于大量元素的盐是（C）。

　　ANH4NO3BKNO3　　CZnSO4·

7H2ODMgSO4·

7H2O　　8．在组织培养中，IAA、ZT和GA必须用（B）法灭菌　　Ａ高压灭菌Ｂ过滤灭菌　　Ｃ干燥灭菌Ｄ照射灭菌　　9．要配置母液浓度为/ml的IBA500ml，需要IBA（B）mg。

　　A20B50　　C100D1000　　10．下列不属于微量元素的盐是（A）　　ACaCL2·

2H2OBZnSO4·

7H2O　　CH3BO3DCuSO4·

5H2O　　11．对于不易生根，较难形成完整植株的植物来说，最好的脱毒方法是（C）。

　　A．茎尖脱毒B．愈伤组织脱毒　　C．微尖嫁接脱毒D．花药脱毒　　12．禾本科植物的花粉培养一般采用下列哪种培养基（B）。

　　A．B5B．N6　　C．HD．尼许　　13．培养基的pH一般是（C）。

　　A．～B．～．～D．～　　14．下列不属于生长素类的植物激素是（A）。

　　A．KtB．IAA　　C．NAAD．IBA　　15．1962年，Murashige和Skoog为培养烟草花叶细胞设计了（B）培养基，其特点是无机盐浓度较高。

　　A．WhiteB．MS　　C．N6D．Miller　　16．第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是（B）。

　　A．MorelB．Haberlandt　　C．SchleidenD．White　　17．花药培养中，大多数植物适宜的花粉发育时期是（B）。

　　A．四分孢子期B．单核后边期　　C．双核期D．三核期　　18．能打破种子休眠，促进种子、块茎、鳞茎等提前萌发的激素是（A）。

　　A．GAB．IAA；

　　C．NAAD．ZT　　19．在成批培养过程中，细胞数目呈（C）曲线变化。

　　A．Y型B．X型　　C．S型D．Z型　　20．要配置母液浓度为/ml的IBA500ml，需要IBA（B）mg。

　　A．20B．50　　篇二：

植物组织培养实验报告　　植物组织培养实验报告　　一实验目的　　让植物组织经过脱分化作用，形成愈伤组织，经过再分化作用，愈伤组织又能重新分化为有结构的组织和器官，最终形成完整的植株。

　　二实验原理　　植物组织培养是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。

植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。

这一过程称为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。

植物激素在此过程中起着重要的作用，吲哚乙酸（IAA）和6–苄基氨基腺嘌呤（6–BA）的比例，决定了根和芽的分化。

　　三实验器材　　

（一）试剂　　乙醇、IAA或2，4–D、HgCl2（或次氯酸钠）、6-苄基氨基腺嘌呤（6-BA）MS培养基　　

（二）仪器设备　　培养室，高压灭菌锅，水浴锅，解剖刀，三角烧瓶（100mL），烧杯，量筒，培养皿，超净工作台，分析天平，长镊子，剪刀，橡皮筋等　　三实验步骤　　1.配制培养基　　

（1）愈伤组织诱导培养基：

MS培养基（蔗糖含量为10g/L，2,4–D含量为2mg/L，琼脂10g/L）。

（2）试验培养基：

在MS培养基中按表33–1加入IAA和6–BA。

　　吲哚乙酸先用少量mol/LNaOH溶解，6-苄基氨基腺嘌呤先用少量mol/LHCl溶解，然后用蒸馏水稀释，再加入培养基中。

　　2.培养基灭菌　　将配好的培养基加入琼脂加热溶解，调至pH，趁热分装于100mL三角烧瓶中，每瓶约20mL。

待培养基冷却凝固后，用两层称量纸包扎瓶口，并用橡皮筋扎牢，然后在高压灭菌锅中121℃（1kg/cm2）下灭菌20min。

取出三角烧瓶放在台子上，冷却后备用。

接种操作所需的一切用具（如长镊子、解剖刀、剪刀等）及灭菌水，需同时灭菌。

　　3.诱导产生愈伤组织　　

（1）取健壮的玫瑰、菊花茎数段，每段约5cm长，于烧杯中用%氯化汞（升汞）浸泡20min，取出用无菌水洗3～4次，置于无菌培养皿中，在接种箱中按无菌操作要求剥去外皮（接种箱事先用紫外灯灭菌30min），用解剖刀切成5mm厚的圆片（弃去开始一片和最后一片），用长镊子将它接种在诱导培养基上，注意圆片的切口朝向培养基，每瓶接种4片，接种后扎好瓶口。

（2）将已接入植物组织（外植体）的三角烧瓶，培养在25℃温室中，每星期检查l～2次，剔除材料已被杂菌污染的三角烧瓶，3～4周后产生愈伤组织。

　　（3）选取愈伤组织生长良好的三角烧瓶，用解剖刀将愈伤组织切下，转移到含有不同激素的试验培养基中（也可以连同原来的外植体一起转移），每瓶放1～2块，仍培养在25℃温室中，每周1～2次观察不同处理的三角烧瓶中，愈伤组织分化情况，直至长出根和芽。

长成的幼小植株即为“试管苗”，可移栽于花盆中。

　　四实验结果　　因为时间有限及实验严密性等问题，大部分都失败了，但是仍然有小部分分化发育了出来。

已经证明了植物组织能够经过脱分化作用，形成愈伤组织，经过再分化作用，愈伤组织又能重新分化为有结构的组织和器官，最终形成完整的植株。

　　篇三：

植物组织培养实验报告　　植物组织培养实验报告　　实验一母液的配置与保存　　一、实验目的　　通过配置MS培养基母液，掌握母液的配置和保存方法二、实验原理　　配置培养基时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配置，即按培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准确称量分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存，使用时按比例吸取母液进行稀释配置即可。

三、实验材料、试剂和仪器设备1.试剂　　NH4NO3,KNO3,KH2PO4,CaCl2·

2H2O,MgSO4·

7H2O,FeSO4·

7H2ONa2-EDTA,MnSO4·

4H2O,ZnSO4·

7H2O,H3BO3,KI,Na2MoO4·

2H2O　　CuSO4·

5H2O,CoCl2·

6H2O,肌醇，甘氨酸，盐酸硫胺素，盐酸吡哆醇，烟酸，蒸馏水2.仪器设备　　电子天平，烧杯（50ml、100ml、500ml、1000ml）量筒（1000ml、100ml、25ml），容量瓶（1000ml、500ml、100ml），试剂瓶，玻璃棒数支，药芍，称量纸等。

四、实验步骤1大量元素母液的配制　　先用量筒称量适当蒸馏水放入500ml烧杯中，按照配方表中用量依次分别称取：

NH4NO3,KNO3,KH2PO4,MgSO4·

7H2O,CaCl2·

2H2O，待第一种化合物完全溶解后再加入第二种化合物，当最后一种化合物完全溶解后，将溶液转移至500ml容量瓶中，用蒸馏水定容至500ml，然后转移至细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称，放大倍数，配制日期，配制人，并置于冰箱中保存备用。

2微量元素母液的配制　　按照配方表中用量用电子天平依次称取MnSO4·

4H2O,ZnSO4·

7H2O　　H3BO3,KI,Na2MoO4·

2H2O，CuSO4·

5H2O,CoCl2·

6H2O,按制备母液I的方法逐个溶解，转移至容量瓶中，然后定容至500ml，转入细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称，放大倍数，配制日期，配制人，并置于冰箱中保存备用。

3铁盐母液的制备　　把FeSO4·

7H2O和Na2-EDTA分别置于适量蒸馏水中，加热搅拌使之完全溶解，保持加热，把FeSO4倒入Na2-EDTA溶液中并搅拌，接近沸腾时停止加热，冷却后调PH到，将溶液转移至500ml容量瓶中，用蒸馏水定容至500ml，转入细口试剂瓶中，用力振荡1～2min，贴上标签，注明母液名称，放大倍数，配制日期，配制人，并置于冰箱中保存备用。

4有机化合物母液的制备按配方表中用量依次称取：

维生素B,烟酸,甘氨酸，用蒸馏水溶解后定容后，转入细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称，放大倍数，配制日期，配制人，并置于冰箱中保存备用。

5植物生长物质母液制备　　NAA母液:

准确称取10mg,用少量1mol/LNaOH溶解后加蒸馏水定容至100ml,即配制成/ml的NAA母液，转入细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称，放大倍数，配制日期，配制人，并置于冰箱中保存备用。

6–BA母液配制方法相似，浓度为2mg/ml。

五、试验结果分析及注意事项配制母液时注意药品只能出不能进。

　　实验二培养基的制备与灭菌一、实验目的　　学习母液法配制培养基以及掌握培养基灭菌的方法二、实验原理　　组织培养所用的培养基含有植物生长所必需的各类营养物质，同时也是微生物繁殖的极好场所，因此必须对培养基灭菌处理，以确保无菌操作的顺利进行。

三、实验材料、试剂和仪器设备　　1.试剂：

琼脂，蔗糖，蒸馏水，1mol/LNaOH,各类母液　　2.仪器设备：

电子天平，烧杯，量筒，移液管，玻璃棒，药芍，称量纸，PH试纸，锥形瓶瓶等。

四、实验步骤　　1.将所需的各种母液按顺序放好，将洁净的各种玻璃器皿放在指定位置2.取50ml烧杯一个，将大量、有机、肌醇、镁盐，钙盐、按配方表中的用量依次称取并倒入烧杯中。

　　3.取50ml烧杯一个，将微量和铁盐按配方表中的用量称取并倒入烧杯中。

4.取瓷盆一个，加入300ml蒸馏水，置于电磁炉上加热，称量琼脂6克，白砂糖40克，依次倒入瓷盆中，待琼脂和白砂糖完全溶解后，将称量好的所有母液倒入瓷盆中，用玻璃棒不断搅拌，并定容至1L。

5.用1mol/LNaOH调PH至　　6.把培养基分装到广口瓶中，用牛皮纸包扎好，待灭菌。

7.培养基灭菌　　五、试验结果分析及注意事项　　配制培养基前先大致估计一下药品数量，不够时提前配制。

培养基灭菌时注意要放干净冷空气。

　　实验三无菌植株的建立　　一、实验目的　　通过实验，初步掌握外植体材料消毒及在超净工作台上接种的方法与注意事项二、实验原理　　植物细胞具有全能型，其外植体接种在无菌的人工培养基上，能长成完整的无菌植株。

　　三、实验材料、试剂和仪器设备　　超净工作台、培养基，大号镊子，剪刀，酒精灯，喷雾器四、实验步骤　　1.准备打开超净工作台，用紫外灯烧2h,关闭紫外灯，将灭菌溶液，无菌水，豌豆，大烧杯等放入超净工作台，在台上点燃2个酒精灯。

　　2.灭菌在超净工作台上取经浸泡处理的豌豆，先用84消毒液摇晃清洗清洗3次，每次5分钟，后用%HgCI摇晃清洗，处理2次，每次5分钟。

后用无菌水摇晃清洗3次。

　　3.接种将灭菌处理好的材料在超净工作台上用镊子靠近酒精灯的外焰放入倾斜的锥形瓶杯中，每个瓶内装5粒豌豆，接种过程中锥形瓶应一直保持倾斜，直到接种完毕盖上棉塞。

　　4.接种完毕后，用棉线绑好用铅笔标上制作人编号。

五、试验结果分析及注意事项　　注意事项：

做本次实验时在豌豆灭菌时注意升汞、酒精灭菌时间应严格注意，过长会对种子活性造成影响实验图片见图1。

　　实验四豌豆根、茎、叶愈伤组织的建立　　一、实验目的　　通过诱导豌豆根、茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法二、实验原理　　细胞全能性，已经分化的植物细胞在适宜条件下可脱分化形成愈伤组织。

三、实验材料、试剂和仪器设备　　超净工作台、无菌豌豆苗、培养基、剪刀、喷雾器四、实验步骤准备歩骤同实验三　　接种在超净工作台外用酒精将装无菌豌豆苗的锥形内灭菌。

用灭菌后的弯头剪刀分别剪取长势良好，无病菌污染的豌豆的根、茎、叶每个锥形内各接一种，每种接3瓶。

　　标记将接种好的锥形瓶标记，根为R,叶L,茎S。

标记好后放置在暗处。

五、试验结果及注意事项　　注意事项1、接种根时注意取接近根尖但不能直接是根尖部分　　2、接种时总体为接种材料大小越少越好，越有利于愈伤组织的形成3、接种时可以适当按压材料使之更有利于愈伤组织的形成。

　　实验结果见图2